適用于連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿的緩沖體系的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種適用于連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿的緩沖體系，該緩沖體系包含緩沖溶液A和緩沖溶液B；其中，緩沖溶液A的配制為：稱取磷酸氫二鈉60.5-83.0g，優(yōu)選為71.6g、磷酸三鈉10.1-20.2g，優(yōu)選為15.2g至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入1L容量瓶中，用水定容至刻度；緩沖溶液B的配制為：稱取對(duì)氨基苯磺酸5.5-8.0g，優(yōu)選為7.0g、磷酸氫二鈉60.5-83.0g，優(yōu)選為71.6g、磷酸二氫鈉5.0-7.0g，優(yōu)選為6.2g和檸檬酸鈉10.0-12.1g，優(yōu)選為11.8g至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入1L容量瓶中，用水定容至刻度。
【專利說明】適用于連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿的緩沖體系
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于煙草化學(xué)成分檢測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及適用于連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿的緩沖體系。
【背景技術(shù)】
[0002]煙堿是煙草的重要成分，無煙堿也就稱不上煙草。在煙草常規(guī)分析中，通常通過測(cè)定煙草中總植物堿的含量來獲知煙堿的含量信息。煙草行業(yè)目前發(fā)布的關(guān)于煙草中總植物堿測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)有:GB/T23225-2008 “煙草及煙草制品總植物堿的測(cè)定光度法”、YC/T160-2002 “煙草及煙草制品總植物堿的測(cè)定連續(xù)流動(dòng)法”以及YC/T468-2013 “煙草及煙草制品總植物堿的測(cè)定連續(xù)流動(dòng)(硫氰酸鉀)法”。
[0003]連續(xù)流動(dòng)法屬于儀器分析方法，適合大批量進(jìn)樣，目前應(yīng)用較為廣泛。YC/T160-2002 “煙草及煙草制品總植物堿的測(cè)定連續(xù)流動(dòng)法”的測(cè)定原理是采用氰化鉀和氯胺T在線生成氯化氰，使煙堿的吡啶環(huán)斷開，進(jìn)而與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生反應(yīng)，反應(yīng)產(chǎn)物在460nm波長(zhǎng)處用比色計(jì)進(jìn)行測(cè)定。氰化鉀雖然較為穩(wěn)定，但它是一種劇毒的物質(zhì)，位于有毒化學(xué)品前列。對(duì)于氰化鉀的使用，存在諸多顧忌，其銷售渠道把關(guān)很嚴(yán)，很多實(shí)驗(yàn)室購(gòu)買周期很長(zhǎng)甚至無法買到，使用者還需要在公安機(jī)關(guān)備案等等。由于該方法對(duì)反應(yīng)適宜的酸堿環(huán)境有要求，因此該方法是通過緩沖溶液A和緩沖溶液B來控制反應(yīng)的酸堿環(huán)境。在該方法中由于緩沖溶液B的緩沖能力不強(qiáng)，如一些化學(xué)分析實(shí)驗(yàn)室用水的pH在5.0?6.0之間，該緩沖溶液B的緩沖能力達(dá)不到測(cè)試需要。該方法實(shí)際使用水的pH要求要高于GB6682/T-2008 “分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法”中一級(jí)水的要求，為了達(dá)到該方法的用水要求，化學(xué)分析實(shí)驗(yàn)室需要對(duì)一級(jí)水進(jìn)行再處理，使該方法實(shí)際使用具有一定的局限性。
[0004]YC/T468_2013“煙草及煙草制品總植物堿的測(cè)定連續(xù)流動(dòng)(硫氰酸鉀)法”的測(cè)定原理是采用硫氰酸鉀和二氯異氰尿酸鈉在線生成氯化氰，使煙堿的吡啶環(huán)斷開，進(jìn)而與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生反應(yīng)，反應(yīng)產(chǎn)物在460nm波長(zhǎng)處用比色計(jì)進(jìn)行測(cè)定。相較于YC/T160-2002，YC/T468-2013不使用氰化鉀，提高了總植物堿測(cè)定的操作安全性。在YC/T468-2013中對(duì)反應(yīng)適宜的酸堿環(huán)境也有要求，同樣是通過緩沖溶液A和緩沖溶液B來控制反應(yīng)的酸堿環(huán)境，雖然能夠有效控制反應(yīng)的酸堿環(huán)境，但是該方法緩沖溶液A和緩沖溶液B配制時(shí)化學(xué)品用量較大，同樣對(duì)該方法的使用帶來不便。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005]為了克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，本發(fā)明提供一種新的適用于連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿的緩沖體系。該緩沖體系適用于采用連續(xù)流動(dòng)(硫氰酸鉀)法測(cè)定煙草及煙草制品中的總植物堿。采用本發(fā)明的緩沖體系在減少了配制時(shí)化學(xué)品的使用量的同時(shí)能控制反應(yīng)的酸堿環(huán)境，保證氯化氰使植物堿的吡啶環(huán)斷裂，進(jìn)而與對(duì)氨基苯磺酸的反應(yīng)，使反應(yīng)在需要的酸堿環(huán)境條件下進(jìn)行。
[0006]本發(fā)明是采用如下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的。
[0007]—方面，本發(fā)明提供一種適用于連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿的緩沖體系，該緩沖體系包含緩沖溶液A和緩沖溶液B ；
