茶葉中13種農(nóng)藥殘留的自然基體標準樣品及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種茶葉中含13種農(nóng)藥殘留的自然基體標準樣品及其制備方法。將肟菌酯、啶酰菌胺、嘧霉胺、甲霜靈、聯(lián)苯菊酯、硫丹、三唑酮、烯唑醇、氟環(huán)唑、噠螨靈、莠滅凈、敵草胺、乙草胺噴施于供試茶樹或供試區(qū)土壤中，采集茶葉制成自然基體標準樣品。該茶葉自然基體標準樣品制備方法科學(xué)合理，可操作性強，制備得到的樣品均勻性好、穩(wěn)定性好、易于保存、使用方便；取樣量及提取、凈化方法與日常分析樣品相同，不同時間、不同環(huán)境溫度與不同檢測人員所得到的檢測數(shù)據(jù)可靠準確，宜于在檢測工作中作為質(zhì)量控制手段使用，具有很高的應(yīng)用與推廣價值。
【專利說明】茶葉中13種農(nóng)藥殘留的自然基體標準樣品及其制備
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種茶葉中13種農(nóng)藥殘留自然污染標準樣本的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]茶葉是我國的優(yōu)勢產(chǎn)業(yè)，茶葉中農(nóng)藥殘留問題一直是人們關(guān)心的重點問題。近年來，有關(guān)茶葉中農(nóng)藥殘留的檢測方法不斷被開發(fā)，對保障茶葉安全、促進茶葉貿(mào)易起了關(guān)鍵作用。
[0003]在農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)研究中，精準的殘留檢測方法離不開對檢測結(jié)果的質(zhì)量控制，由于以空白基體添加的方式進行質(zhì)控不能真實地重現(xiàn)藥物經(jīng)過自然代謝后在生物體內(nèi)的提取效率，無法準確反映方法的準確性，得到的檢測結(jié)果就不足以令人信服。因此，為保證檢測結(jié)果的準確性，在農(nóng)藥殘留分析中使用基于實際污染制備的基體標準物質(zhì)非常重要。歐盟對農(nóng)藥殘留分析方法與結(jié)果表達的指南SANCO 12571-2013中指出了采用實物標準進行過程控制的重要性；IS017025在“5.4檢測和校準方法及方法確認”中提到“如可行，實驗室應(yīng)使用有證標準物質(zhì)評估方法偏差。使用的有證標準物質(zhì)應(yīng)盡可能與樣品基體一致”。不僅如此，基體標準物質(zhì)還可用于證明檢測工作與所要求的標準操作程序相符或參加能力驗證中、校準儀器、解決分析中遇到的問題以及保證結(jié)果的準確。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種茶葉中含13種農(nóng)藥殘留的自然基體標準樣品及其制備方法，制備方法科學(xué)合理，可操作性強，制備得到的樣品可作為實物標樣在日常檢測工作中用于建立分析方法，確定實驗準確度、精密度，應(yīng)用廣泛，樣品質(zhì)量好。
[0005]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:
一種茶葉中含13種農(nóng)藥殘留的自然基體標準樣品的制備方法，包括以下步驟:
1)供試農(nóng)藥的選擇:根據(jù)農(nóng)藥的穩(wěn)定性、代表性、實用性，篩選獲得13種農(nóng)藥；
2)對供試茶樹施藥:取肟菌酯、50wt%啶酰菌胺、40wt%嘧霉胺混合、噴施于供試茶樹上，然后取35wt%甲霜靈、聯(lián)苯菊酯、35的％硫丹混合、噴施于供試茶樹上，再取25wt%三唑酮、5wt%烯唑醇、氟環(huán)唑混合、噴施于土壤中，將噠螨靈噴施于土壤中，最后取莠滅凈、敵草胺、乙草胺混合、噴施于土壤中；肟菌酯的用量為15克/畝、50wt%啶酰菌胺的用量為30克/畝、40wt%嘧霉胺的用量為60mL/畝、35wt%甲霜靈的用量為40克/畝、聯(lián)苯菊酯的用量為40mL/畝、35wt%硫丹的用量為40克/畝、25wt%三唑酮的用量為20克/畝、5wt%烯唑醇的用量為40mL/畝、氟環(huán)唑的用量為30mL/畝，莠滅凈的用量為130克/畝。具體方法為:
