專利名稱：尿糖的測定方法及該方法中使用的生物傳感器的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物檢測領(lǐng)域，具體是尿糖的測定方法及該方法中使用的生物傳感器。
背景技術(shù)：
為了控制新陳代謝的情況，特別是對于糖尿病病例，需要定期地控制體循環(huán)中的葡萄糖濃度。這不僅對于要注射胰島素的I型糖尿病患者來說是必須的，對于II型糖尿病患者也是如此，后者約占這種糖代謝疾病的85%。據(jù)預(yù)計，至2010年世界糖尿病患者數(shù)將達(dá)到兩億兩千一百萬(Hauner, H, ；Dtsch Med Wochenschr (德國醫(yī)學(xué)周刊)1998 ;123 ;777-82 ；Pharmaco Economics (醫(yī)藥經(jīng)濟(jì))1995 ；8 (Suppl, 1)28-71 ;)。鑒于糖尿病的高發(fā)病率，僅有常規(guī)的通過皮膚穿刺進(jìn)行的血糖測量不能夠滿足定期的新陳代謝控制的需要和希望。這需要患者在每次測量前克服刺傷皮膚的心理障礙。對于大多數(shù)患者來說，并不需要測量血糖，而只要控制尿液中的葡萄糖濃度就行了。如果通過新陳代謝的刺激超過了腎臟的閾值，就導(dǎo)致生理需要的外的葡萄糖作為尿糖經(jīng)過腎臟排出，在尿液中的葡萄糖就體現(xiàn)為可以檢測出的濃度。因此，盡管血糖檢測已經(jīng)相當(dāng)普及，但尿糖檢測作為一種使用操作很簡便的無創(chuàng)的檢測方法，仍深受相當(dāng)部分糖尿病患者的歡迎。一種測定尿糖的方法基于葡萄糖的特性，使光偏振而右旋。所說的偏光光度計就利用了這種特性，其中光從偏振面偏轉(zhuǎn)的角度是實際的葡萄糖濃度的測度(Poege，A.W.Zmed.Labortechnik (醫(yī)用實驗室診斷技術(shù))17 (1976) 59-79)。對于預(yù)防用的篩選家庭及個人尿液中的葡萄糖含量的方法通常采用尿糖檢測試紙，這類試紙多數(shù)是在酶化學(xué)基礎(chǔ)上產(chǎn)生葡萄糖依從性的顏色反應(yīng)。這些試紙條的缺點是準(zhǔn)確性差，只能用于尿糖的半定量檢測，且靈敏度比較低，一般都在尿糖含量達(dá)到50mg/dl，甚至100mg/dl才能顯示出陽性，測試時還必須用時鐘嚴(yán)格控制時間才能準(zhǔn)確判斷結(jié)果，從而測量結(jié)果很不可靠。并且只有能分辨顏色的人才能采用，而糖尿病患者，特別是II型糖尿病的老年患者中，相當(dāng)多的人是色盲，至少辯色不準(zhǔn)確。上述偏光光度計是作為實驗室設(shè)備而配備的用于臨床化學(xué)中，而尿糖試紙又不適宜用作日常新陳代謝控制中可靠地表達(dá)尿液中的葡萄糖存在及其濃度的常規(guī)方法。因此研究和開發(fā)越來越集中于酶促電化學(xué)測量裝置及其在葡萄糖測定方面的應(yīng)用。2008年，日本的一家公司研制推出了一種可對尿糖進(jìn)行定量檢測的生物傳感器尿糖測試儀，但由于其采用固定生物傳感器檢測頭，價格昂貴，使用成本高，且檢測頭是多次反復(fù)使用，需要清洗，還會面臨消毒方面的一些問題。尿液中各種雜質(zhì)對尿糖測量造成嚴(yán)重的干擾，不管是比色反射法還是電化學(xué)生物傳感器法。不同比重尿液中存在干擾物的量有較大差別，高比重尿中含有更多的Vc、尿酸等還原性干擾物，高比重尿中含有的大量電解質(zhì)離子、金屬離子均會影響尿糖檢測的特異性，造成測試結(jié)果不準(zhǔn)確。