[0008]其中，緩沖溶液A的配制為:稱取磷酸氫二鈉60.5-83.0g，優(yōu)選為71.6g ;磷酸三鈉10.1-20.2g，優(yōu)選為15.2g至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容至刻度；
[0009]緩沖溶液B的配制為:稱取對(duì)氨基苯磺酸5.5-8.0g,優(yōu)選為7.0g ;磷酸氫二鈉60.5-83.0g，優(yōu)選為71.6g ;磷酸二氫鈉5.0-7.0g，優(yōu)選為6.2g和檸檬酸鈉10.0-12.lg，優(yōu)選為11.8g至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容至刻度。
[0010]上述的磷酸氫二鈉、磷酸三鈉、磷酸二氫鈉、檸檬酸鈉可以為常規(guī)存在形式，例如磷酸氫二鈉以12個(gè)結(jié)晶水形式存在，磷酸三鈉以12個(gè)結(jié)晶水形式存在，磷酸二氫鈉以2個(gè)結(jié)晶水形式存在，檸檬酸鈉以2個(gè)結(jié)晶水形式存在。
[0011]優(yōu)選地，在上述緩沖體系中，緩沖溶液A與緩沖溶液B之間的用量比為1:2至1:1 (體積比)，優(yōu)選為3:4(體積比)。
[0012]另一方面，本發(fā)明提供一種上述緩沖體系在連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草或煙草制品中總植物堿的方法中的用途。
[0013]優(yōu)選地，所述連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿的方法是指采用硫氰酸鉀和二氯異氰尿酸鈉在線生成氯化氰，氯化氰與所述煙草或煙草制品中的總植物堿(以煙堿計(jì))反應(yīng)，使煙堿的吡啶環(huán)斷開，進(jìn)而與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生反應(yīng)，反應(yīng)產(chǎn)物用比色計(jì)在460nm處測(cè)定。
[0014]優(yōu)選地，所述連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿的方法包括:
[0015](I)樣品的制備:按YC/T31制備煙草試樣，并測(cè)定其水分含量，然后使用5%醋酸對(duì)煙草試樣進(jìn)行萃取，過濾，得濾液備用；
[0016](2)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制:
[0017]稱取煙堿或煙堿鹽以5%的醋酸溶解，配制成至少5個(gè)工作標(biāo)準(zhǔn)液，所配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液中煙堿含量濃度范圍為0.5?7% ;
[0018](3)反應(yīng)試劑的配制:
[0019]硫氰酸鉀溶液的配制為:稱取硫氰酸鉀至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入250mL容量瓶中，用水定容，該溶液濃度范圍為0.09?0.21mol/L，優(yōu)選為0.12mol/L。
[0020]二氯異氰尿酸鈉溶液的配制為:稱取二氯異氰尿酸鈉至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入250mL容量瓶中，用水定容，該溶液濃度范圍為0.02?0.06mol/L，優(yōu)選為0.04mol/L。[0021 ] 緩沖溶液A的配制:稱取磷酸氫二鈉60.5-83.0g，優(yōu)選為71.6g ;磷酸三鈉10.1-20.2g，優(yōu)選為15.2g至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容至刻度；
[0022]緩沖溶液B的配制:稱取對(duì)氨基苯磺酸5.5-8.0g，優(yōu)選為7.0g;磷酸氫二鈉60.5-83.0g,優(yōu)選為71.6g ;、磷酸二氫鈉5.0-7.0g,優(yōu)選為6.2g和檸檬酸鈉10.0-12.1g,優(yōu)選為11.8g至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容至刻度；
[0023]上述的磷酸氫二鈉、磷酸三鈉、磷酸二氫鈉、檸檬酸鈉可以為常規(guī)存在形式，例如磷酸氫二鈉以12個(gè)結(jié)晶水形式存在，磷酸三鈉以12個(gè)結(jié)晶水形式存在，磷酸二氫鈉以2個(gè)結(jié)晶水形式存在，檸檬酸鈉以2個(gè)結(jié)晶水形式存在。
[0024]解毒液A的配制為:稱取Ig檸檬酸、1g硫酸亞鐵至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容至刻度；該解毒液A的主要作用是降低未參與反應(yīng)的氯化氰的毒性，該解毒液A與YC/T160-2002 (氰化鉀法)中的解毒液A相同。
[0025]解毒液B的配制為:稱取1g碳酸鈉至燒杯中,用水溶解,然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容至刻度；該解毒液B的主要作用是降低未參與反應(yīng)的氯化氰的毒性，該解毒液B與YC/T160-2002 (氰化鉀法)解毒液B相同。
[0026](4)使用連續(xù)流動(dòng)分析儀在步驟(3)的反應(yīng)體系下檢測(cè)步驟(I)的濾液和步驟
(2)的工作標(biāo)準(zhǔn)液；
[0027](5)根據(jù)下式計(jì)算樣品中的總植物堿:
[0028]
總植物喊％ =-X100
111 X (1- W)x 1000
[0029]式中，X:樣品的儀器觀測(cè)值，單位毫克每毫升(mg/mL)；
[0030]V:加入的萃取液體積，單位為毫升(mL)；
[0031]m:樣品質(zhì)量，單位為克(g)；
[0032]W:試樣的水分百分含量，％ (質(zhì)量分?jǐn)?shù))；
[0033]優(yōu)選地，上述方法中，緩沖溶液A與緩沖溶液B的用量比為1:2至1:1(體積比)，優(yōu)選為3:4 (體積比)，該用量比使得反應(yīng)體系的pH值控制在6.0?7.5之間；
[0034]優(yōu)選地，上述方法中，硫氰酸鉀溶液和二氯異氰尿酸鈉溶液濃度比為2.5:1至
3.5:1，優(yōu)選為 3:1。
[0035]優(yōu)選地，上述方法中，連續(xù)流動(dòng)分析儀的運(yùn)行參數(shù)為:進(jìn)樣清洗比為1.5，進(jìn)樣頻率48杯/小時(shí)，增益18-60，光強(qiáng)2.85伏。
