一種活體無(wú)損傷觀察二色補(bǔ)血草鹽腺的新方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種活體無(wú)損傷觀察二色補(bǔ)血草鹽腺的新方法，包括如下步驟：首先，采用乙烯基聚硅氧烷樹(shù)脂對(duì)二色補(bǔ)血草的葉片下表皮進(jìn)行負(fù)向印記；其次，將聚合的環(huán)氧樹(shù)脂涂抹在二色補(bǔ)血草葉片的負(fù)向印跡上，得葉片的正向印跡；最后，利用普通的光學(xué)顯微鏡和普通CCD照相設(shè)備，觀察并記錄葉片的正向印跡，得二色補(bǔ)血草葉片的生長(zhǎng)形態(tài)圖譜。與傳統(tǒng)的指甲油、火棉膠相比，真正實(shí)現(xiàn)了無(wú)損傷活體觀察，取完印跡后的葉片可以繼續(xù)培養(yǎng)，實(shí)現(xiàn)對(duì)葉片發(fā)育的完整跟蹤。本發(fā)明在其他植物葉片表皮的觀察中同樣有良好的觀察效果(如模式植物擬南芥等)。各觀察結(jié)果間可比性強(qiáng)，可準(zhǔn)確反映出細(xì)胞的形狀和行為對(duì)葉的形狀的影響。
【專利說(shuō)明】一種活體無(wú)損傷觀察二色補(bǔ)血草鹽腺的新方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于細(xì)胞學(xué)領(lǐng)域，特別涉及一種活體無(wú)損傷觀察二色補(bǔ)血草鹽腺的新方法。

【背景技術(shù)】
[0002]在植物發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞的大小和形狀對(duì)植物形態(tài)建成具有重要的貢獻(xiàn)(Kim andSinha, 2003 ；Guimil and Dunand, 2006)。Tsukaya(2003)提出的細(xì)胞決定理論，則認(rèn)為細(xì)胞是生物體的基本單位，也是器官發(fā)生和形態(tài)建成的單位，細(xì)胞的形狀和行為決定了葉的形狀。這種理論強(qiáng)調(diào)，葉的最終形狀是細(xì)胞學(xué)水平各種狀態(tài)的疊加，并在原有細(xì)胞理論的基礎(chǔ)上增加了新內(nèi)容，認(rèn)為細(xì)胞的狀態(tài)和行為之間存在著相互影響，特別是葉細(xì)胞數(shù)量和體積相互補(bǔ)償。因此，研究植物發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞數(shù)目和大小的變化對(duì)闡明植物發(fā)育過(guò)程中的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)理論具有十分重要的意義。
[0003]在細(xì)胞學(xué)、育種學(xué)以及植物生理學(xué)的研究過(guò)程中，經(jīng)常需要測(cè)定葉下表皮氣孔的分布、形狀和大小等數(shù)據(jù)。許多研究者會(huì)直接撕取植物材料的表皮制成臨時(shí)裝片，在顯微鏡下觀察，或采用印跡法，即在植物葉的表面涂抹火棉膠(或牛皮膠液)和醋酸纖維素膠液等，還有人利用指甲油(Ferris and Tayler, 1994 ;林月惠，1996 ;Berger andAltmann, 2000)和乒乓球制液(張秀芳等，2002)，膠體風(fēng)干后凝成薄膜，此膜就印有表皮組織各細(xì)胞的界跡邊痕及氣孔結(jié)構(gòu)。