本發(fā)明屬于煙草生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域。更具體地，本發(fā)明涉及一種煙草制品過氧化值的測定方法。
背景技術(shù)：
以油脂、脂肪為原料而制作的食品，或是含有油脂的其他產(chǎn)品，可能因為油脂氧化而在儲藏過程中發(fā)生酸敗，從而導致產(chǎn)品質(zhì)量變化。因此評價產(chǎn)品氧化程度，或抑制氧化的抗氧化劑效果對于產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性必不可少。過氧化值(peroxide value,POV)是評價油脂和脂肪酸等被氧化程度的一種指標，它表示1千克樣品中的活性氧含量，以過氧化物毫摩爾數(shù)表示。
油脂酸敗過程中產(chǎn)生過氧化物，具有高度活性，能繼續(xù)分解為揮發(fā)性醛類、酮類和低分子脂肪酸等，它們不僅可能改變產(chǎn)品的感官性質(zhì)和品質(zhì)，而且會產(chǎn)生自由基，對人體產(chǎn)生不良影響，甚至可能有致癌作用。
煙草是我國重要的經(jīng)濟作物，隨著中式卷煙品牌的發(fā)展，卷煙工業(yè)對原料的品種需求不斷提高。優(yōu)質(zhì)的原料要求烤煙葉片外觀質(zhì)量和內(nèi)在質(zhì)量協(xié)調(diào)統(tǒng)一，以便于工業(yè)上進行加工使用。烤煙中有一定量的油脂含量，在生長、儲藏、加工過程中均會產(chǎn)生過氧化物，影響煙草的正常生長及其制品的品質(zhì)。為了能生長出優(yōu)質(zhì)煙葉，有研究者在煙葉生長過程中噴灑一種提高煙葉抗氧化代謝能力的溶劑，通過提高超氧化物歧化酶SOD活性和降低膜質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)來有效減輕干旱脅迫對烤煙造成的不利影響，維持煙株正常生長發(fā)育，保證煙葉產(chǎn)量和產(chǎn)值。或者在貯藏和烘烤過程中添加一種生物抗氧化劑來有效減少煙葉與空氣中氧化物質(zhì)反應，使烤后煙葉類胡蘿卜素的降解量下降，提升烤后煙葉外觀質(zhì)量，減少烤后煙葉褪色現(xiàn)象的發(fā)生。
為此，人們需要時時檢測煙草及其制品的過氧化值。目前，過氧化值分析方法例如有紫外分光光度法、近紅外光譜法、傅里葉變換紅外光譜法、碘量法、硫氰酸鐵法、二甲酚橙法、亞甲基藍流動注射分光光度法、微量滴定法、基于酶促反應方法等。
其中，碘量法是一種氧化-還原滴定法，是油脂過氧化值國標通用分析方法。碘量法測定是在酸性介質(zhì)中，油脂在氧化過程中產(chǎn)生的氫過氧化物與碘化鉀反應產(chǎn)生游離的碘，然后用硫代硫酸鈉標準溶液滴定，以淀粉標準溶液為指示劑確定滴定終點，根據(jù)析出電量計算過氧化值，確定過氧化物含量。過氧化值是判斷油脂新鮮程度和質(zhì)量等級的重要標準，是在氧化初期衡量油脂酸敗程度的主要指標。碘量法簡單易行，普通化驗室就可以進行。
目前，我國按照GB/T 5009.37-2003檢測脂肪的過氧化值，國內(nèi)外相繼提出了過氧化物檢測方法專利申請，例如JP昭53-30383公開了一種檢測油脂中過氧化物的試紙及其制備方法，CN1540319A公開了一種檢測液態(tài)食用油過氧化值的方法，這些檢測方法主要適用于高油脂含量的液態(tài)樣品。目前，解決煙草抗氧化性問題主要集中于兩方面，一方面是從煙草中提取抗氧化功能組分，另一方面是煙草自身抗氧化系統(tǒng)的研究，沒有涉及煙草及其制品在不同條件(不同儲藏條件、添加不同抗氧化劑)下抗氧化性能進行評價。過氧化值作為抗氧化性能的一種常規(guī)評價手段，并無相應的檢測方法見諸報道。
