用于快速檢測中藏藥抗氧化活性物質(zhì)的活性反應(yīng)裝置制造方法
【專利摘要】本實用新型涉及一種用于快速檢測中藏藥抗氧化活性物質(zhì)的活性反應(yīng)裝置,該裝置包括分別設(shè)有進(jìn)液口Ⅰ、進(jìn)液口Ⅱ、出液口Ⅰ、出液口Ⅱ的本體及高效液相色譜儀Ⅰ、高效液相色譜儀Ⅱ、質(zhì)譜檢測器。進(jìn)液口Ⅰ的一端與高效液相色譜儀Ⅰ中紫外檢測器出口端相接,其另一端通過分流閥的一端連有阻尼器;分流閥的另一端與出液口Ⅰ的一端相連,該出液口Ⅰ的另一端則與質(zhì)譜檢測器進(jìn)口端相連;進(jìn)液口Ⅱ的一端與高效液相色譜儀Ⅱ中二元泵相連,其另一端連有三通閥,該三通閥的另一端與阻尼器相連,其第三端連有反應(yīng)環(huán);反應(yīng)環(huán)的一端與出液口Ⅱ的一端相連,該出液口Ⅱ的另一端與高效液相色譜儀Ⅱ中紫外檢測器進(jìn)口端相接。本實用新型操作簡單、實用。
【專利說明】用于快速檢測中藏藥抗氧化活性物質(zhì)的活性反應(yīng)裝置
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實用新型涉及一種活性篩選裝置,尤其涉及用于快速檢測中藏藥抗氧化活性物質(zhì)的活性反應(yīng)裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]自由基導(dǎo)致的氧化反應(yīng)不僅與各種疾病的發(fā)生有密切的關(guān)系,而且造成食品腐壞。研宄發(fā)現(xiàn),當(dāng)前主要使用的抗氧化劑多為人工合成抗氧化劑,其對人的健康存在許多負(fù)面影響。因此,近年來學(xué)術(shù)界對植物中存在的天然抗氧化劑的研宄興趣與日俱增。為了尋找高效的抗氧化物質(zhì),對抗氧化物質(zhì)篩選方法的研宄顯得非常重要。
[0003]目前用于評價植物抗氧化能力的方法有硫氰酸鹽法、硫代巴比妥酸法、電子順磁共振法、電子自旋共振法等,,但這些方法或者操作繁瑣、重現(xiàn)性不好、費時費力、準(zhǔn)確度不高,或者需要昂貴的儀器而難以普及(丁 61~18八,066^,八II 011~ 11116III 61:110(1
? 01- (161: 601: 1011 0? ^8,(1108,1 800111 ¢01111(18 111 001111)16^ 1111X1: 111^68 [了]
八的1 016111,2000,72: 2323- 2328 X
[0004]1,1 二 -苯基-2-三硝基苯肼⑶--!!)自由基法已成為國際上較為公認(rèn)的一種抗氧化活性測定方法,被頻繁地用于生物活性物質(zhì)的體外抗氧化活性評價研宄方法中。0??!!在有機(jī)溶劑中是一種穩(wěn)定的自由基,其孤電子在517?。。。?!附近有強(qiáng)吸收(呈深紫色),當(dāng)自由基清除劑存在時,孤電子被配對,吸收消失或減弱,因此通過測定吸收減弱的程度,可評價該自由基清除劑的活性。但利用0????!法僅能對提取物中總抗氧化活性進(jìn)行分析,無法知道具體抗氧化活性成分。
[0005]目前,國內(nèi)外針對天然產(chǎn)物中抗氧化活性化合物的快速篩選發(fā)現(xiàn)已提出了幾種研宄思路,如用在線篩選法篩選了黃芩和趕黃草藥材提取物中的抗氧化劑(王小淞,陳波,姚守拙,〔了 1中草藥,第40卷增刊2009年:224-227.),+ -在線法篩選細(xì)葉杜香葉部抗氧化活性成分(裴世春,徐玖亮,III 871111油皿2,商亞芳,〔了 1食品科學(xué),2012,701.33,^0.19:88-91。),與其他抗氧化活性測定方法相比,操作簡單、快速,從而提高天然產(chǎn)物中抗氧化活性成分篩選效率,降低實驗成本和時間。這些在線篩選方法需要活性反應(yīng)裝置將樣品分離系統(tǒng)與活性檢測系統(tǒng)連接,并在其中進(jìn)行抗氧化活性反應(yīng),并與質(zhì)譜連接,確定具有活性反應(yīng)的化合物。
實用新型內(nèi)容
