一種四味姜黃湯散的檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種四味姜黃湯散的檢測方法，所述的檢測方法是采用高效液相色譜法一次性對四味姜黃湯散中的余甘子、姜黃、小檗皮的含量進行檢測，操作簡便，分析數(shù)據(jù)準確，節(jié)省了實驗時間，提高了工作效率，提升了檢測結(jié)果的準確性，可有效對四味姜黃湯散進行檢測。
【專利說明】一種四味姜黃湯散的檢測方法
【技術(shù)領域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種中藥復方制劑的檢測方法，特別涉及一種四味姜黃湯散的檢測方法，屬于醫(yī)藥【技術(shù)領域】。
【背景技術(shù)】
[0002]四味姜黃湯散收載于中國藏藥部頒標準中，標準編號:WS3-BC-0304-95，由如下重量配比的藥材制成的:姜黃15g、小檗皮12.5g、余甘子25g、蒺藜25g，具有清熱，利尿的作用，用于尿道炎，尿頻，尿急有很好的療效，現(xiàn)已廣泛應用于臨床。
[0003]四味姜黃湯散標準中的檢測方法非常簡單粗糙，沒有鑒別和含量測定方法；文獻《藏成藥四味姜黃湯散質(zhì)量標準研究》(中成藥，2008年3期)采用薄層色譜法鑒別姜黃、小檗皮、余甘子、蒺藜；采用高效液相色譜法測定制劑中姜黃素含量，色譜條件為:C18柱，流動相為乙腈-4%冰醋酸(48:52)，檢測波長430nm。
[0004]按照現(xiàn)有技術(shù)對四味姜黃湯散進行檢測，需要分別鑒別以上各味藥材，操作十分繁瑣，且僅對姜黃素進行定量檢測。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種四味姜黃湯散的檢測方法。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0007]—種四味姜黃湯散的檢測方法，所述的檢測方法是采用高效液相色譜法一次性對四味姜黃湯散中的余甘子、姜黃、小檗皮的含量進行檢測，其方法如下:
[0008]A)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0、體積份數(shù)比0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式:0min — IOmin — 35min — 60min,流動相 A:2% — 2% — 50% — 50% ;流動相 B:98% — 98% — 50% — 50% ;檢測波長為254nm ;理論板數(shù)按姜黃素峰計算應不低于2000 ；
[0009]B)對照品溶液的制備:取沒食子酸對照品、姜黃素對照品、鹽酸小檗堿，精密稱定，加甲醇制成每Iml含沒食子酸0.lmg、姜黃素50 u g、鹽酸小檗堿0.3mg的溶液，即得；
[0010]C)供試品溶液的制備:將四味姜黃湯散研細后，取粉末lg，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，加入體積百分比70:30:1甲醇-水-鹽酸溶液25ml，稱定重量，密塞，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用體積百分比70:30:1甲醇-水-鹽酸溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；
[0011]D)測定法:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各lOiil，注入液相色譜儀，測定，即得；
[0012]本說明書中所述的重量份與體積份的單位對應關系為g/ml或kg/1。
[0013]本發(fā)明使用高效液相色譜法一次性對四味姜黃湯散中的余甘子、姜黃、小檗皮進行了含量檢測，操作簡便，分析數(shù)據(jù)準確，節(jié)省了實驗時間，提高了工作效率，提升了檢測結(jié)果的準確性，可有效對四味姜黃湯散進行檢測。【專利附圖】

【附圖說明】
[0014]圖1是沒食子酸、姜黃素及鹽酸小檗堿混合對照品高效液相色譜圖；
[0015]圖2是沒食子酸線性關系圖；
[0016]圖3是姜黃素線性關系圖；
[0017]圖4是鹽酸小檗堿線性關系圖。
【具體實施方式】
[0018]下面結(jié)合實驗例和實施例進一步說明本發(fā)明的方案和效果，但不限于所述的實驗和實施例。
[0019]實驗例1、含量測定實驗
[0020]1.儀器、試藥和供試樣品
[0021]儀器:高效液相色譜儀:島津-20AT泵，島津STO-20A紫外檢測器，CT0-10AS vp柱溫箱；電子天平:島津AUW220D型。
[0022]對照品:沒食子Ife對照品(中國藥品生物制品檢定所)批號:
[0023]110831-200803，姜黃素對照品(中國藥品生物制品檢定所)批號:
[0024]110823-201004，鹽酸小檗堿對照品，批號:MUST_11122005。
[0025]樣品:四味姜黃湯散(山東阿如拉藥物研究開發(fā)有限責任公司自制)，批號:20131101,20131102,20131103。
[0026]2.檢測波長的選擇
[0027]姜黃素、沒食子酸及鹽酸小檗堿最大吸收差別較遠，不易選擇統(tǒng)一的波長，綜合考慮，以通用檢測波長254nm為檢測波長，實驗結(jié)果表明，以上三種對照品均有很好的吸收。
[0028]3.流動相選擇
[0029]沒食子酸與姜黃素、鹽酸小檗堿極性相差較大，采用等度洗脫很難對兩種成分進行同時測定，故選擇梯度洗脫進行色譜分離。
[0030]使用甲醇-水體系進行色譜分離時發(fā)現(xiàn)，在254nm下甲醇-水體系易形成較大的梯度峰，影響測定。單純使用乙腈-水體系，各色譜峰峰形較差，實驗表明，在一定的酸體系下，峰形得到改善，同時為了保證體系的穩(wěn)定性，加入一定的鹽。實驗發(fā)現(xiàn)，選擇加入磷酸二氫鈉后，流動性體系穩(wěn)定，同時對照峰形趨于完美，分離度也得到了顯著的提高。
[0031]故確定流動相A為乙腈，B為體積百分比0.05mol/L磷酸二氫鈉(磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0)溶液。
[0032]實驗發(fā)現(xiàn)，使用下述梯度，所得結(jié)果較為理想。
[0033]表1梯度洗脫表
【權(quán)利要求】
1.一種四味姜黃湯散的檢測方法，其特征在于，所述的檢測方法是采用高效液相色譜法一次性對四味姜黃湯散中的余甘子、姜黃、小檗皮的含量進行檢測，其測定方法如下: a.色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A ;以體積份數(shù)比0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液為流動相B，磷酸調(diào)節(jié)PH值至3.0 ;采用梯度洗脫方式:0min — IOmin — 35min — 60min ；乙臆:2% — 2%— 50% — 50% ;體積份數(shù)比 0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液:98% — 98% — 50% — 50% ;檢測波長為254nm ;理論板數(shù)按姜黃素峰計算應不低于2000 ； b.對照品溶液的制備:取沒食子酸對照品、姜黃素對照品、鹽酸小檗堿適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含沒食子酸0.lmg、姜黃素50 ii g、鹽酸小檗堿0.3mg的溶液，即得； c.供試品溶液的制備:將四味姜黃湯散研細后，取粉末lg，精密稱定置具塞的錐形瓶中，加入體積百分比70:30:1甲醇-水-鹽酸溶液25ml，稱定重量，密塞，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用體積百分比70:30:1甲醇-水-鹽酸溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得； d.測定法:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10iil，注入液相色譜儀，測定，即得； 所述的四味姜黃湯散由如下重量配比的原料藥制成:姜黃15份、小檗皮12.5份、余甘子25份、蒺藜25份。
【文檔編號】G01N30/02GK103592393SQ201310608122
【公開日】2014年2月19日 申請日期:2013年11月25日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月25日
【發(fā)明者】王彥厚, 賈雷, 王嘉南, 孫緒丁 申請人:淄博市食品藥品檢驗所