一正在等待批準(zhǔn)、名為《具有樣品前處理功能的電極式尿糖試紙》的專利，為了解決不同尿液干擾的問題，在電極式尿糖試紙的加樣部加入浸泡了處理劑的膜，對消除干擾有較好的效果。但是，由于需要前處理膜，前處理膜的生產(chǎn)加工要求嚴(yán)格控制，才能保證尿糖試紙的精密度，有時即使嚴(yán)格控制，生產(chǎn)的試紙精度仍然會較差；另外，由于需要嚴(yán)格控制生產(chǎn)，增加了加工的效率和成本。現(xiàn)有的尿糖測試方法，要么靈敏度偏低，受各種干擾物影響大，造成測試不夠準(zhǔn)確；要么制作工藝繁雜，成本高，使用不夠不方便。為了糖尿病人及非糖尿病人方便、無痛的分析胰島素狀態(tài)，需要一種測試靈敏度高、準(zhǔn)確、可靠的測試尿中葡萄糖的方法。尿糖測試要更準(zhǔn)確、可靠，干擾的消除、測試精密度等還有需要改進(jìn)的地方。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明的目的在于提供通過以高精度和高可靠性測定尿液電導(dǎo)率而能夠充分且正確地校正的尿糖測定方法及該方法中使用的生物傳感，制作工藝簡單，成本低，使用方便。為了達(dá)成上述目的，本發(fā)明的測定方法為尿液中的葡萄糖的測定方法，該方法的步驟為:a，在介體的存在下，利用氧化還原酶將尿液中的葡萄糖氧化還原；b，通過電極系統(tǒng)檢測此時產(chǎn)生的氧化電流或還原電流，以上述電流值為基礎(chǔ)計算葡萄糖濃度；C，測定上述尿液中的電導(dǎo)率、并利用該電導(dǎo)率校正尿液葡萄糖濃度的校正工序；電導(dǎo)率的測定方法為:準(zhǔn)備含有工作電極和對電極的電極系統(tǒng)，在上述兩電極中的工作電極上不配置介體，而在對電極上配置介體；將尿液導(dǎo)入至上述電極系統(tǒng)，在該狀態(tài)下對上述電極系統(tǒng)施加電壓，由此檢測流至上述兩電極間的氧化電流或還原電流，以該電流值為基礎(chǔ)計算電導(dǎo)率值。本文中所說的氧化還原酶，系指可與樣品中的待測標(biāo)的物產(chǎn)生氧化還原反應(yīng)的酶。所使用酶種類視所欲檢測的標(biāo)的物不同而有所不同。例如，欲檢測葡萄糖濃度時，所選用的酶為葡萄糖氧化酶或葡萄糖脫氫酶。本文中所說的電子介體，系指可與經(jīng)前述氧化還原酶作用所產(chǎn)生的物質(zhì)反應(yīng)后，本身可由氧化狀態(tài)還原成還原狀態(tài)得物質(zhì)。當(dāng)電子介體變成還原狀態(tài)時，可藉由施加一外加電壓于電極試紙上，促使電子介體由還原狀態(tài)逆反應(yīng)回復(fù)為氧化狀態(tài)，此時化學(xué)反應(yīng)的電位、電阻或電流變化，可由電極系統(tǒng)的工作電極與參考電極傳導(dǎo)至電極系統(tǒng)另一端的接頭。當(dāng)此接頭與一訊號接收裝置連接時，可將前述化學(xué)反應(yīng)的電位、電阻或電流變化接收，并藉由一顯示裝置將訊號轉(zhuǎn)換成檢測標(biāo)的物的濃度。電子傳遞介體為鐵氰化鉀、二茂鐵及其衍生物、釕的絡(luò)合物或苯醌類化合物。根據(jù)本發(fā)明的一較佳具體實施例，該電子介體可為鐵氰化鉀。較佳地，該電子介體的含量為3% (m/m)至20% (m/m)。本文中所說的緩沖液、粘合劑及表面活性劑，系指可助于氧化還原酶及電子介體干燥后附著于絕緣基片上的物質(zhì)，或可保護(hù)氧化還原的物質(zhì)。