本發(fā)明涉及蜂蜜檢測，具體地說，涉及一種鑒別無刺蜂蜂蜜的方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、無刺蜂（stingless?bees）屬于膜翅目（hymenoptera）、蜜蜂科（apidae）、麥蜂族（meliponini）昆蟲，由于尾部蟄針退化，被名為無刺蜂，主要生活在熱帶和亞熱帶地區(qū)。無刺蜂體型小，飛行能力較低，是小型植物的主要授粉者，它可采集巢穴周圍開花的汁液、植物或昆蟲分泌物，并儲存于用蜂膠和蜂蠟的混合物制成的球型罐中，即為無刺蜂蜂蜜。無刺蜂蜂蜜的口感酸甜，水分含量較高，主要由糖類組成。研究發(fā)現(xiàn)無刺蜂蜂蜜中含有豐富的營養(yǎng)成分，如多酚類化合物等，具有顯著的藥理活性和藥用價值，例如抗氧化、消炎、抑菌、促進傷口愈合、抗糖尿病、治療眼部疾病、調(diào)節(jié)機體代謝、調(diào)節(jié)腸道菌群等，因此越來越受消費者的喜愛。

2、甘露醇（mannitol）是一種糖醇，與山梨糖醇互為同分異構(gòu)體，其分子式和分子量分別為c6h14o6和182.17g/mol。甘露醇的工業(yè)生產(chǎn)困難且昂貴，但可以從一些天然來源中提取和獲得，如葡萄糖代謝、蔬菜、水果、藻類、菌類、堅果和種子等。目前，甘露醇在食品、化工和醫(yī)療工業(yè)中的用途，受到人們的廣泛關(guān)注。甘露醇與蔗糖和葡萄糖相比對血糖水平的影響較小，非常適合作為節(jié)食人群和糖尿病患者的食品成分。由于甘露醇具有非還原性，不會引起美拉德反應(yīng)，被用于烘焙行業(yè)中來保持產(chǎn)品的顏色外觀。甘露醇作為一種高效的脫水劑和利尿劑，有助于接受血管和心臟手術(shù)的患者降低顱內(nèi)壓力的升高，保護患者手術(shù)時期的腎功能。作為六元醇，甘露醇的羥基容易發(fā)生取代、酯化和縮合反應(yīng)，從而生成一系列具有生物活性的衍生物或其中間體。甘露醇具有優(yōu)秀的生物學功能，然而目前還未見其可作為某類蜂蜜特征標志物的報道。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的之一在于提供一種鑒別無刺蜂蜂蜜的新方法。

2、本發(fā)明提供了一種鑒別無刺蜂蜂蜜的方法，當待測蜂蜜中含有甘露醇時，則判定所述待測蜂蜜為無刺蜂蜂蜜。

3、本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)，僅在無刺蜂蜂蜜中可檢測到甘露醇，而在其他蜂蜜中未檢測到，由此，本發(fā)明提出了一種新的鑒別無刺蜂蜂蜜的方法。

4、甘露醇是一種糖醇，結(jié)構(gòu)式為：

5、。

6、甘露醇標準樣品易于獲得，適合作為特征識別物。

7、本發(fā)明的方法適用于不同品種的無刺蜂蜂蜜的鑒別，可將不同品種的無刺蜂蜂蜜（包括并不限于多種無刺蜂如黃紋無刺蜂 lepidotrigona?flavibasis、頂無刺蜂 lepidotrigona?terminata、黑胸無刺蜂 tetragonula?pagdeni、戈氏無刺蜂 tetragonulag ressitti、賓氏無刺蜂 tetrigona?binghami、卡式無刺蜂 tetragonula? carbonaria、虹無刺蜂 tetragonula?hockingsi、墨脫鱗無刺蜂 lepidotrigona?arcifera產(chǎn)生的蜂蜜）與其他蜂蜜區(qū)分開來。

8、本發(fā)明的方法中，通過hplc-rid色譜法對所述待測蜂蜜中是否存在甘露醇進行檢測。

9、本發(fā)明通過hplc-rid建立了蜂蜜中甘露醇的檢測方法，此方法可以實現(xiàn)甘露醇的快速分析，從而有利于無刺蜂蜂蜜的鑒別。

10、具體地，本發(fā)明采用高效液相檢測器配示差檢測器對待測蜂蜜樣品進行檢測，若所得色譜圖中在對應(yīng)時間內(nèi)含有甘露醇的特征峰時，則判定蜂蜜中含有甘露醇，待測蜂蜜樣品為無刺蜂蜂蜜；反之，若不含有所述特征峰時，則判定蜂蜜中不含有甘露醇，待測蜂蜜樣品不是無刺蜂蜂蜜。

