本申請(qǐng)涉及生物檢測(cè)技術(shù)，更具體地，涉及一種用于檢測(cè)生物樣本中錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)的裝置和方法。

背景技術(shù)：

1、子癇前期是一種妊娠過程相關(guān)的疾病，目前對(duì)于其發(fā)生機(jī)制知之甚少，通常指孕前血壓正常的孕婦在妊娠20周以后出現(xiàn)高血壓、蛋白質(zhì)尿，同時(shí)伴隨頭痛、眼花、惡心、嘔吐、上腹不適等癥狀。

2、目前，臨床上針對(duì)子癇前期的診斷主要是依賴其臨床特征如高血壓以及蛋白質(zhì)尿進(jìn)行判定?？蒲泄ぷ髡咭恢敝铝τ谘芯坑糜谧影B前期診斷的新的標(biāo)志物及新的方法。美國(guó)耶魯大學(xué)的科研人員于孕婦尿液中發(fā)現(xiàn)一些錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)分子與子癇前期的發(fā)生存在明顯的相關(guān)性，這些錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)分子可與剛果紅染料選擇性的結(jié)合，而剛果紅染料也可與纖維素結(jié)合，并由此開發(fā)了一種基于斑點(diǎn)擴(kuò)散的試驗(yàn)方法用于檢測(cè)孕婦尿液中的錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)以用于子癇前期的診斷或預(yù)測(cè)。

3、然而，現(xiàn)有技術(shù)采用的斑點(diǎn)擴(kuò)散技術(shù)不適合處理弱陽性樣本，難以有效區(qū)分弱陽性樣本與陰性樣本，容易引起誤判。因此，有必要提供一種改進(jìn)的檢測(cè)方法和裝置。另外，在本領(lǐng)域中對(duì)于能夠進(jìn)行定量和/或具有改進(jìn)的靈敏度、特異度和準(zhǔn)確度的檢測(cè)方法和裝置也存在需求。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本公開滿足了上述需求中的至少一個(gè)。本申請(qǐng)的一個(gè)目的在于提供一種能夠有效檢測(cè)錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)的裝置和方法。

2、在本申請(qǐng)的一個(gè)方面，提供了一種用于檢測(cè)生物樣本中的錯(cuò)誤折疊蛋白或其聚集體的方法，其包括：(a)提供生物樣本；(b)使所述生物樣本與檢測(cè)試劑混合，所述檢測(cè)試劑能夠與所述錯(cuò)誤折疊蛋白或其聚集體結(jié)合；(c)使與所述檢測(cè)試劑混合的所述生物樣本接觸并通過分離基質(zhì)，所述分離基質(zhì)被構(gòu)造以吸附未與所述錯(cuò)誤折疊蛋白或其聚集體結(jié)合的檢測(cè)試劑并允許與所述錯(cuò)誤折疊蛋白或其聚集體結(jié)合的檢測(cè)試劑通過；(d)以游離液體狀態(tài)收集從所述分離基質(zhì)通過的生物樣本；以及(e)檢測(cè)所收集的呈游離液體狀態(tài)的生物樣本中所述檢測(cè)試劑的存在，其中所述檢測(cè)試劑的存在指示所述生物樣本中存在所述錯(cuò)誤折疊蛋白或其聚集體。在一個(gè)實(shí)施方案中，在步驟(d)中，在流體收集腔中收集所述生物樣本，并且所收集的生物樣本在所述流體收集腔中呈游離的液體狀態(tài)。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所收集的所述生物樣本在所述流體收集腔中能夠自由流動(dòng)。在仍進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所述流體收集腔中能夠自由流動(dòng)的液體體積為至少約50μl、至少約100μl、至少約500μl、至少約50μl、至少約1ml、至少約3ml、或約3ml至約5ml。

3、在本申請(qǐng)的另一個(gè)方面，提供了一種用于檢測(cè)生物樣本中的錯(cuò)誤折疊蛋白或其聚集體的裝置，該裝置包括：殼體，所述殼體限定流體分離腔與流體收集腔；其中，所述流體分離腔用于接收與檢測(cè)試劑混合的所述生物樣本，其中所述檢測(cè)試劑能夠與所述生物樣本中的所述錯(cuò)誤折疊蛋白或其聚集體結(jié)合，所述流體分離腔還用于從所述與檢測(cè)試劑混合的所述生物樣本中分離并保留未與所述生物樣本中的所述錯(cuò)誤折疊蛋白或其聚集體結(jié)合的所述檢測(cè)試劑，并允許與所述生物樣本中的所述錯(cuò)誤折疊蛋白或其聚集體結(jié)合的所述檢測(cè)試劑流過；以及其中，所述流體收集腔用于收集流過所述流體分離腔的所述生物樣本。

4、在本申請(qǐng)的另一方面，還提供了一種試劑盒，其包括前述方面的用于檢測(cè)生物樣本中的錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)的裝置。

