清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量快速測定的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量快速測定的方法。具體操作步驟為：（一）采集校正集并采集原始光譜數(shù)據(jù)；（二）清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量的測定；（三）校正模型的建立與檢驗(yàn)；（四）在線測定清開靈注射液生產(chǎn)過程的中間體新樣品。本發(fā)明測定時(shí)間大為縮短，通常每個(gè)樣品在1min之內(nèi)完成，其檢測精度也逼近于標(biāo)準(zhǔn)方法；本發(fā)明有望可以解決清開靈注射液生產(chǎn)過程混配階段傳統(tǒng)離線測定耗時(shí)長、效率低、檢測滯后等問題，同時(shí)為清開靈注射液等品種的質(zhì)量提升提供有力的技術(shù)保障。
【專利說明】清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量快速測定的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于中藥液體制劑的質(zhì)量檢測【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一種用于清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量快速測定的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]中藥注射液按照《中華人民共和國藥典》(2010年版)的定義是“系指藥材經(jīng)提取、純化后制成的供注入體內(nèi)的溶液、乳狀液及供臨用前配制成溶液的粉末或濃溶液的無菌制劑?！鼻彘_靈注射液主要是有桅子、板藍(lán)根、金銀花、黃芩苷、膽酸、豬去氧膽酸、珍珠母和水牛角等組方藥材經(jīng)現(xiàn)代生產(chǎn)工藝制備而成。清開靈注射液通過血管給藥方式大大提高了中藥對人身的藥物有效供給和生物利用率，并進(jìn)而提高了功效。清開靈注射液目前在清熱解毒、鎮(zhèn)靜安神等方面有明顯優(yōu)勢。
[0003]在清開靈注射液的實(shí)際生產(chǎn)過程中，由于清開靈注射液混配過程受到諸多方面的約束，其檢測多是采用離線操作、事后分析，因此該檢測過程存在很多缺陷。例如生產(chǎn)工藝復(fù)雜，無法及時(shí)反饋待測樣品的含量參數(shù)等質(zhì)量問題，存在著分析結(jié)果滯后，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，操作繁瑣等情況，這些不利于清開靈注射液的在線質(zhì)量快速分析，提高生產(chǎn)效率，不適合中藥現(xiàn)代化生產(chǎn)發(fā)展的需要。因此，迫切需要研究一種快速、高效、準(zhǔn)確、便利的分析檢測方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中無法在線操作，同時(shí)準(zhǔn)確測量清開靈注射液中間體各成分的缺點(diǎn)與不足，提供一種用于清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量快速測定的方法，該方法可以有效地解決清開靈注射液生產(chǎn)過程中的中間體指標(biāo)成分的含量快速測定，提聞生廣效率。
[0005]本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的:
一種用于清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量快速測定的方法，包括如下步驟:
S1:采集校正集并采集原始光譜數(shù)據(jù)
從清開靈注射液中間體的樣品中采集樣品作為校正集，并利用近紅外光譜儀采集校正集的原始光譜數(shù)據(jù)；
其中，所述清開靈注射液中間體的樣品是指清開靈注射液混配階段所得濾液，所述清開靈注射液中間體的樣品包括銀黃混合液和六混液；
所述銀黃混合液的制備方法為將黃芩苷用注射用水溶解，調(diào)pH至7.5，加入金銀花提取液，混勻即為銀黃混合液，所述銀黃混合液成分中包括黃芩苷和綠原酸；
所述六混液的制備方法為將桅子液、板藍(lán)根液和水牛角、珍珠母水解液混合液合并然后加到膽酸、豬去氧膽酸的75%乙醇溶液中，并添加乙醇使乙醇總含量達(dá)75%，調(diào)節(jié)混合液PH值至7.0，冷藏，濾過，濾液回收乙醇，加水，冷藏，即為六混液，所述六混液成分中包括膽酸、豬去氧膽酸、桅子苷；
采集的清開靈注射液中間體的樣品應(yīng)根據(jù)樣品的批次、組方藥材的來源等因素合理挑選校正集，在挑選建立校正模型時(shí)應(yīng)盡可能的增大這些因子的變異范圍，以得到代表性盡可能好的校正集。
