中藥組合物安兒寧制劑中巖白菜、甘草含量測(cè)定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種中藥組合物安兒寧制劑中巖白菜、甘草含量測(cè)定方法，該方法采用高效液相色譜法，使用一個(gè)色譜條件同時(shí)對(duì)含有巖白菜和甘草的中藥組合物安兒寧制劑中的巖白菜及甘草進(jìn)行了含量測(cè)定，便于質(zhì)量控制，操作簡(jiǎn)便，分析數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。既節(jié)省了分析人員的分析時(shí)間，提高了工作效率，同時(shí)提高了制劑的安全性、有效性及可控性。
【專利說(shuō)明】中藥組合物安兒寧制劑中巖白菜、甘草含量測(cè)定方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種中藥復(fù)方制劑的含量測(cè)定方法，特別涉及一種安兒寧制劑中巖白 菜、甘草含量測(cè)定方法，屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002] 安兒寧顆粒為金訶藏藥股份有限公司獨(dú)家產(chǎn)品，標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)：WS-10640 (ZD-0640)-2002-2012Z。安兒寧顆粒是由如下重量配比的藥材制成的：天竺黃66. 7g、紅花 53. 3g、人工牛黃5. 3g、巖白菜53. 3g、甘草53. 3g、高山辣根菜53. 3g、短管兔耳草66. 7g、檀 香66. 7g、唐古特烏頭66. 7g。具有清熱祛風(fēng)，化痰止咳等作用。用于小兒風(fēng)熱感冒，咳嗽有 痰，發(fā)熱咽痛，上呼吸道感染見(jiàn)上述癥候者。由于其良好的療效，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于臨床。
[0003] 藥物原有的質(zhì)量控制僅僅控制人工牛黃的質(zhì)量，方法極其簡(jiǎn)單粗糙，根本不能全 面準(zhǔn)確的反映該復(fù)方制劑的生產(chǎn)過(guò)程和控制藥品的質(zhì)量。甘草和巖白菜均具有很好的鎮(zhèn) 咳、化痰作用，為方中主藥。甘草和巖白菜均為提取后入藥，通過(guò)含量測(cè)定以檢測(cè)其方中質(zhì) 量，可更好的控制提取工藝，進(jìn)而保證產(chǎn)品質(zhì)量的安全、有效、質(zhì)量可控。
[0004] 分別控制甘草和巖白菜的質(zhì)量，需進(jìn)行使用兩種方法進(jìn)行測(cè)定，經(jīng)過(guò)檢索，目前沒(méi) 有發(fā)現(xiàn)同時(shí)測(cè)定巖白菜及甘草含量的文獻(xiàn)和專利發(fā)明。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種安兒寧制劑中巖白菜、甘草含量測(cè)定方法。
[0006] 發(fā)明概述
[0007] 本發(fā)明使用一個(gè)色譜條件同時(shí)對(duì)安兒寧制劑中巖白菜、甘草進(jìn)行了質(zhì)量控制，操 作簡(jiǎn)便，分析數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。既節(jié)省了分析人員的分析時(shí)間，提高了工作效率，同時(shí)又提高了制 劑的安全性、有效性及可控性。
[0008] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0009] -種安兒寧制劑中巖白菜、甘草含量測(cè)定方法，步驟如下：
[0010] 照高效液相色譜法（《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI D)測(cè)定；
[0011] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以 乙腈為流動(dòng)相A，以體積份數(shù)比0. 0 5 %磷酸溶液為流動(dòng)相B，采用梯度洗脫方式： Omin - 20min - 30min - 60min，乙臆：7% - 7% - 36% - 36% ;體積份數(shù)比 0· 05% 憐酸溶 液：93% - 93% - 64% - 64%，檢測(cè)波長(zhǎng)為245nm-275nm ;理論板數(shù)按甘草酸峰計(jì)算應(yīng)不低于 3000 ；
[0012] 對(duì)照品溶液的制備：取巖白菜素對(duì)照品、甘草酸銨對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含巖 白菜素、甘草酸銨各50 μ g的溶液，即得；
[0013] 供試品溶液的制備：將固體安兒寧制劑研細(xì)后，取粉末4g，精密稱定，置具塞的錐 形瓶中，加入甲醇25ml，密塞，超聲處理30-40min，放冷，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾 過(guò)，取續(xù)濾液，即得；
[0014] 測(cè)定法：分別吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即 得。
[0015] 所述的安兒寧制劑是指含有巖白菜和甘草為主藥，同時(shí)含有天竺黃、紅花、人工牛 黃、高山辣根菜、短管兔耳草、檀香、唐古特烏頭的多種或全部，按常規(guī)工藝，加入常規(guī)輔料 制備成臨床可接受的任何一種劑型，包括膠囊劑、丸劑、微丸、滴丸、片劑、膠囊、顆粒、飲片 或分散片。