5、在本申請(qǐng)的又一方面，提供了本公開的裝置在制備用于診斷或預(yù)測(cè)以錯(cuò)誤折疊蛋白為特征的疾病的試劑盒中的用途。

6、在本申請(qǐng)的又一方面，提供了一種預(yù)測(cè)罹患以錯(cuò)誤折疊蛋白為特征的疾病的風(fēng)險(xiǎn)的方法。

7、在本申請(qǐng)的又一方面，提供了(1)能夠與錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)特異性或其聚集體結(jié)合的檢測(cè)試劑與(2)能夠吸附游離狀態(tài)的所述檢測(cè)試劑的吸附介質(zhì)的組合在制備用于診斷或預(yù)測(cè)以錯(cuò)誤折疊蛋白為特征的疾病的裝置或試劑盒中的用途。

8、以上為本申請(qǐng)的概述，可能有簡(jiǎn)化、概括和省略細(xì)節(jié)的情況，因此本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該認(rèn)識(shí)到，該部分僅是示例說明性的，而不旨在以任何方式限定本申請(qǐng)范圍。本概述部分既非旨在確定所要求保護(hù)主題的關(guān)鍵特征或必要特征，也非旨在用作為確定所要求保護(hù)主題的范圍的輔助手段。

技術(shù)特征：

1.一種用于檢測(cè)生物樣本中的錯(cuò)誤折疊蛋白或其聚集體的方法，其包括：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在步驟(d)中，在流體收集腔中收集所述生物樣本，并且所收集的生物樣本在所述流體收集腔中呈游離的液體狀態(tài)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1-2中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述檢測(cè)試劑是染料，例如可見光染料或熒光染料，例如偶氮染料或其類似物(例如剛果紅或伊文思藍(lán))、苯并噻唑類染料或其類似物(例如硫黃素t和硫黃素s)、莧菜紅、亮黑或尼羅紅。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述分離基質(zhì)包括選自下組的一種或多種的材料：棉或棉紗布；蠶絲；纖維素，例如硝化纖維素、微晶纖維素、乙酸纖維素、或木屑；聚合物類，例如聚酯、聚乙烯、聚砜、聚乙烯醇、聚乙二醇(例如peg2000、peg3000、peg4000、peg5000或peg6000)、或聚丙烯酰胺；玻璃纖維；硅膠、明膠或葡聚糖凝膠；干蛋白或蛋白干粉，例如蛋清蛋白干粉；無機(jī)礦土類，例如沸石、陶土、高嶺土、羧基磷灰石、蒙脫土；鈣鹽類，例如氯化鈣、碳酸鈣或磷酸鈣；活性炭；或活性氧化鋁。

5.一種用于檢測(cè)生物樣本中的錯(cuò)誤折疊蛋白或其聚集體的裝置，其特征在于，所述裝置包括：

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的裝置，其中所述檢測(cè)試劑是是染料，例如可見光染料或熒光染料，例如偶氮染料或其類似物(例如剛果紅或伊文思藍(lán))、苯并噻唑類染料或其類似物(例如硫黃素t和硫黃素s)、莧菜紅、亮黑或尼羅紅。

7.根據(jù)權(quán)利要求5-6中任一項(xiàng)所述的裝置，其中所述流體收集腔被構(gòu)造成以游離液體狀態(tài)收集從所述流體分離腔流過的生物樣本。

8.根據(jù)權(quán)利要求5-7中任一項(xiàng)所述的裝置，其中所述裝置還包括隔離層，其設(shè)置在所述流體分離腔和所述流體收集腔之間，并分隔所述流體分離腔和所述流體收集腔。

9.根據(jù)權(quán)利要求5-8中任一項(xiàng)所述的裝置，其中所述殼體還限定流體接收腔，所述流體接收腔用于接收所述生物樣本。

10.根據(jù)權(quán)利要求5-9中任一項(xiàng)所述的裝置在制備用于診斷或預(yù)測(cè)以錯(cuò)誤折疊蛋白為特征的疾病的試劑盒中的用途。

技術(shù)總結(jié)
一種用于檢測(cè)生物樣本中的錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)的裝置和方法。方法包括(a)提供生物樣本；(b)使生物樣本與檢測(cè)試劑混合，檢測(cè)試劑能夠與錯(cuò)誤折疊蛋白結(jié)合；(c)使與檢測(cè)試劑混合的生物樣本接觸并通過分離基質(zhì)，分離基質(zhì)被構(gòu)造以吸附未與錯(cuò)誤折疊蛋白結(jié)合的檢測(cè)試劑并允許與錯(cuò)誤折疊蛋白結(jié)合的檢測(cè)試劑通過；(d)以游離液體狀態(tài)收集從分離基質(zhì)通過的生物樣本；以及(e)檢測(cè)所收集的呈游離液體狀態(tài)的生物樣本中檢測(cè)試劑的存在，其中檢測(cè)試劑的存在指示生物樣本中存在錯(cuò)誤折疊蛋白。裝置和方法可用診斷和預(yù)測(cè)以錯(cuò)誤折疊蛋白為特征的疾病，例如，可用于診斷孕婦是否患有子癇前期或患有子癇前期的風(fēng)險(xiǎn)。

技術(shù)研發(fā)人員：李興民
受保護(hù)的技術(shù)使用者：浙江數(shù)問生物技術(shù)有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/10