用于檢測腫瘤細(xì)胞的裝置制造方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)用器械領(lǐng)域，公開了用于檢測腫瘤細(xì)胞的裝置其由玻璃基板與硅蓋板組成；所述硅蓋板設(shè)有由蒙古包形凸起構(gòu)成的粗糙區(qū)域；所述硅蓋板還設(shè)有兩個孔；所述玻璃基板設(shè)有儲液池與兩條流體通道；所述玻璃基板位于硅蓋板的下方；所述粗糙區(qū)域與儲液池對應(yīng)；所述每條流體通道一端連通儲液池，一端與一個孔對應(yīng)。本發(fā)明將納米粗糙區(qū)域應(yīng)用到用于檢測腫瘤細(xì)胞的裝置中，顯著地提高了捕捉腫瘤細(xì)胞的效率；極大的提高了腫瘤細(xì)胞檢測的靈敏度；有利于病癥的準(zhǔn)確檢測。
【專利說明】用于檢測腫瘤細(xì)胞的裝置

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及用于檢測腫瘤細(xì)胞的裝置，屬于醫(yī)療器械領(lǐng)域。

【背景技術(shù)】
[0002]目前，腫瘤越來越嚴(yán)重威脅到人類的生命健康。據(jù)報道，我國每年新發(fā)腫瘤病例約為312萬例，其中，全國平均每天8550人、每分鐘有6人被診斷為腫瘤，全國腫瘤死亡率為180.54/10萬，每年因腫瘤死亡的病例達270萬例。如此觸目的數(shù)據(jù)，高度引起相關(guān)部門的重視，每位醫(yī)療工作者也都為降低腫瘤疾病而努力。腫瘤的死亡率高居不下的原因除了發(fā)病率外，腫瘤的惡性化轉(zhuǎn)移是造成癌癥復(fù)發(fā)和治愈率低下的根本原因，對腫瘤細(xì)胞缺乏有效的檢測是一個重要原因。
[0003]檢測腫瘤細(xì)胞能有效地對腫瘤情況進行早期診斷；能對治療手段的效果進行快速有效的評估，可以以此確定較為合適的具體治療方案；能實現(xiàn)對腫瘤復(fù)發(fā)監(jiān)測，具有重要的臨床應(yīng)用價值。
[0004]然而傳統(tǒng)的技術(shù)方法很難對其進行直接檢測分析。跟著科技的發(fā)展，人們提出了一系列基于微米/納米材料與結(jié)構(gòu)的分離技術(shù)以實現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞的富集和檢測。但是現(xiàn)有基于此種方法的檢測靈敏度依然有待于提高，據(jù)報道，利用此法僅有五六層的乳腺癌患者中檢測出了腫瘤細(xì)胞。因此需要不斷的發(fā)展高靈敏富集和檢測方法。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為了克服現(xiàn)有的腫瘤細(xì)胞檢測方法的不足，本發(fā)明提供了一種以納米凸起為基底的裝置來檢測腫瘤細(xì)胞。
[0006]為達到上述發(fā)明目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:用于檢測腫瘤細(xì)胞的裝置，其由玻璃基板與娃蓋板組成；所述娃蓋板設(shè)有由蒙古包形凸起構(gòu)成的粗糙區(qū)域；所述娃蓋板還設(shè)有兩個孔；所述玻璃基板設(shè)有儲液池與兩條流體通道；所述玻璃基板位于硅蓋板的下方；所述粗糙區(qū)域與儲液池對應(yīng)；所述每條流體通道一端連通儲液池，一端與一個孔對應(yīng)。
[0007]根據(jù)本發(fā)明的裝置，所述蒙古包形凸起的高度為1.2微米；蒙古包形凸起的間距為0.3微米。
[0008]根據(jù)本發(fā)明的裝置，所述儲液池的面積為玻璃基板面積的40%。