所述緩沖液為磷酸緩沖液、MES緩沖液、檸檬酸緩沖液組成的組中的一種；所述粘合劑采用淀粉、糊精、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、海藻酸鈉中的一種或幾種；所述表面活性劑為TritonX-100、TW-20。將酶反應(yīng)膜固定到電極上的方法可以是吸附法、交聯(lián)法、溶膠-凝膠法、粘合劑法等。吸附法固定酶只需要將酶液直接滴加在電極表面上，酶的疏水基團(tuán)與疏水的電極表面經(jīng)范德華力而吸附；交聯(lián)法固定酶可以在酶液中加入戊二醛等交聯(lián)試劑。溶膠-凝膠法固定酶可以將酶融入二氧化硅水溶膠、二氧化鈦水溶膠、明膠等試劑中，在電極表面干燥后形成凝膠。粘合劑法固定酶可以將酶與粘合劑及其他輔料配成可印刷的酶漿，絲網(wǎng)印刷在電極表面上。電子傳遞介體、緩沖液及表面活性劑可以與酶混合一起滴加或絲網(wǎng)印刷到電極表面。本發(fā)明的生物傳感器用于通過氧化還原葡萄糖、并利用電極檢測由該反應(yīng)產(chǎn)生的氧化電流或還原電流來測定上述尿液葡萄糖，其分為尿糖檢測部和濃縮系數(shù)檢測部:尿糖檢測部具有第I電極系統(tǒng)和試劑層，上述試劑層具有尿糖的氧化還原酶和介體。在介體的存在下，通過上述氧化還原酶將尿糖氧化還原，利用上述第I電極檢測施加電壓時的氧化還原電流，從而測定尿糖濃度。濃縮系數(shù)檢測部具有工作電極和對電極，在上述工作電極上不配置介體，而在對電極上配置介體；將上述尿液導(dǎo)入至上述電極系統(tǒng)，施加電壓，由此檢測流動的電流值，從而測定上述尿液的濃縮系數(shù)。通過該濃縮系數(shù)來校正上述尿糖濃度。本發(fā)明的生物傳感器，其包括:一絕緣基片；一位于絕緣基片上的電極系統(tǒng)，該電極系統(tǒng)設(shè)置有三條狀導(dǎo)電電極，分別為參比電極、工作電極、濃縮系數(shù)測定電極；一局部覆蓋于電極系統(tǒng)上的電絕緣層，使得在未覆蓋電絕緣層所裸露出的電極系統(tǒng)區(qū)域，形成一容納樣品溶液空間的電化學(xué)電極反應(yīng)區(qū)及排氣孔；一位于電化學(xué)電極反應(yīng)區(qū)的反應(yīng)層，該反應(yīng)層包括至少一種氧化還原酶、種電子介體，還包括緩沖液、粘合劑及表面活性劑；反應(yīng)層僅覆蓋參比電極、工作電極，而不覆蓋濃縮系數(shù)測定電極。本文中所說的絕緣基片，系指具有平直的表面及電絕緣特性的薄層片。較佳地，該絕緣基片選自下列所組成的群:聚氯乙烯(PVC)片、玻璃纖維片(FR-4)、聚酯、電木片、PET片、PC片、PP片、PE片、PA片、PS片、玻璃片及陶瓷片(CEM-1)。根據(jù)本發(fā)明的一較佳實施，該絕緣基片為PC或PET片。本文中所說的電極系統(tǒng)，系指包括至少有三條分離且互不相接觸的電極，分別形成工作電極、參考電極及濃縮系數(shù)測定電極。根據(jù)本發(fā)明的一較佳實施，電極系統(tǒng)系以電絕緣層局部覆蓋，使裸露于電絕緣隔離層一端分別形成工作電極、參考電極、濃縮系數(shù)測定電極而與電化學(xué)電極反應(yīng)區(qū)相連，而另一端則形成工作電極、參考電極、濃縮系數(shù)測定電極的接頭，可與檢測樣品在電化學(xué)反應(yīng)時產(chǎn)生電效應(yīng)的檢測裝置相連。較佳地，該電極系統(tǒng)的材料可選用適合網(wǎng)版印刷的導(dǎo)電性漿狀材質(zhì)，例如但不限于碳膠、金膠、銀膠、碳銀混合膠、揮發(fā)性石墨或銅膠或其組合(例如以網(wǎng)印先印銀膠后再印碳膠)，或其它任何適合網(wǎng)版印刷的導(dǎo)電性漿狀材料。