同時(shí)測(cè)定茶鮮葉中有機(jī)磷類及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的分析方法
【專利摘要】一種同時(shí)測(cè)定茶鮮葉中有機(jī)磷類及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的分析方法，其特征在于：茶鮮葉試樣用含體積分?jǐn)?shù)為1%乙酸的乙腈溶液超聲提取，再用適量PSA、C18和GCB混合填料凈化，上清液氮吹濃縮至近干，分別用丙酮和正己烷溶解定容，DB-1701和HP-5石英毛細(xì)管柱程序升溫分離，GC/FPD和GC/μECD檢測(cè)，最后用基質(zhì)外標(biāo)法定量。通過試驗(yàn)確證，該方法線性范圍寬，檢測(cè)靈敏度、準(zhǔn)確度及精密度等技術(shù)指標(biāo)均滿足殘留分析的要求，并且前處理操作簡(jiǎn)單、方便快速，為同時(shí)測(cè)定茶鮮葉中有機(jī)磷及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的分析研究提供了可靠的手段。
【專利說明】同時(shí)測(cè)定茶鮮葉中有機(jī)磷類及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的分析方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及農(nóng)藥殘留量的分析方法領(lǐng)域，具體涉及一種同時(shí)測(cè)定茶鮮葉中有機(jī)磷類及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的分析方法，該分析方法是采用改進(jìn)的QuEChERS法對(duì)茶鮮葉進(jìn)行提取、凈化，再用氣相色譜法對(duì)有機(jī)磷和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥進(jìn)行檢測(cè)，以達(dá)到快速、簡(jiǎn)便、可靠的目的。
【背景技術(shù)】
[0002]茶葉是世界三大植物飲料之一，因其獨(dú)特的口感和具有抗癌、防突變、清除自由基、延緩衰老等保健功效越來越受到人們的青睞。我國(guó)是茶葉生產(chǎn)大國(guó)也是出口大國(guó)，施用農(nóng)藥是保證茶葉產(chǎn)量，控制其生長(zhǎng)過程中免受病蟲害威脅的最有效的手段，有機(jī)磷類農(nóng)藥(英文名稱:Organophosphorus pesticides)和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥(英文名稱:Pyrethroidpesticides)因廣譜、高效、成本低、用量少被廣泛應(yīng)用于茶葉病蟲害的防治工作。但是已有研究證實(shí)這兩類農(nóng)藥會(huì)對(duì)人體的神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生毒害作用，部分品種具有致癌、致畸、致突變作用以及一定的蓄積性，過量使用有可能在人體內(nèi)累積，造成慢性蓄積中毒。因此，關(guān)于有機(jī)磷和擬除蟲菊酯兩類農(nóng)藥在茶葉中的殘留一直是人們關(guān)注的焦點(diǎn)問題。
[0003]國(guó)際上許多國(guó)家、特別是歐盟和日本制定了苛刻的農(nóng)藥殘留限量法規(guī)，以限制茶葉中農(nóng)藥的最大殘留限量(MRL)。我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB2763-2012《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》規(guī)定了茶葉中25種農(nóng)藥的MRL，《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告第199號(hào)》規(guī)定了 21種農(nóng)藥禁止或限制在茶葉中使用。歐盟在2008年3月I日發(fā)布了新的農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)法規(guī)(EC)Nol49/2008，更新了茶葉中農(nóng)藥殘留的MRL，新法規(guī)涉及茶葉農(nóng)藥殘留現(xiàn)行限量標(biāo)準(zhǔn)221項(xiàng)，臨時(shí)性限量標(biāo)準(zhǔn)171項(xiàng)，共392項(xiàng)，且90%以上的農(nóng)藥采用方法檢出限作為MRL。日本于2006年5月29日正式實(shí)施食品中農(nóng)業(yè)化學(xué)品“肯定列表制度”，該制度中與茶葉有關(guān)的農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)達(dá)251項(xiàng)，且大多數(shù)農(nóng)藥的MRL要求不大于0.lmg/kg，對(duì)未設(shè)定限量標(biāo)準(zhǔn)的農(nóng)藥全部則執(zhí)行“一律標(biāo)準(zhǔn)”，即含量不得超過0.01mg/kg，且全部采用“干茶法”進(jìn)行檢測(cè)。這在很大程度上限制了我國(guó)茶葉的出口，同時(shí)對(duì)茶葉中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)也提出了更高的要求。