①供試茶樹共2.2畝:其中0.2畝為空白試驗區(qū)、與供試區(qū)間隔15米，2畝為供試區(qū)、均分為10個區(qū)域，供試茶樹在試驗前25天內(nèi)不施肥、施藥；
②對供試區(qū)的茶樹施藥，施藥方法為:取肟菌酯30g、50wt%啶酰菌胺60g、40wt%嘧霉胺120ml混合、噴施于供試區(qū)茶樹上，然后取35wt%甲霜靈80g、聯(lián)苯菊酯801111、35被％硫丹80g混合、噴施于供試區(qū)茶樹上，再取25wt%三唑酮40g、5wt%烯唑醇80ml、氟環(huán)唑60ml混合、噴施于供試區(qū)土壤中，隨后取噠螨靈15g噴施于供試區(qū)土壤中，最后取莠滅凈260g、敵草胺200g、乙草胺200g混合、噴施于供試區(qū)土壤中；施藥后，農(nóng)藥在茶葉中自然代謝，其中硫丹的殘留標識物為α-硫丹、β-硫丹和硫丹硫酸酯，其余12種農(nóng)藥殘留標識物均為藥物本身；空白試驗區(qū)的茶樹未施藥；
3)樣品采集:空白樣品于施藥前I天采集；自然污染樣品于分別于施藥第1、2、3、5、7、10、15、20、25、30天后采集，每次采集選擇一個區(qū)域、每個區(qū)域不重復(fù)采樣；
4)空白樣品與自然污染樣品的制備:分別取施藥前于空白試驗區(qū)采集的茶葉鮮葉，以及于供試區(qū)施藥第1、2、3、5、7、10、15、20、25、30天后采集的茶葉鮮葉，經(jīng)230-250 °C殺青3分鐘后揉捻I小時，110 °C干燥4小時后制得成品；
5)采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜和氣相色譜-質(zhì)譜法對樣品進行檢測；經(jīng)檢測，施藥第15天后，農(nóng)藥在茶葉中的降解趨于穩(wěn)定；因此采集施藥第15天后的茶葉鮮葉制成成品；
6)將于施藥第15天后采集的茶葉鮮葉制得的成品研磨成粉狀，充分混勻后過100目分樣篩，真空獨立包裝，每個獨立包裝5 g，置于室溫保存。
[0006]根據(jù)如上所述的制備方法制得的茶葉中含13種農(nóng)藥殘留的自然基體標準樣品，樣品中卩密霉胺的濃度為9.22 mg/kg、乙草胺為1.45 mg/kg、莠滅凈為1.48 mg/kg、甲霜靈為36.5 mg/kg、三唑酮為10.1 mg/kg、敵草胺為2.45 mg/kg、烯唑醇為4.45 mg/kg、肟菌酯為6.43 mg/kg、聯(lián)苯菊酯為3.87 mg/kg、氟環(huán)唑為13.2 mg/kg、唳酰菌胺為31.1 mg/kg、咕螨靈為 1.12 mg/kg。
[0007]所述的自然基體標準樣品中硫丹的殘留標識物為α -硫丹、β -硫丹和硫丹硫酸酯之和，其濃度為2.075 mg/kg，其中α -硫丹為0.764 mg/kg、β -硫丹為1.26 mg/kg、硫丹硫酸酯為0.051 mg/kg。
[0008]本發(fā)明的有益效果在于:
本發(fā)明公開的茶葉中含13種農(nóng)藥殘留的自然基體標準樣品，已作為質(zhì)量控制標準樣品用于茶葉中農(nóng)藥殘留檢測時的過程質(zhì)量控制與方法驗證。結(jié)果證明該樣品均勻性好、穩(wěn)定性好、易于保存、使用方便；取樣量及提取、凈化方法與日常分析樣品相同，不同時間、不同環(huán)境溫度與不同檢測人員所得到的檢測數(shù)據(jù)可靠準確，宜于在檢測工作中作為質(zhì)量控制手段使用，具有很高的應(yīng)用與推廣價值。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0009]圖1為茶葉中13種農(nóng)藥殘留降解曲線圖，其中A為嘧霉胺、B為莠滅凈、C為甲霜靈、D為氯環(huán)唑、E為啶酰菌胺、F為敵草胺、G為三唑酮、H為乙草胺、I為烯唑醇、K為肟菌酯、L為聯(lián)苯菊酯、M為咕螨靈、N為硫丹(以α-硫丹、β -硫丹和硫丹硫酸酯之和計)。
【具體實施方式】