因此，針對現(xiàn)有技術(shù)存在的技術(shù)缺陷，本發(fā)明人在總結(jié)現(xiàn)有技術(shù)的基礎之上，通過大量實驗研究與分析，終于完成了本發(fā)明。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
[要解決的技術(shù)問題]
本發(fā)明的目的是提供一種煙草制品過氧化值的測定方法。
[技術(shù)方案]
本發(fā)明是通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)的。
本發(fā)明涉及一種煙草制品過氧化值的測定方法。
該測定方法的步驟如下：
A、試劑配制
制備由冰乙酸與三氯甲烷按照體積比1：1組成的脂肪溶解液；
制備碘化鉀飽和溶液，避光保存；
制備1％淀粉指示劑，放置冰箱中保存；
制備0.2mol/L硫代硫酸鈉標準溶液，在使用時，將0.2mol/L硫代硫酸鈉標準溶液用蒸餾水稀釋至0.002mol/L。
B、待測樣品預處理
煙草制品在烘箱中在溫度40℃下烘干直至達到能用手指捻碎，接著研磨≦2min，篩分，篩上部分繼續(xù)研磨，篩分，篩下部分合并裝入樣品瓶，得到待測煙葉或煙絲樣品；
C、測定液制備
準確稱取10g在步驟B得到的待測煙草制品樣品，再放入100mL圓底燒瓶中，接著加入10mL蒸餾水，加蓋密封，在搖床中以轉(zhuǎn)速160rpm/min振蕩溶脹1小時；然后再加入50mL石油醚，以同樣的轉(zhuǎn)速震蕩提取24小時；提取完成后接著進行離心分離，得到的上清液經(jīng)0.45μm有機濾膜過濾，其濾液收集在50mL離心管中；
準確移取25mL濾液放到250mL碘量瓶中，在室溫下使用氮吹儀吹至無石油醚氣味為止，得到一種脂肪提取物；
D、滴定
往步驟C得到的脂肪提取物中加入30mL步驟A制備的脂肪溶解液進行溶解，接著加入1mL步驟A制備的碘化鉀飽和溶液，加塞密封，輕輕振搖半分鐘，在暗室里放置3min，再用60mL水進行稀釋得到滴定液；
往所述的滴定液中添加1mL步驟A制備的淀粉指示劑，混勻，接著用步驟A制備的0.002mol/L硫代硫酸鈉標準溶液滴定至滴定液藍色消失，水層無色透明即為終點，同時以蒸餾水按照同樣操作方式進行空白試驗；
E、按照下式計算過氧化值
POV＝(V-V)×m×c×0.12691×100×78.8……(1)
式中：
POV表示煙草制品樣品過氧化值(mmol/kg)
V1表示煙草制品樣品消耗硫代硫酸鈉標準滴定液體積(mL)；
V2表示空白試驗消耗硫代硫酸鈉標準滴定液體積(mL)；
c表示硫代硫酸鈉標準滴定液濃度(mol/L)；
m表示煙草制品樣品質(zhì)量(g)；
0.12691是與1.00ml硫代硫酸鈉標準滴定液相當?shù)牡赓|(zhì)量(g)；
78.8是換算因子。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟A中，碘化鉀飽和溶液制備方法如下：將14.4g碘化鉀溶于10mL水中得到所述的碘化鉀飽和溶液，它貯存于棕色瓶中避光保存；
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟A中，1％淀粉指示劑制備方法如下：將1g淀粉溶于10mL水中，再加水至100mL，煮沸溶解，再不斷攪拌直至液體透明，得到1％淀粉指示劑，放置冰箱中保存；
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟A中，硫代硫酸鈉標準溶液制備方法如下：將49.8g五水合硫代硫酸鈉溶解于蒸餾水中，再稀釋至1L，得到0.2mol/L硫代硫酸鈉標準溶液，在使用時，將0.2mol/L硫代硫酸鈉標準溶液用蒸餾水稀釋至0.002mol/L。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟B中，煙草制品的研磨時間≤2min。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟B中，待測煙草制品樣品的粒度是100-150目。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟C中，在離心分離時的離心分離機轉(zhuǎn)速是1000-2000轉(zhuǎn)/分。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟C中，使用的0.45μm有機濾膜是疏水性PTFE針式濾器。