本文中所說的電絕緣隔離層，系指以具有電絕緣性質(zhì)的材質(zhì)所形成的薄層。較佳地，該電絕緣隔離層的材料可選用適合網(wǎng)版印刷的電絕緣性漿狀材質(zhì)或電絕緣性膠帶，例如熱干燥型或紫外光干燥型的絕緣漆，或PVC或PET材質(zhì)的絕緣膠帶。較佳地，該電絕緣層具有厚度為0.1至0.25毫米。根據(jù)本發(fā)明的一較佳實施，該電絕緣隔離層局部覆蓋于基片上的電極系統(tǒng)，使得在未覆蓋電絕緣層所裸露出的電極系統(tǒng)區(qū)域，形成一容納樣品溶液空間的電化學(xué)電極反應(yīng)區(qū)及排氣孔。本文中所說的反應(yīng)層，系指位于上述電化學(xué)電極反應(yīng)區(qū)，含有與被測物質(zhì)反應(yīng)的生物試劑。反應(yīng)層中包括與被測物質(zhì)反應(yīng)的酶和一種電子傳遞介體，同時還含有緩沖液、粘合劑及表面活性劑的調(diào)配物薄層。較佳地，該調(diào)配物可以涂覆或滴加的方式加至該反應(yīng)層后，于60°C下干燥。本發(fā)明的尿糖的測定方法和生物傳感器中，上述尿液濃縮系數(shù)測定部的上述工作電極和對電極之間的施加電壓優(yōu)選大于等于水電解的電壓，優(yōu)選為1-5V的范圍，進(jìn)一步優(yōu)選為1-3V的范圍。通過施加大于等于水電解電壓的電壓，能夠以更高的靈敏度測定僅依賴于尿液濃縮的電流，且能夠得到不受尿液中所存在的其它氧化還原物質(zhì)的影響、不依賴于個人差異的穩(wěn)定的電流。另外，施加時間例如為1-10秒、更優(yōu)選為1-5秒。由此，本發(fā)明的特征在于尿液的濃縮系數(shù)的測定。即，當(dāng)測定尿液的濃縮系數(shù)時，通過僅在對電極上配置介體，能夠以高精度和高可靠性簡單地檢測反映尿液的濃縮系數(shù)的電流。因此，通過本發(fā)明的測定方法、生物傳感器和測定裝置，以該高精度和高可靠性測定的尿液的濃縮系數(shù)為基礎(chǔ)來校正尿糖濃度，因此能夠充分且正確地進(jìn)行校正，其結(jié)果是校正后的尿糖濃度也更為高精度和高可靠性，制作工藝簡單，成本低，使用方便。


此處所說明的附圖用來提供對本發(fā)明的進(jìn)一步理解，構(gòu)成本發(fā)明的一部分，并不構(gòu)成對本發(fā)明的限定。在附圖中:圖1為本發(fā)明的第一實施方式的結(jié)構(gòu)示意圖；圖2為圖1所示實施方式的結(jié)構(gòu)分解圖；圖3為表示實施例1的傳感器相對于電壓的施加、濃縮系數(shù)的響應(yīng)電流值(nA)隨時間變化的圖；圖4為表不實施例1的傳感器相對于電壓(IV)的施加、濃縮系數(shù)的響應(yīng)電流值(nA)隨時間變化的圖；圖5為表不實施例1的傳感器相對于電壓(2V)的施加、濃縮系數(shù)的響應(yīng)電流值(nA)隨時間變化的圖；圖6為表不實施例1的傳感器相對于電壓(3V)的施加、濃縮系數(shù)的響應(yīng)電流值(nA)隨時間變化的圖；圖7為表不實施例1的傳感器相對于電壓(4V)的施加、濃縮系數(shù)的響應(yīng)電流值(nA)隨時間變化的圖；圖8為表不實施例1的傳感器相對于電壓(5V)的施加、濃縮系數(shù)的響應(yīng)電流值(nA)隨時間變化的圖；圖中標(biāo)號為:I基片；2對電極；3工作電極；4濃縮系數(shù)測定電極；5絕緣隔離層；6反應(yīng)窗口 ；7酶反應(yīng)膜；8虹吸導(dǎo)樣槽。