[0036]在上述方法中，樣品的制備、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制、反應(yīng)試劑的配制順序可以變化。
[0037]在一個(gè)具體實(shí)施方案中，所述連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿的方法的具體步驟如下:
[0038](I)使用5%醋酸萃取煙末試樣(煙末試樣按YC/T31來制備)中的總植物堿；
[0039](2)按照?qǐng)D1所示連接管路:
[0040](3)配置一定濃度的緩沖溶液A和B、解毒液A、解毒液B、硫氰酸鉀溶液和二氯異氰尿酸鈉溶液；
[0041](4)使用5%醋酸配制總植物堿標(biāo)準(zhǔn)溶液；
[0042](5)將總植物堿模塊上的泵管按照?qǐng)D1所示卡入蠕動(dòng)泵(模塊上不同泵管的內(nèi)徑不同，對(duì)應(yīng)的試劑的流速不同，通過控制反應(yīng)試劑的流速來達(dá)到控制參與反應(yīng)試劑比例的目的；加入空氣泵管是為了使管路中的溶液混合均勻)，將泵蓋蓋上，將試劑管放入水中；打開電源，打開檢測(cè)器，蠕動(dòng)泵，自動(dòng)進(jìn)樣器，計(jì)算機(jī)；將蠕動(dòng)泵上的開關(guān)撥至Run;雙擊計(jì)算機(jī)中連接連續(xù)流動(dòng)分析工作站圖標(biāo)；點(diǎn)擊工作站上的charting,連接成功后，螺動(dòng)泵運(yùn)行，水就被泵入管路中清洗，清洗時(shí)間為20?30min ;待基線穩(wěn)定(此時(shí)基線波動(dòng)小于±1% )后，將不同的管路放入所對(duì)應(yīng)的試劑中，繼續(xù)運(yùn)行，期間在工作站所彈出的charting窗口中調(diào)節(jié)基線至5%左右；按照工作站的下拉菜單中Analysis的提示編制運(yùn)行程序，待基線穩(wěn)定，點(diǎn)擊工作站中的Run即可運(yùn)行；待程序運(yùn)行結(jié)束，將不同的管路重新放回水中，清洗20?30min;清洗完成后，依次關(guān)閉自動(dòng)進(jìn)樣器，蠕動(dòng)泵，檢測(cè)器，將泵蓋取下，關(guān)閉電源。
[0043]上述步驟(I)具體為:稱取煙末試樣(煙末試樣按YC/T31來制備)至50mL具塞三角瓶中，加入5%醋酸振蕩30min，使用定性濾紙過濾。
[0044]上述步驟(2)具體為:按照?qǐng)D1所示，將泵管安裝在蠕動(dòng)泵上，加上泵蓋，用水清洗管路。
[0045]上述步驟⑶中，緩沖溶液A的配制為:稱取71.6克的磷酸氫二鈉、15.2克的磷酸三鈉至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容至刻度。其中，磷酸氫二鈉、磷酸三鈉可以為常規(guī)存在形式，例如磷酸氫二鈉以12個(gè)結(jié)晶水形式存在，磷酸三鈉以12個(gè)結(jié)晶水形式存在。
[0046]上述步驟(3)中，緩沖溶液B的配制為:稱取7g對(duì)氨基苯磺酸、71.6克磷酸氫二鈉、6.2克磷酸二氫鈉和11.8克檸檬酸鈉至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容至刻度。其中，磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、檸檬酸鈉可以為常規(guī)存在形式，例如磷酸氫二鈉以12個(gè)結(jié)晶水形式存在，磷酸二氫鈉以2個(gè)結(jié)晶水形式存在，檸檬酸鈉以2個(gè)結(jié)晶水形式存在。
[0047]上述步驟(3)中，解毒液A的配制為:稱取Ig檸檬酸、1g硫酸亞鐵至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容至刻度。解毒液A的主要作用是降低未參與反應(yīng)氯化氰的毒性。步驟(3)中解毒液A與YC/T160-2002(氰化鉀法)解毒液A相同。
[0048]上述步驟(3)中解毒液B的配制為:稱取1g碳酸鈉至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容至刻度。解毒液B的主要作用是降低未參與反應(yīng)氯化氰的毒性。步驟(3)中解毒液B與YC/T160-2002 (氰化鉀法)解毒液B相同。
[0049]上述步驟(3)中，硫氰酸鉀溶液的配制為:稱取適量硫氰酸鉀至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入250mL容量瓶中，用水定容。該溶液濃度范圍為0.09?0.21mol/L。
[0050]上述步驟(3)中，二氯異氰尿酸鈉溶液的配制為:稱取適量二氯異氰尿酸鈉至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入250mL容量瓶中，用水定容。該溶液濃度范圍為0.02?0.06mol/L0
[0051]上述步驟(3)中，硫氰酸鉀溶液和二氯異氰尿酸鈉溶液濃度配比約為3:1。
[0052]上述步驟(4)中，標(biāo)準(zhǔn)溶液配制為:稱取適量煙堿于250mL容量瓶中，用5%醋酸溶解，定容至刻度。此溶液為煙堿儲(chǔ)備液，煙堿含量約1.6mg/mL左右。由煙堿儲(chǔ)備液制備至少5個(gè)工作標(biāo)準(zhǔn)液，其濃度范圍應(yīng)覆蓋預(yù)計(jì)檢測(cè)到的樣品含量。
[0053]上述步驟(5)中，連續(xù)流動(dòng)分析儀的運(yùn)行參數(shù)為:進(jìn)樣清洗比為1.5，進(jìn)樣頻率48杯/小時(shí)，增益18-60，光強(qiáng)2.85伏。
[0054]上述連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿中，樣品前處理與YC/T468-2013 “煙草及煙草制品總植物堿的測(cè)定連續(xù)流動(dòng)(硫氰酸鉀)法”一致，改變了緩沖溶液A和緩沖溶液B，建立了一種新的緩沖體系，減少配制緩沖溶液A和緩沖溶液B時(shí)化學(xué)品的使用量，同時(shí)保證了同YC/T468-2013方法測(cè)試結(jié)果的一致性。
[0055]本發(fā)明至少存在以下有益效果:
[0056]本發(fā)明采用一種新的緩沖溶液A能控制滲析器前反應(yīng)的酸堿環(huán)境，保證滲析器前溶液pH值在6.0?11.0之間并不會(huì)對(duì)緩沖溶液B控制的酸堿環(huán)境造成影響；
[0057]本發(fā)明采用一種新的緩沖溶液B能控制反應(yīng)的酸堿環(huán)境，調(diào)節(jié)溶液pH值在6.0?
