一種對(duì)紅斑狼瘡抗核抗體進(jìn)行檢測的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種對(duì)紅斑狼瘡抗核抗體進(jìn)行檢測的方法。步驟如下:事先將所有試劑放在室溫下進(jìn)行溫?zé)?,至少一小時(shí);然后將目標(biāo)片段上滴入生物素標(biāo)記液,1-2滴;隨后加入酶標(biāo)記溶液;35-36攝氏度環(huán)境下進(jìn)行孵育反應(yīng),時(shí)間最多1小時(shí);洗板機(jī)反復(fù)清洗,至少3-5次;干燥;再用醫(yī)用蒸餾水進(jìn)行稀釋20倍;高速離心;懸空;靜置;加入終止液即可;高速離心前,需要用酶標(biāo)板以及酶連物進(jìn)行抗體檢測。本發(fā)明的有益效果是:操作簡單,成本較低,可以準(zhǔn)確進(jìn)行篩選,重復(fù)操作性強(qiáng),篩選精確。
【專利說明】一種對(duì)紅斑狼瘡抗核抗體進(jìn)行檢測的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生化實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域,具體涉及一種對(duì)紅斑狼瘡抗核抗體進(jìn)行檢測的方法?!颈尘凹夹g(shù)】
[0002]紅斑狼瘡為全身性、慢性進(jìn)行性反復(fù)發(fā)作和緩解的典型自身免疫性結(jié)締組織病之一。女性發(fā)病多,可侵犯全身多臟器,免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展使早期輕型和不典型的病例能及時(shí)診治,因此除少數(shù)重癥或重要器官受損者外,有些病例可自行緩解,有些只呈一過性發(fā)作,經(jīng)數(shù)月或短暫病程后,癥狀完全消失。治療上由于合理應(yīng)用皮質(zhì)類固醇激素、免疫調(diào)節(jié)劑、血漿交換療法、中西醫(yī)結(jié)合等,紅斑狼瘡患者的十年存活率已達(dá)85%。近年有人認(rèn)為本病為一病譜性疾病,其兩極為局限性盤狀紅斑狼瘡和系統(tǒng)性紅斑狼瘡,中間為亞急性皮膚型紅斑狼瘡和深部紅斑狼瘡,二者均可向兩端演變。LB培養(yǎng)基是一種培養(yǎng)基的名稱,生化分子實(shí)驗(yàn)中一般用該培養(yǎng)基來預(yù)培養(yǎng)菌種,使菌種成倍擴(kuò)增,達(dá)到使用要求.培養(yǎng)的菌種一般是經(jīng)過改造的無法在外界環(huán)境單獨(dú)存活和擴(kuò)增的工程菌.通過培養(yǎng)工程菌,我們可以表達(dá)大量的外源蛋白,也可以拿到帶有外源基因的質(zhì)粒,工程菌的有效擴(kuò)增是生化分子實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于,針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)缺陷,提供一種技術(shù)方案:
一種對(duì)紅斑狼瘡抗核抗體進(jìn)行檢測的方法,步驟如下:事先將所有試劑放在室溫下進(jìn)行溫?zé)?,至少一小時(shí);然后將目標(biāo)片段上滴入生物素標(biāo)記液,1-2滴;隨后加入酶標(biāo)記溶液;35-36攝氏度環(huán)境下進(jìn)行孵育反應(yīng),時(shí)間最多I小時(shí);洗板機(jī)反復(fù)清洗,至少3-5次;干燥;再用醫(yī)用蒸餾水進(jìn)行稀釋20倍;高速離心;懸空;靜置;加入終止液即可。
[0004]本發(fā)明中,高速離心前,需要用酶標(biāo)板以及酶連物進(jìn)行抗體檢測。
[0005]本發(fā)明的有益效果是:操作簡單,成本較低,可以準(zhǔn)確進(jìn)行篩選,重復(fù)操作性強(qiáng),篩選精確。
【具體實(shí)施方式】
[0006]一種對(duì)紅斑狼瘡抗核抗體進(jìn)行檢測的方法,步驟如下:事先將所有試劑放在室溫下進(jìn)行溫?zé)?,至少一小時(shí);然后將目標(biāo)片段上滴入生物素標(biāo)記液,1-2滴;隨后加入酶標(biāo)記溶液;35-36攝氏度環(huán)境下進(jìn)行孵育反應(yīng),時(shí)間最多I小時(shí);洗板機(jī)反復(fù)清洗,至少3-5次;干燥;再用醫(yī)用蒸餾水進(jìn)行稀釋20倍;高速離心;懸空;靜置;加入終止液即可;高速離心前,需要用酶標(biāo)板以及酶連物進(jìn)行抗體檢測。
[0007]以上所述,僅為本發(fā)明較佳的【具體實(shí)施方式】,但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此,任何熟悉本【技術(shù)領(lǐng)域】的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi),根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變,都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種對(duì)紅斑狼瘡抗核抗體進(jìn)行檢測的方法,其特征在于,步驟如下:事先將所有試劑放在室溫下進(jìn)行溫?zé)?,至少一小時(shí);然后將目標(biāo)片段上滴入生物素標(biāo)記液,1-2滴;隨后加入酶標(biāo)記溶液;35-36攝氏度環(huán)境下進(jìn)行孵育反應(yīng),時(shí)間最多I小時(shí);洗板機(jī)反復(fù)清洗,至少3-5次;干燥;再用醫(yī)用蒸餾水進(jìn)行稀釋20倍;高速離心;懸空;靜置;加入終止液即可。
2.如權(quán)利要求1所述的一種對(duì)紅斑狼瘡抗核抗體進(jìn)行檢測的方法,其特征在于,高速離心前,需要用酶標(biāo)板以及酶連物進(jìn)行抗體檢測。
【文檔編號(hào)】G01N33/543GK103616504SQ201310539939
【公開日】2014年3月5日 申請(qǐng)日期:2013年11月5日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月5日
【發(fā)明者】辛竹 申請(qǐng)人:辛竹