專利名稱：一種防腐保鮮劑殘留量的測定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及食品安全檢測領(lǐng)域，尤其涉及一種防腐保鮮劑殘留量的測定方法，通過氣相色譜質(zhì)譜法同時對五種防腐保鮮劑進(jìn)行測定。
背景技術(shù)：
《食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》(GB2760-2011)對鮮水果中允許使用的保鮮劑種類及最大使用量、殘留量作了明確的規(guī)定?；瘜W(xué)防腐保鮮劑雖然具有防腐保鮮的作用，但是大多會對人體產(chǎn)生有不同程度的毒害作用，給健康帶來不利影響，甚至出現(xiàn)致癌、致畸、致突變等情況，為此加強(qiáng)對水果防腐保鮮劑殘留監(jiān)測具有重要意義。對羥基苯甲酸酯類(甲酯、乙酯)、乙萘酚、4-苯基苯酚、聯(lián)苯醚是比較常用的水果保鮮劑，它們對人體有一定的毒性。現(xiàn)有技術(shù)中，對防腐保鮮劑殘留量進(jìn)行測定，以色譜法居多。也有采用高效液相色譜法對對羥基苯甲酸酯類、乙萘酚和4-苯基苯酚殘留量進(jìn)行分別測定的方法。由于現(xiàn)有技術(shù)中對防腐保鮮劑的測定都是分別進(jìn)行的，無法同時進(jìn)行測定，因此，檢測過程繁瑣，耗費(fèi)人力物力。

發(fā)明內(nèi)容
鑒于上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種防腐保鮮劑殘留量的測定方法，本發(fā)明所提供的防腐保鮮劑殘留量的測定方是通過氣相色譜質(zhì)譜法對五種防腐保鮮劑實(shí)現(xiàn)同時測定的方法，旨在解決現(xiàn)有技術(shù)中對防腐保鮮劑的檢測過程繁瑣的問題。本發(fā)明的技術(shù)方案如下:一種防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其中，所述防腐保鮮劑殘留量的測定方法是通過氣相色譜質(zhì)譜法對五種防腐保鮮劑實(shí)現(xiàn)同時測定，其中五種防腐保鮮劑是包括羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、乙萘酚、4-苯基苯酚和聯(lián)苯醚；所述防腐保鮮劑殘留量的測定方法具體包括以下步驟:將待測樣品打碎，用有機(jī)溶劑對待測樣品進(jìn)行超聲提取，經(jīng)平行蒸發(fā)儀第一次濃縮后，采用固相萃取柱凈化，經(jīng)第二次濃縮后甲醇定容，過濾后供氣相色譜-質(zhì)譜分析。所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其中，所述超聲提取過程中采用的有機(jī)溶劑為正己烷、乙酸乙酯或乙醚。所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其中，所述超聲提取過程中采用的有機(jī)溶劑為乙醚。所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其中，所述超聲提取過程具體如下:在待測樣品中加入乙釀，潤旋振湯2 3min后再超聲提取5 6min，加入氣化納再次潤旋2 3min,4000 5000r/min離心5 IOmin ;再分2次加入乙醚,潤旋振蕩2 3min后4000 5000r/min離心5 IOmin,合并有機(jī)相。所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其中，所述采用固相萃取柱凈化的過程采用活性炭小柱或C18柱進(jìn)行凈化。
所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其中，所述采用固相萃取柱凈化的過程是采用活性炭小柱進(jìn)行凈化，其具體過程為:活性炭小柱先用洗脫液進(jìn)行活化，再將待測樣品的濃縮液倒入活性炭小柱后用洗脫液洗脫；所述洗脫液為乙酸乙酯和/或丙酮，用量為濃縮液體積的5 10倍。所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其中，所述洗脫液為乙酸乙酯和丙酮的等體積混合液。所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其中，所述第二次濃縮過程是采用氮?dú)獯?