一種測定茶多酚的共振瑞利散射光譜法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種簡單快速測定茶多酚的共振瑞利散射光譜法，包括如下步驟：（1）制備茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液體系；（2）制備空白對照溶液體系；（3）分別測定茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液體系和空白對照溶液體系的共振瑞利散射峰強(qiáng)度值 I 標(biāo)準(zhǔn)及 I 空白，計(jì)算Δ I = I 空白– I 標(biāo)準(zhǔn)；（4）以Δ I 對茶多酚的濃度關(guān)系做工作曲線；（5）被測物樣品的測定，計(jì)算Δ I 樣= I 空白- I 樣；（6）根據(jù)樣品測得的Δ I 樣，查步驟（4）的工作曲線，計(jì)算出被測物中茶多酚的含量。本測定方法的儀器簡單，操作快速，靈敏度高、選擇性好。
【專利說明】一種測定茶多酚的共振瑞利散射光譜法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及分析化學(xué)領(lǐng)域，具體是測定茶多酚的共振瑞利散射光譜法。

【背景技術(shù)】
[0002]茶葉源于中國，傳播于世界，是世界三大飲料之一。茶水是中華民族的傳統(tǒng)保健飲品之一，其主要藥效成分是茶多酚即多羥基酚類物質(zhì)。茶多酚具有抗氧化作用和良好的藥理作用，高效的抗癌、抗病毒、抗衰老、抗輻射、抗突變、清除人體自由基、強(qiáng)心利尿、興奮中樞神經(jīng)、降血糖和血脂、治心血管病、抑菌抑酶、預(yù)防動脈硬化、抗齲護(hù)齒等多種作用。茶多酚的分析測定方法主要有福林酚比色法(新國標(biāo)法)、原子吸收法、近紅外光譜法、電化學(xué)分析法、高效液相色譜法、毛細(xì)管電泳法等，但未見茶多酚的共振瑞利散射光譜分析方法報(bào)道。本發(fā)明采用共振瑞利散射光譜法研究了鑰酸銨-茶多酚-碳納米微粒反應(yīng)體系，建立了一種檢測茶多酚的共振瑞利散射光譜方法。該方法具有靈敏度高、選擇性好、穩(wěn)定性高、操作簡單、速度快等特點(diǎn)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是為了提供一種簡單測定茶多酚的共振瑞利散射光譜法。
[0004]應(yīng)用共振瑞利散射光譜法測定茶多酚，包括如下步驟:
(1)制備茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液體系:取刻度試管，依次移取5?500μ L 0.1 mg/mL茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，120 ?200 μ? 0.2 mmol/L pH 5.0 HAc-NaAc 緩沖溶液，80 ?150 μ? 0.01 mol/L鑰酸銨溶液，350?450 μ? 15 Pg/mL碳納米微粒溶液，用二次蒸餾水定容至2.0 mL，混勻，靜置10 min ；
(2)制備空白對照溶液體系:用步驟(I)的方法不加茶多酚標(biāo)準(zhǔn)液制備空白對照溶液體系；
(3)分別取按步驟(I)、(2)制備的茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液體系及空白對照溶液體系適量，置于比色皿中，在熒光分光光度計(jì)上，同步掃描激發(fā)波長和發(fā)射波長，獲得體系的共振瑞利散射光譜，測定體系最大波長370 nm處茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液體系的共振瑞利散射峰強(qiáng)度值/，以及測定空白對照溶液體系的共振瑞利散射峰強(qiáng)度值忍，計(jì)算Λ J = 10-1,
(4)以ΛJ對茶多酚的濃度關(guān)系做工作曲線；
(5)被測物樣品測定:取含有茶多酚的待測樣品，按步驟(I)?(3)操作。算出被測物的Δ J樣=J0 - J樣；
(6)根據(jù)樣品測得的，查步驟(4)的工作曲線，計(jì)算出被測物中茶多酚的含量。
[0005]所述的碳納米微粒的制備方法是:稱取1mg乙炔黑置于50mL燒杯，加入2 mLHNO3和6 mL H2SO4,磁力攪拌器攪拌、50°C硝化4.5 h，將硝化后的溶液倒入36mL的二次蒸餾水中，冷卻至室溫，緩慢加入10 mol/L NaOH溶液調(diào)至中性，轉(zhuǎn)移到10mL容量瓶，用二次蒸餾水定容，得到100 μ g/mL碳納米微粒溶液。使用前用二次蒸餾水稀釋為15 μ g/mL作為工作溶液。
[0006]實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的原理是:鑰酸銨與茶多酚反應(yīng)生成黃色的鑰酸酯，鑰酸酯在酸性條件下能穩(wěn)定存在；當(dāng)有碳納米微粒時(shí)，隨著茶多酹的增加，反應(yīng)生成的鑰酸酯增多，370nm處的共振瑞利散射峰強(qiáng)度線性降低。據(jù)此可建立一個(gè)簡便快速測定茶多酚的共振瑞利散射光譜法。
[0007]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:與已有的方法相比，本測定方法操作簡便，靈敏度高、選擇性好、體系穩(wěn)定。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0008]圖1為本發(fā)明實(shí)施例測定茶多酚的部分共振瑞利散射光譜圖。
