本發(fā)明涉及臨床體外檢測試劑技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種血清白蛋白檢測試劑盒。

背景技術(shù)：

血清白蛋白由肝臟實質(zhì)細胞合成，在血漿中它的半衰期約為15-19天，是血漿中含量最多、分子最小、溶解度大、功能較多的一種蛋白質(zhì)，占血漿總蛋白的40%-60%。白蛋白的分子結(jié)構(gòu)已于1975年闡明，它是由585個氨基酸組成的單鏈蛋白質(zhì)，其分子量約為67kd，成熟的白蛋白是一個心形分子，由3個結(jié)構(gòu)相似的α-螺旋結(jié)構(gòu)域組成。

食物中蛋白質(zhì)的含量會影響白蛋白的合成，此外，其合成還受血漿中水平的調(diào)節(jié)，白蛋白在肝細胞中幾乎沒有儲存，在所有的細胞外液中都含有微量的白蛋白。體液ph7.4的環(huán)境中，白蛋白為負離子，每分子帶有200個以上負電荷。白蛋白是血漿中的主要載體，能與體內(nèi)許多水溶性差的小分子有機物和無機離子可逆地結(jié)合形成易溶性的復(fù)合物，成為這些物質(zhì)在血液循環(huán)中的運輸形式，其中包括膽汁酸鹽、膽紅素、長鏈脂肪酸、類固醇激素、前列腺素、金屬離子及某些藥物。白蛋白是一種具有黏性、膠質(zhì)性的物質(zhì)，在人體內(nèi)重金屬離子存在時，會自動與重金屬離子結(jié)合，從而由排泄系統(tǒng)排出體外，起到解毒的作用。因此，食用白蛋白含量豐富的食物，可避免重金屬離子的吸收而中毒。

白蛋白含量升高主要有兩個原因，一是由于血液濃縮使得白蛋白相對含量升高，常見于嚴重脫水和休克、嚴重?zé)齻⒋蟪鲅?、腎臟疾病等；二是受飲食中蛋白質(zhì)攝入量的影響，因此在一定程度上白蛋白可以作為營養(yǎng)狀況的指標。白蛋白含量降低常見于營養(yǎng)不良、急慢性肝病、慢性胃腸道疾病、糖尿病、高燒、外傷等。

本發(fā)明提供一種溴甲酚綠法檢測血清白蛋白的試劑盒，優(yōu)化其反應(yīng)體系，使其重復(fù)性好、穩(wěn)定性好、可進行批量樣本全自動化檢測。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種穩(wěn)定性好的用于檢測血清白蛋白的試劑盒，本試劑盒采用溴甲酚綠法。本試劑盒與同類試劑盒相比，穩(wěn)定性和線性相關(guān)性比同類檢測試劑盒好，有利于試劑在臨床上的推廣應(yīng)用。

基本原理：

在ph為4.2的緩沖溶液中，白蛋白作為一種陽離子，能夠與陰離子染料溴甲酚氯結(jié)合形成藍綠色復(fù)合物，在波長600nm處有吸收峰，其吸光度與白蛋白含量成正比，與同樣處理的白蛋白標準作比較，可以求得血清中白蛋白的含量。

本發(fā)明是通過以下步驟得到的：

一種血清白蛋白檢測試劑盒，其特征在于包含試劑r。

試劑r組成為：80mmol/lph為4.2的琥珀酸緩沖液、0.05mmol/l溴甲酚綠、1%tritonx-100、0.5g/l聚氧乙烯月桂醚、50mmol/l氯化鈉、20mmol/l疊氮鈉。

所述的血清白蛋白檢測試劑盒，其特征在于所述1%tritonx-100為表面活性劑。

所述的血清白蛋白檢測試劑盒，其特征在于所述的50mmol/l氯化鈉為穩(wěn)定劑。

所述的血清白蛋白檢測試劑盒，其特征在于，使用全自動生化分析儀采用速率法進行測定，檢測主波長為600nm。

本發(fā)明的試劑盒在具有雙試劑功能的全自動生化分析儀上進行，其具體使用方法如圖1：

加入生理鹽水、樣本或校準品3μl，再加入300μl的試劑r，讀取吸光度a1，孵育3min后讀取吸光度a2，計算δa。

本發(fā)明的有益效果：

1）本試劑添加了氯化鈉和1%tritonx-100，增強了試劑的穩(wěn)定性，且對試劑的準確度沒有產(chǎn)生影響；

2）試劑的準確度和穩(wěn)定性良好，價格便宜，使用方便，有利于該試劑在市場中進一步的推廣。

附圖說明

圖1為試劑盒的試用方法；

圖2為兩種試劑的相關(guān)性曲線圖；

圖3為實施例1試劑與市場認可的血清白蛋白檢測試劑對比檢測結(jié)果；

圖4為實施例1試劑線性相關(guān)驗證實驗檢測結(jié)果；

圖5為實施例1試劑穩(wěn)定性驗證實驗檢測結(jié)果。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行進一步說明：