下面將更詳細地描述本發(fā)明。
本發(fā)明利用石油醚-水兩相溶劑體系提取煙草制品中微量脂肪，油脂在氧化過程中產(chǎn)生的過氧化物，與碘化鉀作用生成游離碘，用硫代硫酸鈉標準溶液滴定，然后計算過氧化值的含量。本發(fā)明用于煙草制品過氧化值的檢測，重現(xiàn)性好，操作簡便。
本發(fā)明涉及一種煙草制品過氧化值的測定方法。
該測定方法的步驟如下：
A、試劑配制
制備由冰乙酸與三氯甲烷按照體積比1：1組成的脂肪溶解液。冰乙酸即無水乙酸，其在低于熔點時會凍結(jié)成冰狀晶體，俗稱冰乙酸。閃點39℃，爆炸極限4.0％～16.0％，空氣中最大允許濃度不超過25mg/m3。本發(fā)明使用的冰乙酸與三氯甲烷是目前市場上銷售的產(chǎn)品。
制備碘化鉀飽和溶液，避光保存。具體地，碘化鉀飽和溶液制備方法如下：將14.4g碘化鉀溶于10mL水中得到所述的碘化鉀飽和溶液，它貯存于棕色瓶中避光保存。本發(fā)明使用的碘化鉀是目前市場上銷售的在本技術(shù)領(lǐng)域里通常使用的產(chǎn)品。
制備1％淀粉指示劑，放置冰箱中保存；具體地，1％淀粉指示劑制備方法如下：將1g淀粉溶于10mL水中，再加水至100mL，煮沸溶解，再不斷攪拌直至液體透明，得到1％淀粉指示劑，放置冰箱中保存。
制備0.2mol/L硫代硫酸鈉(NaS2O3)標準溶液；具體地，硫代硫酸鈉標準溶液制備方法如下：將49.8g五水合硫代硫酸鈉(Na2S2O3·5H2O)溶解于蒸餾水中，再稀釋至1L，得到0.2mol/L硫代硫酸鈉標準溶液。在使用時，將0.2mol/L硫代硫酸鈉標準溶液用蒸餾水稀釋至0.002mol/L。本發(fā)明使用的五水合硫代硫酸鈉目前市場上銷售的在本技術(shù)領(lǐng)域里通常使用的產(chǎn)品，例如由國藥集團化學試劑有限公司以商品名硫代硫酸鈉銷售的產(chǎn)品。
B、待測樣品預處理
煙草制品在烘箱中在溫度40℃下烘干直至達到能用手指捻碎，接著研磨≤2min，篩分，篩上部分繼續(xù)研磨篩分，篩下部分合并裝入樣品瓶，得到待測煙葉或煙絲樣品。
本發(fā)明在煙葉或煙絲研磨時使用的設備是中藥粉碎機，它們都是目前市場上銷售的產(chǎn)品，例如由上海淀久中藥機械制造有限公司以商品名中藥粉碎機銷售的研磨機。
在本發(fā)明中，煙草制品研磨時間≤2min，如果煙草制品研磨時間超過2min，則會造成樣品溫度快速升高，導致測定結(jié)果失真。
根據(jù)本發(fā)明，待測煙草制品樣品的粒度是100-150目。如果煙草制品樣品的粒度小于100目，則表面積太大，吸附作用增強，影響擴散，用水提取時易產(chǎn)生黏稠結(jié)塊現(xiàn)象，影響提取效率；如果煙草制品樣品的粒度大于150目，則表面積太小，粒度太大，浸潤不完全，用石油醚提取時，也會導致提取效率的下降；因此，煙草制品樣品的粒度為100-150目是可取的。
C、測定液制備
準確稱取10g在步驟B得到的待測煙草制品樣品，再放入100mL圓底燒瓶中，接著加入10mL蒸餾水，加蓋密封，在搖床中以轉(zhuǎn)速160rpm/min振蕩溶脹1小時；然后再加入50mL石油醚，以同樣的轉(zhuǎn)速震蕩提取24小時；提取完成后接著進行離心分離，得到的上清液經(jīng)0.45μm有機濾膜過濾，其濾液收集在50mL離心管中；