該種方法的優(yōu)點(diǎn)是膠膜干燥速度快，缺點(diǎn)是薄膜太薄，在取下的過(guò)程中薄膜易拉伸變形。更重要是，上述方法都只能用于觀察離體葉片，缺乏對(duì)同一葉片不同生長(zhǎng)階段形態(tài)信息的記錄，導(dǎo)致各觀察結(jié)果間可比性差，無(wú)法準(zhǔn)確反映出細(xì)胞的形狀和行為對(duì)葉的形狀的影響。這些傳統(tǒng)方法均是離體取材，對(duì)葉片產(chǎn)生了不可逆轉(zhuǎn)的損害，無(wú)法實(shí)現(xiàn)葉片發(fā)育的連續(xù)觀察，所以實(shí)現(xiàn)對(duì)葉片表皮結(jié)構(gòu)的活體連續(xù)觀察意義重大。
[0004]另外，現(xiàn)有的技術(shù)主要針對(duì)氣孔等表皮結(jié)構(gòu)展開(kāi)，而本發(fā)明采用的二色補(bǔ)血草具有一種特有的表皮結(jié)構(gòu)——鹽腺，如何活體跟蹤鹽腺的發(fā)育成為了技術(shù)上的瓶頸問(wèn)題。


【發(fā)明內(nèi)容】

:
[0005]針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明采用活體葉片兩次印跡，并可以針對(duì)同一葉片同一鹽腺的生長(zhǎng)變化進(jìn)行觀察，避免了傳統(tǒng)的離體方法對(duì)葉片的損害。而且在對(duì)鹽腺觀察的基礎(chǔ)上，可以應(yīng)用到氣孔和其他植物的表皮結(jié)構(gòu)的觀察。與傳統(tǒng)的指甲油、火棉膠相比，真正實(shí)現(xiàn)了無(wú)損傷活體觀察，取完印跡后的葉片可以繼續(xù)培養(yǎng)，實(shí)現(xiàn)對(duì)葉片發(fā)育的完整跟蹤。
[0006]為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:
[0007]—種活體無(wú)損傷觀察二色補(bǔ)血草鹽腺的新方法，包括如下步驟:
[0008]I)將乙烯基聚硅氧烷樹(shù)脂，涂抹在待測(cè)二色補(bǔ)血草的葉片下表皮，靜置5-10min，挑起樹(shù)脂，得二色補(bǔ)血草葉片的負(fù)向印記；
[0009]2)將取完印跡的待測(cè)二色補(bǔ)血草放回培養(yǎng)室繼續(xù)培養(yǎng)I?2小時(shí)后，即可再次進(jìn)行印跡，為待印跡二色補(bǔ)血草；
[0010]3)將聚合的環(huán)氧樹(shù)脂涂抹在二色補(bǔ)血草葉片的負(fù)向印跡上，待凝固后，揭下涂層，得葉片的正向印跡，即完整的葉片復(fù)制體；
[0011]4)利用普通的光學(xué)顯微鏡和普通CXD照相設(shè)備，觀察并記錄葉片的正向印跡，即得二色補(bǔ)血草葉片下表皮形態(tài)圖1;
[0012]5)取步驟2)中待印跡的二色補(bǔ)血草，在葉片的相同位置，重復(fù)步驟1)_4)，即得二色補(bǔ)血草葉片下表皮形態(tài)圖1I ；
[0013]6)多次重復(fù)上述步驟1-5，即得二色補(bǔ)血草葉片表皮各結(jié)構(gòu)的生長(zhǎng)形態(tài)圖譜。
[0014]進(jìn)一步地，所述二色補(bǔ)血草葉片的下表皮包括表皮細(xì)胞、鹽腺細(xì)胞、氣孔。
[0015]優(yōu)選的是，所述的二色補(bǔ)血草為萌發(fā)6?30天的二色補(bǔ)血草幼苗。
[0016]更優(yōu)選的是，所述的二色補(bǔ)血草為萌發(fā)8?12天的二色補(bǔ)血草幼苗。
[0017]上述的方法在觀察模式植物擬南芥葉片表皮方面有很好的應(yīng)用(如圖3所示)。
