一種吲唑磺菌胺及其代謝物it-4殘留量的檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種吲唑磺菌胺及其代謝物IT-4殘留量的檢測方法，包括以下步驟：（1)標準溶液的配制：稱取標準品，用有機溶劑溶解定容，制成標準儲備液，將標準儲備液逐級稀釋，配制成系列濃度標準工作液；(2)提取樣品中殘留;(3)凈化：量取步驟（2)中提取液于離心管中，然后加入吸附劑，離心，取上清液；(4)超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(UHPLC-MSMS)檢測；(5)建立標準曲線；(6)結(jié)果分析。本發(fā)明的檢測方法能夠快速、靈敏、準確的測定吲唑磺菌胺及其代謝物IT-4殘留量，為新型殺菌劑吲唑磺菌胺及其代謝物的檢測提供了一種新的檢測技術(shù)。
【專利說明】-種吲唑磺菌胺及其代謝物IT-4殘留量的檢測方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于痕量分析【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種吲唑磺菌胺及其代謝物IT-4殘留 量的檢測方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 吲唑磺菌胺是日本日產(chǎn)化學(xué)公司創(chuàng)制的三唑磺酰胺類殺菌劑，結(jié)構(gòu)新穎獨特，其 最早于2003年報道。該藥劑主要對卵菌和變形菌類有效。其持效性強，耐雨水沖淋，對多 種病害有穩(wěn)定的效果，是一種前景較好的殺菌劑。作為一種新型藥劑，吲唑磺菌胺在農(nóng)業(yè)生 產(chǎn)中使用還存在較大的盲目性。由于國內(nèi)外對吲唑磺菌胺的相關(guān)研究較少，所以需對吲唑 磺菌胺的檢測方法及殘留行為等方面開展深入和廣泛的研究，為規(guī)范用藥，保障農(nóng)業(yè)生產(chǎn) 和人民健康給予技術(shù)上的支持。
[0003] 吲唑磺菌胺主要代謝為IT-4。研究表明，IT-4毒性遠高于其母體。在分析吲唑磺 菌胺的同時，需要特別關(guān)注其代謝物的產(chǎn)生和含量變化。目前對吲唑磺菌胺及其有毒代謝 物IT-4的殘留分析國內(nèi)外尚未見相關(guān)報道，在國內(nèi)外還處于空白階段。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種操作較簡單、對目標物干擾少，準確檢測吲唑磺菌胺 及其代謝物IT-4殘留的檢測方法。該方法具有簡便迅速、準確可靠的特點，對指導(dǎo)吲唑磺 菌胺的安全合理使用，控制食品和作物中吲唑磺菌胺殘留具有重要價值。
[0005] 本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：
[0006] -種吲唑磺菌胺及其代謝物IT-4殘留量的檢測方法，包括以下步驟：
[0007] (1)標準溶液的配制：稱取吲唑磺菌胺及其代謝物IT-4標準品，用有機溶劑溶解 定容，制成標準儲備液，將標準儲備液逐級稀釋，配制成系列濃度標準工作液；
[0008] (2)提?。悍Q取樣品于離心管中，加入乙腈，渦旋振蕩，加入鹽包、渦旋振蕩、離心， 取上清液；
[0009] (3)凈化：量取步驟（2)中提取液于離心管中，然后加入吸附劑，渦旋、離心，取上 清液；
[0010] ⑷儀器檢測：待儀器狀態(tài)穩(wěn)定后，用步驟⑴中的系列濃度標準工作液進樣，超 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（UHPLC-MSMS)檢測，在此基礎(chǔ)上，對步驟（3)收集的凈化樣品 進行UHPLC-MS/MS檢測；
[0011] (5)標準曲線的建立：采用峰面積定量，以進樣濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標， 繪制標準曲線；
[0012] (6)結(jié)果分析：按以下公式計算試樣中農(nóng)藥的含量
[0013]

【權(quán)利要求】
1. 一種吲唑磺菌胺及其代謝物IT-4殘留量的檢測方法，其特征在于包括以下步驟： (1)標準溶液的配制：稱取標準品，用有機溶劑溶解定容，制成標準儲備液，將標準儲 備液逐級稀釋，配制成系列濃度標準工作液； (2) 提?。悍Q取樣品于離心管中，加入乙腈，渦旋振蕩，加入鹽包、渦旋振蕩、離心，取上 清液； (3) 凈化：量取步驟（2)中提取液于離心管中，然后加入吸附劑，渦旋、離心，取上清 液； (4) 儀器檢測：待儀器狀態(tài)穩(wěn)定后，用步驟（1)中的系列濃度標準工作液進樣， UHPLC-MS/MS檢測，在此基礎(chǔ)上，對步驟（3)收集的凈化樣品進行UHPLC-MS/MS檢測； (5) 標準曲線的建立：采用峰面積定量，以進樣濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制 標準曲線； (6) 結(jié)果分析：按以下公式計算試樣中農(nóng)藥的含量