[0006]優(yōu)選的,所述校正集的數(shù)量至少為15個(gè)；進(jìn)一步優(yōu)選的,所述校正集的數(shù)量為22個(gè)。
[0007]S2:清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量的測定
將步驟SI中已經(jīng)采集完近紅外光譜的清開靈注射液中間體的樣品進(jìn)行含量測定，具體操作步驟如下:
當(dāng)測定銀黃混合液時(shí)，
采用高效液相色譜儀，按照《中華人民共和國藥典》(2010年版第一增補(bǔ)本)中清開靈注射液項(xiàng)下黃芩苷含量測定方法測定樣品中的黃芩苷含量；
采用高效液相色譜儀，按照《中華人民共和國藥典》(2010年版一部)中金銀花項(xiàng)下綠原酸含量測定方法測定樣品中的綠原酸含量；
當(dāng)測定六混液時(shí)，
采用高效液相色譜儀，按照《中華人民共和國藥典》(2010年版第一增補(bǔ)本)中清開靈注射液項(xiàng)下膽酸測定方法測定樣品中的膽酸含量；
采用高效液相色譜儀，按照《中華人民共和國藥典》(2010年版第一增補(bǔ)本)中清開靈注射液項(xiàng)下豬去氧膽酸測定方法測定樣品中的豬去氧膽酸含量；
采用高效液相色譜儀，按照《中華人民共和國藥典》(2010年版一部)中桅子藥材含量測定方法測定樣品中的桅子苷含量；
采用凱氏定氮儀，按照《中華人民共和國藥典》(2010年版一部)中附錄IX L第二法測定樣品中的含氮量。
[0008]在近紅外光譜的采集過程中，不可避免的由于儀器狀態(tài)、環(huán)境干擾以及測定條件的細(xì)微差異導(dǎo)致光譜的變化，通過對光譜信號進(jìn)行預(yù)處理以消除此類影響，改善模型的性能，本發(fā)明主要采用了多種預(yù)處理方法如無預(yù)處理、卷積平滑、卷積求導(dǎo)、多元散色校正、標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變量變換和歸一化中的一種或幾種對光譜進(jìn)行優(yōu)化，以尋求最佳的光譜預(yù)處理方法。
[0009]在近紅外光譜區(qū)域，不同波段的光譜吸收信息對于最后建立的模型的貢獻(xiàn)價(jià)值不同，在特定的波段范圍處，針對特定組分的吸收強(qiáng)度可能小于雜質(zhì)的吸收或者干擾因素影響，且難以抽取對特征信息進(jìn)行有效提?。徊捎没瘜W(xué)計(jì)量學(xué)方法尤其是偏最小二乘法可以對全譜數(shù)據(jù)信息進(jìn)行處理，但是為了改善模型的性能，提高計(jì)算速度，應(yīng)該在建模過程中對光譜的波段范圍進(jìn)行優(yōu)選，波段范圍選擇的方法一般包括全波段、相關(guān)系數(shù)法和迭代優(yōu)化等方法中的一種或者幾種，一般選取的波段范圍為12000?4000 cnT1中的部分或全部范圍。
[0010]S3:校正模型的建立與檢驗(yàn)
S31:將步驟SI獲得的校正集的原始光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理和波段范圍選擇，得到清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量特征光譜信息；
S32:以偏最小二乘法對得到的清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量特征光譜信息分別和步驟S2所測得的指標(biāo)成分含量的真實(shí)值進(jìn)行關(guān)聯(lián)建立校正模型，并采用參數(shù)檢驗(yàn)校正模型； 其中，黃芩苷的波段選擇方法為迭代優(yōu)化2 (M=I, 2, 3),選擇波段范圍5804.685?6402.509 cnT1，光譜預(yù)處理方法為歸一化，采用偏最小二乘法建立校正模型時(shí)，主因子數(shù)為4 ；
綠原酸的波段選擇方法為迭代優(yōu)化2 (M=I )，選擇波段范圍5793.114?6387.082 cnT1和7586.588?8180.556 cnT1，光譜預(yù)處理方法為卷積平滑，采用偏最小二乘法建立校正模型時(shí)，主因子數(shù)為4;
膽酸的波段選擇方法為迭代優(yōu)化3，選擇波段范圍7563.446?8153.557和8751.382?9341.492CHT1，光譜預(yù)處理方法為二階卷積求導(dǎo)，采用偏最小二乘法建立校正模型時(shí)，主因子數(shù)為2;
豬去氧膽酸和含氮量的波段選擇方法為相關(guān)系數(shù)法，閾值> 0.4，光譜預(yù)處理方法為二階卷積求導(dǎo)，采用偏最小二乘法建立校正模型時(shí)，主因子數(shù)為3 ；
桅子苷的波段選擇方法為迭代優(yōu)化I，選擇波段范圍7609.729?8809.235 cnT1，光譜預(yù)處理方法為無譜圖預(yù)處理，采用偏最小二乘法建立校正模型時(shí)，主因子數(shù)為5 ；
S33:在化學(xué)計(jì)量學(xué)分析系統(tǒng)中導(dǎo)入步驟S32中所得的各校正模型；