[0018]上述的方法在觀察植物幼苗葉片表皮結(jié)構(gòu)方面的應(yīng)用。
[0019]本發(fā)明還提供了一種活體無(wú)損傷觀察擬南芥葉片的新方法，包括如下步驟:
[0020]I)將乙烯基聚硅氧烷樹(shù)脂，涂抹在待測(cè)擬南芥的葉片下表皮，靜置5-10min，挑起樹(shù)脂，得擬南芥葉片的負(fù)向印記；
[0021]2)將取完印跡的待測(cè)擬南芥放回培養(yǎng)室繼續(xù)培養(yǎng)I?2小時(shí)后，即可再次進(jìn)行印跡，為待印跡擬南芥；
[0022]3)將聚合的環(huán)氧樹(shù)脂涂抹在擬南芥葉片的負(fù)向印跡上，待凝固后，揭下涂層，得葉片的正向印跡，即完整的葉片復(fù)制體；
[0023]4)利用普通的光學(xué)顯微鏡和普通CXD照相設(shè)備，觀察并記錄葉片的正向印跡，即得擬南芥葉片下表皮形態(tài)圖1;
[0024]5)取步驟2)中待印跡的擬南芥，在葉片的相同位置，重復(fù)步驟1)_4)，即得擬南芥葉片下表皮形態(tài)圖1I。
[0025]6)多次重復(fù)上述步驟1-5，即得擬南芥葉片的生長(zhǎng)形態(tài)圖。
[0026]進(jìn)一步地，所述擬南芥葉片的下表皮包括表皮細(xì)胞、氣孔。
[0027]優(yōu)選的是，所述的擬南芥為萌發(fā)6?30天的擬南芥幼苗。
[0028]更優(yōu)選的是，所述的擬南芥為萌發(fā)8?12天的擬南芥幼苗。
[0029]本發(fā)明還提供了一種活體無(wú)損傷觀察植物幼苗葉片下表皮結(jié)構(gòu)的新方法，包括如下步驟:
[0030]I)將乙烯基聚硅氧烷樹(shù)脂，涂抹在待測(cè)植物幼苗的葉片下表皮，靜置，待樹(shù)脂變硬后，
[0031]挑起樹(shù)脂，得二色補(bǔ)血草葉片的負(fù)向印記；
[0032]2)將取完印跡的待測(cè)植物幼苗放回培養(yǎng)室繼續(xù)培養(yǎng)I?2小時(shí)后，即可再次進(jìn)行印跡，為待印跡植物幼苗；
[0033]3)將聚合的環(huán)氧樹(shù)脂涂抹在植物幼苗葉片的負(fù)向印跡上，待凝固后，揭下涂層，得葉片的正向印跡，即完整的葉片復(fù)制體；
[0034]4)利用普通的光學(xué)顯微鏡和普通CXD照相設(shè)備，觀察并記錄葉片的正向印跡，即得植物幼苗葉片下表皮形態(tài)圖1;
[0035]5)取步驟2)中待印跡的二色補(bǔ)血草，在葉片的相同位置，重復(fù)步驟1)-4)，即得植物幼苗葉片下表皮形態(tài)圖1I。
[0036]6)多次重復(fù)上述步驟1-5，即得植物幼苗葉片表皮各結(jié)構(gòu)的生長(zhǎng)形態(tài)圖譜。
[0037]本發(fā)明有益的效果是:
[0038]1.本發(fā)明與傳統(tǒng)的指甲油、火棉膠相比，真正實(shí)現(xiàn)了無(wú)損傷活體觀察，取完印跡后的葉片可以繼續(xù)培養(yǎng)，實(shí)現(xiàn)對(duì)葉片發(fā)育的完整跟蹤。第一次負(fù)向印跡采用的樹(shù)脂是“乙烯基聚硅氧烷樹(shù)脂”，在醫(yī)學(xué)中一般用于牙科的印模，具有可滲透性好、精細(xì)程度高和無(wú)損害性的優(yōu)點(diǎn)，本發(fā)明首次將其用于植物葉片，能夠保證對(duì)葉片進(jìn)行的是活體觀察，即不需要將葉片取下，直接在生長(zhǎng)的葉片上進(jìn)行操作，取下樹(shù)脂印跡后葉片還可以繼續(xù)生長(zhǎng)，而葉片表皮此時(shí)的發(fā)育狀態(tài)就完全印跡在樹(shù)脂上，所以該“乙烯基聚硅氧烷樹(shù)脂”與普通的指甲油、火棉膠相比，最大的優(yōu)勢(shì)是獲得葉片印跡后，葉片可以繼續(xù)放回培養(yǎng)，可以針對(duì)同一個(gè)葉片進(jìn)行連續(xù)的跟蹤觀察，對(duì)于觀察葉片的分化有重要作用。