[0009]根據(jù)本發(fā)明的裝置，所述硅蓋板與玻璃基板為方形；所述硅蓋板上的兩個孔位于對角線位置。
[0010]硅蓋板上的蒙古包凸起粗糙區(qū)域捕捉富集腫瘤細(xì)胞，為檢測區(qū)域。上述所謂粗糙區(qū)域與儲液池對應(yīng)是指粗糙區(qū)域與儲液池面積接近，最好一致；面面相向。
[0011]優(yōu)選的，流體通道包括平滑流道和魚骨形流道。魚骨形流道能夠很好地混合均勻流入其中的流體。
[0012]玻璃基板與硅蓋板封接結(jié)合，玻璃基板上的儲液池與流體通道形成封閉結(jié)構(gòu)，玻璃基板形成的儲液池可以用來存放試劑，通道用于流體的流通，需要在硅蓋板上設(shè)置小孔，作為流體的出入口 ；本發(fā)明優(yōu)選小孔的孔徑為I毫米。
[0013]本發(fā)明公開了用于檢測腫瘤細(xì)胞裝置的制備:
根據(jù)設(shè)計的儲液池、流體通道，繪制出所需圖形，制出鉻掩膜板；以超聲波刻蝕法，在玻璃基板上制備出儲液池與流體通道；根據(jù)設(shè)計，采用反應(yīng)離子刻蝕法在硅蓋板上制備出蒙古包形凸起粗糙區(qū)域；用激光打孔法在硅蓋板上制備出兩個小孔；最后用乙醇及去離子水清洗干凈；為帶有粗糙區(qū)域的硅蓋板；將硅蓋板封接在玻璃基板上方，流體儲液池與蒙古包粗糙區(qū)域?qū)?yīng)；流體通道的一端與小孔對應(yīng)，分別為流體入口及出口。
[0014]由于上述技術(shù)方案的運用，本發(fā)明具有以下優(yōu)點:
本發(fā)明將納米粗糙區(qū)域應(yīng)用到用于檢測腫瘤細(xì)胞的裝置中，顯著地提高了捕捉腫瘤細(xì)胞的效率；極大的提高了腫瘤細(xì)胞檢測的靈敏度；有利于病癥的準(zhǔn)確檢測。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0015]圖1為用于檢測腫瘤細(xì)胞裝置的結(jié)構(gòu)示意圖；
圖2為實施例一硅蓋板的結(jié)構(gòu)示意圖；
圖3為實施例一玻璃基板的結(jié)構(gòu)示意圖；
其中，1、玻璃基板，2、硅蓋板，21、流體入口，22、流體出口，23、蒙古包凸起粗糙區(qū)域，
11、儲液池，12、流體通道，13、流體通道；
圖4為已知數(shù)目的腫瘤細(xì)胞與用本發(fā)明的裝置檢測到腫瘤細(xì)胞的光強圖。

【具體實施方式】
[0016]下面結(jié)合附圖及實施例對本發(fā)明作進一步描述:
實施例一
附圖1為檢測腫瘤細(xì)胞裝置的結(jié)構(gòu)示意圖，由玻璃基板I以及封接在玻璃基板上方的娃蓋板2組成。
[0017]附圖2為娃蓋板的結(jié)構(gòu)示意圖，娃蓋板設(shè)有流體入口 21與出口 22，還設(shè)有蒙古包凸起粗糙區(qū)域23。
[0018]附圖3為玻璃基板的結(jié)構(gòu)示意圖，設(shè)有儲液池11，流體出口與入口通過流體通道
12、13分別與儲液池。流體通道包括平滑流道和魚骨形流道。流入魚骨形流道中的流體能夠很好地混合均勻。
[0019]檢測腫瘤細(xì)胞裝置的制備:
根據(jù)設(shè)計的儲液池、流體通道，繪制出所需圖形，制出保護膜附在玻璃上；以超聲波刻蝕法，在玻璃基板上制備出儲液池與流體通道；根據(jù)設(shè)計，采用反應(yīng)離子刻蝕法在硅蓋板上制備出蒙古包形凸起粗糙區(qū)域；用激光打孔法在硅蓋板上制備出兩個小孔；最后用乙醇及去離子水清洗干凈；為帶有粗糙區(qū)域區(qū)域的硅蓋板；將硅蓋板封接在玻璃基板上方，流體儲液池與蒙古包粗糙區(qū)域?qū)?yīng)；流體通道的一端與小孔對應(yīng)，分別為流體入口及出口。將潔凈硅蓋板和玻璃基板表面用等離子氧化處理I分鐘，再對應(yīng)復(fù)合在一起，于124°c烘箱中處理22小時，實現(xiàn)不可逆封接。