具體實施例方式本發(fā)明提供通過以高精度和高可靠性測定尿液的濃縮系數(shù)而由此能夠正確地校正尿糖的測定方法和該方法中使用的生物傳感器。本發(fā)明的生物傳感器，其包括:一絕緣基片一位于絕緣基片上的電極系統(tǒng)，該電極系統(tǒng)設(shè)置有三條狀導(dǎo)電電極，分別為參比電極、工作電極、濃縮系數(shù)測定電極；局部覆蓋于電極系統(tǒng)上的電絕緣層，使得在未覆蓋電絕緣層所裸露出的電極系統(tǒng)區(qū)域，形成一容納樣品溶液空間的電化學(xué)電極反應(yīng)區(qū)及排氣孔；一位于電化學(xué)電極反應(yīng)區(qū)的反應(yīng)層，該反應(yīng)層包括至少一種氧化還原酶、種電子介體，還包括緩沖液、粘合劑及表面活性劑；反應(yīng)層僅覆蓋參比電極、工作電極，而不覆蓋濃縮系數(shù)測定電極。本文中所說的絕緣基片，系指具有平直的表面及電絕緣特性的薄層片。較佳地，該絕緣基片選自下列所組成的群:聚氯乙烯(PVC)片、玻璃纖維片(FR-4)、聚酯、電木片、PET片、PC片、PP片、PE片、PA片、PS片、玻璃片及陶瓷片(CEM-1)。根據(jù)本發(fā)明的一較佳實施，該絕緣基片為PC或PET片。本文中所說的電極系統(tǒng)，系指包括至少有三條分離且互不相接觸的電極，分別形成工作電極、參考電極及濃縮系數(shù)測定電極。根據(jù)本發(fā)明的一較佳實施，電極系統(tǒng)系以電絕緣層局部覆蓋，使裸露于電絕緣隔離層一端分別形成工作電極、參考電極、濃縮系數(shù)測定電極而與電化學(xué)電極反應(yīng)區(qū)相連，而另一端則形成工作電極、參考電極、濃縮系數(shù)測定電極的接頭，可與檢測樣品在電化學(xué)反應(yīng)時產(chǎn)生電效應(yīng)的檢測裝置相連。較佳地，該電極系統(tǒng)的材料可選用適合網(wǎng)版印刷的導(dǎo)電性漿狀材質(zhì)，例如但不限于碳膠、金膠、銀膠、碳銀混合膠、揮發(fā)性石墨或銅膠或其組合(例如以網(wǎng)印先印銀膠后再印碳膠)，或其它任何適合網(wǎng)版印刷的導(dǎo)電性漿狀材料。本文中所說的電絕緣隔離層，系指以具有電絕緣性質(zhì)的材質(zhì)所形成的薄層較佳地，該電絕緣隔離層的材料可選用適合網(wǎng)版印刷的電絕緣性漿狀材質(zhì)或電絕緣性膠帶，例如熱干燥型或紫外光干燥型的絕緣漆，或PVC或PET材質(zhì)的絕緣膠帶。較佳地，該電絕緣層具有厚度為0.1至0.25毫米。根據(jù)本發(fā)明的一較佳實施，該電絕緣隔離層局部覆蓋于基片上的電極系統(tǒng)，使得在未覆蓋電絕緣層所裸露出的電極系統(tǒng)區(qū)域，形成一容納樣品溶液空間的電化學(xué)電極反應(yīng)區(qū)及排氣孔。本文中所說的反應(yīng)層，系指位于上述電化學(xué)電極反應(yīng)區(qū)，含有與被測物質(zhì)反應(yīng)的生物試劑。反應(yīng)層中包括與被測物質(zhì)反應(yīng)的酶和一種電子傳遞介體，同時還含有緩沖液、粘合劑及表面活性劑的調(diào)配物薄層。較佳地，該調(diào)配物可以涂覆或滴加的方式加至該反應(yīng)層后，于60°C下干燥。本發(fā)明的尿糖的測定方法和生物傳感器中，上述尿液濃縮系數(shù)測定部的上述工作電極和對電極之間的施加電壓優(yōu)選大于等于水電解的電壓，優(yōu)選為1-5V的范圍，進(jìn)一步優(yōu)選為1-3V的范圍。通過施加大于等于水電解電壓的電壓，能夠以更高的靈敏度測定僅依賴于尿液濃縮的電流，且能夠得到不受尿液中所存在的其它氧化還原物質(zhì)的影響、不依賴于個人差異的穩(wěn)定的電流。另外，施加時間例如為1-10秒、更優(yōu)選為1-5秒。