[0009]圖中:(a)pH 5.0 HAc-NaAc 緩沖溶液-0.Smmol /I,鑰酸銨-3.0 μ g/mL 碳納米微粒；(b) a+0.25 μ g/mL 茶多酌.； (c) a+5.0 μ g/mL 茶多酌.； (d) a+12.5 μ g/mL 茶多酹；(e) a+20 μ g/mL 茶多酹；(f) a+25 μ g/mL 茶多酹。

【具體實(shí)施方式】
[0010]實(shí)施例:
應(yīng)用共振瑞利散射光譜法測定茶多酚，包括如下步驟:
(1)制備茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液體系:取刻度試管，分別移取5，100，250，400，500μ L 0.1 mg/mL茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液加入到不同試管中，再在各試管中依次加入150 μ? 0.2 mmol/L pH 5.0HAc-NaAc緩沖溶液，100 μ? 0.01 mol/L鑰酸銨溶液，400 μ? 15 Pg/mL碳納米微粒溶液，用二次蒸餾水定容至2.0 mL，混勻，靜置lOmin，制成多個(gè)茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液體系；
(2)制備空白對照溶液體系:用步驟(I)的方法不加茶多酚標(biāo)準(zhǔn)液制備空白對照溶液體系；
(3)分別取按步驟(I)、(2)制備的茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液體系及空白對照溶液體系適量，置于比色皿中，在熒光分光光度計(jì)上，同步掃描激發(fā)波長和發(fā)射波長，獲得體系的共振瑞利散射光譜，測定體系最大波長370 nm處茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液體系的共振瑞利散射峰強(qiáng)度值/，以及測定空白對照溶液體系的共振瑞利散射峰強(qiáng)度值忍，計(jì)算Λ J = 10-1'
(4)以ΛJ對茶多酚的濃度關(guān)系做工作曲線；
(5)被測物樣品測定:取市售的黃山毛峰、云南大理普洱茶、湖南黑毛茶、西湖龍井茶、鐵觀音茶、霍山黃芽茶樣品，分別準(zhǔn)確稱取0.1g茶葉，于50mL的沸水中煮沸30min，用抽濾瓶抽濾，再將濾渣用50mL沸水煮沸20min，抽濾，合并兩次濾液，定容到10mL,得到6種不同的待測茶樣品溶液，移取10yL,按步驟(I)?(3)操作。算出被測物的AJti=Jc1-1
樣；
(6)根據(jù)樣品測得的△/#，查步驟(4)的工作曲線，計(jì)算出被測物中茶多酚的含量分別為 14.64%、13.26%, 9.72%, 25.36%、12.94%、19.41%。
[0011]本發(fā)明實(shí)施例測定茶多酚含量范圍為0.25?25 Pg/mL范圍，線性回歸方程為M= 103.7C+ 89.8，檢出限為 0.05 Pg/mL。
[0012]回收率實(shí)驗(yàn):分別移取步驟(5)的6個(gè)待測茶樣品溶液50 μ L，再加入7.5 μ g/mL茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，按步驟(I)?(3)操作，計(jì)算回收率分別是98.6?102.4%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.1%?2.8%。說明該方法正確可靠。
【權(quán)利要求】
1.一種簡單快速測定茶多酚的共振瑞利散射光譜法，其特征是:包括如下步驟: (1)制備茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液體系:取刻度試管，依次移取5?500μ L 0.1 mg/mL茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，120 ?200 μ? 0.2 mmol/L pH 5.0 HAc-NaAc 緩沖溶液，80 ?150 μ? 0.01 mol/L鑰酸銨溶液，350?450 μ? 15 Pg/mL碳納米微粒溶液，用二次蒸餾水定容至2.0 mL，混勻，靜置10 min ； (2)制備空白對照溶液體系:用步驟(I)的方法不加茶多酚標(biāo)準(zhǔn)液制備空白對照溶液體系； (3)分別取按步驟(I)、(2)制備的茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液體系及空白對照溶液體系適量，置于比色皿中，在熒光分光光度計(jì)上，同步掃描激發(fā)波長和發(fā)射波長，獲得體系的共振瑞利散射光譜，測定體系最大波長370 nm處茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液體系的共振瑞利散射峰強(qiáng)度值/，以及測定空白對照溶液體系的共振瑞利散射峰強(qiáng)度值忍，計(jì)算Λ J = 10-1, (4)以ΛJ對茶多酚的濃度關(guān)系做工作曲線； (5)被測物樣品測定:取含有茶多酚的待測樣品，按步驟(I)?(3)操作，算出被測物的Li鐵=Λι _ 7樣； (6)根據(jù)樣品測得的，查步驟(4)的工作曲線，計(jì)算出被測物中茶多酚的含量。
【文檔編號】G01N21/64GK104359879SQ201410613295
【公開日】2015年2月18日 申請日期:2014年11月5日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月5日
【發(fā)明者】梁愛惠, 王耀輝, 劉慶業(yè), 蔣治良 申請人:廣西師范大學(xué)