而普通的指甲油、火棉膠處理后的葉片已經(jīng)死亡，無(wú)法對(duì)葉片進(jìn)行連續(xù)的跟蹤觀察。
[0039]2.本發(fā)明通過(guò)兩次印跡獲得了葉片復(fù)制體，與常規(guī)的一次印跡后的膠膜相比，其突出的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)是，采用的兩種樹(shù)脂連續(xù)印跡方法，獲得的是葉片的正向印跡，觀察植物葉片的結(jié)構(gòu)和發(fā)育時(shí)更加直觀。傳統(tǒng)對(duì)葉片的印跡觀察采用的是一次印跡，獲得的是負(fù)向印跡，本發(fā)明巧妙的利用了兩種不同的樹(shù)脂材料進(jìn)行兩次印跡，實(shí)現(xiàn)了葉片的正向印跡觀察。
[0040]3.本發(fā)明不僅適用于二色補(bǔ)血草鹽腺及表皮結(jié)構(gòu)的觀察，而且在其他植物的表皮，如模式植物擬南芥中，同樣有較好的觀察效果，可以清楚的觀察到擬南芥的氣孔和表皮細(xì)胞等結(jié)構(gòu)(圖3)。
[0041]4.本發(fā)明通過(guò)對(duì)同一葉片不同生長(zhǎng)階段形態(tài)信息的連續(xù)記錄，實(shí)現(xiàn)了無(wú)損傷活體觀察，各觀察結(jié)果間可比性強(qiáng)，可準(zhǔn)確反映出細(xì)胞的形狀和行為對(duì)葉的形狀的影響以及二色補(bǔ)血草的鹽腺幼苗時(shí)期的生長(zhǎng)狀況和變化規(guī)律。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0042]圖1 二色補(bǔ)血草活體無(wú)損傷觀察鹽腺的流程圖
[0043]圖2利用兩次印跡法觀察二色補(bǔ)血草鹽腺
[0044]圖3利用兩次印跡法觀察擬南芥葉片表皮

【具體實(shí)施方式】
[0045]下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的闡述。應(yīng)該說(shuō)明的是，下述說(shuō)明僅是為了解釋本發(fā)明，并不對(duì)其內(nèi)容進(jìn)行限定。
[0046]實(shí)施例1:
[0047]實(shí)驗(yàn)材料:二色補(bǔ)血草(Limonium bicolor)萌發(fā)6天的幼苗,觀察真葉的發(fā)育。
[0048]實(shí)驗(yàn)試劑:乙烯基聚硅氧烷(樹(shù)脂材料)，聚合的環(huán)氧樹(shù)脂。(皆為市售產(chǎn)品)
[0049]實(shí)驗(yàn)儀器:普通光學(xué)顯微鏡，普通CXD照相設(shè)備。
[0050]實(shí)驗(yàn)步驟:
[0051]I)將乙烯基聚硅氧烷樹(shù)脂，涂抹在二色補(bǔ)血草的葉片下表皮，靜置7.5min，利用注射器的尖頭將樹(shù)脂挑起，得二色補(bǔ)血草葉片的負(fù)向印記；
[0052]2)將步驟I)中取完印跡的二色補(bǔ)血草放回培養(yǎng)室繼續(xù)培養(yǎng)1.5h，使葉片繼續(xù)生長(zhǎng)分化，即可再次進(jìn)行印跡，記為待印跡二色補(bǔ)血草；