7.5之間，保證氯化氰使植物堿的吡啶環(huán)斷裂，進(jìn)而與對(duì)氨基苯磺酸的反應(yīng)，在反應(yīng)需要的酸堿環(huán)境條件下進(jìn)行；
[0058]本發(fā)明建立了一種新的適用于連續(xù)流動(dòng)(硫氰酸鉀)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿的緩沖體系；
[0059]采用本發(fā)明的緩沖體系的連續(xù)流動(dòng)法與YC/T468-2013相比，減少了配制緩沖溶液A和緩沖溶液B時(shí)化學(xué)品的使用量，同時(shí)保證數(shù)據(jù)與YC/T468-2013 —致。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0060]圖1為采用連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿的管路圖。
【具體實(shí)施方式】
[0061]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說明。這些實(shí)施例旨在幫助闡述發(fā)明的內(nèi)容而不是限制本發(fā)明的范圍。
[0062]實(shí)施例1:烤煙中總棺物堿的測(cè)定
[0063]I)樣品前處理
[0064]將烤煙煙末按照YC/T31制備成試樣，并測(cè)定其水分含量，然后稱取0.25g試樣于50mL具塞三角瓶中，加入25mL5%醋酸，蓋上塞子，在振蕩器上振蕩(轉(zhuǎn)速>150rpm)萃取30min。用快速定性濾紙過濾萃取液,棄去前2mL?3mL濾液,收集后續(xù)濾液作分析之用。
[0065]2)反應(yīng)試劑的的配制
[0066]緩沖溶液A的配制為:稱取磷酸氫二鈉(12個(gè)結(jié)晶水)71.6克、磷酸三鈉(12個(gè)結(jié)晶水)15.2克至燒杯中,用水溶解,然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中,用水定容至刻度。
[0067]緩沖溶液B的配制為:稱取7g對(duì)氨基苯磺酸、磷酸氫二鈉(12個(gè)結(jié)晶水)71.6克、磷酸二氫鈉(2個(gè)結(jié)晶水)6.2克和檸檬酸鈉(2個(gè)結(jié)晶水)11.8克至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容用水定容至刻度。
[0068]在以下測(cè)定時(shí)，緩沖溶液A和緩沖溶液B的用量比為3:4 (體積比)。
[0069]解毒液A、解毒液B、硫氰酸鉀溶液和二氯異氰尿酸鈉溶液的配制與YC/T468-2013 “煙草及煙草制品總植物堿的測(cè)定連續(xù)流動(dòng)(硫氰酸鉀)法”中對(duì)應(yīng)試劑相同。
[0070]具體如下:
[0071]解毒溶液A的配制為:
[0072]稱取Ig檸檬酸、1g硫酸亞鐵至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中，用水定容至刻度。
[0073]解毒溶液B的配制為:
[0074]稱取1g碳酸鈉至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中，用水定容至刻度。
[0075]硫氰酸鉀溶液的配制為:
[0076]稱取2.88g硫氰酸鉀至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入250mL容量瓶中，用水定容至刻度。
[0077]二氯異氰尿酸鈉溶液的配制為:
[0078]稱取2.20g 二氯異氰尿酸鈉至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入250mL容量瓶中，用水定容至刻度。該溶液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。
[0079]3)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制
[0080]稱取適量總植物堿標(biāo)液(國(guó)家煙草質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，有證標(biāo)物)于250mL容量瓶中，精確至0.0OOlg，用水溶解，定容至刻度，此溶液為煙堿標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，煙堿含量應(yīng)在
1.6mg/mL左右。分別移取12.5mL、10mL、5mL、2.5mL、0.5mL煙堿標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液至10mL容量瓶中，用5%的醋酸定容，得到工作標(biāo)液的濃度分別為1.2105mg/mL、0.9683mg/mL、0.4842mg/mL、0.2421mg/mL、0.0484mg/mL。
[0081]4)本發(fā)明中所使用的分析儀器為德國(guó)布朗盧比公司生產(chǎn)的AA3型連續(xù)流動(dòng)分析儀。采用連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿的管路如圖1所示。將總植物堿模塊上的泵管按照?qǐng)D1所示卡入蠕動(dòng)泵(模塊上不同泵管的內(nèi)徑不同，對(duì)應(yīng)的試劑的流速不同，通過控制反應(yīng)試劑的流速來達(dá)到控制參與反應(yīng)試劑比例的目的；加入空氣泵管是為了使管路中的溶液混合均勻)，將泵蓋蓋上，將試劑管放入水中；打開電源，打開檢測(cè)器，蠕動(dòng)泵，自動(dòng)進(jìn)樣器，計(jì)算機(jī)；將螺動(dòng)泵上的開關(guān)撥至Run,雙擊連接連續(xù)流動(dòng)分析工作站；點(diǎn)擊工作站上的charting,連接成功后,螺動(dòng)泵運(yùn)行,水就被泵入管路中清洗,清洗時(shí)間為20?30min ;待基線穩(wěn)定(此時(shí)基線波動(dòng)小于±1% )后，將不同的管路放入所對(duì)應(yīng)的試劑中，繼續(xù)運(yùn)行，期間在工作站所彈出的charting窗口中調(diào)節(jié)基線至5%左右；按照工作站的下拉菜單中Analysis的提示編制運(yùn)行程序，待基線穩(wěn)定，點(diǎn)擊工作站中的Run即可運(yùn)行；待程序運(yùn)行結(jié)束，將不同的管路重新放回水中，清洗20?30min ;清洗完成后，依次關(guān)閉自動(dòng)進(jìn)樣器，蠕動(dòng)泵，檢測(cè)器，將泵蓋取下，關(guān)閉電源。
[0082]5)標(biāo)準(zhǔn)曲線采用一次曲線；
[0083]6)數(shù)據(jù)計(jì)算
[0084]總植物堿峰的峰高對(duì)其相應(yīng)濃度進(jìn)行回歸分析，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后通過檢測(cè)樣品的峰高，由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣品對(duì)應(yīng)的濃度，即儀器觀測(cè)值。
[0085]以干基計(jì)的總植物堿含量，由下式得出:
[0086]
總植物堿％ =--xlOO
m X (I—WOx100
[0087]式中，X:樣品的儀器觀測(cè)值，單位毫克每毫升(mg/mL)；
