復(fù)方木尼孜其制劑的指紋圖譜檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種復(fù)方木尼孜其制劑的指紋圖譜檢測(cè)方法，該方法取復(fù)方木尼孜其顆粒作為供試品溶液，再取哈馬林作對(duì)照品溶液；分別取對(duì)照品溶液與供試品溶液注入高效液相色譜儀，記錄60分鐘內(nèi)的色譜圖，用指紋圖譜軟件對(duì)圖譜進(jìn)行處理，通過對(duì)比所得復(fù)方木尼孜其制劑的指紋圖譜，確定共有峰9個(gè)，得到標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。本發(fā)明所述方法建立的復(fù)方木尼孜其制劑HPLC指紋圖譜與對(duì)照?qǐng)D譜的相似度均大于0.9，能有效的表征其質(zhì)量，有利于全面監(jiān)控產(chǎn)品的質(zhì)量；避免了復(fù)方木尼孜其制劑質(zhì)量控制的單一性和片面性，減少了人為處理產(chǎn)品質(zhì)量達(dá)標(biāo)的可能性。該方法簡(jiǎn)便、穩(wěn)定、精密度高、重現(xiàn)性好，能從整體特征面貌上控制復(fù)方木尼孜其制劑的質(zhì)量，為復(fù)方木尼孜其制劑的質(zhì)量控制提供科學(xué)的依據(jù)。
【專利說明】復(fù)方木尼孜其制劑的指紋圖譜檢測(cè)方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種復(fù)方木尼孜其制劑的指紋圖譜檢測(cè)方法及其指紋圖譜，屬于中藥 檢測(cè)領(lǐng)域。

【背景技術(shù)】
[0002] 復(fù)方木尼孜其制劑收載于《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》維吾爾藥分冊(cè)。標(biāo) 準(zhǔn)號(hào)為WS3-BW-0161-98。本方劑收載于維吾爾族古籍著名藥典《卡日己了卡德爾》，至今已 有1500年的歷史。復(fù)方木尼孜其制劑處方由茵香根皮、洋甘菊、芹菜根、駱駝蓬子、茵芹果 等藥材組成。用于調(diào)節(jié)體液及氣質(zhì)，為四種異常體液的成熟劑。復(fù)方木尼孜其制劑為多組 分復(fù)雜體系，因此評(píng)價(jià)其質(zhì)量應(yīng)采用與之相適應(yīng)的，能提供豐富鑒別信息的檢測(cè)方法，但現(xiàn) 行的顯微鑒別、理化鑒別等方法都不足W解決該一問題，建立指紋圖譜將能較為全面地反 映其所含化學(xué)成分的種類與數(shù)量，進(jìn)而對(duì)藥品質(zhì)量進(jìn)行整體描述和評(píng)價(jià)，為控制和保證產(chǎn) 品質(zhì)量的穩(wěn)定性提供保障。
[0003] 目前，對(duì)復(fù)方木尼孜其制劑的鑒定，往往是選取復(fù)方木尼孜其制劑的一兩種中藥 成分進(jìn)行鑒定，比如其現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中使用駱駝蓬子對(duì)照藥材對(duì)其進(jìn)行鑒別；還有文獻(xiàn)公開了 復(fù)方木尼孜其制劑中甘草酸饋HPLC含量測(cè)定方法。
[0004] 復(fù)方木尼孜其制劑是由茵香根皮、洋甘菊、芹菜根等制成的，臨床報(bào)道其可W治療 瘦瘡、濕疹等癥，其治療效果已經(jīng)得到臨床的驗(yàn)證，并且在不斷發(fā)掘其效果，能夠保證藥物 的質(zhì)量W及復(fù)方木尼孜其制劑中有效成分含量，是決定復(fù)方木尼孜其制劑療效的基礎(chǔ)。如 果用一兩種成分的活性成分來說明復(fù)方木尼孜其制劑的內(nèi)在質(zhì)量，具有一定的片面性，指 紋圖譜作為中草藥及其提取物的質(zhì)量控制方法，目前已經(jīng)成為國(guó)際共識(shí)。如何能更全面地 W復(fù)方木尼孜其制劑中化學(xué)成分為指標(biāo)建立宏觀指紋圖譜的方法卻未見報(bào)道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于，提供一種復(fù)方木尼孜其制劑的指紋圖譜檢測(cè)方法，該方法是 由取復(fù)方木尼孜其顆粒加入水，加熱溶解，冷卻，采用水飽和正下醇萃取，合并萃取液，蒸干 后加入甲醇溶解過濾，作為供試品溶液；再取哈馬林對(duì)照品溶液；分別取對(duì)照品溶液與供 試品溶液注入高效液相色譜儀，記錄60分鐘內(nèi)的色譜圖，用指紋圖譜軟件對(duì)圖譜進(jìn)行處 理，即得復(fù)方木尼孜其制劑的指紋圖譜。