專利名稱：一種利用特征圖譜控制牛黃蛇膽川貝膠囊里蛇膽汁質(zhì)量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中成藥的質(zhì)量控制方法，特別是涉及一種利用特征圖譜控制牛黃蛇膽川貝膠囊里蛇膽汁的方法。
背景技術(shù)：
牛黃蛇膽川貝膠囊是由人工牛黃、蛇膽汁、川貝母等三味中藥材，經(jīng)一定工藝加工而成。具有清熱、化痰、止咳功效，主要用于外感咳嗽中的熱痰咳嗽，燥痰咳嗽。為了提高生物利用度，本品是制粒后粉碎成細(xì)粉，然后灌裝膠囊。眾所周知，中成藥的藥效不是來(lái)自任何單一的活性成分，而是多種有效部位群共同作用的結(jié)果，目前，牛黃蛇膽川貝膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)人工牛黃、川貝母采用多成分鑒別方式進(jìn)行質(zhì)量控制，而蛇膽汁是采用?；悄懰徕c進(jìn)行含量測(cè)定?？此粕吣懼目刂聘鼑?yán)，但由于?；悄懰徕c能額外獲得，所以單獨(dú)采用牛磺膽酸鈉含量來(lái)判斷蛇膽汁的質(zhì)量不準(zhǔn)確，反而存在很大風(fēng)險(xiǎn)。因此，需要一種快速、相對(duì)準(zhǔn)確的質(zhì)量控制方法，對(duì)牛黃蛇膽川貝膠囊中的蛇膽汁進(jìn)行控制。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種牛黃蛇膽川膠囊中蛇膽汁的質(zhì)量控制方法。本發(fā)明方法快速、準(zhǔn)確率高。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下:第一步，先建立蛇膽汁中成分標(biāo)準(zhǔn)特征圖譜，方法如下:(I)供試品溶液的制備:取牛黃蛇膽川貝膠囊內(nèi)容物適量，混勻，取lg，精密稱定，置25ml量瓶中，加70%甲醇約20ml，超聲處理30分鐘，放冷，加70%甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45 μ m)濾過(guò)，取續(xù)濾液，為供試品溶液；(2)參照物溶液的制備:取牛磺膽酸鈉對(duì)照品適量，精密稱定，加70%甲醇制成每Iml含0.2mg的溶液，作為參照物溶液；(3)色譜條件:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.4%磷酸二氫鉀溶液(7:3)為流動(dòng)相；檢驗(yàn)波長(zhǎng)為205nm ；(4)測(cè)定:分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，用液相色譜法測(cè)定，制定牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分特征圖譜；所述牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分特征圖譜中，有三個(gè)特征峰，以參照物牛磺膽酸鈉的色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積為1，計(jì)算其它色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積，上述三個(gè)特征峰分別是I號(hào)峰:平均相對(duì)保留時(shí)間RRT為0.68，相對(duì)峰面積為50%-70%，2號(hào)峰的平均相對(duì)保留時(shí)間RRT為0.81，相對(duì)峰面積為80%_100%，3號(hào)峰平均相對(duì)保留時(shí)間RRT為1.0，相對(duì)峰面積為100% ;所述I號(hào)峰、2號(hào)峰的相對(duì)保留時(shí)間的差值均小于 10% ；
第二步，以上述相同的方法建立待測(cè)牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分樣品特征圖譜；第三步，將待測(cè)牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分樣品特征圖譜與標(biāo)準(zhǔn)的蛇膽汁成分特征圖譜比對(duì)，判斷牛黃蛇膽川貝膠囊的質(zhì)量。本發(fā)明是結(jié)合大量生產(chǎn)批次統(tǒng)計(jì)情況和試驗(yàn)研究工作，建立了合格的牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分標(biāo)準(zhǔn)特征圖譜，能較好地保證牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁投料的準(zhǔn)確性與正確性。到目前為止，上述的控制方法尚無(wú)公開(kāi)報(bào)道。本發(fā)明具有下述特點(diǎn):1、整體性、宏觀性和模糊性，本發(fā)明克服了單一成分含量測(cè)定難以反映蛇膽汁真實(shí)投料情況，本發(fā)明為完整、準(zhǔn)確評(píng)價(jià)牛黃蛇膽川貝膠囊的質(zhì)量提供了新的方法和手段；2、用視覺(jué)直觀辨識(shí)圖譜的異同；用半定量指標(biāo)量化樣品的真?zhèn)?，?yōu)劣。


圖1為牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分標(biāo)準(zhǔn)特征圖譜。
具體實(shí)施例方式下面通過(guò)實(shí)施例的方式進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。實(shí)施例1:牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁特征圖譜的建立1、儀器與試藥1.1 儀器EX1600高效液相色譜儀及原裝工作站1.2 試藥?；悄懰徕c對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；磷酸二氫鉀為分析純；甲醇為色譜純；牛黃蛇膽川貝膠囊由合肥今越制藥有限公司提供，批號(hào)為110801,110901，111101，120101，120201，120301，120302，120401，120501，120601。2、方法與結(jié)果2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性C18色譜柱(4.6X250mm，5 μ m)，甲醇-0.4%磷酸二氫鉀溶液(7:3)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為205nm。