本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體涉及到一種用x射線衍射內(nèi)標(biāo)標(biāo)曲法定量藥物制劑中活性成分(active?pharmaceutical?ingredient,api)的方法。

背景技術(shù)：

1、目前藥物制劑中api含量的確定可以通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法完成。在傳統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)曲線法中，利用不同已知api含量的標(biāo)準(zhǔn)樣品分別對應(yīng)某個(gè)特征x射線衍射峰的不同強(qiáng)度，來繪制強(qiáng)度與含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。繼而對某個(gè)未知api含量樣品進(jìn)行x射線衍射(xrd)測定，得到的特征x射線衍射峰強(qiáng)度可以通過上述標(biāo)準(zhǔn)曲線得到該樣品的api含量。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、但是，上述這種傳統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線法面臨諸多問題。

2、首先，在標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制過程中，容易受到以下兩個(gè)因素的影響，一是每次樣品制備過程中的人為誤差會帶來被測樣品密度上的差異，進(jìn)而導(dǎo)致制訂標(biāo)曲時(shí)的樣品的衍射體積與實(shí)際樣品測試時(shí)的衍射體積會有所不同；二是api與藥物制劑中其它組份例如輔料的x射線吸收系數(shù)不同導(dǎo)致的誤差。因此，傳統(tǒng)方法的標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性相關(guān)系數(shù)r2很難達(dá)到0.99以上。當(dāng)在已知api含量的標(biāo)準(zhǔn)樣品中加入與api的x射線吸收系數(shù)相近的內(nèi)標(biāo)后，標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性相關(guān)系數(shù)r2很容易就可以達(dá)到0.99甚至0.999以上。這時(shí)標(biāo)準(zhǔn)曲線的橫坐標(biāo)仍然是api的含量，縱坐標(biāo)是api特征衍射峰的強(qiáng)度與內(nèi)標(biāo)特征衍射峰強(qiáng)度的比值。

3、另外，x射線光源的強(qiáng)度會隨時(shí)間變化而變化，即使繪制出高精度的標(biāo)準(zhǔn)曲線，當(dāng)制定標(biāo)準(zhǔn)曲線和測試實(shí)際樣品的時(shí)間跨度超過一周時(shí)，制訂標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)的光源強(qiáng)度與測試實(shí)際樣品時(shí)的光源強(qiáng)度會顯著不同，這也會影響到未知樣品的api含量分析。該問題可以利用引入光源強(qiáng)度漂移校正因子來解決。

4、具體內(nèi)標(biāo)法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線理論基礎(chǔ)如下：

5、一般情況下，待測相的衍射線強(qiáng)度與其含量(vj或wj)間沒有簡單的線性關(guān)系。

6、方法概要：在被測的粉末試樣中加入一種含量恒定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，混合均勻后制成復(fù)合試樣，測量復(fù)合試樣中待測相的某一衍射峰強(qiáng)度與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)某一衍射峰強(qiáng)度，根據(jù)兩個(gè)強(qiáng)度之比來計(jì)算待測相的含量。

7、公式推導(dǎo)：設(shè)被測試樣由n個(gè)相組成，待測相為a，在其中摻入內(nèi)標(biāo)物質(zhì)s后，被測試樣與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)混合均勻后制成復(fù)合試樣。其中wa為a在被測試樣中的重量百分?jǐn)?shù)；wa′為a在復(fù)合試樣中的重量百分?jǐn)?shù)；ws為s在復(fù)合試樣中的重量百分?jǐn)?shù)。三者關(guān)系如下，

8、wa′＝wa×(1-ws)??????????????????????(1)

9、根據(jù)x射線定量分析的普適公式，復(fù)合試樣中a與s的衍射強(qiáng)度分別為，

10、

11、

12、所以兩者的強(qiáng)度比為，

13、

14、結(jié)合(1)式，可得，

15、

16、令，

17、

18、最終得到內(nèi)標(biāo)法的基本方程，

19、

20、上述方程中，其中ka與ks分別為待測相a與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)s的強(qiáng)度因子，(μm)j為各組成相的質(zhì)量吸收系數(shù)，c為物理常量，表達(dá)式如下，

21、

22、其中，i0為入射x射線強(qiáng)度，λ為入射x射線波長，r為衍射儀測角儀半徑，e為電子電荷，m為電子質(zhì)量，c為光速。

23、復(fù)合試樣中a與s相的強(qiáng)度比ia/is與待測試樣中a相的重量分?jǐn)?shù)wa呈線性關(guān)系，k為其斜率。若k已知，測量復(fù)合試樣中的ia與is，即可計(jì)算出待測試樣中a的重量分?jǐn)?shù)wa。

24、通過在標(biāo)注樣品中加入與api吸收系數(shù)相近的內(nèi)標(biāo)，可顯著提高標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性相關(guān)系數(shù)r2至0.99甚至0.999以上。這明顯提高了標(biāo)準(zhǔn)曲線法確定未知樣品中api含量的可靠性。當(dāng)api為無機(jī)藥物時(shí)，常用的內(nèi)標(biāo)為al2o3(質(zhì)量吸收系數(shù)為31.5cm2/g)。當(dāng)api為有機(jī)藥物時(shí)，常用的內(nèi)標(biāo)為lif(質(zhì)量吸收系數(shù)為11.7cm2/g)。當(dāng)使用不合適的內(nèi)標(biāo)時(shí)，線性相關(guān)系數(shù)r2的值也會受到影響。

