一種煙草廢料中多酚類物質(zhì)的提取方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種煙草廢料中多酚類物質(zhì)的提取方法。該方法利用有機(jī)溶劑超聲萃取煙草廢料中的多酚類物質(zhì)，在萃取液中加入非離子表面活性劑和輔助萃取劑渦旋、離心。以綠原酸作為標(biāo)準(zhǔn)品，紫外分光光度法檢測(cè)煙草廢料中提取出來的多酚的含量。與現(xiàn)有多酚物質(zhì)的提取方法相比，該方法萃取條件溫和，所用有機(jī)溶劑量大幅減少，提取劑對(duì)環(huán)境友好、提取成本低等特點(diǎn)。
【專利說明】一種煙草廢料中多酚類物質(zhì)的提取方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于分析化學(xué)前處理與預(yù)富集【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及一種煙草廢料中多酚類物質(zhì)的提取及測(cè)定方法。

【背景技術(shù)】
[0002]我國的煙草產(chǎn)量占世界產(chǎn)量的45%，煙草工業(yè)每年都有大量的煙末、霉變煙草等富含纖維素的物料被棄置，既浪費(fèi)資源又污染環(huán)境。煙草廢棄物通過微生物轉(zhuǎn)化處理是其綜合利用途徑之一，但煙草中所含的綠原酸等多酚類物質(zhì)及煙堿等對(duì)很多微生物有抑制作用，因此有必要將其提取提出來，而且綠原酸等多酚類物質(zhì)本身具有重要的應(yīng)用價(jià)值，浸提殘?jiān)捎梦⑸镛D(zhuǎn)化處理為有機(jī)肥基質(zhì)。綠原酸等多酚類物質(zhì)在植物中普遍存在，傳統(tǒng)工藝大多是從金銀花、杜仲葉中提取，從廢棄煙草中提取多酚類物質(zhì)是必要的。
[0003]目前，煙草中多酚物質(zhì)的提取方法主要有，有機(jī)溶劑浸提法、超聲波提取、微波提取等方法。本發(fā)明采用的濁點(diǎn)萃取方法是利用非離子表面活性劑在水溶液中與輔助萃取劑混溶改變了相互的極性，使其對(duì)多酚類物質(zhì)有著更好的親和力，萃取效果增強(qiáng)；而且它有著在常溫下或較低的溫度就可操作、對(duì)環(huán)境友好、成本低等優(yōu)點(diǎn)，適用于低含量多酚類物質(zhì)的提取。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于針對(duì)現(xiàn)在濁點(diǎn)萃取方法存在的不足，提供了一種新型的提取煙草廢料中多酚類物質(zhì)的方法，對(duì)于多酚物質(zhì)提取具有指導(dǎo)意義。
[0005]本發(fā)明的目的是通過以下方案來實(shí)現(xiàn)的:
[0006]一種煙草廢料中多酚類物質(zhì)的提取方法包括以下步驟:
[0007](I)取一定質(zhì)量的煙草廢料置于一定體積的有機(jī)溶劑中,在一定溫度下超聲提取，過濾，濾液待用；
[0008](2)取上述樣品溶液，加入一定量的去離子水和非離子表面活性劑和輔助萃取劑，渦旋，離心，得到表面活性劑相及水相；多酚類物質(zhì)被提取到表面活性劑相；
[0009](3)用紫外分光光度法測(cè)定表面活性劑相中多酚類物質(zhì)的含量。
[0010]本發(fā)明中所述的取煙草廢料與有機(jī)溶劑的重量體積比為1:5-15，有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、丙酮之一種，其濃度為30% -100%。
[0011]本發(fā)明中所述的非離子表面活性劑包括聚氧乙烯脂肪醇Genapol X-080、脂肪醇聚氧乙烯醚AE0-9之一種，用量為每5mL水溶液加0.1?0.5mL ;助萃劑包括正己醇、正辛醇、異辛醇、正戊醇之一種，用量為每5mL水溶液加0.1?0.5mL。
[0012]本發(fā)明中所述的提取溫度為40-50°C，超聲時(shí)間為10-30min，渦旋時(shí)間為l_3min，離心速度為3000-6000r/min,離心時(shí)間為3_15min。
[0013]本發(fā)明以綠原酸作為標(biāo)準(zhǔn)品，紫外分光光度法檢測(cè)煙草廢料中提取出來的多酚的含量，測(cè)定波長為540nm。