通過對(duì)比所得復(fù)方木尼孜其制劑的指紋圖譜，確定 共有峰9個(gè)，得到標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。本發(fā)明所提供的方法建立的復(fù)方木尼孜其制劑HPLC指紋 圖譜與對(duì)照?qǐng)D譜的相似度均大于0.9,能有效的表征其質(zhì)量，有利于全面監(jiān)控產(chǎn)品的質(zhì)量； 本發(fā)明建立了復(fù)方木尼孜其制劑HPLC特征指紋圖譜共有模式，標(biāo)定了 9個(gè)共有峰，并成功 的表征了復(fù)方木尼孜其制劑中所含3種藥材（駱駝蓬子、甘草、黑種草子）的特征成分，建 立的指紋圖譜技術(shù)含量高，避免了復(fù)方木尼孜其制劑質(zhì)量控制的單一性和片面性，減少了 人為處理產(chǎn)品質(zhì)量達(dá)標(biāo)的可能性。該方法簡(jiǎn)便、穩(wěn)定、精密度高、重現(xiàn)性好，能從整體特征面 貌上控制復(fù)方木尼孜其制劑的質(zhì)量，保證其質(zhì)量穩(wěn)定、可控，從而確保復(fù)方木尼孜其制劑的 安全性和有效性，為復(fù)方木尼孜其制劑的質(zhì)量控制提供科學(xué)的依據(jù)。
[0006] 本發(fā)明中所述的一種復(fù)方木尼孜其制劑的指紋圖譜檢測(cè)方法，該方法W哈馬林對(duì) 照品為參照，采用高效液相色譜法測(cè)定其指紋圖譜，具體操作按下列步驟進(jìn)行：
[0007] a、供試品溶液的制備；取復(fù)方木尼孜顆粒15g，精密稱定，加入10-30ml水，加熱 溶解，冷卻，采用水飽和正下醇萃取2-3次，每次10-40ml，合并萃取液，蒸干后加入濃度為 30-70%甲醇5ml溶解過濾，過0. 22 y m的微孔濾膜，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；
[0008] b、對(duì)照品溶液的制備；取哈馬林對(duì)照品，精密稱定，加入甲醇制成每Iml含哈馬林 0. 3mg的溶液，過0. 22 y m的微孔濾膜，取續(xù)濾液作為對(duì)照品溶液；
[0009] C、測(cè)定；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5-15 y 1，注入高效液相色譜 儀，記錄60分鐘內(nèi)的色譜圖，用指紋圖譜軟件對(duì)圖譜進(jìn)行處理，即得復(fù)方木尼孜其顆粒的 指紋圖譜。
[0010] 步驟C中高效液相色譜測(cè)定的色譜條件為；W十八焼基娃焼鍵合娃膠為填充劑， W己膳為流動(dòng)相A，W含0. 6 %己酸的0. 68 %己酸饋緩沖鹽溶液為流動(dòng)相B，梯度洗脫，流動(dòng) 相 A、B 的比例變化為；0-5min，A 相 5%，B 相 95%;5-25min，A 相 18%，B 相 82%;25-30min， A 相 18%, B 相 82% ;30-45min, A 相 32%, B 相 68% ;45-60min, A 相 70%, B30% ;流速 0. 5-1. 5ml 'min-l，柱溫28-42°C，采用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器溫度55-65°C，理論培板數(shù)按哈馬 林峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
[0011] 步驟C中得到的復(fù)方木尼孜其制劑的指紋圖譜中有9個(gè)共有峰，由該9個(gè)共有峰 構(gòu)成復(fù)方木尼孜其制劑的指紋特征，作為復(fù)方木尼孜其制劑成分的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。