為使本發(fā)明實施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚明白，下面結(jié)合實施例和附圖，對本發(fā)明實施例做進(jìn)一步詳細(xì)說明。在此，本發(fā)明的示意性實施例及其說明用于解釋本發(fā)明，但并不作為對本發(fā)明的限定。任何熟悉此項技術(shù)的人上可輕易做到的修飾及改變均包含于本案所附申請專利權(quán)利要求的范圍內(nèi)。實施例1本實施例提供一電極式尿糖試紙的制備實例，從而說明本發(fā)明的電化學(xué)生物傳感器及制備方法。如圖1-8所示:首先，采用絲網(wǎng)印刷技術(shù)在0.25mm厚PET塑料基片上制作反電極2、工作電極3、濃縮系數(shù)測定電極4，反電極2、工作電極3、濃縮系數(shù)測定電極4采用由Acheson公司購買的導(dǎo)電碳墨制作。通過絲網(wǎng)印刷將導(dǎo)電油墨在PET塑料基片上鋪上分散均勻的油墨薄層后，放到80°C烘箱中烘干60min。其次，采用絲網(wǎng)印刷技術(shù)在印好電極系統(tǒng)的基片上印刷絕緣漆作為電絕緣隔離層5，絕緣漆由Acheson公司購買。通過絲網(wǎng)印刷將絕緣漆在PET塑料基片上鋪上分散均勻的油墨薄層后，放到紫外烘干機(jī)一分鐘烘干。接著，在電極表面固定酶反應(yīng)膜7用于尿液葡萄糖的檢測，反應(yīng)層僅覆蓋反電極、工作電極，而不覆蓋濃縮系數(shù)測定電極。所取酶反應(yīng)液的各組分及其重量百分比如下:
權(quán)利要求
1.尿糖的測定方法中使用的生物傳感器，其特征在于分為尿糖檢測部和濃縮系數(shù)檢測部；尿糖檢測部具有第I電極系統(tǒng)和試劑層，上述試劑層具有尿糖的氧化還原酶和介體；濃縮系數(shù)檢測部具有工作電極和對電極，在上述工作電極上不配置介體，而在對電極上配置介體；所述生物傳感器包括絕緣基片，即具有平直的表面及電絕緣特性的薄層片；包括位于絕緣基片上的電極系統(tǒng)，該電極系統(tǒng)設(shè)置有三條狀導(dǎo)電電極，分別為參比電極、工作電極、濃縮系數(shù)測定電極；包括局部覆蓋于電極系統(tǒng)上的電絕緣層，使得在未覆蓋電絕緣層所裸露出的電極系統(tǒng)區(qū)域，形成一容納樣品溶液空間的電化學(xué)電極反應(yīng)區(qū)及排氣孔；包括位于電化學(xué)電極反應(yīng)區(qū)的反應(yīng)層，該反應(yīng)層包括至少一種氧化還原酶、一種電子介體，還包括緩沖液、粘合劑及表面活性劑，反應(yīng)層僅覆蓋參比電極、工作電極，而不覆蓋濃縮系數(shù)測定電極。
2.如權(quán)利要求1所述的尿糖的測定方法中使用的生物傳感器，其特征在于所述絕緣基片選自下列所組成的群:聚氯乙烯片、玻璃纖維片、聚酯、電木片、PET片、PC片、PP片、PE片、PA片、PS片、玻璃片及陶瓷片。
3.如權(quán)利要求1所述的尿糖的測定方法中使用的生物傳感器，其特征在于所述電極系統(tǒng)系以電絕緣層局部覆蓋，使裸露于電絕緣隔離層一端分別形成工作電極、參考電極、濃縮系數(shù)測定電極而與電化學(xué)電極反應(yīng)區(qū)相連，而另一端則形成工作電極、參考電極、濃縮系數(shù)測定電極的接頭，與檢測樣品在電化學(xué)反應(yīng)時產(chǎn)生電效應(yīng)的檢測裝置相連。
