艾滋病(尿液)和毒品兩項快速檢測試劑的制作方法
【專利摘要】艾滋病(尿液)和毒品兩項快速檢測試劑，是一種同時檢測尿液中艾滋病及多種毒品的液質(zhì)聯(lián)用測定方法。其特點為根據(jù)樣品的實際情況和對靈敏度的不同要求，分別采用雙抗原夾心原理和固相萃取，直接沉淀或直接進樣的方法對樣品進行檢測.檢測過程在5分鐘內(nèi)完成，應用包括醫(yī)院、防疫站、出入境檢疫局，現(xiàn)場的疾病診斷。家庭自檢。用尿液直接檢測，避免血液的交叉感染，徹底解決了實驗室檢測技術的缺陷，檢測無創(chuàng)傷，速度快，方便安全。
【專利說明】艾滋病(尿液)和毒品兩項快速檢測試劑
1.

【技術領域】
[0001]本發(fā)明是涉及艾滋病(尿液)和毒品兩項快速檢測試劑，尤其是能快速判定出被檢查者是否感染艾滋病和吸毒的檢測試劑。
2.

【背景技術】
[0002]當前涉及艾滋病及毒品的案件，其數(shù)量呈有增無減的趨勢，世界各國都在控制艾滋病的蔓延和緝毒，我國也不例外，因此如何判定被檢者是否感染艾滋病和吸食毒品，成為很重要的課題，急待解決。我國目前艾滋病檢測主要是血源檢測，是用血清.血槳或全血檢測.因血液傳染性強，醫(yī)院檢驗人員進行血檢有被感染的危險。所以，發(fā)展尿液檢測試劑對檢驗人員和受檢人員都安全，本項目檢測用尿液直接檢測，避免血液的交叉感染.該方法不依賴于精密的儀器、不依賴于熟練的技術人員、操作步驟簡捷，比起目前常用的酶聯(lián)免疫法具有更人的優(yōu)點。整個反應過程約在5分鐘內(nèi)就可以完成。該技術是國際先進水平，在國內(nèi)該技術處于領先水平。
[0003]艾滋病(尿液)和毒品兩項快速檢測試劑是以尿液為樣本檢測抗體，檢測過程只需5-10分針完成。準確率99.6%，特異性100%，靈敏性99%。
3.


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于公開一種結構簡單，檢測過程快速準確，應用層析法(LateralFlow lmmuno-Assay)膠體金免疫診斷技術的艾滋病(尿液)和毒品多項檢測試劑。膠體金檢測系統(tǒng)使用一種特殊的多孔膜(NC膜)作為固相抗原或抗體載體。該膜具有很強的蛋白吸附功能，抗原或抗體吸附于NC膜并經(jīng)干燥處理后即作為固相，可與液相中的相應抗體或抗原快速結合。而在濕潤狀態(tài)下，液相(尿液)中含有的抗體或抗原可因“燈信引流現(xiàn)象”作快速定向泳動并與固相抗原或抗體結合成為復合物:結合物載體上預先噴點的結合有膠體會(作為顯色和指示劑)的相應第二抗體或抗原亦可與該復合物快速結合。由于毛細作用復合物沿線條向前移動，移動至檢測線處，復合物被抗人一 IgG單克降抗體捕獲形成Au-HIVAg-抗體-抗人-1gG單克隆抗體夾心物,呈現(xiàn)出一條紫紅色條帶。陰性標本則不會形成夾心物。
[0005]由于這種結合過程為物理過程，反應可在數(shù)分鐘內(nèi)完成且結合非常穩(wěn)定。這一技術的創(chuàng)新點為:加有輔助劑使抗原或抗體與固相膜載體牢固結合；應用特殊干燥技術使與固相膜載體結合的蛋白保持穩(wěn)定，從而達到試劑盒可在常溫下保存18個月到I年；膠體金制備和結合技術:膠體金結合物的干燥和在常溫下長期保存技術；測試條中各種參試組分的最佳配比:為達到整個測試反應在數(shù)分鐘內(nèi)一步完成對測試條中各種原材料的測試選定和參試組分的最佳配比。解決的技術關鍵問題:(I)，以重組抗原構建高靈敏度的雙抗原夾心法系統(tǒng)，(2)高靈敏度的雙抗原夾心法系統(tǒng)和高靈敏度的雙抗體夾心系統(tǒng)中金標記物的制備；(3)尿液快速采樣和樣品濃縮技術。
[0006]4、【具體實施方式】:由于這種結合過程為物理過程，反應可在數(shù)分鐘內(nèi)完成且結合非常穩(wěn)定。這一技術的創(chuàng)新點為:加有輔助劑使抗原或抗體與固相膜載體牢固結合；應用特殊干燥技術使與固相膜載體結合的蛋白保持穩(wěn)定，從而達到試劑盒可在常溫下保存18個月到I年:膠體金制備和結合技術:膠體金結合物的干燥和在常溫下長期保存技術；測試條中各種參試組分的最佳配比:為達到整個測試反應在數(shù)分鐘內(nèi)一步完成對測試條中各種原材料的測試選定和參試組分的最佳配比。解決的技術關鍵問題:(I)，以HIV重組抗原構建高靈敏度的雙抗原夾心法系統(tǒng)，用于檢測尿液中的特異性HIV抗體；(2)高靈敏度的雙抗原夾心法系統(tǒng)和高靈敏度的雙抗體夾心系統(tǒng)中金標記物的制備；(3)尿液快速采樣和樣品濃縮技術。
【權利要求】
1.以HIV重組抗原構建高靈敏度的雙抗原夾心法系統(tǒng)，用于檢測尿液中的特異性HIV和毒品抗體:高度純化的重組抗原HIV-lgp41、.P24和HIV_2gp36、高靈敏度的雙抗原夾心法系統(tǒng)構建。
2.高靈敏度的雙抗原夾心法系統(tǒng)和高靈敏度的雙抗體夾心系統(tǒng)中金標記物的制備。
3.上述兩個檢測系統(tǒng)中金標記物的制備。
4.尿液的快速樣品濃縮技術:尿液作為待測樣品進行檢測時，由于尿液中含有的特異性抗體和抗原的含量要較血清或血漿的多，這就需要該檢測系統(tǒng)的靈敏度更強。本項目使用的濃縮墊可使樣品在加樣瞬間濃縮10-100倍，從而提高檢測系統(tǒng)的敏感性。
【文檔編號】G01N33/558GK104515849SQ201310461326
【公開日】2015年4月15日 申請日期:2013年10月8日 優(yōu)先權日:2013年10月8日
【發(fā)明者】陳潔 申請人:常州泰晶生物科技有限公司