成像流式細(xì)胞儀的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)的制作方法
【專利摘要】成像流式細(xì)胞儀的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)，涉及生物學(xué)和醫(yī)學(xué)的光學(xué)儀器領(lǐng)域，解決了現(xiàn)有成像流式細(xì)胞儀的光學(xué)系統(tǒng)存在的光譜成像通道數(shù)較少、成像質(zhì)量不能夠達(dá)到衍射極限、無法提高細(xì)胞儀的分辨率的問題。包括顯微物鏡、二次成像鏡組、多光譜分光器件、多光譜成像物鏡和TDI相機(jī)。待測樣品通過消色差顯微物鏡完成全波段高分辨率的放大成像，然后經(jīng)過二次成像鏡組得到一個中間像面，中間像面處放置一個視場光闌，再通過二次成像鏡組準(zhǔn)直，由多光譜分光器件堆棧分光，經(jīng)多光譜成像物鏡會聚于TDI相機(jī)。本發(fā)明采用全光譜分波段多重結(jié)構(gòu)，保證成像光學(xué)系統(tǒng)的成像質(zhì)量在各光譜通道均能夠達(dá)到衍射極限，整個系統(tǒng)的最小探測尺寸達(dá)到40nm。
【專利說明】成像流式細(xì)胞儀的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物學(xué)和醫(yī)學(xué)的光學(xué)儀器【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種成像流式細(xì)胞儀的 顯微成像光學(xué)系統(tǒng)。

【背景技術(shù)】
[0002] 流式細(xì)胞術(shù)是一種用以對液流中排成單列的細(xì)胞或其它生物微粒（如微球，細(xì) 菌，小型模式生物等）逐個進(jìn)行快速定量分析和分選的技術(shù)。在生物學(xué)與醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，當(dāng)需 要對大量的細(xì)胞進(jìn)行掃描時，流式細(xì)胞儀完全犧牲空間分辨率，可以獲得高的檢測速度，數(shù) 十千個細(xì)胞每秒。成像流式細(xì)胞儀不僅能夠獲得大量細(xì)胞的群體分析數(shù)據(jù)，而且還能夠?qū)?時看到細(xì)胞圖像，每一步的分析結(jié)果都可以通過圖像進(jìn)行確認(rèn)。當(dāng)需要獲得細(xì)胞形態(tài)及內(nèi) 部結(jié)構(gòu)信息時，相對于傳統(tǒng)的流式細(xì)胞儀，成像流式細(xì)胞儀有著更大的優(yōu)勢。
[0003] 目前，成像流式細(xì)胞儀已經(jīng)在國際上獲得了極大的重視，以美國Merck Millipore 旗下的Amnis公司為代表已經(jīng)做出了性能不錯的成像流式細(xì)胞儀，型號有Image Stream Mark II和Flow Sight等，能實時捕獲每個流動細(xì)胞最多可以達(dá)到12幅高分辨率圖像，檢 測速率可達(dá)5000細(xì)胞/秒，并具有更強(qiáng)熒光靈敏度。
[0004] 成像流式細(xì)胞儀對細(xì)胞進(jìn)行多光譜、高分辨率的顯微成像，其光學(xué)系統(tǒng)的設(shè)計直 接影響著整個系統(tǒng)的性能指標(biāo)，如細(xì)胞成像分辨率、多光譜通道數(shù)以及最小可探測細(xì)胞尺 寸等等。現(xiàn)有的成像流式細(xì)胞儀的光學(xué)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)多種多樣，但是普遍存在著一些問題：光譜 成像通道數(shù)較少，成像質(zhì)量不能夠達(dá)到衍射極限，無法提高細(xì)胞儀的分辨率。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為了解決現(xiàn)有成像流式細(xì)胞儀的光學(xué)系統(tǒng)存在的光譜成像通道數(shù)較少、成像質(zhì)量 不能夠達(dá)到衍射極限、無法提高細(xì)胞儀的分辨率的問題，本發(fā)明提供一種成像流式細(xì)胞儀 的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)。
[0006] 本發(fā)明為解決技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案如下：
[0007] 本發(fā)明的成像流式細(xì)胞儀的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)，包括：