[0014]相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明具有以下顯著優(yōu)點(diǎn):
[0015]1.非離子表面活性劑在水溶液中與輔助萃取劑混溶改變了相互的極性，使其對(duì)多酚類物質(zhì)有著更好的親和力，萃取效果明顯增強(qiáng)。
[0016]2.所采用的非離子表面活性劑濁點(diǎn)低，在常溫或稍加熱條件下就可以進(jìn)行萃取，操作條件溫和。
[0017]3.與現(xiàn)有多酚物質(zhì)的提取方法相比，提取中所用有機(jī)溶劑量大幅減少，提取劑對(duì)環(huán)境友好、提取成本低等特點(diǎn)。

【具體實(shí)施方式】
[0018]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步地說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不限于此。
[0019]多酚物質(zhì)檢測(cè)方法:
[0020](I)工作曲線的制作:分別取濃度為10mg/mL的多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液于1mL的刻度離心管中，用去離子水配制成濃度分別為l、2、4、6、8、10mg/mL的多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，以綠原酸作為標(biāo)準(zhǔn)品用紫外分光光度法檢測(cè)，波長為540nm，得到線性回歸方程y = 0.01435χ-0.008，相關(guān)系數(shù) R2 = 0.9960。
[0021](2)樣品多酚含量測(cè)定:取處理好的樣品溶液，測(cè)定其吸光度，根據(jù)(I)中工作曲線計(jì)算樣品中多酚物質(zhì)含量。
[0022]實(shí)施例1
[0023]利用本發(fā)明提取煙草廢料中的多酚物質(zhì)并測(cè)定其含量，實(shí)施過程包括如下步驟:
[0024](I)樣品的預(yù)處理:
[0025]取廢料煙末1g加入95%乙醇溶液90mL，50°C下放入超聲中提取15min，過濾，將濾液放入樣品瓶中備用。
[0026](2)樣品提取:
[0027]取步驟⑴中樣品溶液2mL于1mL刻度離心管中，加入3mL去離子水，加入
0.5mT,AF,0~9和0.3mL正己醇于離心管中，潤旋2min, 3000r/min離心15min,目標(biāo)物被萃取于離心管上層。
[0028](3)按上述多酚物質(zhì)檢測(cè)方法用紫外分光光度法進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算出多酚類物質(zhì)的量為 2.13mg/mL。
[0029]實(shí)施例2
[0030]利用本發(fā)明提取煙草廢料中的多酚物質(zhì)并測(cè)定其含量，實(shí)施過程包括如下步驟:
[0031](I)樣品預(yù)處理:
[0032]取廢料煙末1g加入75%甲醇150mL溶液，45°C下放入超聲中提取20min，過濾，將濾液放入樣品瓶中備用。
[0033](2)樣品提取:
[0034]取步驟(I)中樣品溶液2mL于1mL刻度離心管中，加入3mL去離子水，取
0.2mLAE0-9和0.2mL正辛醇于離心管中，潤旋3min, 4000r/min離心lOmin,目標(biāo)物被萃取于離心管上層。
[0035](3)按上述多酚物質(zhì)檢測(cè)方法用紫外分光光度法進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算出多酚類物質(zhì)的量為 5.65mg/mL。
[0036]實(shí)施例3
[0037]利用本發(fā)明提取煙草廢料中的多酚物質(zhì)并測(cè)定其含量，實(shí)施過程包括如下步驟:
[0038](I)樣品預(yù)處理:
[0039]取廢料煙末1g加入50mL丙酮，50°C下放入超聲中提取lOmin，過濾，將濾液放入樣品瓶中備用。
[0040](2)樣品測(cè)定:
[0041]取步驟(I)中樣品溶液2mL于1mL刻度離心管中，加入3mL去離子水，力口
0.5mLX-080和0.1mL正戍醇于離心管中，潤旋lmin, 5000r/min離心6min,目標(biāo)物被萃取于離心管上層。