準確移取25mL濾液放到250mL碘量瓶中，在室溫下使用氮吹儀吹至無石油醚氣味為止，得到一種脂肪提取物；
根據(jù)本發(fā)明，待測煙草制品樣品加入蒸餾水振蕩溶脹的基本作用在于對煙草制品進行浸潤溶脹，一方面能夠提取部分親水性色素，使得顯色物質(zhì)盡可能溶解于水溶液中，避免干擾滴定終點的判定；另一方面，經(jīng)過溶脹的粉末樣品，有利于石油醚浸提效率，縮短石油醚提取時間，提高油脂提取效率。
煙草制品樣品在溶脹處理后應該達到對煙草制品中水溶性色素、有機酸鹽、生物堿鹽類浸出和樣品粉末溶脹以提高提取效率的效果。
溶脹處理的煙草制品樣品進行石油醚震蕩提取的基本作用是提取煙草制品的微量油脂，同時使水溶性色素保留于水相中，降低石油醚提取物中色素的含量。
在本發(fā)明中，凡是具有與石油醚同樣提取作用，并且對煙草制品沒有任何負作用的其它有機提取劑都可以用于本發(fā)明，也都在本發(fā)明保護范圍之內(nèi)。
震蕩提取使用的搖床是EYC-2雙層搖床，它們是目前市場上銷售的產(chǎn)品，例如由江蘇金壇市易通電子有限公司以商品名EYC-2雙層搖床銷售的產(chǎn)品。
在這個步驟中，在離心分離時使用的離心機是例如由賽默飛世爾科技中國有限公司以商品名Sorvall ST16R銷售的產(chǎn)品。離心分離機轉(zhuǎn)速是1000-2000轉(zhuǎn)/分。
在本發(fā)明中，使用的離心過程和0.45μm有機濾膜的主要目的在于去除樣品顆粒物，過濾粒徑超過0.45μm的顆粒，防止樣品微粒對滴定和顯色過程產(chǎn)生干擾。所述的0.45μm有機濾膜是疏水性PTFE針式濾器。它是目前市場上銷售的產(chǎn)品，例如由上海安普實驗科技股份有限公司以商品名SCAA-105銷售的有機濾膜。
D、滴定
往步驟C得到的脂肪提取物中加入30mL步驟A制備的脂肪溶解液進行溶解，接著加入1mL步驟A制備的碘化鉀飽和溶液，加塞密封，輕輕振搖半分鐘，在暗室里放置3min，再用60mL水進行稀釋得到滴定液；
往所述的滴定液中添加1mL步驟A制備的淀粉指示劑，混勻，接著用步驟A制備的0.002mol/L硫代硫酸鈉標準溶液滴定至滴定液藍色消失，水層無色透明即為終點，同時以蒸餾水按照同樣操作方式進行空白試驗；
E、按照下式計算過氧化值
POV＝(V-V)×m×c×0.12691×100×78.8……(1)
式中：
POV表示煙草制品樣品過氧化值(mmol/kg)
V1表示煙草制品樣品消耗硫代硫酸鈉標準滴定液體積(mL)；
V2表示空白試驗消耗硫代硫酸鈉標準滴定液體積(mL)；
c表示硫代硫酸鈉標準滴定液濃度(mol/L)；
m表示煙草制品樣品質(zhì)量(g)；
0.12691是與1.00ml硫代硫酸鈉標準滴定液相當?shù)牡赓|(zhì)量(g)；
78.8是換算因子。
本發(fā)明煙草制品過氧化值測定方法的相對標準偏差如下：
實例1中樣品1、2、3的相對標準偏差分別為1.18％、0.44％、0.43％。
實例2中樣品1、2、3的相對標準偏差分別為0.59％、0.86％、0.28％。
本發(fā)明煙草制品過氧化值測定方法具有下述特點：
I、采用石油醚提取煙草樣品，達到對煙草制品微量油脂富集的效果。
II、優(yōu)化碘量法中脂肪溶解液的比例(冰乙酸：三氯甲烷＝1:1)和淀粉指示劑的濃度(1.0％)，消除了樣液渾濁乳化的干擾，有利于滴定終點的判斷。
III、解決了目前煙草行業(yè)中有關(guān)煙草及煙草制品中過氧化值檢測方法的技術(shù)問題。
IV、該方法簡單易行，僅需簡單的試劑和滴定裝置，普通實驗室就可以進行操作。
[有益效果]
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：