[0008] 主要由八個透鏡組組成的顯微物鏡，其中一個透鏡組的前表面是一個以平面為基 底的二元衍射面；所述顯微物鏡對待測樣品進(jìn)行消色差作用后完成全波段清晰放大成像；
[0009] 主要由第九透鏡組、第十透鏡組、用于限制待測樣品成像視場的視場光闌、與第十 透鏡組關(guān)于視場光闌中心對稱的第十一透鏡組、與第九透鏡組關(guān)于視場光闌中心對稱的第 十二透鏡組組成的二次成像鏡組，所述視場光闌放置在由第九透鏡組、第十透鏡組、第十一 透鏡組、第十二透鏡組形成的中間像面處；待測樣品的放大圖像依次經(jīng)第九透鏡組、第十透 鏡組和視場光闌作用后形成中間像，中間像的光束再依次經(jīng)第十一透鏡組和第十二透鏡組 作用后準(zhǔn)直成平行光出射；
[0010] 由六個長波通二向色鏡組成的多光譜分光器件，六個長波通二向色鏡分別對應(yīng)六 個分光通道，每個分光通道對應(yīng)一個分光波段，通過改變六個長波通二向色鏡之間的角度 改變對應(yīng)分光通道的方向；所述多光譜分光器件接收由二次成像鏡組出射的平行光，通過 六個長波通二向色鏡對平行光進(jìn)行堆棧分光后分別通過六個分光通道出射；
[0011] 對由六個分光通道出射的光線進(jìn)行分波段色差校正作用的多光譜成像物鏡，保證 系統(tǒng)寬波段的多光譜清晰成像；
[0012] 對由多光譜成像物鏡分波段校正色差后的光線進(jìn)行聚焦成像的TDI相機(jī)。
[0013] 所述顯微物鏡為無限遠(yuǎn)共軛距，數(shù)值孔徑NA為0. 75,組合焦距為4. 58mm，工作距 離為4?6_，視場為60 μ mX 128 μ m，工作波段為400?800nm。
[0014] 所述顯微物鏡中的八個透鏡組分別為第一透鏡組、第二透鏡組、第三透鏡組、第四 透鏡組、第五透鏡組、第六透鏡組、第七透鏡組和第八透鏡組；所述第一透鏡組、第二透鏡組 和第三透鏡組光焦度均為正；第三透鏡組前表面是一個以平面為基底的二元衍射面，用于 校正色差，使得400?830nm全波段均能清晰成像；所述第六透鏡組為三膠合透鏡，光焦度 為負(fù)-正-負(fù)；所述第七透鏡組和第八透鏡組光焦度均為負(fù)，所述第七透鏡組和第八透鏡組 的負(fù)光焦度可增大顯微物鏡工作距離；所述第四透鏡組、第七透鏡組和第八透鏡組均為雙 膠合透鏡。
[0015] 所述第一透鏡組采用H-ZK20材料制成，前表面曲率半徑為10. 1018mm，厚度為 7. 0050mm，后表面曲率半徑為7. 9507mm，厚度為4. 4683mm ;所述第二透鏡組采用H-QK3L材 料制成，前表面曲率半徑為55. 1761mm，厚度為0. 1998mm，后表面曲率半徑為16. 4824mm，厚 度為5. OOOOmm ;所述第三透鏡組采用D-K9L材料制成，前表面即二元衍射面曲率半徑為無 窮大，厚度為0. 1989mm，后表面曲率半徑為31. 9629mm，厚度為4. OOOOmm ;所述第四透鏡組 采用H-LAF62材料和H-QK3L材料制成，前表面曲率半徑為81. 3780mm，厚度為18. 6998mm， 膠合面曲率半徑為-20. 5108mm，厚度為3. 7000mm，后表面曲率半徑為61. 8605mm，厚度 為9. OOOOmm ;所述第五透鏡組采用K4A材料制成，前表面曲率半徑為-22. 3502mm，厚度為 0· 3872mm，后表面曲率半徑為86. 0363mm，厚度為7. 9904mm ;所述第六透鏡組采用H-LAF4 材料、H-QK3L材料和ZF8材料制成，前表面曲率半徑為-50. 0536mm，厚度為0· 2939mm，第 二膠合面曲率半徑為-21. 6984mm，厚度為7. 9904mm，第一膠合面曲率半徑為18. 8740mm， 厚度為0. 2939mm，后表面曲率半徑為374. 5895mm，厚度為2. 5000mm ;所述第七透鏡組采用 H-QK3L材料和BAF4材料制成，前表面曲率半徑為-9. 7646mm，厚度為9. 3359mm，膠合面曲 率半徑為20. 0454mm，厚度為7. 9246mm，后表面曲率半徑為-5. 5751mm，厚度為3. OOOOmm ;所 述第八透鏡組采用H-LAF6LA材料和H-ZF6材料制成，前表面曲率半徑為5. 5342mm，厚度為 3. 1541mm，膠合面曲率半徑為-13. 8856mm，厚度為2. 0000mm，后表面曲率半徑為9. 9050mm， 厚度為3. 4190mm。
[0016] 所述顯微物鏡還包括位于第六透鏡組前表面之上的孔徑光闌，所述孔徑光闌的曲 率半徑為-50. 0536mm，厚度為0. 2939mm。
[0017] 所述第九透鏡組、第十透鏡組、第十一透鏡組和第十二透鏡組均為雙膠合透鏡；所 述第九透鏡組和第十透鏡組的組合焦距為36. 5mm。