[0042](3)按上述多酚物質(zhì)檢測(cè)方法用紫外分光光度法進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算出多酚類物質(zhì)的量為 3.78mg/mL。
[0043]實(shí)施例4
[0044]利用本發(fā)明提取煙草廢料中的多酚物質(zhì)并測(cè)定其含量，實(shí)施過程包括如下步驟:
[0045](I)樣品預(yù)處理:
[0046]取廢料煙末1g加入30%丙酮水溶液90mL，40°C下放入超聲中提取30min，過濾，將濾液放入樣品瓶中備用。
[0047](2)樣品測(cè)定:
[0048]取步驟(I)中樣品溶液5mL于1mL刻度離心管中，加0.lmLX-080和0.3mL異辛醇于離心管中，渦旋2min，6000r/min離心3min，目標(biāo)物被萃取于離心管上層。
[0049](3)按上述多酚物質(zhì)檢測(cè)方法用紫外分光光度法進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算出多酚類物質(zhì)的量為 3.56mg/mL。
【權(quán)利要求】
1.一種煙草廢料中多酚類物質(zhì)的提取方法，其特征在于包括以下步驟: (1)取一定質(zhì)量的煙草廢料置于一定體積的有機(jī)溶劑中，超聲提取，過濾，濾液待用； (2)取上述樣品溶液，加入一定量的去離子水和非離子表面活性劑和輔助萃取劑，渦旋，離心，得到表面活性劑相及水相；多酚類物質(zhì)被提取到表面活性劑相； (3)用紫外分光光度法測(cè)定表面活性劑相中多酚類物質(zhì)的含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的煙草廢料中多酚類物質(zhì)的提取方法，其特征在于:步驟(I)中所述的煙草廢料與有機(jī)溶劑的重量體積比為1:5-15，有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、丙酮之一種，其濃度為30% -100%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的煙草廢料中多酚類物質(zhì)的提取方法，其特征在于:步驟(I)中所述的提取溫度為40-50°C，超聲時(shí)間為10-30min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的煙草廢料中多酚類物質(zhì)的提取方法，其特征在于:步驟(2)中所述的非離子表面活性劑包括聚氧乙烯脂肪醇Genapol X-080、脂肪醇聚氧乙烯醚AE0-9之一種，用量為每5mL水溶液加0.1?0.5mL。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的煙草廢料中多酚類物質(zhì)的提取方法，其特征在于:步驟(2)中所述輔助萃取劑包括正己醇、正辛醇、異辛醇、正戊醇之一種，用量為每5mL水溶液加0.1 ?0.5mL0
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的煙草廢料中多酚類物質(zhì)的提取方法，其特征在于:步驟(2)中所述潤旋時(shí)間為l-3min,離心速度為3000-6000r/min,離心時(shí)間為3_15min。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的煙草廢料中多酚類物質(zhì)的提取方法，其特征在于:步驟(3)中所述多酚類物質(zhì)的含量，是以綠原酸作為標(biāo)準(zhǔn)品紫外分光光度法檢測(cè)煙草廢料中提取出來的多酚的含量，測(cè)定波長為540nm。
【文檔編號(hào)】G01N1/28GK104048866SQ201410289090
【公開日】2014年9月17日 申請(qǐng)日期:2014年6月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月24日
【發(fā)明者】李小蘭, 孟冬玲, 孟麗芬, 黃善松, 范忠, 吳晶晶, 周曉, 徐雪芹, 黃世杰, 周艷枚 申請(qǐng)人:廣西中煙工業(yè)有限責(zé)任公司