[0088]V:加入的萃取液體積,單位為毫升(此處萃取液體積為25mL)；
[0089]m:樣品質(zhì)量，單位為克(g)；
[0090]W:試樣的水分百分含量，％ (質(zhì)量分?jǐn)?shù))；
[0091]由以上公式算出烤煙中總植物堿含量為0.5?3%。
[0092]實(shí)施例2:白肋煙中總植物堿的測(cè)定
[0093]I)樣品前處理
[0094]將白肋煙煙末按照YC/T31制備成試樣，并測(cè)定其水分含量，然后稱取0.25g白肋煙試樣于50mL具塞三角瓶中，加入251^5%醋酸，蓋上塞子，在振蕩器上振蕩(轉(zhuǎn)速>150rpm)萃取30min。用快速定性濾紙過濾萃取液,棄去前2mL?3mL濾液,收集后續(xù)濾液作分析之用。
[0095]2)反應(yīng)試劑的的配制
[0096]緩沖溶液A的配制為:稱取磷酸氫二鈉(12個(gè)結(jié)晶水)71.6克、磷酸三鈉(12個(gè)結(jié)晶水)15.2克至燒杯中,用水溶解,然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中,用水定容至刻度。
[0097]緩沖溶液B的配制為:稱取7g對(duì)氨基苯磺酸、磷酸氫二鈉(12個(gè)結(jié)晶水)71.6克、磷酸二氫鈉(2個(gè)結(jié)晶水)6.2克和檸檬酸鈉(2個(gè)結(jié)晶水)11.8克至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容用水定容至刻度。
[0098]在以下測(cè)定時(shí)，緩沖溶液A和緩沖溶液B的用量比為請(qǐng)補(bǔ)充3:4(體積比)。
[0099]解毒液A、解毒液B、硫氰酸鉀溶液和二氯異氰尿酸鈉溶液的配制與YC/T468-2013 “煙草及煙草制品總植物堿的測(cè)定連續(xù)流動(dòng)(硫氰酸鉀)法”中對(duì)應(yīng)試劑相同。
[0100]具體如下:
[0101]解毒溶液A的配制為:
[0102]稱取Ig檸檬酸、1g硫酸亞鐵至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中，用水定容至刻度。
[0103]解毒溶液B的配制為:
[0104]稱取1g碳酸鈉至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中，用水定容至刻度。
[0105]硫氰酸鉀溶液的配制為:
[0106]稱取2.88g硫氰酸鉀至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入250mL容量瓶中，用水定容至刻度。
[0107]二氯異氰尿酸鈉溶液的配制為:
[0108]稱取2.20g 二氯異氰尿酸鈉至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入250mL容量瓶中，用水定容至刻度。該溶液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。
[0109]3)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制
[0110]稱取適量總植物堿標(biāo)液(國(guó)家煙草質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，有證標(biāo)物)于250mL容量瓶中，精確至0.0OOlg，用水溶解，定容至刻度，此溶液為煙堿標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，煙堿含量應(yīng)在
1.6mg/mL左右。分別移取12.5mL、10mL、5mL、2.5mL、0.5mL煙堿標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液至10mL容量瓶中，用5%的醋酸定容，得到工作標(biāo)液的濃度分別為1.2105mg/mL、0.9683mg/mL、0.4842mg/mL、0.2421mg/mL、0.0484mg/mL。
[0111]4)本發(fā)明中所使用的分析儀器為德國(guó)布朗盧比公司生產(chǎn)的AA3型連續(xù)流動(dòng)分析儀。采用連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿的管路如圖1所示。將總植物堿模塊上的泵管按照?qǐng)D1所示卡入蠕動(dòng)泵(模塊上不同泵管的內(nèi)徑不同，對(duì)應(yīng)的試劑的流速不同，通過控制反應(yīng)試劑的流速來達(dá)到控制參與反應(yīng)試劑比例的目的；加入空氣泵管是為了使管路中的溶液混合均勻)，將泵蓋蓋上，將試劑管放入水中；打開電源，打開檢測(cè)器，蠕動(dòng)泵，自動(dòng)進(jìn)樣器，計(jì)算機(jī)；將螺動(dòng)泵上的開關(guān)撥至Run,雙擊連接連續(xù)流動(dòng)分析工作站；點(diǎn)擊工作站上的charting,連接成功后,螺動(dòng)泵運(yùn)行,水就被泵入管路中清洗,清洗時(shí)間為20?30min ;待基線穩(wěn)定(此時(shí)基線波動(dòng)小于±1% )后，將不同的管路放入所對(duì)應(yīng)的試劑中，繼續(xù)運(yùn)行，期間在工作站所彈出的charting窗口中調(diào)節(jié)基線至5%左右；按照工作站的下拉菜單中Analysis的提示編制運(yùn)行程序，待基線穩(wěn)定，點(diǎn)擊工作站中的Run即可運(yùn)行；待程序運(yùn)行結(jié)束，將不同的管路重新放回水中，清洗20?30min;清洗完成后，依次關(guān)閉自動(dòng)進(jìn)樣器，蠕動(dòng)泵，檢測(cè)器，將泵蓋取下，關(guān)閉電源。
[0112]5)標(biāo)準(zhǔn)曲線采用一次曲線；
[0113]6)數(shù)據(jù)計(jì)算
[0114]總植物堿峰的峰高對(duì)其相應(yīng)濃度進(jìn)行回歸分析，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后通過檢測(cè)樣品的峰高，由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣品對(duì)應(yīng)的濃度，即儀器觀測(cè)值。
[0115]以干基計(jì)的總植物堿含量，由下式得出:
[0116]
總植物喊％ =-—-X100
/? x(l-1f)x 1000
[0117]式中，X:樣品的儀器觀測(cè)值，單位毫克每毫升(mg/mL)；
[0118]V:加入的萃取液體積,單位為毫升(此處萃取液體積為25mL)；
[0119]m:樣品質(zhì)量，單位為克(g)；
[0120]W:試樣的水分百分含量，％ (質(zhì)量分?jǐn)?shù))；
[0121]由以上公式算出白肋煙中總植物堿含量為I?5%。
[0122]實(shí)施例3:卷煙中總棺物堿的測(cè)定
[0123]I)樣品前處理
[0124]將卷煙煙絲按照YC/T31制備成試樣，并測(cè)定其水分含量，然后稱取0.25g卷煙試樣于50mL具塞三角瓶中，加入25mL5%醋酸，蓋上塞子，在振蕩器上振蕩(轉(zhuǎn)速>150rpm)萃取30min。用快速定性濾紙過濾萃取液,棄去前2mL?3mL濾液,收集后續(xù)濾液作分析之用。
[0125]2)反應(yīng)試劑的的配制
[0126]緩沖溶液A的配制為:稱取磷酸氫二鈉(12個(gè)結(jié)晶水)83.0克、磷酸三鈉(12個(gè)結(jié)晶水)20.0克至燒杯中,用水溶解,然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中,用水定容至刻度。
