1.一種利用魚的CAT活性檢測水體污染程度的方法,其特征在于,獲取需要檢測的水域中的魚,并采用所述魚的CAT作為敏感生物標(biāo)記物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用魚的CAT活性檢測水體污染程度的方法,其特征在于,所述魚的CAT活性與水體中重金屬鎘的濃度呈負(fù)相關(guān)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用魚的CAT活性檢測水體污染程度的方法,其特征在于,所述魚的CAT活性與水體中菲的濃度呈負(fù)相關(guān)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用魚的CAT活性檢測水體污染程度的方法,其特征在于,所述魚的CAT活性與水體中多氯聯(lián)苯的濃度呈負(fù)相關(guān)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項所述的利用魚的CAT活性檢測水體污染程度的方法,其特征在于,建立魚的CAT活性與污染物濃度關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后將待檢測水域中的同種同大小的魚的CAT活性與所述標(biāo)準(zhǔn)曲線比對,得到待檢測水域中水體污染物濃度。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的利用魚的CAT活性檢測水體污染程度的方法,其特征在于,所述標(biāo)準(zhǔn)曲線為魚的CAT活性與重金屬鎘濃度關(guān)系的曲線,或者魚的CAT活性與菲濃度關(guān)系的曲線,或者魚的CAT活性與多氯聯(lián)苯濃度關(guān)系的曲線。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的利用魚的CAT活性檢測水體污染程度的方法,其特征在于,所述魚的CAT活性測定包括如下步驟:
步驟一、待測樣本處理:制備全魚勻漿,然后離心分層,取上層清液為待測樣本;
步驟二、待測樣本蛋白濃度的測定:分別將等量的雙蒸水、蛋白標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本加入1、2、3號管中,并分別向各管加入等量的考馬斯亮藍(lán)顯色劑,分別混勻,靜置,預(yù)熱,用分光光度計并用雙蒸水調(diào)零后,于1cm光徑,在波長595nm處,測定1、2、3號管中物質(zhì)的光密度,分別記為1號OD值,2號OD值,3號OD值,然后代入如下公式計算得待測樣本蛋白濃度:
步驟三、在對照管和測定管中各加入試劑盒的同樣量的37℃預(yù)熱的試劑一和試劑二,然后在所述測定管中加入待測樣本,混勻反應(yīng)50-70秒;
步驟四、在所述對照管和測定管中各加入試劑盒的同樣量的試劑三和試劑四,然后在所述對照管中加入待測樣本,混勻,用分光光度計并用雙蒸水調(diào)零后,于0.5cm光徑,405nm波長處分別測所述對照管和測定管的光密度,分別記為對照OD值,測定OD值,其中取樣量為加入對照管或測定管的待測樣本的量,然后代入如下公式計算得魚的CAT活性:
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的利用魚的CAT活性檢測水體污染程度的方法,其特征在于,所述步驟一中全魚勻漿為全魚與濃度0.65%的魚用生理鹽水按質(zhì)量比為1:9配置,且所述離心分層用冷凍離心機(jī),相對離心力為11028g,離心10min。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的利用魚的CAT活性檢測水體污染程度的方法,其特征在于,所述步驟二中等量的雙蒸水、蛋白標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本均為0.05ml,蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為0.563g/L,分別加入考馬斯亮藍(lán)顯色劑的量均為3ml,靜置10min;所述步驟三中在對照管和測定管中各加入試劑盒的試劑一1ml和試劑二0.1ml,然后在所述測定管中加入濃度為1%的待測樣本0.05ml,反應(yīng)溫度為37℃;所述步驟四中在所述對照管和所述測定管中各加入試劑盒的試劑三1ml和試劑四0.1ml,然后在所述對照管中加入濃度為1%的待測樣本0.05ml。
10.根據(jù)權(quán)利要求6-9任一項所述的利用魚的CAT活性檢測水體污染程度的方法,其特征在于,所述魚為海水青鳉或淡水青鳉。