[0020]儲液池大小為1.3厘米X 1.4厘米X 2毫米；流體通道直徑為I毫米，與小孔對應(yīng)，流體不外泄；蒙古包形凸起的高度為1.2微米；蒙古包形凸起的間距為0.3微米。
[0021]樣品檢測:
將血樣中紅細(xì)胞裂解，分離出白細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞；之后加入一定量的抗體(根據(jù)需要檢測的腫瘤細(xì)胞選擇合適的抗體)標(biāo)記的電化學(xué)發(fā)光材料(三聯(lián)吡啶釕化合物)，共孵育，離心去除未結(jié)合腫瘤細(xì)胞的電化學(xué)發(fā)光材料，得到細(xì)胞懸浮液；將細(xì)胞懸液以恒定的流速加入檢測腫瘤細(xì)胞裝置的入口，經(jīng)過流體通道勻速進入儲液池中。在蒙古包凸起粗糙線的作用下，結(jié)合上電化學(xué)發(fā)光材料的腫瘤細(xì)胞被粗糙區(qū)域牢牢捕捉；細(xì)胞懸浮液添加完成后，捕捉的腫瘤細(xì)胞可以洗脫下來，利用電化學(xué)發(fā)光體系對捕獲的腫瘤細(xì)胞進行檢測，可以進行循環(huán)電位掃描，或者采用脈沖電位模式，或者采用恒電位模式，即可得到電化學(xué)發(fā)光信號，通過電化學(xué)發(fā)光強度計算出腫瘤細(xì)胞的捕獲效率。
[0022]在血樣中放置了已知不同數(shù)目的乳腺癌細(xì)胞，根據(jù)方法檢測腫瘤細(xì)胞的信號。附圖4是在血樣中放置了不同數(shù)目已知的乳腺癌細(xì)胞電化學(xué)發(fā)光強度以及用本發(fā)明的裝置去檢測腫瘤細(xì)胞的電化學(xué)發(fā)光強度圖。可以看到本發(fā)明的裝置捕捉到的信號和已知數(shù)目的細(xì)胞的電化學(xué)發(fā)光強度有明顯的相吻合的情況，證明本發(fā)明的裝置有非常高的捕捉和檢測效率。
【權(quán)利要求】
1.用于檢測腫瘤細(xì)胞的裝置，其特征在于:所述用于檢測腫瘤細(xì)胞的裝置由玻璃基板與娃蓋板組成；所述娃蓋板設(shè)有由蒙古包形凸起構(gòu)成的粗糙區(qū)域；所述娃蓋板還設(shè)有兩個孔；所述玻璃基板設(shè)有儲液池與兩條流體通道；所述玻璃基板位于硅蓋板的下方；所述粗糙區(qū)域與儲液池對應(yīng)；所述每條流體通道一端連通儲液池，一端與一個孔對應(yīng)。
2.根據(jù)權(quán)利I所述用于檢測腫瘤細(xì)胞的裝置，其特征在于:所述蒙古包形凸起的高度為1.2微米；蒙古包形凸起的間距為0.3微米。
3.根據(jù)權(quán)利I所述用于檢測腫瘤細(xì)胞的裝置，其特征在于:所述儲液池的面積為玻璃基板面積的40%。
4.根據(jù)權(quán)利I所述用于檢測腫瘤細(xì)胞的裝置，其特征在于:所述硅蓋板與玻璃基板為方形。
5.根據(jù)權(quán)利4所述用于檢測腫瘤細(xì)胞的裝置，其特征在于:所述硅蓋板上的兩個孔位于對角線位置。
【文檔編號】G01N33/574GK104483483SQ201410802231
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年12月22日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月22日
【發(fā)明者】張偉 申請人:常熟市創(chuàng)新模具有限公司