[0127]緩沖溶液B的配制為:稱取7g對(duì)氨基苯磺酸、磷酸氫二鈉(12個(gè)結(jié)晶水)克、磷酸二氫鈉(2個(gè)結(jié)晶水)5.2克和檸檬酸鈉(2個(gè)結(jié)晶水)10.4克至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容用水定容至刻度。
[0128]在以下測(cè)定時(shí)，緩沖溶液A和緩沖溶液B的用量比為3:4(體積比)
[0129]解毒液A、解毒液B、硫氰酸鉀溶液和二氯異氰尿酸鈉溶液的配制與YC/T468-2013 “煙草及煙草制品總植物堿的測(cè)定連續(xù)流動(dòng)(硫氰酸鉀)法”中對(duì)應(yīng)試劑相同。
[0130]具體如下:
[0131]解毒溶液A的配制為:
[0132]稱取Ig檸檬酸、1g硫酸亞鐵至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中，用水定容至刻度。
[0133]解毒溶液B的配制為:
[0134]稱取1g碳酸鈉至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中，用水定容至刻度。
[0135]硫氰酸鉀溶液的配制為:
[0136]稱取2.88g硫氰酸鉀至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入250mL容量瓶中，用水定容至刻度。
[0137]二氯異氰尿酸鈉溶液的配制為:
[0138]稱取2.20g 二氯異氰尿酸鈉至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入250mL容量瓶中，用水定容至刻度。該溶液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。
[0139]3)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制
[0140]稱取適量總植物堿標(biāo)液(國(guó)家煙草質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，有證標(biāo)物)于250mL容量瓶中，精確至0.0OOlg，用水溶解，定容至刻度，此溶液為煙堿標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，煙堿含量應(yīng)在
1.6mg/mL左右。分別移取12.5mL、10mL、5mL、2.5mL、0.5mL煙堿標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液至10mL容量瓶中，用5%的醋酸定容，得到工作標(biāo)液的濃度分別為1.2105mg/mL、0.9683mg/mL、0.4842mg/mL、0.2421mg/mL、0.0484mg/mL。
[0141]4)本發(fā)明中所使用的分析儀器為德國(guó)布朗盧比公司生產(chǎn)的AA3型連續(xù)流動(dòng)分析儀。采用連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿的管路如圖1所示。將總植物堿模塊上的泵管按照?qǐng)D1所示卡入蠕動(dòng)泵(模塊上不同泵管的內(nèi)徑不同，對(duì)應(yīng)的試劑的流速不同，通過控制反應(yīng)試劑的流速來達(dá)到控制參與反應(yīng)試劑比例的目的；加入空氣泵管是為了使管路中的溶液混合均勻)，將泵蓋蓋上，將試劑管放入水中；打開電源，打開檢測(cè)器，蠕動(dòng)泵，自動(dòng)進(jìn)樣器，計(jì)算機(jī)；將螺動(dòng)泵上的開關(guān)撥至Run,雙擊連接連續(xù)流動(dòng)分析工作站；點(diǎn)擊工作站上的charting,連接成功后,螺動(dòng)泵運(yùn)行,水就被泵入管路中清洗,清洗時(shí)間為20?30min ;待基線穩(wěn)定(此時(shí)基線波動(dòng)小于±1% )后，將不同的管路放入所對(duì)應(yīng)的試劑中，繼續(xù)運(yùn)行，期間在工作站所彈出的charting窗口中調(diào)節(jié)基線至5%左右；按照工作站的下拉菜單中Analysis的提示編制運(yùn)行程序，待基線穩(wěn)定，點(diǎn)擊工作站中的Run即可運(yùn)行；待程序運(yùn)行結(jié)束，將不同的管路重新放回水中，清洗20?30min ;清洗完成后，依次關(guān)閉自動(dòng)進(jìn)樣器，蠕動(dòng)泵，檢測(cè)器，將泵蓋取下，關(guān)閉電源。
[0142]5)標(biāo)準(zhǔn)曲線采用一次曲線；
[0143]6)數(shù)據(jù)計(jì)算
[0144]總植物堿峰的峰高對(duì)其相應(yīng)濃度進(jìn)行回歸分析，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后通過檢測(cè)樣品的峰高，由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣品對(duì)應(yīng)的濃度，即儀器觀測(cè)值。
[0145]以干基計(jì)的總植物堿含量，由下式得出:
[0146]
總植物喊％ =-X100
mx (1-^K) X1000
[0147]式中，X:樣品的儀器觀測(cè)值，單位毫克每毫升(mg/mL)；
[0148]V:加入的萃取液體積,單位為毫升(此處萃取液體積為25mL)；
[0149]m:樣品質(zhì)量，單位為克(g)；
[0150]W:試樣的水分百分含量，％ (質(zhì)量分?jǐn)?shù))；
[0151]由以上公式算出卷煙中總植物堿含量為0.5?4%。
[0152]實(shí)施例4:采用本發(fā)明緩沖體系的連續(xù)流動(dòng)法與采用其他緩沖體系的連續(xù)流動(dòng)法檢測(cè)結(jié)果的對(duì)比研究
[0153]如無特殊說明，本實(shí)施例使用的試劑及方法均與YC/T468-2013相一致。
[0154]分別采用本發(fā)明緩沖體系的連續(xù)流動(dòng)法和其他緩沖體系(除緩沖體系與本發(fā)明不同之外，其余試劑均相同)對(duì)烤煙，白肋煙，香料煙、烤煙型卷煙和混合型卷煙五種樣品進(jìn)行測(cè)定，其測(cè)定結(jié)果見表I?表7。從表I?表7可知:同一樣品采用本發(fā)明緩沖體系的連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定結(jié)果相對(duì)于YC/T468-2013方法的絕對(duì)差值均小于0.04，其他緩沖體系測(cè)定結(jié)果相對(duì)于YC/T468-2013方法的絕對(duì)差值均較大。在表8中列出了對(duì)同一樣品分別采用本發(fā)明緩沖體系的連續(xù)流動(dòng)法、其他緩沖體系的連續(xù)流動(dòng)法和YC/T468-2013方法的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)(α =0.05)，結(jié)果，采用本發(fā)明緩沖體系的連續(xù)流動(dòng)法結(jié)果為P =