[0012] 本發(fā)明所述的復(fù)方木尼孜其制劑由茵香根皮、駱駝蓬子、茵芹果、洋甘菊、芹菜根、 菊宦子、黑種草子、菊宦根、香茅、香青蘭子、甘草、羅勒子和蜀葵子十H種干藥材按重量之 比2 : 2 : 2 : 1 : 1 : 1 : 1 : 1 : 1 : 1 : 1 : 1 : 1的比例稱取后水提煎煮H次， 第一次2小時(shí)、第二次1. 5小時(shí)，第H次1小時(shí)，合并煎煮液，濾過，濾液濃縮至在溫度5(TC 下相對(duì)密度為1. 32-1. 35的清膏，該清膏即為復(fù)方木尼孜其提取物，再加入常用醫(yī)學(xué)制藥 的適量輔料，制備成復(fù)方木尼孜其顆粒。
[0013] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有W下優(yōu)點(diǎn)：
[0014] 1.本發(fā)明所提供的復(fù)方木尼孜其制劑的指紋圖譜檢測(cè)方法，建立的復(fù)方木尼孜其 制劑HPLC指紋圖譜與對(duì)照?qǐng)D譜的相似度均大于0. 9,能有效的表征其質(zhì)量，有利于全面監(jiān) 控產(chǎn)品的質(zhì)量；
[00巧]2.本發(fā)明建立了復(fù)方木尼孜其制劑HPLC特征指紋圖譜共有模式，標(biāo)定了 9個(gè)共有 峰，建立的指紋圖譜技術(shù)含量高，9個(gè)共有峰中1號(hào)、5號(hào)、6號(hào)峰為藥材駱駝蓬子的特征性成 分，分別為鴨嘴花堿、哈馬林、哈明；4號(hào)、9號(hào)峰為藥材甘草的特征性成分，其中4號(hào)峰為甘 草巧；8號(hào)峰為藥材黑種草子的特征性成分；避免了復(fù)方木尼孜其制劑質(zhì)量控制的單一性 和片面性，減少了人為處理產(chǎn)品質(zhì)量達(dá)標(biāo)的可能性；
[0016] 3.由于指紋圖譜不是為了測(cè)定某個(gè)成分的精確含量，而是要充分反映化學(xué)成分的 信息，其出峰較多，反映的信息較完全；各個(gè)峰吸收值良好，基線平穩(wěn)，也避免了近紫外雜質(zhì) 峰較大吸收情況；
[0017] 4.本發(fā)明所述復(fù)方木尼孜其制劑的指紋圖譜檢測(cè)方法，所得復(fù)方木尼孜其制劑指 紋圖譜的峰多，峰形好，易于鑒別，相似性高，準(zhǔn)確可靠。
[0018] 5.本發(fā)明所述復(fù)方木尼孜其制劑的指紋圖譜檢測(cè)方法，W復(fù)方木尼孜其顆粒為 例，原因是市售的復(fù)方木尼孜其制劑僅有復(fù)方木尼孜其顆粒一種制劑類型。若出現(xiàn)其他復(fù) 方木尼孜其制劑類型，因藥物的物質(zhì)基礎(chǔ)沒有改變，所含化學(xué)成分無差異，因此，本發(fā)明所 述的復(fù)方木尼孜其制劑HPLC指紋圖譜檢測(cè)方法仍適用。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0019] 圖1為本發(fā)明測(cè)得的復(fù)方木尼孜其顆粒的共有模式圖譜；
[0020] 圖2為本發(fā)明復(fù)方木尼孜其顆粒精密度HPLC指紋圖譜；
[0021] 圖3為本發(fā)明復(fù)方木尼孜其顆粒重復(fù)性HPLC指紋圖譜；
[0022] 圖4為本發(fā)明復(fù)方木尼孜其顆粒穩(wěn)定性HPLC指紋圖譜；
[0023] 圖5為本發(fā)明12個(gè)批次復(fù)方木尼孜其顆粒指紋圖譜疊加圖。

【具體實(shí)施方式】
[0024] 實(shí)施例1 (選擇復(fù)方木尼孜顆粒）
[00巧]a、供試品溶液的制備；取復(fù)方木尼孜顆粒15g，精密稱定，加入IOml水，加熱溶解， 冷卻，采用水飽和正下醇萃取2次，每次IOml,合并萃取液，蒸干后加入體積濃度為30%甲 醇5ml溶解，過濾，過0. 22 y m的微孔濾膜，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；
[0026] b、對(duì)照品溶液的制備；取哈馬林對(duì)照品，精密稱定，加入甲醇制成每Iml含哈馬林 0. 3mg的溶液，過0. 22 y m的微孔濾膜，取續(xù)濾液作為對(duì)照品溶液；