[0053]3)將環(huán)氧樹(shù)脂AB膠水涂抹在二色補(bǔ)血草葉片的負(fù)向印跡上，待凝固后，揭下涂層，得葉片的正向印跡，即完整的葉片復(fù)制體；
[0054]4)利用普通的光學(xué)顯微鏡和普通CXD照相設(shè)備，觀察并記錄葉片的正向印跡，即得二色補(bǔ)血草葉片下表皮形態(tài)圖1;
[0055]5)取步驟2)中待印跡的二色補(bǔ)血草，在葉片的相同位置，重復(fù)步驟1)_4)，即得二色補(bǔ)血草葉片下表皮形態(tài)圖1I。
[0056]6)每隔1.5h重復(fù)上述步驟I)-5)，即得二色補(bǔ)血草葉片表皮各結(jié)構(gòu)的生長(zhǎng)形態(tài)圖
-1'TfeP曰。
[0057]實(shí)施例2:
[0058]實(shí)驗(yàn)材料:二色補(bǔ)血草(Limonium bicolor)萌發(fā)30天的幼苗,觀察真葉的發(fā)育。
[0059]實(shí)驗(yàn)試劑:乙烯基聚硅氧烷(樹(shù)脂材料)，聚合的環(huán)氧樹(shù)脂。(皆為市售產(chǎn)品)
[0060]實(shí)驗(yàn)儀器:普通光學(xué)顯微鏡，普通CXD照相設(shè)備。
[0061]實(shí)驗(yàn)步驟:
[0062]I)將乙烯基聚硅氧烷樹(shù)脂，涂抹在二色補(bǔ)血草的葉片下表皮，靜置lOmin，利用注射器的尖頭將樹(shù)脂挑起，得二色補(bǔ)血草葉片的負(fù)向印記；
[0063]2)將步驟I)中取完印跡的二色補(bǔ)血草放回培養(yǎng)室繼續(xù)培養(yǎng)2h，即可再次進(jìn)行印跡，記為待印跡二色補(bǔ)血草；
[0064]3)將無(wú)色指甲油涂抹在二色補(bǔ)血草葉片的負(fù)向印跡上，待凝固后，揭下涂層，得葉片的正向印跡，即完整的葉片復(fù)制體；
[0065]4)利用普通的光學(xué)顯微鏡和普通CXD照相設(shè)備，觀察并記錄葉片的正向印跡，即得二色補(bǔ)血草葉片下表皮形態(tài)圖1;
[0066]5)取步驟2)中待印跡的二色補(bǔ)血草，在葉片的相同位置，重復(fù)步驟1)_4)，即得二色補(bǔ)血草葉片下表皮形態(tài)圖1I。
[0067]6)每隔2h重復(fù)上述步驟1)-5)，即得二色補(bǔ)血草葉片表皮各結(jié)構(gòu)的生長(zhǎng)形態(tài)圖
-1'TfeP曰。
[0068]實(shí)施例3:
[0069]實(shí)驗(yàn)材料:二色補(bǔ)血草(Limonium bicolor)萌發(fā)10天的幼苗,觀察真葉的發(fā)育。
[0070]實(shí)驗(yàn)試劑:乙烯基聚硅氧烷(樹(shù)脂材料)，聚合的環(huán)氧樹(shù)脂。(皆為市售產(chǎn)品)
[0071]實(shí)驗(yàn)儀器:普通光學(xué)顯微鏡，普通CXD照相設(shè)備。
[0072]實(shí)驗(yàn)步驟:
[0073]I)將乙烯基聚硅氧烷樹(shù)脂，涂抹在二色補(bǔ)血草的葉片下表皮，靜置5min，利用注射器的尖頭將樹(shù)脂挑起，得二色補(bǔ)血草葉片的負(fù)向印記；
[0074]2)將步驟I)中取完印跡的二色補(bǔ)血草放回培養(yǎng)室繼續(xù)培養(yǎng)lh，即可再次進(jìn)行印跡，記為待印跡二色補(bǔ)血草；
[0075]3)將環(huán)氧樹(shù)脂AB膠水涂抹在二色補(bǔ)血草葉片的負(fù)向印跡上，待凝固后，揭下涂層，得葉片的正向印跡，即完整的葉片復(fù)制體；