為保證所建立模型的準(zhǔn)確性，通常要對所建立的校正模型進(jìn)行預(yù)測，利用近紅外光譜儀采集清開靈注射液生產(chǎn)過程中的中間體新樣品的原始光譜數(shù)據(jù)，將所采集清開靈注射液生產(chǎn)過程中的中間體新樣品的原始光譜數(shù)據(jù)輸入到已導(dǎo)入校正模型的化學(xué)計(jì)量學(xué)分析系統(tǒng)中，經(jīng)軟件系統(tǒng)計(jì)算得到未知清開靈注射液生產(chǎn)過程中的中間體指標(biāo)成分含量，即預(yù)測值；并采用S2中的相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)方法測得清開靈注射液生產(chǎn)過程中的中間體新樣品的實(shí)際含量，即真實(shí)值，將預(yù)測值與真實(shí)值進(jìn)行對比，以檢驗(yàn)所建立的校正模型的預(yù)測能力。
[0011]S4:在線測定清開靈注射液生產(chǎn)過程的中間體新樣品
利用近紅外光譜儀采集清開靈注射液生產(chǎn)過程的中間體新樣品的原始光譜數(shù)據(jù)，將所得原始光譜數(shù)據(jù)輸入到已導(dǎo)入校正模型的化學(xué)計(jì)量學(xué)分析系統(tǒng)中，經(jīng)軟件系統(tǒng)計(jì)算得到新樣品中各成分的含量。
[0012]化學(xué)計(jì)量學(xué)分析系統(tǒng)是一種可進(jìn)行數(shù)據(jù)運(yùn)算處理的軟件，其可以對所獲得的光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行光譜預(yù)處理、回歸校正、預(yù)測分析的功能，在本發(fā)明中，所選用的化學(xué)計(jì)量學(xué)分析系統(tǒng)優(yōu)選的采用OPUS、Unscrambler、Matlab、TQ或廣州白云山明興制藥有限公司質(zhì)量監(jiān)控系統(tǒng)。
[0013]進(jìn)一步優(yōu)選的，所述化學(xué)計(jì)量學(xué)分析系統(tǒng)為TQ或廣州白云山明興制藥有限公司質(zhì)量監(jiān)控系統(tǒng)。
[0014]在本發(fā)明中，利用近紅外光譜儀采集在線測定清開靈注射液生產(chǎn)過程的中間體新樣品的操作條件與采集校正集原始光譜數(shù)據(jù)的操作條件相同；
具體操作條件如下:在室溫(15?30 °C)下，利用Antaris MX傅立葉近紅外過程分析儀(賽默飛世爾科技公司，產(chǎn)地為美國，光源:鹵鎢燈，檢測器:InGaAs檢測器，其中，分辨率為8 cnT1,掃描次數(shù)為32次,掃描光譜范圍為10000?4 000 cnT1,光程為2 mm)進(jìn)行數(shù)據(jù)米集。
[0015]在本發(fā)明中用到的評價(jià)校正模型的參數(shù)，其具體意義是:
(O 決定系數(shù):R2 (The coefficient of determination)
【權(quán)利要求】
1.一種用于清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量快速測定的方法，其特征在于，包括如下步驟: S1:采集校正集并采集其原始光譜數(shù)據(jù) 從清開靈注射液中間體的樣品中采集樣品作為校正集，并利用近紅外光譜儀采集校正集的原始光譜數(shù)據(jù)； 其中，所述清開靈注射液中間體的樣品是指清開靈注射液混配階段所得濾液，所述清開靈注射液中間體的樣品包括銀黃混合液和六混液； 52:清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量的測定 將步驟SI中已經(jīng)采集完近紅外光譜的清開靈注射液中間體的樣品進(jìn)行含量測定，具體操作步驟如下: 當(dāng)測定銀黃混合液時(shí)，按照《中華人民共和國藥典》中的方法測定樣品中的黃芩苷和綠原酸含量； 當(dāng)測定六混液時(shí)，按照《中華人民共和國藥典》中的方法測定樣品中的膽酸、豬去氧膽酸和桅子苷的含量，并測定樣品中的含氮量； 53:校正模型的建立與檢驗(yàn) 531:將步驟SI獲得的校正集的原始光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理和波段范圍選擇，得到清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量的特征光譜信息； 532:以偏最小二乘法對得到的清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量的特征光譜信息分別和步驟S2所測得的指標(biāo)成分含量的真實(shí)值進(jìn)行關(guān)聯(lián)建立校正模型，并采用參數(shù)檢驗(yàn)校正模型； 其中，黃芩苷的波段選擇方法為迭代優(yōu)化2 (M=l，2，3)，選擇波段范圍5804.685~.6402.509 cnT1，光譜預(yù)處理方法為歸一化，采用偏最小二乘法建立校正模型時(shí)，主因子數(shù)為.4 ； 綠原酸的波段選擇方法為迭代優(yōu)化2 (M=I )，選擇波段范圍5793.114~6387.082 cnT1和7586.588~8180.556 cnT1，光譜預(yù)處理方法為卷積平滑，采用偏最小二乘法建立校正模型時(shí)，主因子數(shù)為4; 膽酸的波段選擇方法為迭代優(yōu)化3，選擇波段范圍7563.446~8153.557和.8751.382~9341.492CHT1，光譜預(yù)處理方法為二階卷積求導(dǎo)，采用偏最小二乘法建立校正模型時(shí)，主因子數(shù)為2; 豬去氧膽酸和含氮量的波段選擇方法為相關(guān)系數(shù)法，閾值> 0.4，光譜預(yù)處理方法為二階卷積求導(dǎo)，采用偏最小二乘法建立校正模型時(shí)，主因子數(shù)為3 ； 桅子苷的波段選擇方法為迭代優(yōu)化I，選擇波段范圍7609.729~8809.235 cnT1，光譜預(yù)處理方法為無譜圖預(yù)處理，采用偏最小二乘法建立校正模型時(shí)，主因子數(shù)為5 ； . 533:在化學(xué)計(jì)量學(xué)分析系統(tǒng)中導(dǎo)入步驟S32中建立的各校正模型； . 54:在線測定清開靈注射液生產(chǎn)過程的中間體新樣品 利用近紅外光譜儀采集清開靈注射液生產(chǎn)過程的中間體新樣品的原始光譜數(shù)據(jù)，將所得原始光譜數(shù)據(jù)輸入到已導(dǎo)入校正模型的化學(xué)計(jì)量學(xué)分析系統(tǒng)中，經(jīng)軟件系統(tǒng)計(jì)算得到新樣品中各成分的含量； 其中，采集清開靈注射液生產(chǎn)過程的中間體新樣品的操作條件與采集校正集原始光譜數(shù)據(jù)的操作條件相同。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量快速測定的方法，其特征在于，所述化學(xué)計(jì)量學(xué)分析系統(tǒng)為OPUS、Unscrambler、Matlab、TQ或廣州白云山明興制藥有限公司質(zhì)量監(jiān)控系統(tǒng)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量快速測定的方法，其特征在于，所述化學(xué)計(jì)量學(xué)分析系統(tǒng)為TQ或廣州白云山明興制藥有限公司質(zhì)量監(jiān)控系統(tǒng)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量快速測定的方法，其特征在于，所述校正集的數(shù)量至少為15個(gè)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用于清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量快速測定的方法，其特征在于，所述校正集的數(shù)量為22個(gè)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量快速測定的方法，其特征在于，采集清開靈注射液生產(chǎn)過程的中間體新樣品的具體操作條件如下: 在室溫15~30 °(:下，利用Antaris MX傅立葉近紅外過程分析儀進(jìn)行數(shù)據(jù)采集；具體操作條件為:光源為鹵鶴燈，檢測器為InGaAs檢測器,其中，分辨率為8 cnT1,掃描次數(shù)為32次，掃描光譜范圍為10000~4000 cnT1，光程為2 mm。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量快速測定的方法，其特征在于，步驟S32中所述參數(shù)是指交叉檢驗(yàn)的校正標(biāo)準(zhǔn)偏差、校正標(biāo)準(zhǔn)偏差和決定系數(shù)中的一種或幾種。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用于清開靈注射液中間體指標(biāo)成分含量快速測定的方法，其特征在于，步驟S32中所述參數(shù)是指交叉檢驗(yàn)的校正標(biāo)準(zhǔn)偏差、校正標(biāo)準(zhǔn)偏差和決定系數(shù)。
【文檔編號】G01N21/359GK103940775SQ201410215259
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年5月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月21日
【發(fā)明者】劉順國, 高建勝, 肖雪, 譚仲森, 羅國安, 劉明穎, 陳艷, 陳育娟, 覃炳達(dá), 周小琴 申請人:廣州白云山明興制藥有限公司