0.35>0.05，說明兩種分析方法沒有顯著性差異，表明采用本發(fā)明緩沖體系的連續(xù)流動(dòng)法與YC/T468-2013標(biāo)準(zhǔn)方法結(jié)果一致；采用其他緩沖體系的檢測(cè)方法Ρ〈0.05，說明兩種分析方法存在顯著性差異，表明采用其他緩沖體系的方法與YC/T468-2013標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)試結(jié)果不—致。
[0155]表I采用本發(fā)明緩沖體系的連續(xù)流動(dòng)法與YC/T468-2013方法測(cè)定結(jié)果比對(duì)
[0156]
釆用本發(fā)明緩沖體系的連兩法測(cè)定結(jié)果的
、YC/T 468-2013
續(xù)流動(dòng)法差異
樣品編號(hào)平均值％平均值％差值％
烤煙 1.801.790.01
白肋煙 4,534.570.04
香料煙 1.011.020.01
烤煙型卷
1.701.690 01
煙
混合型卷
2.062.08 0.02
煙
[0157]表2磷酸氫二鈉、硼砂體系與YC/T468-2013方法測(cè)定結(jié)果比對(duì)
[0158]I _兩法測(cè)磷酸氫二鈉、硼砂體系緩沖溶磷酸氫二鈉、硼砂yc/t^ 、 L1
L.足結(jié)果液配制方法體系468-2013 , ^ ρ
__的差異__
樣品編平均值平均值^緩沖溶液A的配制為:稱取適
O/q
號(hào)％%工量的磷酸氫二鈉、硼砂至燒杯烤煙 1.54 1.79 0.25中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容白肋煙 44.57 0.57量瓶中，用水定容至刻度。該香料煙 0.86 1.02 0.16溶液pH值在6,0 ~ 11.0之間；
烤煙型緩沖溶液B的配制為:稱取7g
I 46 I 69 O 23
卷煙對(duì)氨基苯磺酸、適量的磷酸氫二鈉、硼砂至燒杯中，用水溶混合型解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用
1.87 2.08 0 21ι、、rn ι、、< ' ι & '、、、
卷煙水足答用水足答至刻度。該溶
液pH值在6.0 ~7.5之間。
[0159]表3磷酸二氫鈉、氫氧化鈉體系與YC/T468-2013方法測(cè)定結(jié)果比對(duì)
[0160]
磷酸二氫鈉、氫氧|yc/t 兩法測(cè)I磷酸二氫鈉、氫氧化鈉體系緩化鈉緩沖體系468-2013定結(jié)果沖溶液配制方法
[0161]
的差異樣品編平均值平均值- &緩沖溶液A的配制為:稱取適號(hào) % % 工量的鱗酸二氫鈉、氫氧化鈉至烤煙 1.63 1.79 0.16燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入白肋煙 4.22 4.57 0.35IL容量瓶中，用水定容至刻度。
香料煙 0.92 1.02 0.1該溶液pH值在6.0 ~ 11.0之間；
烤煙型緩沖溶液B的配制為:稱取7g
卷煙丨.55 L69 °.14對(duì)氨基苯磺酸、適量的磷酸二氫鈉、氫氧化鈉至燒杯中，用混合型水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶卷煙1-95 2-08 0-13中，用水定容用水定容至刻度。
該溶液pH值在6.0 ~ 7.5之間ο
[0162]表4磷酸鈉、檸檬酸體系與YC/T468-2013方法測(cè)定結(jié)果比對(duì)
[0163]
u.,:~兩法測(cè)I石粦酸鈉、梓檬酸體系緩沖溶液磷酸鈉、檸檬酸緩YC/T 、 ^L
丄K足結(jié)果配制萬法沖體系468-2013 ,』?
__的差異__
樣品編平均值平均值^緩沖溶液A的配制為:稱取適
差值％
號(hào)％%量的嶙酸鈉、梓檬酸至燒杯中，
烤煙1.571.790.22用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶白肋煙3.914.570.66中，用水定容至刻度。該溶液香料煙0.891.020.13pH值在6.0 ~ 11.0之間；緩沖烤煙型溶液B的配制為:稱取7g對(duì)氨卷煙I]!1690.38基苯續(xù)酸、適量的鱗酸納、押
檬酸至燒杯中，用水溶解，然混合型后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容
,1.822 080.26m b ^ r ■, ,* 、-一 + TT ^
卷煙用水足容至刻度。該>谷液pH值
在6.0 ~ 7.5之間。
[0164]表5朽1檬酸鈉、朽1檬酸體系與YC/T468-2013方法測(cè)定結(jié)果比對(duì)
[0165]
兩法測(cè)押樣酸納、抒橡酸體系緩沖溶檸檬酸鈉、檸檬酸YC/T 、 m 、，，，
^ , ^.足結(jié)果液配制方法緩沖體系468-2.0丨3 , j ?
__的差異 _
[0166]樣品編平均值平均值-緩沖溶液A的配制為:稱取適
差值％
jf__%__%__量的檸檬酸鈉、檸檬酸至燒杯烤煙 1.47 1.79 0.32 中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容白肋煙3.88 4 57 0.69 量瓶中，用水定答至刻度。該
M )rn----溶液pH值在6.0 ~ 11.0之間;
香料煙 0.76 1.02 0.261
—----緩沖溶液B的配制為:稱取7g
烤煙型
,1.36 1.69 0.33 對(duì)氨基苯橫酸、適量的梓檬酸卷煙
----鈉、檸檬酸至燒杯中，用水溶混合型解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用卷煙 131 2.08 0.11 水定容用水定容至刻度。該溶_____液pH值在6.0 ~ 7.5之間。
[0167]表6巴比妥納、鹽酸體系與YC/T468-2013方法測(cè)定結(jié)果比對(duì)
[0168]:~兩法測(cè)巴比妥納、鹽酸體系緩沖溶液巴比妥納、鹽酸緩YC/TL
^ K足結(jié)果配制萬法棚468-20丨3的差異__
樣品編I平均值平均值^丄緩沖溶液A的配制為:稱取適
jf_%__%__量的巴比妥納、鹽酸至燒杯中，
烤煙 1.65 1.79 0.14 用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶白肋煙 4.31 4.57 0.26 中，用水定容至刻度。該溶液香料煙 0.95 I 02 O 07 pH值在6.0 ~ 11.0之間;緩沖烤煙型溶液B的配制為:稱取7g對(duì)氣卷煙 L56 L69 °.13 基苯續(xù)酸、適量的巴比妥納、
鹽酸至燒杯中，用水溶解，然混合型后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容
,1.91 2.08 0.17 m^ ^ -■ ττ
卷煙用水足谷至刻度。該〉谷救pH值
在6.0 ~ 7.5之間。
[0169]表7三羥甲基氨基甲烷、鹽酸體系與YC/T468方法測(cè)定結(jié)果比對(duì)
[0170] ,&一」兩法測(cè)三羥曱基氨基曱烷、鹽酸體系三羥曱基氨基曱YC/T,
J " hi J定結(jié)果緩沖溶液配制方法烷、鹽酸緩沖體系 468-2013 j ^
__的差異__
樣品編I平均值平均值y丄緩沖溶液A的配制為:稱取適號(hào)丨％|%I工量的三羥甲基氨基曱烷、鹽酸
[0171]
烤煙 I 1.61 I I 79 I 0.18 |至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)白肋煙 4.25 4.57 0.32 入IL容量瓶中，用水定容至刻香料煙 0.91.02 0.12 度。該溶液pH值在6.0 ~丨1.0