[0018] 所述第九透鏡組采用H-LAF62材料和H-QK3L材料制成，前表面曲率半徑為 30. 0530mm，厚度為3. 7000mm，膠合面曲率半徑為11. 7345mm，厚度為6. 0000mm，后表面曲率 半徑為54. 3265mm，厚度為0. 9102mm ;所述第十透鏡組采用H-LAF62材料和H-QK3L材料制 成，前表面曲率半徑為14. 4775mm，厚度為3. 7000mm，膠合面曲率半徑為10. 6706mm，厚度為 6. 0000mm，后表面曲率半徑為-126. 5531mm，厚度為26. 6872mm ;所述視場光闌尺寸為長X 寬=3mmX0. 5mm〇
[0019] 所述多光譜分光器件中的六個長波通二向色鏡分別為第一二向色鏡、第二二向 色鏡、第三二向色鏡、第四二向色鏡、第五二向色鏡和第六二向色鏡，所述第一二向色鏡 與光軸的夾角為44. 02°，分光波段為420?480nm ;所述第二二向色鏡與光軸的夾角為 44. 4Γ，分光波段為480?560nm;所述第三二向色鏡與光軸的夾角為44.80°，分光波段 為560?600nm ;所述第四二向色鏡與光軸的夾角為45. 20°，分光波段為600?640nm、第 五二向色鏡與光軸的夾角為45. 59°，分光波段為640?745nm ;所述第六二向色鏡與光軸 的夾角為45. 98°，分光波段為745?800nm〇
[0020] 所述多光譜成像物鏡包括第十三鏡組、第十四鏡組和第十五鏡組，所述第十三 鏡組、第十四鏡組和第十五鏡組均為雙膠合透鏡且均為正光焦度；所述第十三鏡組采 用H-TF3L材料和H-FK71材料制成，上表面曲率半徑為97. 7468mm，厚度為8. 0000mm， 膠合面曲率半徑為86. 8020mm，厚度為12. 0000mm，下表面曲率半徑為-244. 0957mm，厚 度為48. 3617mm ;第十四鏡組采用H-FK71材料和H-TF3L材料制成，上表面曲率半徑為 908. 4018mm，厚度為8. 0000mm，膠合面曲率半徑為-44. 0402mm，厚度為6. 0000mm，下表面曲 率半徑為272. 9051mm，厚度為56. 4095mm ;第十五鏡組采用D-ZLAF52LA材料和D-LAK6材料 制成，上表面曲率半徑為59. 4329mm，厚度為6. 0000mm，膠合面曲率半徑為-65. 6382mm，厚 度為8. 0000mm，下表面曲率半徑為38. 1601mm，厚度為97. 2288mm。
[0021] 所述TDI相機(jī)選用日本濱松的C10000-801型號TDI相機(jī)，分辨率為2048 X 128,像 元大小為12 μπιΧ12 μπι，線速率0· 45?50KHz。
[0022] 本發(fā)明的有益效果是：
[0023] 1、本發(fā)明的目的是為滿足成像流式細(xì)胞儀多光譜、高分辨率的顯微成像，采用全 光譜分波段多重結(jié)構(gòu)，保證成像光學(xué)系統(tǒng)的成像質(zhì)量在各光譜通道均能夠達(dá)到衍射極限， 整個系統(tǒng)的最小探測尺寸達(dá)到40nm。
[0024] 2、本發(fā)明中顯微物鏡中引入一個衍射面校正色差，保證顯微物鏡的成像質(zhì)量在全 波段下均達(dá)到衍射極限。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0025] 圖1為本發(fā)明的成像流式細(xì)胞儀的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)的光路結(jié)構(gòu)示意圖。
[0026] 圖2為顯微物鏡逆向設(shè)計的光路結(jié)構(gòu)示意圖。
[0027] 圖3為顯微物鏡的光學(xué)傳遞函數(shù)曲線圖。
[0028] 圖4至圖9為本發(fā)明的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)6個分光通道的光學(xué)傳遞函數(shù)曲線圖。
[0029] 圖中：100、顯微物鏡，101、第一透鏡組，102、第二透鏡組，103、第三透鏡組，104、 第四透鏡組，105、第五透鏡組，106、第六透鏡組，107、第七透鏡組，108、第八透鏡組，109、孔 徑光闌，200、二次成像鏡組，201、第九透鏡組，202、第十透鏡組，203、視場光闌，204、第^^一 透鏡組，205、第十二透鏡組，300、多光譜分光器件，301、第一二向色鏡，302、第二二向色鏡， 303、第三二向色鏡，304、第四二向色鏡，305、第五二向色鏡，306、第六二向色鏡，400、多光 譜成像物鏡，401、第十三鏡組，402、第十四鏡組，403、第十五鏡組，500、TDI相機(jī)。

