一種蘇木素染色液及其含蘇木素染色液的he染色液的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種蘇木素染色液，包括如下組分：蘇木素、鋁鹽、氧化劑、苯扎氯銨、醇、弱酸、水。本發(fā)明還提供了所述蘇木素染色液的制備方法、含蘇木素染色液的HE染色液及其染色方法。本發(fā)明的蘇木素染色液對(duì)切片進(jìn)行染色時(shí)，背景清晰、層次分明、染色效果好、易于讀片，且不易褪色，便于長期存放。
【專利說明】一種蘇木素染色液及其含蘇木素染色液的HE染色液
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種體外診斷試劑，具體涉及一種蘇木素染色液及其制備方法，以及含蘇木素染色液的HE染色液以及其染色方法。
【背景技術(shù)】
[0002]蘇木素伊紅染色方法，簡(jiǎn)稱HE染色法，是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)中使用最為廣泛的技術(shù)方法。HE染色是將組織切片或細(xì)胞涂片等分別浸入蘇木素染色液和伊紅染色液中，經(jīng)過適當(dāng)?shù)臅r(shí)間和處理，使組織、細(xì)胞及其他成分染上不同深淺的顏色，產(chǎn)生不同的折射率，從而便于光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察和研究。
[0003]蘇木素是一種堿性染料，由洋蘇木中提取，被氧化后生成蘇木因，同媒染劑共同使用，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色。蘇木素的分子式為C16H14O6，結(jié)構(gòu)
式如下:
[0004]
【權(quán)利要求】
1.一種蘇木素染色液，其特征在于，每100ml所述蘇木素染色液中包括如下組分: 蘇木素0.3-lg ;鋁鹽0.5-10g ;氧化劑0.025-2.26 ;苯扎氯銨0.05-lg ;醇5_60ml ;弱酸0.03-6.3g ;余量為水。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘇木素染色液，其特征在于， 所述氧化劑與所述蘇木素的質(zhì)量比小于或等于2.3 ； 所述醇占所述蘇木素染色液的20%-60% (V/V)時(shí)，所述鋁鹽的重量應(yīng)小于或等于IOX(1.2-v) g ;所述V為所述醇占所述蘇木素染色液的體積百分比。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的蘇木素染色液，其特征在于， 所述氧化劑為紅色氧化汞、碘酸鈉、高錳酸鉀、高碘酸鉀、次氯酸鈉、次氯酸鈣、過氧化氫中的一種或多種的混合物； 所述弱酸為檸檬酸、水楊酸、冰乙酸中的一種或多種的混合物； 所述醇為乙醇、甲醇、乙二醇、異丙醇、丙二醇、丙三醇中的一種或多種混合物； 所述鋁鹽為硫酸鋁鉀、硫酸鋁銨、硫酸鋁、硝酸鋁、氯化鋁中的一種或多種的混合物； 所述水為去離子水或蒸餾水中的一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的蘇木素染色液，其特征在于， 每100ml所述蘇木素染色液中包括如下組分: 蘇木素Ig ;硫酸招3.6g` ;碘酸鈉0.1g ;苯扎氯銨0.1g ;乙醇IOml ;冰乙酸2.1g ;余量為水。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述的蘇木素染色液的制備方法，其特征在于，包括以下步驟， a.按選定的比例取醇、蘇木素，將所述蘇木素加入醇中，加熱溶解，得到蘇木素醇溶液，備用; b.按選定的比例取水、鋁鹽，使所述鋁鹽完全溶解于水中，加入步驟a中得到的所述蘇木素醇溶液，得到混合液； c.按選定的比例取氧化劑、苯扎氯銨、弱酸，將所述氧化劑攪拌加入步驟b中得到的所述混合液中，加熱溶液變深紫色后，冷卻，加入所述苯扎氯銨、弱酸，混合均勻，過濾，即得蘇木素染色液。
6.一種HE染色液，包含權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的蘇木素染色液。
7.權(quán)利要求6所述的HE染色液，其特征在于，還包括伊紅染色液。
8.權(quán)利要求7所述的HE染色液，其特征在于，所述伊紅染色液，按重量比計(jì)算，至少包括以下組分: 伊紅0.1_2%，余量為水、乙醇中的一種或兩者的混合溶液。
9.根據(jù)權(quán)利要求6-8任意一項(xiàng)所述的HE染色液的染色方法，其特征在于，包括以下步驟: 1)切片預(yù)處理:取待染色石蠟切片按常規(guī)方式脫蠟、水化； 2)蘇木素伊紅染色:將步驟I)中得到的經(jīng)預(yù)處理后切片置于所述蘇木素染色液中染色3-10min ;取出后水洗，分化，水洗，返藍(lán)后，再水洗；取所述伊紅染色液對(duì)切片染色； 3)切片脫水、透明、封片:將步驟2)得到的染色后的切片采用常規(guī)方式脫水，透明處理，封片，即可。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的HE染色液的染色方法，其特征在于，所述步驟I)為:取石蠟切片置于二甲苯中脫蠟2-3次，每次5-10min ;將上述石蠟切片依次置于無水乙醇中2_3次、每次3-5min，體積分?jǐn)?shù)為90%_95%的乙醇中1_2次、每次l_3min，體積分?jǐn)?shù)為60%_80%的乙醇中l(wèi)-3min,再水洗l_5min。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的HE染色液的染色方法，其特征在于，所述步驟I)為:取石蠟切片置于二甲苯中脫蠟3次，每次5min ;將上述石蠟切片依次置于無水乙醇中2次、每次3min,體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇中2次、每次3min，體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇中3min，再用蒸餾水水洗5min。
12.根據(jù)權(quán)利要求9-11任一所述的HE染色液的染色方法，其特征在于，所述步驟2)為:將步驟I)中得到的經(jīng)預(yù)處理后切片置于所述蘇木素染色液中染色3-10min ;取出后水洗l-20min,用0.1%_1%鹽酸乙醇分化l_60s后,水洗l_5min,用0.2%氨水或飽和碳酸鋰水溶液返藍(lán)30s-60s后，水洗l_5min ;取所述伊紅染色液對(duì)切片染色。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的HE染色液的染色方法，其特征在于，所述步驟2)為:將步驟I)中得到的經(jīng)預(yù)處理后切片置于所述蘇木素染色液中染色5min ;取出后水洗5min，用0.25%鹽酸乙醇分化30s后，水洗5min，用1.36%的碳酸鋰水溶液中返藍(lán)30s后，水洗5min ；取所述伊紅染色液對(duì)切片染色。
14.根據(jù)權(quán)利要求9-13任一所述的HE染色液的染色方法，其特征在于，所述步驟3)為:將步驟2)得到的染色后的切片分別用體積分?jǐn)?shù)為60-80%的乙醇脫水10-30S，體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇脫水2-3次、每次l_5min，無水乙醇脫水2_3次，每次l_5min ;再置于二甲苯中透明2-3次，每次2-5min ;封片，即可。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的HE染色液的染色方法，其特征在于，所述步驟3)為:將步驟2)得到的染色后的切片分別用體積分?jǐn)?shù)為80%的乙醇脫水30s，體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇脫水2次、每次3min，無水乙醇脫水2次，每次3min ;再置于二甲苯中透明2次，每次5min ；封片，即可。``
【文檔編號(hào)】G01N1/30GK103694732SQ201310750204
【公開日】2014年4月2日 申請(qǐng)日期:2013年12月31日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月31日
【發(fā)明者】鄒霈, 吳軍, 吳昊, 謝敏浩, 王洪勇, 劉婭靈 申請(qǐng)人:江蘇省原子醫(yī)學(xué)研究所