一種液質(zhì)聯(lián)用定量檢測(cè)小鼠體內(nèi)s-構(gòu)型利伐沙班及r-構(gòu)型利伐沙班藥物濃度的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)一種液質(zhì)聯(lián)用定量檢測(cè)小鼠體內(nèi)S-構(gòu)型利伐沙班及R-構(gòu)型利伐沙班藥物濃度的方法，即首先將小鼠血漿樣品進(jìn)行預(yù)處理，然后將預(yù)處理后小鼠血漿樣品依次經(jīng)液相、質(zhì)譜聯(lián)用進(jìn)行分析，最后采用外標(biāo)法定量，使用峰面積計(jì)算出血漿中S-構(gòu)型利伐沙班及R-構(gòu)型利伐沙班藥物濃度。該方法縮短了手性分離的時(shí)間，分析時(shí)間僅為13min。該方法的檢測(cè)限為3ng/mL，定量限為10ng/mL，在0.01-10μg/mL范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好，方法的回收率在86-112%之間，日內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.50-8.86%，日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為8.39-17.6%，滿(mǎn)足小鼠體內(nèi)S-構(gòu)型利伐沙班及R-構(gòu)型利伐沙班藥物濃度檢測(cè)分析的要求。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種液質(zhì)聯(lián)用定量檢測(cè)小鼠體內(nèi)S-構(gòu)型利伐沙班及R-構(gòu) 型利伐沙班藥物濃度的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥檢測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及一種檢測(cè)血漿中利伐沙班藥物S-構(gòu)型及其 異構(gòu)體R-構(gòu)型含量的方法，具體涉及液質(zhì)聯(lián)用定量檢測(cè)小鼠體內(nèi)S-構(gòu)型利伐沙班及R-構(gòu) 型利伐沙班藥物濃度的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 利伐沙班是一種新的口服抗凝藥物，是一個(gè)具有高度選擇性和競(jìng)爭(zhēng)性直接抑制 呈游離狀態(tài)的Xa因子的藥物，而且還可抑制結(jié)合狀態(tài)的Xa因子以及凝血酶原活性，對(duì)血 小板聚集沒(méi)有直接作用。其具有生物利用度高，治療疾病譜廣，量效關(guān)系穩(wěn)定，口服方便， 出血風(fēng)險(xiǎn)低的特點(diǎn)。利伐沙班（rivaroxaban, BAY5927939,商品名：Xarelto)化學(xué)名 為：5_氯-N-{[2-氧代-3-[4- (3-氧嗎啉-4-基)苯基]噁唑烷酮-5 (S)-基]甲基}噻 吩-2-羧酰胺。其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下所示：

【權(quán)利要求】
1. 一種液質(zhì)聯(lián)用定量檢測(cè)小鼠體內(nèi)S-構(gòu)型利伐沙班及R-構(gòu)型利伐沙班藥物濃度的方 法，其特征在于具體包括如下步驟： (1) 、樣品預(yù)處理 采用液液萃取的方法，以二氯甲烷作萃取劑，取50 y L小鼠血漿樣品，加150 y L二氯甲 烷，渦旋震蕩l〇s，以lOOOOr/min轉(zhuǎn)速，離心分離lOmin，用移液槍移取下層清液于I. 5mL 離心管中，用N2吹干，用50 L乙腈超聲溶解后進(jìn)液質(zhì)分析； (2) 、液相分析方法 所用的儀器，高效液相色譜儀為Waters公司的ACQUITY UPLC ; 液相色譜柱：CHIRALPAK IC 250mm*4. 6mm 5 ii m ; 流動(dòng)相：按體積百分比計(jì)算，由乙腈：水：甲酸為97%:3%:0. 1%的比例組成的混合溶劑， 單通道等度洗脫； 流速：〇? 9mL/min ; 柱溫:室溫； 進(jìn)樣量：20ii L ; 檢測(cè)波長(zhǎng)：全波段掃描； 采用柱后分流的方法，液相流速為〇. 9mL/min,進(jìn)質(zhì)譜流速為0. 3mL/min ; (3)、質(zhì)譜分析方法 所用的儀器，質(zhì)譜儀為Waters公司的Quattro Premier XE,采用高純液氮經(jīng)汽化所得 的氮?dú)庾鳛榕鲎矚?、霧化氣、輔助氣、錐孔氣，并維持系統(tǒng)的真空狀態(tài)； 質(zhì)譜過(guò)程控制參數(shù)如下： 采用ESI正離子掃描模式進(jìn)行多反應(yīng)監(jiān)測(cè)，錐孔電壓35. OV ;毛細(xì)管電壓3. 28kv ;離子 源溫度115°C ;去溶劑溫度400°C ;去溶劑氣流量600L/hr ;錐孔氣流量50L/hr，定量離子對(duì) 為 436. 0/144. 9 ; (4)、采用外標(biāo)法定量，使用峰面積計(jì)算出血漿中S-構(gòu)型利伐沙班及R-構(gòu)型利伐沙班 藥物濃度。
2. 如權(quán)利要求1所述的液質(zhì)聯(lián)用定量檢測(cè)小鼠體內(nèi)S-構(gòu)型利伐沙班及R-構(gòu)型利伐沙 班藥物濃度的方法，其特征在于所述的血漿樣品是小鼠灌胃給藥溶液后的血漿； 所述的給藥溶液是濃度分別為I. Omg/mL利伐沙班消旋體溶液和S-構(gòu)型利伐沙班溶 液； 給藥溶液配制所用的溶劑是由乙醇、分子量為400的聚乙二醇和水的體積比例為 20:60:20組成的混合溶液。
【文檔編號(hào)】G01N30/88GK104316639SQ201410607169
【公開(kāi)日】2015年1月28日 申請(qǐng)日期:2014年11月3日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月3日
【發(fā)明者】潘仙華, 閆茜, 張瑞敏, 于一文, 徐娜, 許旭, 陳思羽 申請(qǐng)人:上海應(yīng)用技術(shù)學(xué)院