R-樣品中所含農(nóng)藥殘留量，單位mg/kg ; 一標準溶液濃度，單位mg/L ; V標一標準溶液進樣體積，單位ML ; -樣品溶液中被測農(nóng)藥的峰面積； 一樣品溶液最終定容體積，單位mL ; 一樣品溶液進樣體積，單位ML ; -標準溶液中被測農(nóng)藥的峰面積； r一樣品稱樣重量，單位g。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述吲唑磺菌胺及其代謝物IT-4殘留量的檢測方法，其特征在于： 所述步驟（1)中稱取標準品的重量為0.01 g±〇. 2 mg;有機溶劑采用色譜甲醇。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述吲唑磺菌胺及其代謝物IT-4殘留量的檢測方法，其特征在于： 所述步驟（1)中標準儲備液是指制成100 mg/L儲備液。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述吲唑磺菌胺及其代謝物IT-4殘留量的檢測方法，其特征在于： 所述步驟（2)中乙腈使用量為2 mL/g試樣。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述吲唑磺菌胺及其代謝物IT-4殘留量的檢測方法，其特征在于： 所述步驟（2)中鹽包是指無水硫酸鎂，氯化鈉，檸檬酸鈉和檸檬酸氫二鈉的混合物，使用量 無水硫酸鎂0. 4 g/mL提取液，氯化鈉0. 1 g/mL提取液，檸檬酸鈉0. 1 g/mL提取液，檸檬酸 氫二鈉0. 05 g/mL提取液。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述吲唑磺菌胺及其代謝物IT-4殘留量的檢測方法，其特征在于： 所述步驟（3)中的吸附劑為無水硫酸鎂與PSA、C18、GCB中的一種或者兩種組合，無水硫酸 鎂使用量為〇. 15 g/mL提取液，PSA、C18和GCB使用量均為0. 05 g/mL提取液。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述吲唑磺菌胺及其代謝物IT-4殘留量的檢測方法，其特征在于： 所述步驟（4)中 UPLC-MS/MS 選用 Thermo Scientific TSQ Quantum Ultra;色譜柱選用 Thermo Hypersil GOLD C18 色譜柱； 色譜檢測條件： 柱溫：25°C ; 流動相：A相為甲醇，B相為0. 1%甲酸水溶液； 梯度洗脫條件為：〇?〇.5 min，保持20%A ; 0.5?1.5 min，20%?90%A;L5?6.0 min，保 持90〇從；6.0?7.5 111丨11，90%?20〇從；7.5?10.0 111丨11，保持20%八； 流速：〇· 25 ml,/ min ； 進樣量：1〇 μ?^ ; 質(zhì)譜條件： 離子源：電噴霧離子源ESI ; 掃描方式：正離子源/負離子源； 噴霧電壓：3200V/2800V ; 毛細管溫度：350°C ; 鞘氣壓力：45 Arb ; 輔助氣壓力：15 Arb ; 檢測方式：多重反應(yīng)監(jiān)測。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述吲唑磺菌胺及其代謝物IT-4殘留量的檢測方法，其特征在于： 所述步驟（5)中進樣濃度為 0· 001、0· 005、0· 01、0· 05、0· 1、0· 5、1· 0 mg/L。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述吲唑磺菌胺及其代謝物IT-4殘留量的檢測方法，其特征在于： 所述步驟（2 )中的樣品是指水果、蔬菜、糧食作物樣品或環(huán)境樣品。
【文檔編號】G01N30/06GK104215730SQ201410472770
【公開日】2014年12月17日 申請日期:2014年9月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月16日
【發(fā)明者】王秀國, 李義強, 徐茜, 陳志厚, 林勇, 翟明泉, 趙海剛, 王鳳龍, 孔凡玉, 宋超, 周楊全 申請人:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院煙草研究所, 福建省煙草公司南平市公司, 山東淄博煙草有限公司