[0076]4)利用普通的光學(xué)顯微鏡和普通CXD照相設(shè)備，觀察并記錄葉片的正向印跡，即得二色補(bǔ)血草葉片下表皮形態(tài)圖1;
[0077]5)取步驟2)中待印跡的二色補(bǔ)血草，在葉片的相同位置，重復(fù)步驟1)_4)，即得二色補(bǔ)血草葉片下表皮形態(tài)圖1I。
[0078]6)每隔Ih重復(fù)上述步驟1)_5)，即得二色補(bǔ)血草葉片表皮各結(jié)構(gòu)的生長(zhǎng)形態(tài)圖
-1'TfeP曰。
[0079]實(shí)施例4:
[0080]實(shí)驗(yàn)材料:二色補(bǔ)血草(Limonium bicolor)萌發(fā)20天的幼苗,觀察真葉的發(fā)育。
[0081]實(shí)驗(yàn)試劑:乙烯基聚硅氧烷(樹(shù)脂材料)，聚合的環(huán)氧樹(shù)脂。(皆為市售產(chǎn)品)
[0082]實(shí)驗(yàn)儀器:普通光學(xué)顯微鏡，普通CXD照相設(shè)備。
[0083]實(shí)驗(yàn)步驟:
[0084]I)將乙烯基聚硅氧烷樹(shù)脂，涂抹在二色補(bǔ)血草的葉片下表皮，待樹(shù)脂變硬后，利用注射器的尖頭將樹(shù)脂挑起，得二色補(bǔ)血草葉片的負(fù)向印記；
[0085]2)將步驟I)中取完印跡的二色補(bǔ)血草放回培養(yǎng)室繼續(xù)培養(yǎng)1.5h，即可再次進(jìn)行印跡，記為待印跡二色補(bǔ)血草；
[0086]3)將環(huán)氧樹(shù)脂AB膠水涂抹在二色補(bǔ)血草葉片的負(fù)向印跡上，待凝固后，揭下涂層，得葉片的正向印跡，即完整的葉片復(fù)制體；
[0087]4)利用普通的光學(xué)顯微鏡和普通CXD照相設(shè)備，觀察并記錄葉片的正向印跡，即得二色補(bǔ)血草葉片下表皮形態(tài)圖1;
[0088]5)取步驟2)中待印跡的二色補(bǔ)血草，在葉片的相同位置，重復(fù)步驟1)_4)，即得二色補(bǔ)血草葉片下表皮形態(tài)圖1I。
[0089]6)每隔1.5h重復(fù)上述步驟I)-5)，即得二色補(bǔ)血草葉片表皮各結(jié)構(gòu)的生長(zhǎng)形態(tài)圖
-1'TfeP曰。
[0090]實(shí)施例5:
[0091]實(shí)驗(yàn)材料:擬南芥萌發(fā)15天的幼苗，觀察真葉的發(fā)育。
[0092]實(shí)驗(yàn)試劑:乙烯基聚硅氧烷(樹(shù)脂材料)，聚合的環(huán)氧樹(shù)脂。(皆為市售產(chǎn)品)
[0093]實(shí)驗(yàn)儀器:普通光學(xué)顯微鏡，普通CXD照相設(shè)備。
[0094]實(shí)驗(yàn)步驟:
[0095]I)將乙烯基聚硅氧烷樹(shù)脂，涂抹在擬南芥的葉片下表皮，靜置7.5min，挑起樹(shù)脂，得擬南芥葉片的負(fù)向印記；
[0096]2)將步驟I)中取完印跡的擬南芥放回培養(yǎng)室繼續(xù)培養(yǎng)1.5小時(shí)，即可再次進(jìn)行印跡，記為待印跡擬南芥；
[0097]3)將無(wú)色指甲油涂抹在擬南芥葉片的負(fù)向印跡上，待凝固后，揭下涂層，得葉片的正向印跡，即完整的葉片復(fù)制體；
[0098]4)利用普通的光學(xué)顯微鏡和普通CXD照相設(shè)備，觀察并記錄葉片的正向印跡，即得擬南芥葉片下表皮形態(tài)圖1;
[0099]5)取步驟2)中待印跡的擬南芥，在葉片的相同位置，重復(fù)步驟1)_4)，即得擬南芥葉片下表皮形態(tài)圖1I。