I、本發(fā)明采用石油醚-水兩相體系從煙草樣品中提取并達到富集微量油脂的目的，最大程度地消除了煙草提取物淺黃色溶液對滴定終點判定的干擾。本發(fā)明使用石油醚提取方法能夠獲得基本無色的澄清石油醚提取液，因此對滴定過程準確度有顯著提高。
II、本發(fā)明通過優(yōu)化碘量法脂肪溶解液比例(冰乙酸：三氯甲烷＝1:1)和淀粉指示劑濃度(1.0％)，有效解決了現(xiàn)有煙草提取液是渾濁乳化問題，從而有利于滴定終點的判斷。
III、通過添加蒸餾水使反應液中的冰乙酸與水重量比為15:60，使其呈中性或弱酸性，在煙草基質(zhì)下使得顯色更為顯著。優(yōu)化了S2O32-與I2迅速反應的條件，消除了因生成的碘難以從溶劑中釋放出來而造成的反應延時和滯后對滴定終點的誤判。
IV、填補了目前煙草行業(yè)內(nèi)有關(guān)煙草及煙草制品中過氧化值檢測方法的空白，解決了煙草基質(zhì)本身顯淺黃色對測定過程的干擾，為煙草樣品的品質(zhì)控制和煙草抗氧化劑開發(fā)提供了可行的檢測和評價手段；
V、該方法簡單易行，僅需簡單的試劑和滴定裝置，普通實驗室就可以進行操作。
【具體實施方式】
通過下述實施例將能夠更好地理解本發(fā)明。
實施例1：煙草制品過氧化值的測定方法
該實施例的實施步驟如下：
A、試劑配制
將冰乙酸與三氯甲烷按照體積比1：1混合，得到脂肪溶解液；
將14.4g碘化鉀溶于10mL水中得到碘化鉀飽和溶液，它貯存于棕色瓶中避光保存；
1％淀粉指示劑制備方法如下：將1g淀粉溶于10mL水中，再加水至100mL，煮沸溶解，再不斷攪拌直至液體透明，得到1％淀粉指示劑，放置冰箱中保存；
將49.8g五水合硫代硫酸鈉(Na2S2O3·5H2O)溶解于蒸餾水中，再稀釋至1L，得到0.2mol/L硫代硫酸鈉標準溶液，使用時，將0.2mol/L硫代硫酸鈉標準溶液用蒸餾水稀釋至0.002mol/L；
B、待測樣品預處理
由一家專業(yè)生產(chǎn)煙草制品公司提供的煙葉(樣品1-3)分別在烘箱中在溫度40℃下烘干直至達到能用手指捻碎，接著使用由上海淀久中藥機械制造有限公司以商品名中藥粉碎機銷售的研磨機，篩分，篩上部分繼續(xù)研磨，篩分，研磨總時間≤2min，篩下部分合并裝入樣品瓶，得到粒度為100-150目的待測煙葉樣品；
C、測定液制備
準確稱取10g在步驟B得到的待測煙葉樣品，再放入100mL圓底燒瓶中，接著加入10mL蒸餾水，加蓋密封，在由江蘇金壇市易通電子有限公司以商品名EYC-2雙層搖床銷售的搖床中以轉(zhuǎn)速160rpm/min振蕩溶脹1小時；然后再加入50mL石油醚，以同樣的轉(zhuǎn)速震蕩提取24小時；提取完成后接著使用由賽默飛世爾科技中國有限公司以商品名Sorvall ST16R銷售的離心機以轉(zhuǎn)速1000轉(zhuǎn)/分進行離心分離，得到的上清液經(jīng)由上海安普實驗科技股份有限公司以商品名SACC-105銷售的0.45μm有機濾膜過濾，其濾液收集在50mL離心管中；
準確移取25mL濾液放到250mL碘量瓶中，在室溫下使用由拜泰齊貿(mào)易(上海)有限公司以商品名LV濃縮工作站銷售的氮吹儀吹至無石油醚氣味為止，得到一種脂肪提取物；
D、滴定
往步驟C得到的脂肪提取物中加入30mL步驟A制備的脂肪溶解液進行溶解，接著加入1mL步驟A制備的碘化鉀飽和溶液，加塞密封，輕輕振搖半分鐘，在暗室里放置3min，再用60mL水進行稀釋得到滴定液；
往所述的滴定液中添加1mL步驟A制備的淀粉指示劑，混勻，接著用步驟A制備的0.002mol/L硫代硫酸鈉標準溶液滴定至滴定液藍色消失，水層無色透明即為終點，同時以蒸餾水按照同樣操作方式進行空白試驗；
E、按照本說明書描述的公式計算得到所述煙葉的過氧化值以及相對誤差，其結(jié)果列于表1中。
表1：本發(fā)明方法檢測煙葉過氧化值結(jié)果
對比實施例1：煙草制品過氧化值的測定方法