，促使洗脫液揮發(fā)。所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其中，所述過濾過程是采用0.45 μ m濾膜進(jìn)行過濾。所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其中，質(zhì)譜條件為:色譜柱:HP-5毛細(xì)管色譜柱；進(jìn)樣口的溫度為240°C 260°C ;進(jìn)樣方式為不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣體積為0.5μ L LOyL ;色譜柱升溫程序為初始柱溫80°C，保持0.5min,30°C /min升溫至200°C，保持
1.5min，25°C /min升溫至280°C，保持0.5min ;載氣為氦氣；GC_MS傳輸線溫度為240°C 270°C;電子能量為70eV ;離子源溫度為230°C;四級桿溫度為150°C;質(zhì)量掃描范圍:為50 350m/zo有益效果:本發(fā)明所提供的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，通過氣相色譜質(zhì)譜法對五種防腐保鮮劑的殘留量實(shí)現(xiàn)同時定性、定量測定，該方法具有操作簡便、快捷、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，方法加標(biāo)回收率在80.5% 104%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.21% 6.41%，可以滿足鮮水果中上述5種防腐保鮮劑殘留量監(jiān)測要求。


圖1為洗脫溶劑(乙酸乙酯)及其體積對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)洗脫效率的影響示意圖；其中，a代表聯(lián)苯醚山代表對羥基苯甲酸甲酯；(:代表對羥基苯甲酸乙酯；d代表乙萘酚；e代表4-苯基苯酹。圖2為洗脫溶劑(丙酮)及其體積對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)洗脫效率的影響示意圖；其中，a代表聯(lián)苯醚山代表對羥基苯甲酸甲酯；(:代表對羥基苯甲酸乙酯；d代表乙萘酚；e代表4-苯基苯酚。圖3為洗脫溶劑(丙酮及乙酸乙酯等體積混合液)及其體積對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)洗脫效率的影響示意圖；其中，a代表聯(lián)苯醚山代表對羥基苯甲酸甲酯；(:代表對羥基苯甲酸乙酯；(1代表乙萘酚；e代表4-苯基苯酚。圖4本發(fā)明實(shí)施例中葡萄樣品葡萄的回收總離子流圖。圖5本發(fā)明實(shí)施例中葡萄加標(biāo)樣品的回收總離子流圖；其中，I為聯(lián)苯醚；2為對羥基苯甲酸甲酯；3為對羥基苯甲酸乙酯；4為乙萘酚；5為4-苯基苯酚。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明提供一種防腐保鮮劑殘留量的測定方法，為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及效果更加清楚、明確，以下對本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。本發(fā)明所提供一種防腐保鮮劑殘留量的測定方法，通過氣相色譜質(zhì)譜法對五種防腐保鮮劑實(shí)現(xiàn)同時測定，其中五種防腐保鮮劑是對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、乙萘酚、4-苯基苯酚和聯(lián)苯醚。具體地，所述防腐保鮮劑殘留量的測定方法，包括以下步驟:將待測樣品打碎，用有機(jī)溶劑對待測樣品進(jìn)行超聲提取，經(jīng)平行蒸發(fā)儀第一次濃縮后，采用固相萃取柱凈化，經(jīng)第二次濃縮后甲醇定容，過濾后供氣相色譜-質(zhì)譜分析。其中，進(jìn)行超聲提取采用的所述有機(jī)溶劑可以為正己烷、乙酸乙酯和乙醚等有機(jī)溶劑。