[0010]本發(fā)明用下列實施例來進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明的保護范圍并不限于下列實施例。
[0011]實施例1
供試化合物的選擇在尋找可以作為基體標準物質(zhì)特性量的化合物時，考慮的主要因素包括:
(1)穩(wěn)定性:相當一部分農(nóng)藥在自然條件下易分解，難以準確賦值和貯存，不適合作為基體標準物質(zhì)特性量；
(2)代表性:農(nóng)藥按功能分包括了殺蟲劑、除草劑、殺菌劑、殺螨劑等，分屬于有機氮、有機鹵素、有機磷、擬除蟲菊酯類，選擇特性量時盡可能涵蓋不同功能的農(nóng)藥品種。此外，化合物的極性也是一個考慮因素。
[0012](3)實用性:重點考慮茶葉生長過程中較常使用的農(nóng)藥、茶葉貿(mào)易中經(jīng)常被要求檢測的農(nóng)藥，并且已在我國登記注冊，在本地市場可購得商品農(nóng)藥的化合物。
[0013]綜上，獲得表1中所列出的13種農(nóng)藥。
[0014]表1篩查獲得的13種農(nóng)藥
【權(quán)利要求】
1.一種茶葉中含13種農(nóng)藥殘留的茶葉自然基體標準樣品的制備方法，其特征在于:包括以下步驟: O對供試茶樹施藥:取肟菌酯、50wt%啶酰菌胺、40wt%嘧霉胺混合、噴施于供試茶樹上，然后取35wt%甲霜靈、聯(lián)苯菊酯、35被％硫丹混合、噴施于供試茶樹上，再取25wt%三唑酮、5wt%烯唑醇、氟環(huán)唑混合、噴施于供試區(qū)土壤中，將噠螨靈噴施于供試區(qū)土壤中，最后取莠滅凈、敵草胺、乙草胺混合、噴施于供試區(qū)土壤中； 2)樣品采集與制備:采集施藥第15天后的茶葉鮮葉，經(jīng)230-250 °C殺青3分鐘后揉捻I小時，110 °C干燥4小時后制得成品；將所制成的茶葉成品研磨成粉狀，充分混勻后過100目分樣篩，真空獨立包裝、裝袋，每袋為5g，滅菌，置于室溫保存。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的茶葉中含13種農(nóng)藥殘留的茶葉自然基體標準樣品的制備方法，其特征在于:步驟I)中肟菌酯的用量為15克/畝、50wt%啶酰菌胺的用量為30克/畝、40wt%嘧霉胺的用量為60mL/畝、35wt%甲霜靈的用量為40克/畝、聯(lián)苯菊酯的用量為40mL/畝、35wt%硫丹的用量為40克/畝、25wt%三唑酮的用量為20克/畝、5wt%烯唑醇的用量為40mL/畝、氟環(huán)唑的用量為30mL/畝，莠滅凈的用量為130克/畝。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法制得的茶葉中含13種農(nóng)藥殘留的自然基體標準樣品，其特征在于:所述的自然基體標準樣品中卩密霉胺的濃度為9.22 mg/kg、乙早胺為1.45mg/kg、莠滅凈為1.48 mg/kg、甲霜靈為36.5 mg/kg、三唑酮為10.1 mg/kg、敵草胺為2.45mg/kg、烯唑醇為4.45 mg/kg、廂菌酯為6.43 mg/kg、聯(lián)苯菊酯為3.87 mg/kg、氟環(huán)唑為13.2mg/kg、唳酰菌胺為31.1 mg/kg、咕螨靈為1.12 mg/kg。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法制得的茶葉中含13種農(nóng)藥殘留的自然基體標準樣品，其特征在于:所述的自然基體標準樣品中硫丹的殘留標識物為α-硫丹、β-硫丹和硫丹硫酸酯之和，其濃度為2.075 mg/kg，其中α -硫丹為0.764 mg/kg、β -硫丹為1.26 mg/kg、硫丹硫酸酯為0.051 mg/kg。
【文檔編號】G01N1/28GK103808545SQ201410060555
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2014年2月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月24日
【發(fā)明者】楊方 申請人:福建出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心