本發(fā)明涉及fmoc-ser(tbu)-thr(psi(me,me)pro)-oh純度檢測(cè)方法，特別涉及fmoc-ser(tbu)-thr(psi(me,me)pro)-oh純度檢測(cè)方法。

背景技術(shù)：

1、常規(guī)fmoc-ser(tbu)-thr(psi(me,me)pro)-oh純度檢測(cè)，需要用到高效液相色譜方法，常規(guī)采用c18色譜柱，流動(dòng)相用到乙腈/水，常規(guī)洗脫液會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重拖尾，且峰對(duì)稱度差，已知雜質(zhì)沒(méi)有完全分離。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明提供了一種fmoc-ser(tbu)-thr(psi(me,me)pro)-oh純度檢測(cè)方法，主要解決現(xiàn)有液相色譜方法存在的峰型拖尾以及目標(biāo)峰與相鄰已知雜質(zhì)峰分離度等技術(shù)問(wèn)題。

2、本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案：帶fmoc-ser(tbu)-thr(psi(me,me)pro)-oh純度檢測(cè)方法，包括以下步驟：

3、步驟一，準(zhǔn)備測(cè)量的試劑：乙腈-色譜純，超純水，色譜純甲酸。

4、步驟二：樣品溶液的配制：稱取試樣置于容量瓶中，加入乙腈，室溫條件下采用超聲波溶解，再用水定容，最后試樣用聚丙烯有機(jī)濾膜過(guò)濾后進(jìn)行hplc分析。

5、?步驟三，進(jìn)行高效液相色譜測(cè)定;色譜條件為樣品室溫度為40℃，自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣體積為10?μl，色譜柱采用agilent?poroshell?120?ec-c18，柱溫：40?℃，流速：1.0?ml/min，流動(dòng)相a為質(zhì)量百分濃度0.025%甲酸水溶液；流動(dòng)相b為質(zhì)量百分濃度0.025%甲酸乙腈溶液，采用梯度洗脫程序。

6、所述的液相色譜測(cè)定時(shí)采用的色譜儀為安捷倫?1260色譜儀，該色譜儀采用vwd

7、檢測(cè)器。色譜柱尺寸為4.6mm?×150mm,?4.0μm。所述的梯度洗脫程序?yàn)椋?～12min，流動(dòng)相b體積比例為60%到100%，?12～12.1?min，流動(dòng)相b體積比例從100%?到60%?的初始比例，12.1～18?min，流動(dòng)相b體積比例從60%?到平衡系統(tǒng)。

8、本發(fā)明具有以下有益效果：本發(fā)明方法操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，穩(wěn)定性好，更主要是主峰峰型對(duì)稱，與相鄰已知雜質(zhì)分離度好等；本發(fā)明采用了高效液相色譜儀的自動(dòng)進(jìn)樣器的精準(zhǔn)定量，利用常規(guī)vwd檢測(cè)器的靈敏度可以對(duì)帶fmoc-ser(tbu)-thr(psi(me,me)pro)-oh有很好的響應(yīng)值，同時(shí)利用agilent?poroshell?120?ec-c18色譜柱填料為直徑實(shí)心核和0.5?μm?厚的多孔外層構(gòu)成，多孔層和實(shí)心核限制了擴(kuò)散距離，提高了分離速度，解決了峰拖尾以及相鄰已知雜質(zhì)峰分離度現(xiàn)象。達(dá)到了低濃度，高響應(yīng)、基線級(jí)分離的技術(shù)效果。

技術(shù)特征：

1.fmoc-ser(tbu)-thr(psi(me,me)pro)-oh純度檢測(cè)方法；其特征是：包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的fmoc-ser(tbu)-thr(psi(me,me)pro)-oh純度檢測(cè)方法，其特征是：所述的液相色譜測(cè)定時(shí)采用的色譜儀為agilent?1260?液相色譜儀，該儀器采用vwd檢測(cè)器。

3.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的fmoc-ser(tbu)-thr(psi(me,me)pro)-oh純度檢測(cè)方法，其特征是：所述色譜柱尺寸為4.6mm?×150mm,?4.0μm。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的fmoc-ser(tbu)-thr(psi(me,me)pro)-oh純度檢測(cè)方法，其特征是：所述的梯度洗脫程序?yàn)椋?～12min，流動(dòng)相b體積比例為60%到100%，?12～12.1?min，流動(dòng)相b體積比例從100%?到60%?的初始比例，12.1～18?min，流動(dòng)相b體積比例從60%?到平衡系統(tǒng)。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了Fmoc?Ser(tBu)?Thr(psi(Me,Me)pro)?OH純度檢測(cè)方法，主要解決現(xiàn)有液相色譜方法存在的峰型拖尾以及目標(biāo)峰與相鄰已知雜質(zhì)峰分離度等技術(shù)問(wèn)題。本發(fā)明測(cè)定方法包括以下步驟：一，準(zhǔn)備測(cè)量的試劑，二，樣品的前處理；三，進(jìn)行高效液相色譜測(cè)定，色譜儀為安捷倫1260色譜儀，采用VWD紫外檢測(cè)器，色譜柱采用Agilent?poroshell?120?EC?C18，流動(dòng)相為質(zhì)量百分濃度為0.025%甲酸水溶液（A）和質(zhì)量百分濃度為0.025%甲酸乙腈（B）。通過(guò)本發(fā)明為Fmoc?Ser(tBu)?Thr(psi(Me,Me)pro)?OH純度檢測(cè)方法純度檢測(cè)領(lǐng)域提供了可靠便捷的檢測(cè)手段。

技術(shù)研發(fā)人員：徐紅巖,夏偉冬,于程偉,彭麗勤
受保護(hù)的技術(shù)使用者：上海吉奉生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/9/23