聯(lián)苯醚回收率高低可能跟其容易揮發(fā)的物理性質(zhì)有關(guān)，在進(jìn)行回收率試驗時，以正己烷和乙酸乙酯為提取溶劑時，聯(lián)苯醚的回收率較差，低于70%，而當(dāng)乙醚為提取溶劑時，聯(lián)苯醚的回收率有提高，可達(dá)80%以上，因此，在本發(fā)明技術(shù)方案中優(yōu)選采用乙醚作為提取溶劑。本發(fā)明中還給所述超聲提取的優(yōu)選操作過程，以2.0g的待測樣品為例，具體過程為:在待測樣品中加入10 15mL乙醚(約為3 6倍的待測樣品重量)，渦旋振蕩2 3min后再超聲提取5 6min，加入2.0 3.0g氯化鈉再次渦旋2 3min，4000 5000r/min離心5 IOmin ;再分2次加入10 15mL乙醚(約為3 6倍的待測樣品重量)，渦旋振蕩2 3min后離心5 IOmin (轉(zhuǎn)數(shù)同上)，合并有機(jī)相，約20 28mL (約為7 10倍的待測樣品重量)。此超聲提取采用兩次萃取的方法，保證了萃取的完全，以取得良好的回收率。所述第一次濃縮的過程是采用平行蒸發(fā)儀對樣品萃取液進(jìn)行濃縮的，其具體操作過程可以為:取10 20mL有機(jī)相于平行蒸發(fā)儀(壓力689mbar)上濃縮至約lmL。所得到的樣品濃縮液用于凈化處理，保證了提取的平行性。由于水果中的色素等物質(zhì)會干擾目標(biāo)物的分離，為此在本技術(shù)方案中對粗提液進(jìn)行了固相萃取柱凈化。所述采用固相萃取柱凈化的過程可采用活性炭小柱和C18柱，優(yōu)選為采用活性炭小柱進(jìn)行凈化，因為活性炭小柱去除樣品中色素的效果優(yōu)于C18小柱，且其對目標(biāo)物的吸附能力也強(qiáng)。本發(fā)明中還給采用活性炭小柱進(jìn)行固相萃取柱凈化的優(yōu)選技術(shù)方案，具體為:活性炭小柱先用洗脫液進(jìn)行活化，再將待測樣品的濃縮液倒入活性炭小柱后用洗脫液洗脫。由于洗脫液的種類及體積會都對目標(biāo)物的洗脫效率造成影響，為了保證了良好的洗脫效果，本發(fā)明中選取了合適洗脫液及洗脫液體積，所述洗脫液可以為乙酸乙酯和/或丙酮，所述洗脫液的用量為采用5 10倍的濃縮液體積。因為聯(lián)苯醚和對羥基苯甲酸甲酯、乙酯較容易洗脫，而丙酮對乙萘酚和4-苯基苯酚的洗脫能力優(yōu)于乙酸乙酯，以ImL的濃縮液樣品為例，當(dāng)采用8倍于濃縮液體積的乙酸乙酯和丙酮對濃縮液進(jìn)行洗脫后，5種目標(biāo)物的回收率均可達(dá)到90%以上，如圖1和圖2所示。優(yōu)選地，將乙酸乙酯和丙酮等體積混合后洗脫效果更佳，可將洗脫液用量體積降低至5倍濃縮液體積，如圖3所示。因此，所述洗脫液優(yōu)選為采用乙酸乙酯和丙酮等體積的混合液。而在進(jìn)行活化的過程，可以采用2 3倍濃縮液體積的洗脫液對活性炭小柱進(jìn)行活化，保證良好的凈化效果。所述第二次濃縮過程是采用氮?dú)獯担偈瓜疵撘簱]發(fā)，當(dāng)凈化得到的溶液被氮?dú)獯抵两蓵r，再用甲醇定容。所述過濾過程是采用0.45 μ m濾膜進(jìn)行過濾，進(jìn)一步排出其他物質(zhì)的干擾，保證測定效果。本發(fā)明中，稱取對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、乙萘酚、4-苯基苯酚和聯(lián)苯醚的標(biāo)準(zhǔn)品，經(jīng)甲醇配制后稀釋成一系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，供氣相色譜質(zhì)譜分析，外標(biāo)法定量，做出標(biāo)準(zhǔn)曲線。待測樣品中五種防腐保鮮劑的計算公式如下:
權(quán)利要求
1.一種防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其特征在于，所述防腐保鮮劑殘留量的測定方法是通過氣相色譜質(zhì)譜法對五種防腐保鮮劑實(shí)現(xiàn)同時測定，其中五種防腐保鮮劑是包括羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、乙萘酚、4-苯基苯酚和聯(lián)苯醚；所述防腐保鮮劑殘留量的測定方法具體包括以下步驟: 將待測樣品打碎，用有機(jī)溶劑對待測樣品進(jìn)行超聲提取，經(jīng)平行蒸發(fā)儀第一次濃縮后，采用固相萃取柱凈化，經(jīng)第二次濃縮后甲醇定容，過濾后供氣相色譜-質(zhì)譜分析。