[0006]本實用新型所要解決的技術(shù)問題是提供一種操作簡單、實用的用于快速檢測中藏藥抗氧化活性物質(zhì)的活性反應(yīng)裝置。
[0007]為解決上述問題,本實用新型所述的用于快速檢測中藏藥抗氧化活性物質(zhì)的活性反應(yīng)裝置,其特征在于:該裝置包括分別設(shè)有進(jìn)液口 1、進(jìn)液口 I1、出液口 1、出液口 II的本體及高效液相色譜儀1、高效液相色譜儀I1、質(zhì)譜檢測器;所述進(jìn)液口 I的一端與所述高效液相色譜儀I中紫外檢測器出口端相接,其另一端通過分流閥的一端連有阻尼器;所述分流閥的另一端與所述出液口 I的一端相連,該出液口 I的另一端則與所述質(zhì)譜檢測器進(jìn)口端相連;所述進(jìn)液口 II的一端與所述高效液相色譜儀II中二元泵相連,其另一端連有三通閥,該三通閥的另一端與所述阻尼器相連,其第三端連有反應(yīng)環(huán);所述反應(yīng)環(huán)的一端與所述出液口 II的一端相連,該出液口 II的另一端與所述高效液相色譜儀II中紫外檢測器進(jìn)口端相接。
[0008]所述反應(yīng)環(huán)是指長度為10米、直徑為5 VIII的管。
[0009]所述分流閥為1:3分流閥。
[0010]本實用新型與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點:
[0011]1、由于本實用新型中設(shè)有阻尼器,因此,可以有效防止溶液倒流,達(dá)到使分流比例穩(wěn)定的目的。
[0012]2、本實用新型不但解決了樣品分離系統(tǒng)與活性檢測系統(tǒng)連接問題,還增加了分流閥和阻尼器,使其與質(zhì)譜連接,實現(xiàn)了樣品分離、活性檢測與結(jié)果鑒定同時進(jìn)行,進(jìn)樣一次即知樣品中那些化合物具有抗氧化活性,從而大大提高抗氧化活性物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)速度,降低了實驗成本。
[0013]3、本實用新型將即仏的快速分離技術(shù)和0????!對抗氧化物的快速檢測技術(shù)結(jié)合起來,與質(zhì)譜、核磁共振波譜進(jìn)一步聯(lián)用從而提供更多有關(guān)被篩選物質(zhì)的信息或?qū)ζ溥M(jìn)行結(jié)構(gòu)表征,從而可以快速地鑒定中藏藥中抗氧化活性成分,具有靈敏度和特異性高的特點。
[0014]4、本實用新型操作簡單、實用,所用試劑量少。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0015]下面結(jié)合附圖對本實用新型的【具體實施方式】作進(jìn)一步詳細(xì)的說明。
[0016]圖1為本實用新型的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0017]圖2為本實用新型中實施例的色譜圖。
[0018]圖中:1一進(jìn)液口 I 2—進(jìn)液口 II 3—出液口 I 4一出液口 II 5—分流閥6—阻尼器7—二通閥8—反應(yīng)環(huán)。
【具體實施方式】
[0019]如圖1所示,用于快速檢測中藏藥抗氧化活性物質(zhì)的活性反應(yīng)裝置,該裝置包括分別設(shè)有進(jìn)液口 I 1、進(jìn)液口 II 2、出液口 I 3、出液口 II 4的本體及高效液相色譜儀1、高效液相色譜儀I1、質(zhì)譜檢測器。
[0020]進(jìn)液口 I 1的一端與高效液相色譜儀I中紫外檢測器出口端相接,其另一端通過分流閥5的一端連有阻尼器6 ;分流閥5的另一端與出液口 I 3的一端相連,該出液口 I 3的另一端則與質(zhì)譜檢測器進(jìn)口端相連;進(jìn)液口 II 2的一端與高效液相色譜儀II中二元泵相連,其另一端連有三通閥7,該三通閥7的另一端與阻尼器6相連,其第三端連有反應(yīng)環(huán)8 ;反應(yīng)環(huán)8的一端與出液口 II 4的一端相連,該出液口 II 4的另一端與高效液相色譜儀II中紫外檢測器進(jìn)口端相接。