[0100]6)每隔1.5h重復(fù)上述步驟I)-5)，即得擬南芥葉片表皮各結(jié)構(gòu)的生長(zhǎng)形態(tài)圖譜。
[0101]上述雖然對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】進(jìn)行了描述，但并非對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，所屬領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該明白，在本發(fā)明的技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，本領(lǐng)域技術(shù)人員不需要付出創(chuàng)造性勞動(dòng)即可做出的各種修改或變形仍在本發(fā)明的保護(hù)范圍以內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種活體無(wú)損傷觀察二色補(bǔ)血草鹽腺的新方法，其特征在于，包括如下步驟: 1)將乙烯基聚硅氧烷樹(shù)脂，涂抹在待測(cè)二色補(bǔ)血草的葉片下表皮，靜置5-10min，挑起樹(shù)脂，得二色補(bǔ)血草葉片的負(fù)向印記； 2)將取完印跡的待測(cè)二色補(bǔ)血草放回培養(yǎng)室繼續(xù)培養(yǎng)I?2小時(shí)后，即可再次進(jìn)行印跡，為待印跡二色補(bǔ)血草； 3)將聚合的環(huán)氧樹(shù)脂涂抹在二色補(bǔ)血草葉片的負(fù)向印跡上，待凝固后，揭下涂層，得葉片的正向印跡，即完整的葉片復(fù)制體； 4)利用普通的光學(xué)顯微鏡和普通CCD照相設(shè)備，觀察并記錄葉片的正向印跡，即得二色補(bǔ)血草葉片下表皮形態(tài)圖1; 5)取步驟2)中待印跡的二色補(bǔ)血草，在葉片的相同位置，重復(fù)步驟1)_4)，即得二色補(bǔ)血草葉片下表皮形態(tài)圖1I ； 6)多次重復(fù)上述步驟I)_5)，即得二色補(bǔ)血草葉片表皮各結(jié)構(gòu)的生長(zhǎng)形態(tài)圖譜。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述二色補(bǔ)血草葉片的下表皮包括表皮細(xì)胞、鹽腺細(xì)胞、氣孔。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的二色補(bǔ)血草為萌發(fā)6?30天的二色補(bǔ)血草幼苗。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的二色補(bǔ)血草為萌發(fā)8?12天的二色補(bǔ)血草幼苗。
5.權(quán)利要求1所述的方法在觀察模式植物擬南芥葉片表皮結(jié)構(gòu)方面的應(yīng)用。
6.權(quán)利要求1所述的方法在觀察植物幼苗葉片表皮結(jié)構(gòu)方面的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】G01N21/84GK104359909SQ201410677157
【公開(kāi)日】2015年2月18日 申請(qǐng)日期:2014年11月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月21日
【發(fā)明者】袁芳, 王寶山 申請(qǐng)人:山東師范大學(xué)