烤煙型之間；緩沖溶液B的配制為:
卷煙卜52 1 69 °'17 稱取7g對(duì)氨基苯續(xù)酸、適量
的三羥甲基氨基甲烷、鹽酸至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入混合型
1.84 2.08 0.24 IL容量瓶中，用水定容用水定a煙容至刻度。該溶液pH值在6.0 ~
7.5之間。
[0172]表8不同緩沖體系與YC/T468-2013方法測(cè)定結(jié)果配對(duì)t檢驗(yàn)
[0173]
緩沖體系名稱t檢驗(yàn)P值
本發(fā)明的緩沖溶液0.35
磷酸氫二鈉、硼砂體系0.02
磷酸二氫鈉、氫氧化鈉體系0.02
磷酸納、檸檬酸緩沖體系 0.02
片寧橡酸納、抒橡酸緩沖體系0.02
巴比妥納、鹽酸緩沖體系 0.01
三羥曱基氨基曱烷、鹽酸緩0.003
沖體系
【權(quán)利要求】
1.一種適用于連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿的緩沖溶液，該緩沖溶液包含緩沖溶液A和緩沖溶液B ； 其中，緩沖溶液A的配制為:稱取磷酸氫二鈉60.5-83.0g,優(yōu)選為71.6g ;磷酸三鈉10.1-20.2g，優(yōu)選為15.2g至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容至刻度； 緩沖溶液B的配制為:稱取對(duì)氨基苯磺酸5.5-8.0g,優(yōu)選為7.0g、磷酸氫二鈉60.5-83.0g，優(yōu)選為71.6g、磷酸二氫鈉5.0-7.0g，優(yōu)選為6.2g和檸檬酸鈉10.0-12.lg，優(yōu)選為11.8g至燒杯中，用水溶解,然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中,用水定容至刻度。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的緩沖溶液，其特征在于，緩沖溶液A與緩沖溶液B之間的用量比為1:2至1:1，優(yōu)選為3:4。
3.—種權(quán)利要求1或2所述的緩沖溶液在連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草或煙草制品中總植物堿的方法中的用途。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于，所述連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿的方法是指采用硫氰酸鉀和二氯異氰尿酸鈉在線生成氯化氰，氯化氰與所述煙草或煙草制品中的總植物堿(以煙堿計(jì))反應(yīng)，使煙堿的吡啶環(huán)斷開，進(jìn)而與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生反應(yīng)，反應(yīng)產(chǎn)物用比色計(jì)在460nm處測(cè)定。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的用途，其特征在于，所述連續(xù)流動(dòng)法測(cè)定煙草及煙草制品中總植物堿的方法包括: (1)樣品的制備:按YC/T31制備煙草試樣，并測(cè)定其水分含量，然后使用5%醋酸對(duì)煙草試樣進(jìn)行萃取，過濾，得濾液備用； (2)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制: 稱取煙堿或煙堿鹽以5%的醋酸溶解，配制成至少5個(gè)工作標(biāo)準(zhǔn)液，所配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液中煙堿含量濃度范圍為0.5?7% ; (3)反應(yīng)試劑的配制: 硫氰酸鉀溶液的配制為:稱取硫氰酸鉀至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入250mL容量瓶中，用水定容，該溶液濃度范圍為0.09?0.21mol/L，優(yōu)選為0.12mol/L ； 二氯異氰尿酸鈉溶液的配制為:稱取二氯異氰尿酸鈉至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入250mL容量瓶中，用水定容，該溶液濃度范圍為0.02?0.06mol/L，優(yōu)選為0.04mol/L ； 緩沖溶液A的配制:稱取磷酸氫二鈉60.5-83.0g,優(yōu)選為71.6g、磷酸三鈉10.1-20.2g，優(yōu)選為15.2g至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容至刻度；緩沖溶液B的配制:稱取對(duì)氨基苯磺酸5.5-8.0g,優(yōu)選為7.0g、磷酸氫二鈉60.5-83.0g,優(yōu)選為71.6g、磷酸二氫鈉5.0-7.0g,優(yōu)選為6.2g和檸檬酸鈉10.0-12.1g,優(yōu)選為11.8g至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中,用水定容至刻度； 解毒液A的配制為:稱取Ig檸檬酸、1g硫酸亞鐵至燒杯中，用水溶解，然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用水定容至刻度； 解毒液B的配制為:稱取1g碳酸鈉至燒杯中,用水溶解,然后轉(zhuǎn)入IL容量瓶中,用水定容至刻度； (4)使用連續(xù)流動(dòng)分析儀在步驟(3)的反應(yīng)體系下檢測(cè)步驟(I)的濾液和步驟(2)的工作標(biāo)準(zhǔn)液； (5)根據(jù)下式計(jì)算樣品中的總植物堿:總植物喊％ =-—-X100
m x(l-ff)x 1000 式中，X:樣品的儀器觀測(cè)值，單位毫克每毫升(mg/mL)； V:加入的萃取液體積，單位為毫升(mL)； m:樣品質(zhì)量，單位為克(g)； W:試樣的水分百分含量，％ (質(zhì)量分?jǐn)?shù))； 上式計(jì)算的總植物堿為以干基計(jì)的總植物堿的含量。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于，緩沖溶液A與緩沖溶液B的用量比為1:2至1:1，優(yōu)選為3:4，該用量比使得反應(yīng)體系的pH值控制在6.0?7.5之間。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于，硫氰酸鉀溶液和二氯異氰尿酸鈉溶液濃度比為2.5:1至3.5:1，優(yōu)選為3:1。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于，連續(xù)流動(dòng)分析儀的運(yùn)行參數(shù)為:進(jìn)樣清洗比為1.5，進(jìn)樣頻率48杯/小時(shí)，增益18-60，光強(qiáng)2.85伏。
【文檔編號(hào)】G01N21/75GK104132895SQ201410322455
【公開日】2014年11月5日 申請(qǐng)日期:2014年7月8日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月8日
【發(fā)明者】張威, 胡清源, 邢軍, 孟慶華, 侯宏衛(wèi), 羅安娜, 劉楠, 何聲寶, 王英元, 馮曉民, 王穎 申請(qǐng)人:國(guó)家煙草質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心