4.如權(quán)利要求3所述的尿糖的測定方法中使用的生物傳感器，其特征在于所述電極系統(tǒng)的材料選用適合網(wǎng)版印刷的導(dǎo)電性漿狀材質(zhì)，例如碳膠、金膠、銀膠、碳銀混合膠、揮發(fā)性石墨或銅膠或其組合，或其它適合網(wǎng)版印刷的導(dǎo)電性漿狀材料。
5.如權(quán)利要求1所述的尿糖的測定方法中使用的生物傳感器，其特征在于所述電絕緣層的材料選用適合網(wǎng)版印刷的電絕緣性漿狀材質(zhì)或電絕緣性膠帶，如熱干燥型或紫外光干燥型的絕緣漆，或PVC或PET材質(zhì)的絕緣膠帶。
6.如權(quán)利要求5所述的 尿糖的測定方法中使用的生物傳感器，其特征在于所述電絕緣層的厚度為0.1至0.25毫米。
7.如權(quán)利要求1所述的尿糖的測定方法中使用的生物傳感器，其特征在于所述反應(yīng)層中包括與被測物質(zhì)反應(yīng)的酶和一種電子傳遞介體，同時還含有緩沖液、粘合劑及表面活性劑的調(diào)配物薄層。
8.如權(quán)利要求7所述的尿糖的測定方法中使用的生物傳感器，其特征在于所述反應(yīng)層的調(diào)配物薄層是以涂覆或滴加的方式加至該反應(yīng)層后，于60°C下干燥。
9.尿糖的測定方法，其步驟為: a,在介體的存在下，利用氧化還原酶將尿液中的葡萄糖氧化還原； b，通過電極系統(tǒng)檢測此時產(chǎn)生的氧化電流或還原電流，以上述電流值為基礎(chǔ)計算葡萄糖濃度； C，測定上述尿液中的電導(dǎo)率、并利用該電導(dǎo)率校正尿液葡萄糖濃度的校正工序；電導(dǎo)率的測定方法為:準(zhǔn)備含有工作電極和對電極的電極系統(tǒng)，在上述兩電極中的工作電極上不配置介體，而在對電極上配置介體；將尿液導(dǎo)入至上述電極系統(tǒng)，在該狀態(tài)下對上述電極系統(tǒng)施加電壓，由此檢測流至上述兩電極間的氧化電流或還原電流，以該電流值為基礎(chǔ)計算電導(dǎo)率值。
10.如權(quán)利要求9所述的尿糖的尿糖的測定方法，其特征在于所述電子介體為鐵氰化鉀，其含量為3% (m/m)至20% (m/m)。
11.如權(quán)利要求9所述的尿糖的尿糖的測定方法，其特征在于所述緩沖液為磷酸緩沖液、MES緩沖液、檸檬酸緩沖液組成的組中的一種；所述粘合劑采用淀粉、糊精、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、海藻酸鈉中的一種或幾種；所述表面活性劑為TritonX-1OO或TW-20。
12.如權(quán)利要求9所述的尿糖的尿糖的測定方法， 其特征在于所述氧化還原酶為葡萄糖氧化酶或葡萄糖脫氫酶。
全文摘要
本發(fā)明的目的在于提供通過以高精度和高可靠性測定尿液電導(dǎo)率而能夠充分且正確地校正的尿糖測定方法及該方法中使用的生物傳感，制作工藝簡單，成本低，使用方便。該方法的步驟為a，在介體的存在下，利用氧化還原酶將尿液中的葡萄糖氧化還原；b，通過電極系統(tǒng)檢測此時產(chǎn)生的氧化電流或還原電流，以上述電流值為基礎(chǔ)計算葡萄糖濃度；c，測定上述尿液中的電導(dǎo)率、并利用該電導(dǎo)率校正尿液葡萄糖濃度的校正工序。所述生物傳感器包括絕緣基片、位于絕緣基片上的電極系統(tǒng)、電絕緣層和位于電化學(xué)電極反應(yīng)區(qū)的反應(yīng)層。
文檔編號G01N27/416GK103105426SQ20131001833
公開日2013年5月15日 申請日期2013年1月16日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月16日
發(fā)明者梁明龍, 李中 申請人:桂林中輝科技發(fā)展有限公司