11、本發(fā)明的方法中，以hplc-rid色譜法進行檢測時，色譜柱為hi-plex?pb；流動相為水。

12、本發(fā)明的方法中，以hplc-rid色譜法進行檢測時，柱溫為50±5℃；壓力為0.5-0.7kpa。

13、本發(fā)明的方法中，以hplc-rid色譜法進行檢測時，示差檢測器為rid-10a，檢測溫度為50±5℃。

14、本發(fā)明的方法中，以hplc-rid色譜法進行檢測時，進樣量為20~25μl；流速為0.4~0.5ml/min；單梯度洗脫時間為55~60min。

15、優(yōu)選，本發(fā)明的方法中，以hplc-rid色譜法進行檢測時，色譜柱為hi-plex?pb；流動相為水；柱溫為50℃；壓力為0.6kpa；示差檢測器為rid-10a，檢測溫度為50℃；進樣量為20μl；流速為0.4ml/min；單梯度洗脫時間為60min。

16、本發(fā)明的方法中，在以hplc-rid色譜法進行檢測前，還包括對所述待測蜂蜜進行預處理的步驟；所述預處理的方法為：將所述待測蜂蜜與水混合后取上清液過尼龍膜。

17、本發(fā)明的檢測方法不需要對待測蜂蜜進行復雜的前處理，僅進行簡單的稀釋和過濾即可實現(xiàn)后續(xù)的檢測。優(yōu)選將待測蜂蜜的水溶液過0.22μm尼龍濾膜即可。

18、本發(fā)明還提供上述方法在判別無刺蜂蜂蜜真?zhèn)沃械膽?yīng)用。

19、本發(fā)明的應(yīng)用中，當檢測到待測蜂蜜中含有甘露醇時，則判定所述待測蜂蜜為真的無刺蜂蜂蜜；當檢測到待測蜂蜜中不含有甘露醇時，則判定所述待測蜂蜜不為無刺蜂蜂蜜。

20、本發(fā)明的有益效果至少在于：

21、本發(fā)明確定了甘露醇可以作為鑒別無刺蜂蜂蜜的特征識別物，為無刺蜂蜂蜜真實性及品質(zhì)評價體系提供了新的判定方法。

技術(shù)特征：

1.一種鑒別無刺蜂蜂蜜的方法，其特征在于，當待測蜂蜜中含有甘露醇時，則判定所述待測蜂蜜為無刺蜂蜂蜜。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，通過hplc-rid色譜法對所述待測蜂蜜中是否存在甘露醇進行檢測。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，以hplc-rid色譜法進行檢測時，色譜柱為hi-plex?pb；流動相為水。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，以hplc-rid色譜法進行檢測時，柱溫為50±5℃；壓力為0.5-0.7kpa。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，以hplc-rid色譜法進行檢測時，示差檢測器為rid-10a，檢測溫度為50±5℃。

6.根據(jù)權(quán)利要求2-5任一項所述的方法，其特征在于，以hplc-rid色譜法進行檢測時，進樣量為20~25μl；流速為0.4~0.5ml/min；單梯度洗脫時間為55~60min。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，以hplc-rid色譜法進行檢測時，色譜柱為hi-plex?pb；流動相為水；柱溫為50℃；壓力為0.6kpa；示差檢測器為rid-10a，檢測溫度為50℃；進樣量為20μl；流速為0.4ml/min；單梯度洗脫時間為60min。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，在以hplc-rid色譜法進行檢測前，還包括對所述待測蜂蜜進行預處理的步驟；

9.權(quán)利要求1-8任一項所述的方法在判別無刺蜂蜂蜜真?zhèn)沃械膽?yīng)用。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，當檢測到待測蜂蜜中含有甘露醇時，則判定所述待測蜂蜜為真的無刺蜂蜂蜜；當檢測到待測蜂蜜中不含有甘露醇時，則判定所述待測蜂蜜不為無刺蜂蜂蜜。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及蜂蜜檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體公開了一種鑒別無刺蜂蜂蜜的方法與應(yīng)用。本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)在除無刺蜂蜂蜜外的其他蜂蜜中均未檢測到甘露醇，且甘露醇標準樣品易于獲得，適合作為特征識別物，進而提出了一種鑒別無刺蜂蜂蜜的方法，當待測蜂蜜中含有甘露醇時，則判定所述待測蜂蜜為無刺蜂蜂蜜。本發(fā)明方法為無刺蜂蜂蜜的鑒定提出了一種新的有效方法，對于無刺蜂蜂蜜的質(zhì)量/真?zhèn)舞b定有著重要意義。

技術(shù)研發(fā)人員：王凱,徐嚴冬,鄭星,唐本艷,吳黎明
受保護的技術(shù)使用者：中國農(nóng)業(yè)科學院蜜蜂研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/17