[0027] C、測(cè)定；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5 y 1，注入高效液相色譜儀， 高效液相色譜測(cè)定的色譜條件為；W十八焼基娃焼鍵合娃膠為填充劑，W己膳為流動(dòng)相A， W含0. 6 %己酸的0. 68 %己酸饋緩沖鹽溶液為流動(dòng)相B，梯度洗脫，流動(dòng)相A、B的比例變化 為；0-5min，A 相 5%, B 相 95% ;5-25min，A 相 18%, B 相 82% ;25-30min，A 相 18%, B 相 82 % ;30-45min，A 相 32 %，B 相 68 % ;45-60min，A 相 70 %，B30 %;流速 0. 5-1. 5ml ，柱 溫28-42C，采用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器溫度55C，理論培板數(shù)按哈馬林峰計(jì)算應(yīng)不低于2000， 記錄60分鐘內(nèi)的色譜圖，用指紋圖譜軟件對(duì)圖譜進(jìn)行處理，即得復(fù)方木尼孜其顆粒的指紋 圖譜中有9個(gè)共有峰，由該9個(gè)共有峰構(gòu)成復(fù)方木尼孜其制劑的指紋特征，作為復(fù)方木尼孜 其制劑成分的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。
[0028] 實(shí)施例2 (選擇復(fù)方木尼孜顆粒）
[0029] a、供試品溶液的制備；取復(fù)方木尼孜顆粒15g，精密稱定，加入20ml水，加熱溶解， 冷卻，采用水飽和正下醇萃取3次，每次20ml，合并萃取液，蒸干后加入體積濃度為50%甲 醇5ml溶解，過濾，過0. 22 y m的微孔濾膜，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；
[0030] b、對(duì)照品溶液的制備；取哈馬林對(duì)照品，精密稱定，加入甲醇制成每Iml含哈馬林 0. 3mg的溶液，過0. 22 y m的微孔濾膜，取續(xù)濾液作為對(duì)照品溶液；
[0031] C、測(cè)定；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 y 1，注入高效液相色譜儀， 高效液相色譜測(cè)定的色譜條件為：W十八焼基娃焼鍵合娃膠為填充劑，W己膳為流動(dòng)相A， W含0. 6%己酸的0. 68%己酸饋緩沖鹽溶液為流動(dòng)相B，梯度洗脫，流動(dòng)相A、B的比例變化 為；0-5min，A 相 5%, B 相 95% ;5-25min，A 相 18%, B 相 82% ;25-30min，A 相 18%, B 相 82 % ;30-45min，A 相 32 %，B 相 68 % ;45-60min，A 相 70 %，B30 %;流速 0. 5-1. 5ml ，柱 溫28-42C，采用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器溫度6(TC，理論培板數(shù)按哈馬林峰計(jì)算應(yīng)不低于2000， 記錄60分鐘內(nèi)的色譜圖，用指紋圖譜軟件對(duì)圖譜進(jìn)行處理，即得復(fù)方木尼孜其顆粒的指紋 圖譜中有9個(gè)共有峰，由該9個(gè)共有峰構(gòu)成復(fù)方木尼孜其制劑的指紋特征，作為復(fù)方木尼孜 其制劑成分的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。
[0032] 實(shí)施例3 (選擇復(fù)方木尼孜顆粒）
[0033] a、供試品溶液的制備；取復(fù)方木尼孜顆粒15g，精密稱定，加入30ml水，加熱溶解， 冷卻，采用水飽和正下醇萃取3次，每次40ml，合并萃取液，蒸干后加入體積濃度為70%甲 醇5ml溶解，過濾，過0. 22 y m的微孔濾膜，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；
[0034] b、對(duì)照品溶液的制備；取哈馬林對(duì)照品，精密稱定，加入甲醇制成每Iml含哈馬林 0. 3mg的溶液，過0. 22 y m的微孔濾膜，取續(xù)濾液作為對(duì)照品溶液；