[0004]近年來，有關(guān)茶葉中農(nóng)藥殘留的分析方法已有不少研究報(bào)道，但主要集中在成茶上，對(duì)茶鮮葉中的殘留研究的不多。茶鮮葉作為茶葉加工的原料，是決定茶葉品質(zhì)的物質(zhì)基礎(chǔ)，它的質(zhì)量好壞直接關(guān)系到茶葉品質(zhì)的優(yōu)劣。因此，直接測(cè)定茶鮮葉中的農(nóng)藥殘留量具有重要的現(xiàn)實(shí)意義，不但可以實(shí)現(xiàn)茶葉農(nóng)藥的源頭控制，有效引導(dǎo)農(nóng)民正確地對(duì)茶園用藥，提高飲茶安全性，而且可以減少農(nóng)藥不合理地使用對(duì)茶園土壤環(huán)境造成污染。
[0005]由于茶鮮葉比成茶含有更多的水分、色素、水溶性灰分、茶多酚等干擾物質(zhì)，更容易造成提取凈化困難，因此現(xiàn)有的測(cè)定茶葉中有機(jī)磷類及菊酯類農(nóng)藥的檢測(cè)方法，不適用于茶鮮葉基質(zhì)的測(cè)定。國(guó)內(nèi)雖有一些關(guān)于茶鮮葉農(nóng)殘的研究工作報(bào)道，但僅涉及六六六、滴滴涕等有機(jī)氯農(nóng)藥以及少數(shù)幾種菊酯類農(nóng)藥的檢測(cè)，對(duì)有機(jī)磷等其它類型農(nóng)藥的檢測(cè)方法研究較少。同時(shí)分析茶鮮葉中多種有機(jī)磷類及菊酯類農(nóng)藥的殘留分析方法更是鮮有報(bào)道。而且在茶鮮葉農(nóng)藥殘留提取過程中，現(xiàn)有的報(bào)道主要運(yùn)用傳統(tǒng)的振蕩提取、均質(zhì)提取、液液萃取等方法，凈化手段針對(duì)不同的目標(biāo)農(nóng)藥多采用濃硫酸磺化法和柱層析凈化法。這些前處理方法消耗有機(jī)溶劑多、樣品通量小、應(yīng)用范圍有限、操作繁瑣、耗費(fèi)時(shí)間、成本高，對(duì)于多類多殘留不是簡(jiǎn)單或有效的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明提供一種同時(shí)測(cè)定茶鮮葉中有機(jī)磷類及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的分析方法，其目的在于解決現(xiàn)有的測(cè)定茶葉中有機(jī)磷類及菊酯類農(nóng)藥的檢測(cè)方法耗時(shí)長(zhǎng)、操作繁瑣、消耗有機(jī)溶劑多以及檢測(cè)結(jié)果不夠穩(wěn)定可靠的問題。
[0007]為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:一種同時(shí)測(cè)定茶鮮葉中有機(jī)磷類及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的分析方法，所述分析方法有兩部分組成:
[0008]第一部分，用氣相色譜法分別建立已知梯度濃度的被測(cè)的有機(jī)磷農(nóng)藥和擬除蟲菊酯農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線；所述標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立由以下步驟組成:
[0009]第一步，制備空白基質(zhì)提取液，制備方法由以下步驟組成:
[0010](I)稱取5.0g經(jīng)測(cè)定不含被測(cè)的有機(jī)磷農(nóng)藥和擬除蟲菊酯農(nóng)藥的空白茶鮮葉樣品，置于50mL離心管中，再向離心管中加入IOmL含體積分?jǐn)?shù)為I %乙酸的乙腈溶液，混勻，超聲提取10?15min,再加入2g無水乙酸鈉和Ig無水硫酸鎂,潤(rùn)旋1.5min?2.5min,然后，以9000r/min的轉(zhuǎn)速離心3.5min?4.5min，取上清液即為待凈化的空白基質(zhì)提取液；
[0011](2)另取一支IOmL離心管,加入0.15g C18、0.15g N-丙基乙二胺、0.12g石墨化碳黑和0.3g無水硫酸鎂,加入4mL所述待凈化的空白基質(zhì)提取液,潤(rùn)旋1.5min?2.5min,以9000r/min的轉(zhuǎn)速離心4.5min?5.5min ;離心后移取2份上清液至2支刻度試管中，每份上清液為1.5mL,再在50?60°C水浴下將每份上清液用氮?dú)饩徛抵?0?70 μ L ;再在其中一份上清液中加入丙酮以定容至0.75mL，過有機(jī)系濾膜后，得到用于配制有機(jī)磷農(nóng)藥的空白基質(zhì)提取液，另一份上清液中加入正己烷以定容至0.75mL，過有機(jī)系濾膜后，得到擬除蟲菊酯農(nóng)藥的空白基質(zhì)提取液；