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其特征在于，所述超聲提取過程中采用的有機(jī)溶劑為正己烷、乙酸乙酯或乙醚。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其特征在于，所述超聲提取過程中采用的有機(jī)溶劑為乙醚。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其特征在于，所述超聲提取過程具體如下: 在待測樣品中加入乙醚，渦旋振蕩2 3min后再超聲提取5 6min，加入氯化鈉再次潤旋2 3min,4000 5000r/min離心5 IOmin ;再分2次加入乙醚，潤旋振蕩2 3min后4000 5000r/min離心5 IOmin,合并有機(jī)相。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其特征在于，所述采用固相萃取柱凈化的過程采用活性炭小柱或C18柱進(jìn)行凈化。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其特征在于，所述采用固相萃取柱凈化的過程是采用活性炭小柱進(jìn)行凈化，其具體過程為: 活性炭小柱先用洗脫液進(jìn)行活化，再將待測樣品的濃縮液倒入活性炭小柱后用洗脫液洗脫； 所述洗脫液為乙酸乙酯和/或丙酮。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其特征在于，所述洗脫液為乙酸乙酯和丙酮的等體積混合液。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其特征在于，所述第二次濃縮過程是采用氮?dú)獯?，促使洗脫液揮發(fā)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其特征在于，所述過濾過程是采用0.45 μ m濾膜進(jìn)行過濾。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其特征在于，質(zhì)譜條件為:色譜柱:HP-5毛細(xì)管色譜柱；進(jìn)樣口的溫度為240°C 260°C;進(jìn)樣方式為不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣體積為0.5yL 1.0yL ;色譜柱升溫程序為初始柱溫80°C，保持0.5min, 30 °C /min升溫至200°C，保持1.5min, 25°C /min升溫至280°C，保持0.5min ;載氣為氦氣；GC_MS傳輸線溫度為240°C 270°C ;電子能量為70eV ;離子源溫度為230°C ;四級桿溫度為150°C ;質(zhì)量掃描范圍為50 350m/z。
全文摘要
本發(fā)明公開一種防腐保鮮劑殘留量的測定方法，其中，所述防腐保鮮劑殘留量的測定方法是通過氣相色譜質(zhì)譜法對五種防腐保鮮劑實(shí)現(xiàn)同時測定，五種防腐保鮮劑包括對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、乙萘酚、4-苯基苯酚和聯(lián)苯醚；所述防腐保鮮劑殘留量的測定方法具體包括以下步驟將待測樣品打碎，用有機(jī)溶劑對待測樣品進(jìn)行超聲提取，經(jīng)平行蒸發(fā)儀第一次濃縮后，采用固相萃取柱凈化，經(jīng)第二次濃縮后甲醇定容，過濾后供氣相色譜-質(zhì)譜分析。該方法具有操作簡便、快捷、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，方法加標(biāo)回收率在80.5%～104%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.21%～6.41%，可以滿足鮮水果中上述5種防腐保鮮劑殘留量監(jiān)測要求。
文檔編號G01N30/02GK103197009SQ20131012425
公開日2013年7月10日 申請日期2013年4月11日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月11日
發(fā)明者奉夏平, 胡昆, 黃秀麗, 唐麗娜, 付麗敏, 李彩均, 陳清清, 黃飛 申請人:廣東省惠州市質(zhì)量計量監(jiān)督檢測所