[00巧]C、測(cè)定；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各15 y 1，注入高效液相色譜儀， 高效液相色譜測(cè)定的色譜條件為：W十八焼基娃焼鍵合娃膠為填充劑，W己膳為流動(dòng)相A， W含0. 6%己酸的0. 68%己酸饋緩沖鹽溶液為流動(dòng)相B，梯度洗脫，流動(dòng)相A、B的比例變化 為；0-5min，A 相 5%, B 相 95% ;5-25min，A 相 18%, B 相 82% ;25-30min，A 相 18%, B 相 82 % ;30-45min，A 相 32 %，B 相 68 % ;45-60min，A 相 70 %，B30 %;流速 0. 5-1. 5ml ，柱 溫28-42C，采用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器溫度65C，理論培板數(shù)按哈馬林峰計(jì)算應(yīng)不低于2000， 記錄60分鐘內(nèi)的色譜圖，用指紋圖譜軟件對(duì)圖譜進(jìn)行處理，即得復(fù)方木尼孜其顆粒的指紋 圖譜中有9個(gè)共有峰，由該9個(gè)共有峰構(gòu)成復(fù)方木尼孜其制劑的指紋特征，作為復(fù)方木尼孜 其制劑成分的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。
[003引 實(shí)施例4
[0037] 供試品溶液的制備；取復(fù)方木尼孜顆粒15g，精密稱定，加入30ml水，加熱溶解，冷 卻，采用水飽和正下醇萃取3次，每次40ml，合并萃取液，蒸干后加入體積濃度為70%甲醇 5ml溶解，過濾，過0. 22 y m的微孔濾膜，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；
[0038] 精密度試驗(yàn)；取復(fù)方木尼孜其顆粒1份，制備供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，分別 對(duì)共有峰的相對(duì)保留時(shí)間及峰面積比值進(jìn)行考察，結(jié)果各共有峰相對(duì)保留時(shí)間RSD小于 0. 24%，相對(duì)峰面積比值RSD小于1. 35%，利用中國(guó)藥典委員會(huì)"中藥色譜指紋圖譜相似度 評(píng)價(jià)系統(tǒng)A版"，將HPLC圖譜導(dǎo)入，經(jīng)多點(diǎn)校正和數(shù)據(jù)匹配，W平均數(shù)法生成對(duì)照?qǐng)D譜，相似 度分別為 0. 989、0. 995、0. 997、0. 997、0. 989、0. 997,見圖 3 ;
[0039] 重復(fù)性試驗(yàn)；精密稱取同一批復(fù)方木尼孜其顆粒6份，制備供試品溶液，分別進(jìn) 樣，對(duì)共有峰的相對(duì)保留時(shí)間及峰面積比值進(jìn)行考察，結(jié)果各共有峰相對(duì)保留時(shí)間RSD小 于0. 28 %，相對(duì)峰面積比值RSD小于2. 87 %，利用中國(guó)藥典委員會(huì)"中藥色譜指紋圖譜相似 度評(píng)價(jià)系統(tǒng)A版"，將HPLC圖譜導(dǎo)入，經(jīng)多點(diǎn)校正和數(shù)據(jù)匹配，W平均數(shù)法生成對(duì)照?qǐng)D譜，相 似度分別為 0. 977、0. 986、0. 993、0. 994、0. 983、0. 991，見圖 4 ;
[0040] 穩(wěn)定性試驗(yàn)；精密稱取復(fù)方木尼孜其顆粒1份，制備供試品溶液，分別在時(shí)間0、2、 4、8、12、24、36、4她進(jìn)樣分析，對(duì)共有峰的相對(duì)保留時(shí)間及峰面積比值進(jìn)行考察，結(jié)果各共 有峰相對(duì)保留時(shí)間RSD小于0. 49%，相對(duì)峰面積比值RSD小于2. 74%，利用中國(guó)藥典委員 會(huì)"中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)A版"，將HPLC圖譜導(dǎo)入，經(jīng)多點(diǎn)校正和數(shù)據(jù)匹配， W平均數(shù)法生成對(duì)照?qǐng)D譜，相似度分別為0. 994、0. 992、0. 992、0. 989、0. 985、0. 985、0. 967、 0. 993,見圖 5。
[00川 實(shí)施例5