[0016] 所述的梯度洗脫方式為梯度性地改變洗脫液的組分（成分、離子強(qiáng)度等）或pH，以 期將層析柱上不同的組分合理的時(shí)間內(nèi)洗脫出來(lái)的方法。
[0017] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，一種原料藥組成為天竺黃66. 7g、紅花53. 3g、人工牛黃5. 3g、 巖白菜53. 3g、甘草53. 3g、高山辣根菜53. 3g、短管兔耳草66. 7g、檀香66. 7g、唐古特烏頭 66. 7g的中藥組合物安兒寧顆粒中巖白菜、甘草含量測(cè)定方法，步驟如下：
[0018] 照高效液相色譜法（《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI D)測(cè)定；
[0019] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以 乙腈為流動(dòng)相A，以體積份數(shù)比0. 0 5 %磷酸溶液為流動(dòng)相B，采用梯度洗脫方式： Omin - 20min - 30min - 60min，乙臆：7% - 7% - 36% - 36% ;體積份數(shù)比 0· 05% 憐酸溶 液：93% - 93% - 64% - 64%，檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm ;理論板數(shù)按甘草酸峰計(jì)算應(yīng)不低于3000 ;
[0020] 對(duì)照品溶液的制備：取巖白菜素對(duì)照品、甘草酸銨對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含巖 白菜素、甘草酸銨各50 μ g的溶液，即得；
[0021] 供試品溶液的制備：將安兒寧顆粒研細(xì)后，取粉末4g，精密稱定，置具塞的錐形瓶 中，加入甲醇25ml，密塞，超聲處理30min，放冷，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù) 濾液，即得；
[0022] 測(cè)定法：分別吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即 得；
[0023] 安兒寧顆粒中巖白菜的含量以巖白菜素苷計(jì)，不得少于0. 7mg/g ;甘草含量以甘 草酸計(jì)，不得少于〇. 3mg/g。
[0024] 本發(fā)明使用一個(gè)色譜條件同時(shí)對(duì)含有巖白菜和甘草的安兒寧制劑進(jìn)行質(zhì)量控制， 操作簡(jiǎn)便，分析數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。既節(jié)省了分析人員的分析時(shí)間，提高了工作效率，同時(shí)提高了制 劑的安全性、有效性及可控性。例如安兒寧顆粒原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下只有人工牛黃的含量測(cè)定 方法，不能有效的檢測(cè)其他主要成分巖白菜、甘草的含量。本發(fā)明對(duì)現(xiàn)有的安兒寧顆粒質(zhì)量 標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了相應(yīng)提高，使用一個(gè)色譜條件同時(shí)對(duì)巖白菜及甘草進(jìn)行了含量測(cè)定，提高了工 作效率，同時(shí)提高了制劑的安全性、有效性及可控性，從而確保了其臨床療效和廣大患者的 身體健康。
[0025] 下述實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例用于進(jìn)一步說(shuō)明但不限于本發(fā)明。
[0026] 實(shí)驗(yàn)例1含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)
[0027] 1.儀器、試藥和供試樣品
[0028] 儀器：日立L-2100泵，日立L-2400紫外檢測(cè)器，島津AUW-220D型電子天平。
[0029] 對(duì)照品：巖白采素對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品鑒定所）批號(hào)：111532-200202,甘早 酸銨對(duì)照品（中國(guó)生物制品鑒定所）批號(hào)：110731-200615。
[0030] 樣品：安兒寧顆粒（金訶藏藥股份有限公司提供)，批號(hào)：20121110,20121114， 20121119。
[0031] 2.檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇
[0032] 巖白菜素在275nm處有最大吸收峰；甘草酸銨在250nm處有最大吸收峰。制劑中 巖白菜素含量較甘草酸含量高一倍，故選擇巖白菜素最大吸收峰250nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。
[0033] 3.流動(dòng)相選擇
[0034] 巖白菜素與甘草酸極性相差較大，采用等度洗脫很難對(duì)兩種成分進(jìn)行同時(shí)測(cè)定， 故選擇梯度洗脫進(jìn)行色譜分離。
[0035] 使用甲醇-水體系進(jìn)行色譜分離時(shí)發(fā)現(xiàn)，在250nm下甲醇-水體系易形成較大的 梯度峰，同時(shí)峰性較差，影響測(cè)定。