實施例1

一種常規(guī)的血清白蛋白檢測試劑盒，試劑組成為：

80mmol/l琥珀酸緩沖液ph4.2

溴甲酚綠0.05mmol/l

聚氧乙烯月桂醚0.5g/l

氯化鈉50mmol/l

tritonx-1001%

疊氮鈉20mmol/l

本實施例所述試劑r，配置時需先配制琥珀酸緩沖液，用naoh調(diào)到適當(dāng)ph值后，再添加其它物質(zhì)。本實施例所述試劑盒在使用時，其測定方法是采用具有雙試劑功能的邁瑞800全自動生化分析儀，利用終點法進行測定，操作如下：

加入生理鹽水、樣本或校準品3μl，再加入300μl的試劑r，讀取吸光度a1，孵育3min后讀取吸光度a2，計算δa；

δa＝a2-a1

血清白蛋白含量（g/l）=（?a測定÷?a標準）×標準品濃度

?a測定：測定樣本吸光度變化?a標準：標準品吸光度變化。

實施例2

準確度驗證試驗：將實施例1的血清白蛋白檢測試劑作為實驗組，市場上獲得認可的一種準確度好、穩(wěn)定性好的血清白蛋白檢測試劑作為對照組進行檢測，對20個臨床血清樣本進行檢測，檢測結(jié)果如圖3所示。獲得了兩種試劑的相關(guān)性曲線（如圖2所示），結(jié)果表明，兩組試劑盒的相關(guān)系數(shù)為0.9945，說明兩者相關(guān)性比較好。證明本發(fā)明試劑盒添加的組分對其準確性不會造成影響，試劑盒依然保持較好的準確度。

實施例3

線性相關(guān)性驗證試驗：選取一個血清白蛋白含量為60g/l的高值樣本，用生理鹽水進行系列稀釋，配制6個不同濃度的樣本，濃度依次為60g/l、48g/l、36g/l、24g/l、12g/l、0g/l。分別利用實施例1試劑及對照組試劑進行檢測，每個濃度的樣本分別測定三次，分別取平均值，檢測結(jié)果如圖4所示：

如圖4所示，實施例1與對照組試劑檢測結(jié)果相關(guān)系數(shù)均大于0.990，且實施例1試劑檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)略大于對照組試劑檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)，這表明本發(fā)明試劑具有更好的線性相關(guān)性。

實施例4

穩(wěn)定性驗證實驗：在2℃～8℃、無腐蝕性氣體的避光環(huán)境中貯存試劑，檢測實施例1及對照組試劑的穩(wěn)定性。每月1號分別用兩組試劑測定質(zhì)控樣本（靶值為42.4g/l），測定三次取平均值，檢測數(shù)據(jù)如圖5所示：

實驗結(jié)果顯示，實施例1試劑在2℃～8℃、無腐蝕性氣體的避光環(huán)境中貯存15個月穩(wěn)定，而對照組試劑在2℃～8℃、無腐蝕性氣體的避光環(huán)境中貯存12個月開始不穩(wěn)定，說明本發(fā)明試劑添加氯化鈉和tritonx-100穩(wěn)定性增強。

綜上所述，本發(fā)明提供的血清白蛋白檢測試劑盒，試劑r中添加氯化鈉和tritonx-100，提高了試劑盒的穩(wěn)定性，線性范圍較好，試劑的準確度也較好。因此，本發(fā)明提供的血清白蛋白檢測試劑盒有利于在市場中進一步的推廣使用。

技術(shù)特征：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種血清白蛋白檢測試劑盒，本試劑盒采用溴甲酚綠法檢測血液中的血清白蛋白，屬于臨床體外檢測試劑技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明試劑盒僅包括試劑R。通過在試劑R中添加氯化鈉和TritonX?100，提高了試劑盒的穩(wěn)定性，線性范圍較好，試劑的準確度也較好，有利于在市場中進一步的推廣使用。

技術(shù)研發(fā)人員：宋慧玲;羅維曉;王慧娟
受保護的技術(shù)使用者：濟南協(xié)謙醫(yī)療器械有限公司
技術(shù)研發(fā)日：2017.04.12
技術(shù)公布日：2017.08.18