【具體實施方式】
[0030] 以下結(jié)合附圖對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明。
[0031] 如圖1所示，本發(fā)明的成像流式細(xì)胞儀的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)包括顯微物鏡100、二 次成像鏡組200、多光譜分光器件300、多光譜成像物鏡400和TDI相機(jī)500。待測樣品通過 消色差顯微物鏡100完成全波段高分辨率的放大成像，然后經(jīng)過二次成像鏡組200得到一 個中間像面，中間像面處放置一個視場光闌203,再通過二次成像鏡組200準(zhǔn)直，由多光譜 分光器件300堆棧分光，最終經(jīng)過多光譜成像物鏡400會聚于TDI相機(jī)500。
[0032] 顯微物鏡100為無限遠(yuǎn)共軛距，數(shù)值孔徑NA為0. 75,組合焦距為4. 58mm，工作距 離為4?6mm，最好為5. 1mm，視場為60 μ mX 128 μ m，工作波段為400?800nm，顯微物鏡 100中引入衍射元件校正色差達(dá)到全波段清晰成像。如圖2所示，顯微物鏡100主要由第一 透鏡組101、第二透鏡組102、第三透鏡組103、第四透鏡組104、第五透鏡組105、孔徑光闌 109、第六透鏡組106、第七透鏡組107和第八透鏡組108組成，這些透鏡組組合在一起對顯 微物鏡100寬波段的成像進(jìn)行色差校正。顯微物鏡100采用反遠(yuǎn)距結(jié)構(gòu)，前組的第一透鏡 組101、第二透鏡組102和第三透鏡組103光焦度為正，后組的第七透鏡組107和第八透鏡 組108的光焦度為負(fù)，其中第七透鏡組107和第八透鏡組108的負(fù)光焦度可增大顯微物鏡 100的工作距離；第四透鏡組104、第七透鏡組107以及第八透鏡組108均為雙膠合透鏡；第 六透鏡組106為三膠合透鏡，光焦度為負(fù)-正-負(fù)，孔徑光闌109位于第六透鏡組106前表 面之上；第三透鏡組103前表面是一個以平面為基底的二元衍射面（Binary 2)，用于校正 色差，使得波段400?830nm全波段均能清晰成像，其中830nm為成像流式細(xì)胞儀用于對焦 和測速的光源波長。表1給出了顯微物鏡100逆向設(shè)計的設(shè)計結(jié)果，包括各透鏡的具體參 數(shù)，表2給出了第三透鏡組103的二元衍射面（Binary 2)的位置和附加參數(shù)。
[0033] 表 1

【權(quán)利要求】
1. 成像流式細(xì)胞儀的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)，其特征在于，包括： 主要由八個透鏡組組成的顯微物鏡（100)，其中一個透鏡組的前表面是一個W平面為 基底的二元衍射面；所述顯微物鏡（100)對待測樣品進(jìn)行消色差作用后完成全波段清晰放 大成像； 主要由第九透鏡組（201)、第十透鏡組（202)、用于限制待測樣品成像視場的視場光 闊（203)、與第十透鏡組（202)關(guān)于視場光闊（203)中屯、對稱的第十一透鏡組（204)、與第 九透鏡組（201)關(guān)于視場光闊（203)中屯、對稱的第十二透鏡組（205)組成的二次成像鏡 組（200)，所述視場光闊（203)放置在由第九透鏡組（201)、第十透鏡組（202)、第十一透鏡 組（204)、第十二透鏡組（205)形成的中間像面處；待測樣品的放大圖像依次經(jīng)第九透鏡組 (201)、第十透鏡組（202)和視場光闊（203)作用后形成中間像，中間像的光束再依次經(jīng)第 十一透鏡組（204)和第十二透鏡組（205)作用后準(zhǔn)直成平行光出射； 由六個長波通二向色鏡組成的多光譜分光器件（300)，六個長波通二向色鏡分別對應(yīng) 六個分光通道，每個分光通道對應(yīng)一個分光波段，通過改變六個長波通二向色鏡之間的角 度改變對應(yīng)分光通道的方向；所述多光譜分光器件（300)接收由二次成像鏡組（200)出 射的平行光，通過六個長波通二向色鏡對平行光進(jìn)行堆找分光后分別通過六個分光通道出 射； 對由六個分光通道出射的光線進(jìn)行分波段色差校正作用的多光譜成像物鏡（400)，保 證系統(tǒng)寬波段的多光譜清晰成像； 對由多光譜成像物鏡（400)分波段校正色差后的光線進(jìn)行聚焦成像的TDI相機(jī)巧00)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的成像流式細(xì)胞儀的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)，其特征在于，所述顯 微物鏡（100)為無限遠(yuǎn)共輛距，數(shù)值孔徑NA為0. 