[0042] 分別稱取12批復(fù)方木尼孜其顆粒各15g，加入IOml水，加熱溶解，冷卻，采用水飽 和正下醇萃取3次，每次30ml，合并正下醇液蒸干后加體積濃度70%甲醇5ml溶解，過濾， 進(jìn)樣，對(duì)共有峰的相對(duì)保留時(shí)間及峰面積比值進(jìn)行考察，結(jié)果見表1、表2 ;利用中國(guó)藥典委 員會(huì)"中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)A版"，將12批復(fù)方木尼孜其顆粒HPLC圖譜導(dǎo) 入，經(jīng)多點(diǎn)校正和數(shù)據(jù)匹配，W平均數(shù)法生成對(duì)照?qǐng)D譜，15批相似度分別為0. 989、0. 989、 0.991、0.987、0.991、0.988、0.986、0.994、0. 979、0. 990、0. 967 ;
[0043] 表1復(fù)方木尼孜其顆粒指紋對(duì)照?qǐng)D譜12批次共有峰相對(duì)保留時(shí)間
[0044]

【權(quán)利要求】
1. 一種復(fù)方木尼孜其制劑的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于該方法以哈馬林對(duì)照品為 參照，采用高效液相色譜法測(cè)定其指紋圖譜，具體操作按下列步驟進(jìn)行： a、 供試品溶液的制備：取復(fù)方木尼孜顆粒15g，精密稱定，加入10-30ml水，加熱溶解， 冷卻，采用水飽和正丁醇萃取2-3次，每次10-40ml，合并萃取液，蒸干后加入濃度為30-70% 甲醇5ml溶解過濾，過0. 22 μ m的微孔濾膜，取續(xù)濾液，作為供試品溶液； b、 對(duì)照品溶液的制備：取哈馬林對(duì)照品，精密稱定，加入甲醇制成每lml含哈馬林 〇. 3mg的溶液，過0. 22 μ m的微孔濾膜，取續(xù)濾液作為對(duì)照品溶液； c、 測(cè)定：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5-15 μ 1，注入高效液相色譜儀，記 錄60分鐘內(nèi)的色譜圖，用指紋圖譜軟件對(duì)圖譜進(jìn)行處理，即得復(fù)方木尼孜其顆粒的指紋圖 譜。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)方木尼孜其制劑的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于步驟 c中高效液相色譜測(cè)定的色譜條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈為流動(dòng) 相Α，以含0. 6%乙酸的0. 68%乙酸銨緩沖鹽溶液為流動(dòng)相Β，梯度洗脫，流動(dòng)相A、Β的比 例變化為：〇_5min，Α 相 5%，Β 相 95% ;5-25min，Α 相 18%，Β 相 82% ;25-30min，Α 相 18%，Β 相 82% ;30-45min，A 相 32%，B 相 68% ;45-60min，A 相 70%，B30% ;流速 0· 5-L 5ml · min-1， 柱溫28-42°C，采用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器溫度55-65°C，理論塔板數(shù)按哈馬林峰計(jì)算應(yīng)不低于 2000。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)方木尼孜其制劑的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于步驟c 中得到的復(fù)方木尼孜其制劑的指紋圖譜中有9個(gè)共有峰，由這9個(gè)共有峰構(gòu)成復(fù)方木尼孜 其制劑的指紋特征，作為復(fù)方木尼孜其制劑成分的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，其中9個(gè)共有峰中1號(hào)、 5號(hào)、6號(hào)峰為藥材駱駝蓬子的特征性成分，分別為鴨嘴花堿、哈馬林、哈明；4號(hào)、9號(hào)峰為藥 材甘草的特征性成分，其中4號(hào)峰為甘草苷；8號(hào)峰為藥材黑種草子的特征性成分。
【文檔編號(hào)】G01N30/06GK104237422SQ201410555722
【公開日】2014年12月24日 申請(qǐng)日期:2014年10月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月17日
【發(fā)明者】田芳, 馬璇, 劉臘才, 劉子甲 申請(qǐng)人:新疆維吾爾藥業(yè)有限責(zé)任公司