理論板數(shù)按?；悄懰徕c峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。3、特征圖譜特征峰的測(cè)定3.1牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分特征圖譜特征峰的建立(I)供試品溶液的制備:取牛黃蛇膽川貝膠囊內(nèi)容物適量，混勻，取Ig精密稱定，置25ml量瓶中，加70%甲醇約20ml，超聲處理30分鐘，放冷，加70%甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45 μ m)濾過(guò)，取續(xù)濾液，為供試品溶液。(2)參照物溶液的制備:取?；悄懰徕c對(duì)照品約50mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加入70%甲醇適量使溶解完全，然后稀釋至刻度，搖勻，作為參照物溶液。分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液各20 μ 1，分別注入液相色譜儀，照液相色譜法測(cè)定，記錄30分鐘的圖譜，即得。以參照物的色譜峰保留時(shí)間和峰面積為1，計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間和峰面積比值，即得牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁標(biāo)準(zhǔn)特征圖譜。
3.2特征峰確定通過(guò)10批牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分特征圖譜的測(cè)定，比較其圖譜，確定特征峰為3個(gè)，以參照物?；悄懰徕c的色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積為1，計(jì)算10批樣品共有峰相對(duì)保留時(shí)間以及相對(duì)峰面積。結(jié)果見(jiàn)下表1、表2。表1:10批樣品保留時(shí)間統(tǒng)計(jì)結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種利用特征圖譜控制牛黃蛇膽川貝膠囊里蛇膽汁質(zhì)量的方法，其特征在于，包括如下步驟: 第一步，先建立蛇膽汁中成分標(biāo)準(zhǔn)特征圖譜，方法如下: (1)供試品溶液的制備:取牛黃蛇膽川貝膠囊內(nèi)容物適量，混勻，取lg，精密稱定，置25ml量瓶中，加70%甲醇約20ml，超聲處理30分鐘，放冷，加70%甲醇至刻度，搖勻，用.0.45 μ m微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，為供試品溶液； (2)參照物溶液的制備:取牛磺膽酸鈉對(duì)照品適量，精密稱定，加70%甲醇制成每Iml含.0.2mg的溶液，作為參照物溶液； (3)色譜條件:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.4%磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相，檢驗(yàn)波長(zhǎng)為205nm，其中，甲醇與0.4%磷酸二氫鉀溶液的質(zhì)量比為7:3 ； (4)測(cè)定:分別精確吸取參照物溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，用液相色譜法測(cè)定，制定牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分特征圖譜； 所述牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分特征圖譜中，有三個(gè)特征峰，以參照物牛磺膽酸鈉的色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積為1，計(jì)算其它色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積，上述三個(gè)特征峰分別是I號(hào)峰:平均相對(duì)保留時(shí)間RRT為0.68，相對(duì)峰面積為50%-70%，2號(hào)峰的平均相對(duì)保留時(shí)間RRT為0.81，相對(duì)峰面積為80%_100%，3號(hào)峰平均相對(duì)保留時(shí)間RRT為1.0，相對(duì)峰面積為100% ;所述I號(hào)峰、2號(hào)峰的相對(duì)保留時(shí)間的差值均小于 10%, 第二步，以上述相同的方法建立待測(cè)牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分樣品特征圖譜； 第三步，將待測(cè)牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分樣品特征圖譜與標(biāo)準(zhǔn)的蛇膽汁成分特征圖譜比對(duì)，判斷牛黃蛇膽川貝膠囊的質(zhì)量及真?zhèn)巍?br> 全文摘要
本發(fā)明提供了一種利用特征圖譜控制牛黃蛇膽川貝膠囊里蛇膽汁的方法，首先先建立標(biāo)準(zhǔn)蛇膽汁中成分標(biāo)準(zhǔn)特征圖譜，然后，以相同的方法建立待測(cè)牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分樣品特征圖譜；最后將待測(cè)牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分樣品特征圖譜與標(biāo)準(zhǔn)的蛇膽汁成分特征圖譜比對(duì)，判斷牛黃蛇膽川貝膠囊的質(zhì)量及真?zhèn)?。本發(fā)明方法能真實(shí)的控制蛇膽汁實(shí)際投料情況，為完整、準(zhǔn)確評(píng)價(jià)牛黃蛇膽川貝膠囊的質(zhì)量提供了新的方法和手段。
文檔編號(hào)G01N30/02GK103149288SQ201310043898
公開(kāi)日2013年6月12日 申請(qǐng)日期2013年2月4日 優(yōu)先權(quán)日2013年2月4日
發(fā)明者趙棟磊, 劉延武, 孫夢(mèng)希, 王旦, 呂春懷 申請(qǐng)人:合肥今越制藥有限公司