75,組合焦距為4. 58mm，工作距離為4? 6mm，視場為60 y mX 128 y m，工作波段為400?800nm。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的成像流式細(xì)胞儀的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)，其特征在于，所述 顯微物鏡（100)中的八個透鏡組分別為第一透鏡組（101)、第二透鏡組（102)、第=透鏡 組（103)、第四透鏡組（104)、第五透鏡組（105)、第六透鏡組（106)、第走透鏡組（107)和 第八透鏡組（108);所述第一透鏡組（101)、第二透鏡組（102)和第S透鏡組（103)光焦 度均為正；第=透鏡組（103)前表面是一個W平面為基底的二元衍射面，用于校正色差， 使得400?830nm全波段均能清晰成像；所述第六透鏡組（106)為S膠合透鏡，光焦度為 負(fù)-正-負(fù)；所述第走透鏡組（107)和第八透鏡組（108)光焦度均為負(fù)，所述第走透鏡組 (107)和第八透鏡組（108)的負(fù)光焦度可增大顯微物鏡（100)工作距離；所述第四透鏡組 (104)、第^;：透鏡組（107)和第八透鏡組（108)均為雙膠合透鏡。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的成像流式細(xì)胞儀的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)，其特征在于，所述第 一透鏡組（101)采用H-ZK20材料制成，前表面曲率半徑為10. 1018mm，厚度為7. 0050mm， 后表面曲率半徑為7. 9507mm，厚度為4. 4683mm ;所述第二透鏡組（102)采用H-QK化材料 制成，前表面曲率半徑為55. 1761mm，厚度為0. 1998mm，后表面曲率半徑為16. 4824mm，厚 度為5. 0000mm ;所述第S透鏡組（103)采用D-腳L材料制成，前表面即二元衍射面曲率 半徑為無窮大，厚度為0. 1989mm，后表面曲率半徑為31. 9629mm，厚度為4. 0000mm ;所述 第四透鏡組（104)采用H-LAF62材料和H-QK化材料制成，前表面曲率半徑為81. 3780mm， 厚度為18. 6998mm，膠合面曲率半徑為-20. 5108mm，厚度為3. 7000mm，后表面曲率半徑 為61. 8605mm，厚度為9. 0000mm;所述第五透鏡組（105)采用K4A材料制成，前表面曲率 半徑為-22. 3502mm，厚度為0. 3872mm，后表面曲率半徑為86. 0363mm，厚度為7. 9904mm ; 所述第六透鏡組（106)采用H-LAF4材料、H-QK化材料和ZF8材料制成，前表面曲率半徑 為-50. 0536mm，厚度為0. 2939mm，第二膠合面曲率半徑為-21. 6984mm，厚度為7. 9904mm， 第一膠合面曲率半徑為18. 8740mm，厚度為0. 2939mm，后表面曲率半徑為374. 5895mm，厚度 為2. 5000mm ;所述第^;：透鏡組（107)采用H-QOL材料和BAF4材料制成，前表面曲率半徑 為-9. 7646mm，厚度為9. 3359mm，膠合面曲率半徑為20. 0454mm，厚度為7. 9246mm，后表面曲 率半徑為-5. 5751mm，厚度為3. 0000mm ;所述第八透鏡組（108)采用H-LAF6LA材料和H-ZF6 材料制成，前表面曲率半徑為5. 5342mm，厚度為3. 1541mm，膠合面曲率半徑為-13. 8856mm， 厚度為2. 0000mm，后表面曲率半徑為9. 9050mm，厚度為3. 4190mm。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的成像流式細(xì)胞儀的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)，其特征在于，所述 顯微物鏡（100)還包括位于第六透鏡組（106)前表面之上的孔徑光闊（109)，所述孔徑光闊 (109)的曲率半徑為-50. 0536mm，厚度為0. 2939mm。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的成像流式細(xì)胞儀的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)，其特征在于，所述第 九透鏡組（201)、第十透鏡組（202)、第十一透鏡組（204)和第十二透鏡組（205)均為雙膠 合透鏡；所述第九透鏡組（201)和第十透鏡組（202)的組合焦距為36. 