25、實(shí)驗(yàn)步驟：

26、(1)測繪定標(biāo)曲線

27、配制一系列(3個(gè)以上)待測相a含量已知但數(shù)值各不相同的樣品，向每個(gè)試樣中摻入含量恒定的內(nèi)標(biāo)物s，混合均勻制成復(fù)合試樣。其中，內(nèi)標(biāo)物s的摻入量以其衍射峰強(qiáng)度合適即可，建議內(nèi)標(biāo)物選定衍射峰強(qiáng)度在待測相選定衍射峰的0.1～10倍之間，以減小積分時(shí)帶來的誤差。在a相及s相的衍射譜中分別選擇某一衍射峰為選測峰，衍射峰選擇以強(qiáng)度合適，附近無干擾峰，特征性強(qiáng)為標(biāo)準(zhǔn)。通過測量各復(fù)合試樣中的衍射強(qiáng)度ia與is，繪制曲線，即為待測相的定標(biāo)曲線。定標(biāo)曲線的斜率即為方程(7)的系數(shù)k。

28、(2)制備復(fù)合試樣

29、在待測樣品中摻入與定標(biāo)曲線中比例相同的內(nèi)標(biāo)物s制備成復(fù)合試樣。

30、(3)測試復(fù)合試樣

31、在與繪制定標(biāo)曲線相同的實(shí)驗(yàn)條件下，測量復(fù)合試樣中a相與s相的選測峰強(qiáng)度ia與is。選測峰需與繪制定標(biāo)曲線選測峰相同。

32、(4)計(jì)算含量

33、由待測樣復(fù)合試樣的在事先繪制的待測相定標(biāo)曲線上查出待測相a的含量wa?；蛘呃梅匠?7)計(jì)算得出待測相a的含量wa。

34、本發(fā)明提出的上述方法提高了未知樣品中api含量確定的準(zhǔn)確性。

35、如果不使用本發(fā)明的內(nèi)標(biāo)法，則需要引入光源強(qiáng)度漂移系數(shù)。光源強(qiáng)度漂移系數(shù)理論基礎(chǔ)如下：

36、當(dāng)制訂標(biāo)準(zhǔn)曲線與實(shí)際測試樣品發(fā)生的時(shí)間跨度較長，例如超過一周時(shí)，需要引入光源強(qiáng)度飄移系數(shù)f來校正光源強(qiáng)度變化帶來的對定量結(jié)果不準(zhǔn)確的影響。

37、漂移系數(shù)f等于x射線衍射儀配套的標(biāo)準(zhǔn)樣品(例如剛玉和硅粉)特征衍射峰的峰面積的比值。測試過程為：(1)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，首先取適量儀器配套標(biāo)準(zhǔn)樣品(剛玉或硅粉)進(jìn)行x射線測試，記錄特征峰強(qiáng)度i1；(2)若在長時(shí)間以后進(jìn)行未知樣品的測試，可在測試前首先對相同質(zhì)量的儀器配套標(biāo)準(zhǔn)樣品(剛玉或硅粉)進(jìn)行x射線測試，記錄此時(shí)特征峰強(qiáng)度i2。

38、則漂移系數(shù)f為，

39、f＝i1/i2?????????????????????????????(9)

40、方程(9)中，分子是進(jìn)行建立標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)該特征峰的峰面積i1，分母是分析實(shí)際樣品時(shí)該特征峰的峰面積i2；(3)對實(shí)際未知樣品進(jìn)行x射線測試后，對特征峰強(qiáng)度乘以f，對修正后的強(qiáng)度再使用標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行分析即可得到更精確的api定量結(jié)果，即，

41、

42、由此可見，采用本發(fā)明的內(nèi)標(biāo)標(biāo)曲法，可以省略上述繁瑣的光源強(qiáng)度漂移校正步驟，使得藥物制劑中api含量的確定更加簡單、準(zhǔn)確、高效。

技術(shù)特征：

1.一種用x射線衍射內(nèi)標(biāo)標(biāo)曲法定量藥物制劑中api的方法，其特征在于，所述方法包括：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中所述配制一系列待測相a含量已知但數(shù)值各不相同的樣品，為配制3個(gè)以上，優(yōu)選配制5個(gè)以上，更有選配制5-10個(gè)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)所述在a相及s相的衍射譜中分別選擇某一衍射峰為選測峰，其中選擇選測峰地標(biāo)準(zhǔn)為：選擇以強(qiáng)度合適、附近無干擾峰、特征性強(qiáng)的衍射峰為選測峰。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)所述內(nèi)標(biāo)物s的摻入量按照以下方法確定：內(nèi)標(biāo)物s選定衍射峰強(qiáng)度在待測相選定衍射峰強(qiáng)度的0.1～10倍之間。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)所述內(nèi)標(biāo)物s的摻入量按照以下方法確定：內(nèi)標(biāo)物s選定衍射峰強(qiáng)度在待測相選定衍射峰強(qiáng)度的1-8倍。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)所述內(nèi)標(biāo)物s的摻入量按照以下方法確定：內(nèi)標(biāo)物s選定衍射峰強(qiáng)度在待測相選定衍射峰強(qiáng)度的2-6倍。

技術(shù)總結(jié)
一種用X射線衍射內(nèi)標(biāo)標(biāo)曲法定量藥物制劑中API的方法，該方法在被測的粉末試樣中加入一種含量恒定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，混合均勻后制成復(fù)合試樣，測量復(fù)合試樣中待測相的某一衍射峰強(qiáng)度與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)某一衍射峰強(qiáng)度，根據(jù)兩個(gè)強(qiáng)度之比來計(jì)算待測相的含量。

技術(shù)研發(fā)人員：李霄鵬
受保護(hù)的技術(shù)使用者：李霄鵬
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/9/9