本發(fā)明涉及生物檢測，更具體地說，它涉及一種氣相色譜法測定小麥中乙烯含量的方法。

背景技術：

1、植物激素(plant?hormone)亦稱為植物內(nèi)源激素或植物天然激素，是植物細胞接受特定環(huán)境信號誘導產(chǎn)生的、低濃度時可調(diào)節(jié)(促進、抑制)植物生理過程的有機化合物，在細胞分裂與生長、組織于器官分化、開花與結(jié)實、成熟與衰老、休眠與萌發(fā)以及離體組織培養(yǎng)等方面，分別或相互協(xié)調(diào)的調(diào)控植物的生長發(fā)育與分化。

2、已知植物體內(nèi)產(chǎn)生的激素有六大類，即生長素(auxins)、細胞分裂素(gibberellins，gas)、赤霉素(cytokinins，ctks)、脫落酸(abscisic?acid，aba)、乙烯(ethylene，eth)和油菜素甾醇(brassnosteroid，brs)，雖然這些激素在植物體內(nèi)的含量很少，卻發(fā)揮著很大的作用，是植物生命活動不可缺少的物質(zhì)，對于調(diào)節(jié)植物的各種生長發(fā)育過程和環(huán)境的應答有著非常重大的意義。

3、乙烯在植物體內(nèi)含量極低且具有易燃易爆性，檢測所用儀器需具備高選擇性的傳感器，以區(qū)別其他氣體的干擾，氣相色譜法(gas?chromatography，gc)是目前乙烯含量測定中應用最為廣泛且可靠的方法之一；但是，目前并沒有專門針對普通小麥提出的關于小麥體內(nèi)乙烯含量精準檢測的方法，現(xiàn)有技術中也缺少小麥體內(nèi)乙烯含量精準檢測的相關報道。

4、因此，本發(fā)明旨在提供一種氣相色譜法測定小麥中乙烯含量的方法，用以解決上述問題。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是提供一種氣相色譜法測定小麥中乙烯含量的方法，本發(fā)明利用不同物質(zhì)在氣相和固定相之間的分配系數(shù)差異，通過色譜柱實現(xiàn)混合物的分離，隨后通過火焰離子化檢測器fid對分離出的乙烯進行定量檢測，具有靈敏度高、分辨率強、重復性好等優(yōu)點，能夠準確測定復雜基質(zhì)中的乙烯含量。

2、本發(fā)明的上述技術目的是通過以下技術方案得以實現(xiàn)的：一種氣相色譜法測定小麥中乙烯含量的方法，包括以下步驟：

3、s1、準備小麥籽粒樣品，將定量處于發(fā)育時期的小麥籽粒從穗上取下，稱取其重量，置于15ml具塞玻璃瓶中，密封于22℃溫室下靜置48h，生成待測氣體。

4、s2、將0.5ml?1-2個不同濃度的標準氣體依次注入氣相色譜儀，測定各個標準系列濃點的響應值，以濃度點的濃度為橫坐標，各濃度點的峰面積為縱坐標，繪制校準曲線，得到標準氣體的乙烯峰面積。

5、s3、從具塞玻璃瓶中抽取0.5ml待測氣體樣品進樣，然后向其中加入0.5ml體積的水補充體積。

6、s4、將0.5ml待測氣體樣品依次注入氣相色譜儀，得到待測氣體的乙烯峰面積。

7、s5、計算待測氣體的乙烯峰面積與標準氣體乙烯峰面積的比值，得到待測氣體樣品中乙烯的含量。

8、本發(fā)明進一步設置為：將小麥籽粒樣品由普通小麥幼苗樣品代替，將種植7d的10棵單葉期幼苗，稱取其重量，置于50ml具塞離心管中，并在離心管中放入適量水以沒過植株根部，密封于22℃溫室靜置24h，生成待測氣體。

9、本發(fā)明進一步設置為：所述步驟s2中繪制校準曲線具體是以一個濃度點的標準氣體繪制校準曲線，所述校準曲線過原點。

10、本發(fā)明進一步設置為：所述氣相色譜儀中具體采用貨號為113-4332的安捷倫色譜柱，所述色譜柱的長度為30m，規(guī)格為7英寸，內(nèi)徑為0.32mm，且所述色譜柱保持恒流模式，流速為4ml/min。

11、本發(fā)明進一步設置為：所述色譜柱前進樣口溫度為150℃，進樣方式為分流進樣，分流比為3:1，壓力為16.817psi，隔墊吹掃為3ml/min。

12、本發(fā)明進一步設置為：所述氣相色譜儀中具體采用氫火焰離子檢測器，所述檢測器的使用溫度為250℃，具有高靈敏度和高達400℃的溫度范圍。

13、本發(fā)明進一步設置為：所述檢測器中包括用于檢測的高純氫氣、用于調(diào)整靈敏度的高純空氣、用于載氣的高純氮氣、用于示蹤撿漏的高純氦氣和用于消除柱外效應的尾吹氣，所述高純氫氣的流量為40ml/min，所述高純空氣的流量為350ml/min，所述尾吹氣的流量為25ml/min。

14、本發(fā)明進一步設置為：所述步驟s2中標準氣體采用有證書的乙烯氣體，所述乙烯氣體的濃度為1ppm。

15、本發(fā)明進一步設置為：所述氣相色譜儀中具體采用貨號為5190-2295的安捷倫進樣口襯管，所述進樣口襯管體積為870ul，內(nèi)徑為1mm，所述進樣口襯管具有超高惰性，可分流，低壓降，帶玻璃毛，可根據(jù)試驗要求更換不同容積的襯管。