5mm。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的成像流式細(xì)胞儀的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)，其特征在于，所述 第九透鏡組（201)采用H-LAF62材料和H-QK化材料制成，前表面曲率半徑為30. 0530mm， 厚度為3. 7000mm，膠合面曲率半徑為11. 7345mm，厚度為6. 0000mm，后表面曲率半徑為 54. 3265mm，厚度為0. 9102mm ;所述第十透鏡組（202)采用H-LAF62材料和H-QK化材料制 成，前表面曲率半徑為14. 4775mm，厚度為3. 7000mm，膠合面曲率半徑為10. 6706mm，厚度為 6. 0000mm，后表面曲率半徑為-126. 5531mm，厚度為26. 6872mm ;所述視場光闊（203)尺寸為 長 X 寬=3mmX0. 5mm。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的成像流式細(xì)胞儀的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)，其特征在于，所述多 光譜分光器件（300)中的六個長波通二向色鏡分別為第一二向色鏡（301)、第二二向色鏡 (302)、第S二向色鏡（303)、第四二向色鏡（304)、第五二向色鏡（305)和第六二向色鏡 (306)，所述第一二向色鏡（301)與光軸的夾角為44. 02°，分光波段為420?480nm ;所述 第二二向色鏡（302)與光軸的夾角為44.41°，分光波段為480?560皿；所述第S二向 色鏡（303)與光軸的夾角為44. 80°，分光波段為560?600皿；所述第四二向色鏡（304) 與光軸的夾角為45. 20°，分光波段為600?640nm、第五二向色鏡（305)與光軸的夾角為 45. 59。，分光波段為640?745nm;所述第六二向色鏡（306)與光軸的夾角為45.98°，分 光波段為745?800皿。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的成像流式細(xì)胞儀的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)，其特征在于，所述 多光譜成像物鏡（400)包括第十=鏡組（401)、第十四鏡組（402)和第十五鏡組（403)， 所述第十=鏡組（401)、第十四鏡組（402)和第十五鏡組（403)均為雙膠合透鏡且均為正 光焦度；所述第十S鏡組（401)采用H-TF化材料和H-FK71材料制成，上表面曲率半徑為 97. 7468mm，厚度為8. 0000mm，膠合面曲率半徑為86. 8020mm，厚度為12. 0000mm，下表面曲 率半徑為-244. 0957mm，厚度為48. 3617mm ;第十四鏡組（402)采用H-FK71材料和H-TF化材 料制成，上表面曲率半徑為908. 4018mm.厚度為8. 0000mm，膠合面曲率半徑為-44. 0402mm， 厚度為6. 0000mm，下表面曲率半徑為272. 9051mm，厚度為56. 4095mm ;第十五鏡組（403)采 用D-ZLAF52LA材料和D-LAK6材料制成，上表面曲率半徑為59. 4329mm，厚度為6. 0000mm， 膠合面曲率半徑為-65. 6382mm，厚度為8. 0000mm，下表面曲率半徑為38. 1601 mm.厚度為 97. 2288mm。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的成像流式細(xì)胞儀的顯微成像光學(xué)系統(tǒng)，其特征在于，所述 TDI相機(jī)（500)選用日本濱松的C10000-801型號TDI相機(jī)，分辨率為2048 X 128,像元大小 為 12 y mX 12 y m，線速率 0. 45 ?50KHZ。
【文檔編號】G01N15/14GK104459975SQ201410835442
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年12月29日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月29日
【發(fā)明者】李 燦, 劉 英, 李淳, 王健, 郭幫輝, 張建忠, 孫強(qiáng), 趙建 申請人:中國科學(xué)院長春光學(xué)精密機(jī)械與物理研究所