該實施例的實施方式按照現(xiàn)有技術(shù)(GB/T 5538-2005動植物油脂過氧化值的測定)進行，實施例1所述煙葉的過氧化值以及相對誤差結(jié)果列于表2中。
表2：傳統(tǒng)方法檢測煙葉過氧化值結(jié)果
由表1與表2的結(jié)果可以清楚地看出傳統(tǒng)油脂測定方法對于煙草基質(zhì)測定干擾大，樣品基質(zhì)本身顏色極大干擾了滴定終點的判斷，導致測定結(jié)果失真，偏差變大。因此，本發(fā)明方法的精密度顯著優(yōu)于現(xiàn)有傳統(tǒng)測定方法。
實施例2：煙草制品過氧化值的測定方法
該實施例的實施步驟如下：
A、試劑配制
將冰乙酸與三氯甲烷按照體積比1：1混合，得到脂肪溶解液；
將14.4g碘化鉀溶于10mL水中得到碘化鉀飽和溶液，它貯存于棕色瓶中避光保存；
1％淀粉指示劑制備方法如下：將1g淀粉溶于10mL水中，再加水至100mL，煮沸溶解，再不斷攪拌直至液體透明，得到1％淀粉指示劑，放置冰箱中保存；
將49.8g五水合硫代硫酸鈉(Na2S2O3·5H2O)溶解于蒸餾水中，再稀釋至1L，得到0.2mol/L硫代硫酸鈉標準溶液，使用時，將0.2mol/L硫代硫酸鈉標準溶液用蒸餾水稀釋至0.002mol/L；
B、待測樣品預處理
由另一家專業(yè)生產(chǎn)煙草制品公司提供的煙絲(樣品4-6)分別在烘箱中在溫度40℃下烘干8小時，接著使用由上海淀久中藥機械制造有限公司以商品名中藥粉碎機銷售的研磨機，篩分，篩上部分繼續(xù)研磨，篩分，研磨總時間≤2min，篩下部分合并裝入樣品瓶，得到粒度為100-150目的待測煙絲樣品；
C、測定液制備
準確稱取10g在步驟B得到的待測煙絲樣品，再放入100mL圓底燒瓶中，接著加入10mL蒸餾水，加蓋密封，在由江蘇金壇市易通電子有限公司以商品名EYC-2雙層搖床銷售的搖床中以轉(zhuǎn)速160rpm/min振蕩溶脹1小時；然后再加入50mL石油醚，以同樣的轉(zhuǎn)速震蕩提取24小時；提取完成后接著使用由賽默飛世爾科技中國有限公司以商品名Sorvall ST16R銷售的離心機以轉(zhuǎn)速2000轉(zhuǎn)/分進行離心分離，得到的上清液經(jīng)由上海安普實驗科技股份有限公司以商品名SACC-105銷售的0.45μm有機濾膜過濾，其濾液收集在50mL離心管中；
準確移取25mL濾液放到250mL碘量瓶中，在室溫下使用由拜泰齊貿(mào)易(上海)有限公司以商品名LV濃縮工作站銷售的氮吹儀吹至無石油醚氣味為止，得到一種脂肪提取物；
D、滴定
往步驟C得到的脂肪提取物中加入30mL步驟A制備的脂肪溶解液進行溶解，接著加入1mL步驟A制備的碘化鉀飽和溶液，加塞密封，輕輕振搖半分鐘，在暗室里放置3min，再用60mL水進行稀釋得到滴定液；
往所述的滴定液中添加1mL步驟A制備的淀粉指示劑，混勻，接著用步驟A制備的0.002mol/L硫代硫酸鈉標準溶液滴定至滴定液藍色消失，水層無色透明即為終點，同時以蒸餾水按照同樣操作方式進行空白試驗；
E、按照本說明書描述的公式計算得到所述煙絲的過氧化值以及相對誤差，其結(jié)果列于表3中。
表3：本發(fā)明方法檢測煙絲過氧化值結(jié)果
對比實施例2：煙草制品過氧化值的測定方法
該實施例的實施方式按照現(xiàn)有技術(shù)(GB/T 5538-2005動植物油脂過氧化值的測定)進行，實施例1所述煙絲的過氧化值以及相對誤差結(jié)果列于表4中。
表4：傳統(tǒng)方法檢測煙絲過氧化值結(jié)果
由表3與表4的結(jié)果可以清楚地看出本發(fā)明方法的精密度和穩(wěn)定性均顯著優(yōu)于傳統(tǒng)方法。
總之，本發(fā)明采用石油醚-水兩相體系從煙草樣品中提取并達到富集微量油脂的目的，最大程度地消除了煙草提取物淺黃色溶液對滴定終點判定的干擾。本發(fā)明使用石油醚提取方法能夠獲得基本無色的澄清石油醚提取液，因此對滴定過程準確度有顯著提高。