[0021]其中:反應(yīng)環(huán)8是指長度為10米、直徑為5 VIII的?££1(管。
[0022]分流閥5為1:3分流閥。
[0023]本實用新型的工作原理是:中藏藥材提取液經(jīng)高效液相色譜儀I色譜柱分離,分離的成分先流經(jīng)高效液相色譜儀I紫外檢測器后作為樣品,該樣品與二元泵中作為流動相泵入抗氧化劑在反應(yīng)環(huán)8中反應(yīng)后,進(jìn)入高效液相色譜儀II中紫外檢測器,然后將高效液相色譜儀I中紫外檢測器和高效液相色譜儀II中紫外檢測器所記錄的色譜圖進(jìn)行比對,當(dāng)高效液相色譜儀II中紫外檢測器所記錄的色譜圖中出現(xiàn)倒峰的化合物時,該化合物即為提取物中的抗氧化成分,通過質(zhì)譜總離子流圖譜對照,根據(jù)離子碎片和譜庫檢索,推測可能的抗氧化成分結(jié)構(gòu)信息。
實施例
[0024]⑴樣品溶液制備:將藏藥白花龍膽花粉碎至40目后,得到白花龍膽花粉末。粉末用其質(zhì)量50倍的體積濃度為100%的甲醇在功率為2001的條件下超聲提取30-11后,過濾后得到樣品提取液。
[0025]⑵高效液相色譜儀1、高效液相色譜儀II的條件:
[0026]色譜柱(4.6 臟 X 250 臟,5 4111);柱溫:25 X:;流速:1 齓/“!??;流動相4相為甲醇,8相為0.01 %乙酸水溶液,梯度洗脫(0 ~ 30 111111,八相維持15 %的比例不變;30 ~ 40 111111,八相從15 %線性改變至30 % ;40 ~ 55 111111,八相從30 %線性改變至35 % ;55 ~ 75 “打,八相維持35 %的比例不變;75 111111以后八相從35 %線性改變至75% ;檢測波長:26011111 ;進(jìn)樣量:10 V匕
[0027]⑶二元泵流速:0.51111/111111 ;紫外檢測器檢測波長:51711111。
[0028]⑷將提取液放入本實用新型中,得到對比色譜圖(參見圖2允
[0029](5)通過質(zhì)譜信息,確定了 2個化合物。
【權(quán)利要求】
1.用于快速檢測中藏藥抗氧化活性物質(zhì)的活性反應(yīng)裝置,其特征在于:該裝置包括分別設(shè)有進(jìn)液口 I (I)、進(jìn)液口 II (2)、出液口 I (3)、出液口 II (4)的本體及高效液相色譜儀1、高效液相色譜儀I1、質(zhì)譜檢測器;所述進(jìn)液口 I (I)的一端與所述高效液相色譜儀I中紫外檢測器出口端相接,其另一端通過分流閥(5)的一端連有阻尼器(6);所述分流閥(5)的另一端與所述出液口 I (3)的一端相連,該出液口 I (3)的另一端則與所述質(zhì)譜檢測器進(jìn)口端相連;所述進(jìn)液口 II (2)的一端與所述高效液相色譜儀II中二元泵相連,其另一端連有三通閥(7),該三通閥(7)的另一端與所述阻尼器(6)相連,其第三端連有反應(yīng)環(huán)(8);所述反應(yīng)環(huán)(8)的一端與所述出液口 II (4)的一端相連,該出液口 II (4)的另一端與所述高效液相色譜儀II中紫外檢測器進(jìn)口端相接。
2.如權(quán)利要求1所述的用于快速檢測中藏藥抗氧化活性物質(zhì)的活性反應(yīng)裝置,其特征在于:所述反應(yīng)環(huán)(8)是指長度為10米、直徑為5 μπι的PEEK管。
3.如權(quán)利要求1所述的用于快速檢測中藏藥抗氧化活性物質(zhì)的活性反應(yīng)裝置,其特征在于:所述分流閥(5)為1:3分流閥。
【文檔編號】G01N30/88GK204228675SQ201420763005
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年12月8日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月8日
【發(fā)明者】董琦, 遲曉峰, 胡風(fēng)祖, 譚亮, 耿丹丹 申請人:中國科學(xué)院西北高原生物研究所