16、綜上所述，本發(fā)明具有以下有益效果：

17、1、本發(fā)明利用不同物質(zhì)在氣相和固定相之間的分配系數(shù)差異，通過色譜柱實現(xiàn)混合物的分離，隨后通過火焰離子化檢測器fid對分離出的乙烯進行定量檢測，具有靈敏度高、分辨率強、重復性好等優(yōu)點，能夠準確測定復雜基質(zhì)中的乙烯含量；

18、2、本發(fā)明提供的氣相色譜法測定小麥中乙烯含量的方法能夠?qū)崿F(xiàn)更低定量限、更廣線性范圍的檢測，并且具有高靈敏度、通量高、快速便捷、準確可靠的特點，一個樣品的檢測時間僅1-2min，適用于小麥籽粒、幼苗中植物激素乙烯的檢測；

19、3、本發(fā)明的氣相色譜法測定小麥中乙烯含量的方法操作簡單，靈敏度高，采用本發(fā)明方法檢測乙烯的檢出限度可達0.1ppm以下，分流器還能進行反吹，從而縮短分析周期，并延長色譜柱壽命，隔墊吹掃氣既可以帶走隔墊分解的污染物又可以消除二次進樣現(xiàn)象，同時儀器的的自動化性能使分析時間更短，能使每個樣品分析的成本降到非常低；

20、4、本發(fā)明的氣相色譜法測定小麥中乙烯含量的方法快速便捷，無需對樣品進行的復雜的前處理，極大的減少了前處理過程中乙烯的分解，避免了植物激素乙烯含量的失真。

技術特征：

1.一種氣相色譜法測定小麥中乙烯含量的方法，其特征是：包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種氣相色譜法測定小麥中乙烯含量的方法，其特征是：將小麥籽粒樣品由普通小麥幼苗樣品代替，將種植7d的10棵單葉期幼苗，稱取其重量，置于50ml具塞離心管中，并在離心管中放入適量水以沒過植株根部，密封于22℃溫室靜置24h，生成待測氣體。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種氣相色譜法測定小麥中乙烯含量的方法，其特征是：所述步驟s2中繪制校準曲線具體是以一個濃度點的標準氣體繪制校準曲線，所述校準曲線過原點。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種氣相色譜法測定小麥中乙烯含量的方法，其特征是：所述氣相色譜儀中具體采用貨號為113-4332的安捷倫色譜柱，所述色譜柱的長度為30m，規(guī)格為7英寸，內(nèi)徑為0.32mm，且所述色譜柱保持恒流模式，流速為4ml/min。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種氣相色譜法測定小麥中乙烯含量的方法，其特征是：所述色譜柱前進樣口溫度為150℃，進樣方式為分流進樣，分流比為3:1，壓力為16.817psi，隔墊吹掃為3ml/min。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種氣相色譜法測定小麥中乙烯含量的方法，其特征是：所述氣相色譜儀中具體采用氫火焰離子檢測器，所述檢測器的使用溫度為250℃，具有高靈敏度和高達400℃的溫度范圍。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種氣相色譜法測定小麥中乙烯含量的方法，其特征是：所述檢測器中包括用于檢測的高純氫氣、用于調(diào)整靈敏度的高純空氣、用于載氣的高純氮氣、用于示蹤撿漏的高純氦氣和用于消除柱外效應的尾吹氣，所述高純氫氣的流量為40ml/min，所述高純空氣的流量為350ml/min，所述尾吹氣的流量為25ml/min。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種氣相色譜法測定小麥中乙烯含量的方法，其特征是：所述步驟s2中標準氣體采用有證書的乙烯氣體，所述乙烯氣體的濃度為1ppm。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種氣相色譜法測定小麥中乙烯含量的方法，其特征是：所述氣相色譜儀中具體采用貨號為5190-2295的安捷倫進樣口襯管，所述進樣口襯管體積為870ul，內(nèi)徑為1mm，所述進樣口襯管具有超高惰性，可分流，低壓降，帶玻璃毛，可根據(jù)試驗要求更換不同容積的襯管。

技術總結(jié)
本發(fā)明公開了一種氣相色譜法測定小麥中乙烯含量的方法，涉及生物檢測技術領域，其技術方案要點是：包括準備小麥籽粒樣品，在一定條件下置于具塞玻璃瓶中，生成待測氣體；從具塞玻璃瓶中抽取待測氣體樣品依次注入氣相色譜儀，得到待測氣體的乙烯峰面積；將標準氣體依次注入氣相色譜儀，繪制校準曲線，得到標準氣體的乙烯峰面積；計算待測氣體的乙烯峰面積與標準氣體乙烯峰面積的比值，得到待測氣體樣品中乙烯的含量。本發(fā)明提供的測定方法能夠?qū)崿F(xiàn)更低定量限、更廣線性范圍的檢測，并且具有高靈敏度、通量高、快速便捷、準確可靠的特點，一個樣品的檢測時間僅1?2min，適用于小麥籽粒、幼苗中植物激素乙烯的檢測。

技術研發(fā)人員：鄭宏遠,王秀雨,王羽,周雪敏,張星宇,王道文,陳杰,陳怡萱,郭瑞
受保護的技術使用者：河南農(nóng)業(yè)大學
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/12/10