[0012]第二步，以所述第一步中得到的空白基質(zhì)提取液為溶劑分別配制有機(jī)磷農(nóng)藥的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和擬除蟲菊酯農(nóng)藥的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，其中，所述有機(jī)磷農(nóng)藥是指敵敵畏、樂果、毒死蜱、甲基對(duì)硫磷、馬拉硫磷、殺螟硫磷、三唑磷，所述擬除蟲菊酯農(nóng)藥是指甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯；所述有機(jī)磷農(nóng)藥的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中各有機(jī)磷農(nóng)藥的濃度范圍以及所述擬除蟲菊酯農(nóng)藥的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中各擬除蟲菊酯農(nóng)藥的濃度范圍為:
【權(quán)利要求】
1.一種同時(shí)測(cè)定茶鮮葉中有機(jī)磷類及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的分析方法，其特征在于:所述分析方法有兩部分組成: 第一部分，用氣相色譜法分別建立已知梯度濃度的被測(cè)的有機(jī)磷農(nóng)藥和擬除蟲菊酯農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線；所述標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立由以下步驟組成: 第一步，制備空白基質(zhì)提取液，制備方法由以下步驟組成: (1)稱取5.0 g經(jīng)測(cè)定不含被測(cè)的有機(jī)磷農(nóng)藥和擬除蟲菊酯農(nóng)藥的空白茶鮮葉樣品，置于50 mL離心管中，再向離心管中加入10 mL含體積分?jǐn)?shù)為1%乙酸的乙腈溶液，混勻，超聲提取10~15 min,再加入2 g無水乙酸鈉和I g無水硫酸鎂，潤(rùn)旋1.5min~2.5min,然后，以9000 r/min的轉(zhuǎn)速離心3.5mirT4.5min，取上清液即為待凈化的空白基質(zhì)提取液； (2)另取一支10mL離心管,加入0.15g C18、0.15g N-丙基乙二胺、0.12 g石墨化碳黑和0.3g無水硫酸鎂，加入4mL所述待凈化的空白基質(zhì)提取液，渦旋1.5mirT2.5min,以9000r/min的轉(zhuǎn)速離心4.5mirT5.5min ;離心后移取2份上清液至2支刻度試管中，每份上清液為1.5 mL，再在50~60°C水浴下將每份上清液用氮?dú)饩徛抵?0-70 μ L ;再在其中一份上清液中加入丙酮以定容至0.75 mL，過有機(jī)系濾膜后，得到用于配制有機(jī)磷農(nóng)藥的空白基質(zhì)提取液，另一份上清液中加入正己烷以定容至0.75 mL，過有機(jī)系濾膜后，得到擬除蟲菊酷農(nóng)藥的空白基質(zhì)提取液； 第二步，以所述第一步中得到的空白基質(zhì)提取液為溶劑分別配制有機(jī)磷農(nóng)藥的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和擬除蟲菊酯農(nóng)藥的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，其中，所述有機(jī)磷農(nóng)藥是指敵敵畏、樂果、毒死蜱、甲基對(duì)硫磷、馬拉硫磷、殺螟硫磷、三唑磷，所述擬除蟲菊酯農(nóng)藥是指甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯；所述有機(jī)磷農(nóng)藥的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中各有機(jī)磷農(nóng)藥的濃度范圍以及所述擬除蟲菊酯農(nóng)藥的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中各擬除蟲菊酯農(nóng)藥的濃度范圍為:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時(shí)測(cè)定茶鮮葉中有機(jī)磷類及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的分析方法，其特征在于:所述第一部分的第一步和所述第二部分的第一步中超聲提取的條件為超聲功率在80W~100W之間 ，超聲溫度在20~30°C。
【文檔編號(hào)】G01N30/06GK103926348SQ201410168677
【公開日】2014年7月16日 申請(qǐng)日期:2014年4月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月24日
【發(fā)明者】劉騰飛, 董明輝, 楊代鳳, 謝修慶, 蔣寶南, 鄧金花, 張麗, 顧俊榮, 陸?zhàn)┸? 李軍, 錢輝 申請(qǐng)人:江蘇太湖地區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所