[0036] 考慮色譜柱的耐受性，以及樣品的穩(wěn)定性使用乙腈-0. 05%磷酸體系進(jìn)行梯度洗 脫時(shí)，以上問(wèn)題得到解決。
[0037] 4、梯度洗脫時(shí)間的選擇
[0038] 通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)按以下時(shí)間進(jìn)行洗脫時(shí)，巖白菜與甘草酸均能達(dá)到很好的檢測(cè) 要求。流動(dòng)相A為乙腈，流動(dòng)相B為0.05%磷酸。見(jiàn)表1和附圖1、附圖2。
[0039] 表1梯度洗脫表
[0040]

【權(quán)利要求】
1. 一種中藥組合物安兒寧制劑中巖白菜、甘草含量測(cè)定方法，包括米用2010年版《中 國(guó)藥典》一部附錄VI D高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定；其特征在于步驟如下： 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙 腈為流動(dòng)相A，以體積份數(shù)比0. 05%磷酸溶液為流動(dòng)相B，采用梯度洗脫方式： Omin - 20min - 30min - 60min，乙臆：7% - 7% - 36% - 36% ;體積份數(shù)比 0· 05% 憐酸溶 液：93% - 93% - 64% - 64%，檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm ;理論板數(shù)按甘草酸峰計(jì)算應(yīng)不低于3000 ; 對(duì)照品溶液的制備：取巖白菜素對(duì)照品、甘草酸銨對(duì)照品，加甲醇制成每lml含巖白菜 素、甘草酸銨各50 μ g的溶液，即得； 供試品溶液的制備：將安兒寧制劑研細(xì)后，取粉末4g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中， 加入甲醇25ml，密塞，超聲處理30min，放冷，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾 液，即得； 測(cè)定法：分別吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
2. 權(quán)利要求1所述的一種中藥組合物安兒寧制劑中巖白菜、甘草含量測(cè)定方法，其特 征在于，所述的中藥組合物安兒寧制劑指含有巖白菜和甘草為主藥，同時(shí)含有天竺黃、紅 花、人工牛黃、高山辣根菜、短管兔耳草、檀香或唐古特烏頭中的多種或全部，按常規(guī)工藝， 加入常規(guī)輔料制備成臨床可接受的任何一種劑型，包括膠囊劑、丸劑、微丸、滴丸、片劑、膠 囊、顆粒、飲片或分散片。
3. 權(quán)利要求1所述的一種中藥組合物安兒寧制劑中巖白菜、甘草含量測(cè)定方法，其特 征在于，一種原料藥組成為天竺黃66. 7g、紅花53. 3g、人工牛黃5. 3g、巖白菜53. 3g、甘草 53. 3g、高山辣根菜53. 3g、短管兔耳草66. 7g、檀香66. 7g、唐古特烏頭66. 7g的中藥組合物 安兒寧顆粒中巖白菜、甘草含量測(cè)定方法，包括采用2010年版《中國(guó)藥典》一部附錄VI D高 效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定；步驟如下： 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙 腈為流動(dòng)相A，以體積份數(shù)比0. 05%磷酸溶液為流動(dòng)相B，采用梯度洗脫方式： Omin - 20min - 30min - 60min，乙臆：7% - 7% - 36% - 36% ;體積份數(shù)比 0· 05% 憐酸溶 液：93% - 93% - 64% - 64%，檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm ;理論板數(shù)按甘草酸峰計(jì)算應(yīng)不低于3000 ; 對(duì)照品溶液的制備：取巖白菜素對(duì)照品、甘草酸銨對(duì)照品，加甲醇制成每lml含巖白菜 素、甘草酸銨各50 μ g的溶液，即得； 供試品溶液的制備：將安兒寧顆粒研細(xì)后，取粉末4g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中， 加入甲醇25ml，密塞，超聲處理30min，放冷，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾 液，即得； 測(cè)定法：分別吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得； 安兒寧顆粒中巖白菜的含量以巖白菜素苷計(jì)，不得少于0. 7mg/g ;甘草含量以甘草酸 計(jì)，不得少于〇. 3mg/g。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK104122340SQ201310153344
【公開(kāi)日】2014年10月29日 申請(qǐng)日期:2013年4月27日 優(yōu)先權(quán)日:2013年4月27日
【發(fā)明者】孫緒丁, 趙延霞, 任松鵬, 李懷平, 馬宏偉 申請(qǐng)人:山東阿如拉藥物研究開(kāi)發(fā)有限公司