本發(fā)明屬于生物檢測領域，具體涉及一種檢測血清自身抗體的試劑盒及其應用。

背景技術：

1、近些年來，全球乳腺癌的發(fā)病率和死亡率呈現(xiàn)上升的趨勢，成為發(fā)展中國家和發(fā)達國家女性的主要癌癥。乳腺癌早期的篩查和診斷是降低乳腺癌死亡率的最好辦法，因此，早期的疾病的預防至關重要。在目前乳腺癌檢測方法中，乳房x光檢查是一種比較普遍的篩查技術，但是存在明顯的局限性。乳房x光檢查缺乏敏感性，不適合檢測原發(fā)性乳腺癌，而且可能導致假陽性結果。因此，亟須一種更有效的診斷早期乳腺癌的手段。目前，早期乳腺癌的檢測手段主要是通過檢測腫瘤相關抗原，例如甲胎蛋白cea、抗原ca19-9、蛋白afp等，這些標志物的含量隨著腫瘤大小的增長而升高，所以腫瘤相關抗原靈敏度和特異性比較差。因此，亟待尋找一種腫瘤標志物來解決目前的國際難題。

2、20世紀60年代研究證實了人體的免疫系統(tǒng)能夠?qū)δ[瘤產(chǎn)生免疫反應，腫瘤相關抗原的過表達、異常突變導致癌癥患者產(chǎn)生自身免疫應答，能夠在癌癥患者體內(nèi)檢測到高表達的自身抗體來，來實現(xiàn)對腫瘤患者早期診斷。自身抗體是針對自身組織、器官、細胞成分的抗體，產(chǎn)生可能先于確診腫瘤數(shù)月或者數(shù)年，能夠在腫瘤患者出現(xiàn)臨床癥狀之前檢測到。抗原本身在健康細胞中以低濃度表達，少量的刺激就可以引起b細胞產(chǎn)生大量的自身抗體，對抗原信號起到了一定的放大作用，所以自身抗體的濃度遠遠高于抗原，因此在腫瘤抗原表達很低的時候也能夠檢測到自身抗體。此外，自身抗體穩(wěn)定性好，存在于血清中的時間較長，便于長期存放及大規(guī)模篩查。

3、因此，特異性檢測自身抗體的試劑盒可以作為醫(yī)學上癌癥早期檢測的補充手段，實現(xiàn)對癌癥簡單、快速、靈敏的檢測。尋找腫瘤特異的靶抗原以及其誘導產(chǎn)生的自身抗體，對于自身抗體應用于腫瘤的檢測至關重要，也是該領域研究的重點以及難點。異質(zhì)核糖核蛋白（hnrnps）是高等真核生物中含量最豐富的核蛋白，也是一種rna結合蛋白。異質(zhì)核糖核蛋白主要包括hnrnpa0、hnrnpa1、hnrnpa2b1和hnrnpa3四種亞型。hnrnpa3是?hnrnps家族中研究相對較少的成員，是一種重要的蛋白。hnrnpa3作為腫瘤抗原誘導自身抗體產(chǎn)生，參與乳腺癌的發(fā)展過程尚未報道，目前已經(jīng)報道的標志物缺乏在早期乳腺癌或者乳腺癌前病變方面的研究。

技術實現(xiàn)思路

1、為了克服現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明的目的之一在于提供一種檢測血清自身抗體的試劑盒，可用于特異性檢測血清中的hnrnpa3自身抗體，作為高表達hnrnpa3自身抗體類的癌癥的輔助診斷手段，具有檢測方法簡便、準確性強等優(yōu)點。

2、本發(fā)明的目的之二在于提供一種檢測血清自身抗體的試劑盒的應用。

3、為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術方案是：

4、一種檢測血清自身抗體的試劑盒，所述試劑盒包括標準品、包被重組抗原蛋白的酶標板、酶標二抗、顯色液、反應終止液；所述的重組抗原蛋白為帶有his標簽的重組hnrnpa3抗原蛋白。

5、進一步地，所述標準品為含有hnrnpa3自身抗體的血清。

6、進一步地，所述重組hnrnpa3抗原蛋白的包被濃度為0.5-1μg/ml。

7、進一步地，所述重組hnrnpa3抗原蛋白最佳包被濃度為0.5μg/ml。

8、進一步地，所述酶標二抗為辣根過氧化物酶標記的兔抗人igg抗體。

9、進一步地，所述顯色液為tmb顯色液；所述反應終止液為硫酸。

10、上述檢測血清自身抗體的試劑盒在制備乳腺癌前期病變篩查以及診斷產(chǎn)品中的應用。

11、進一步地，所述試劑盒用于檢測血清樣本中hnrnpa3自身抗體含量。

12、與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果主要在于：本發(fā)明公開了一種檢測血清自身抗體的試劑盒及其應用，通過蛋白質(zhì)質(zhì)譜技術篩選出來能夠檢測早期乳腺癌血清hnrnpa3自身抗體，該試劑盒可特異性檢測hnrnpa3自身抗體含量，特異性強，靈敏度高，可以用于乳腺癌前期病變篩查以及診斷產(chǎn)品中的應用，具有廣闊的應用前景。

技術特征：

1.一種檢測血清自身抗體的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括標準品、包被重組抗原蛋白的酶標板、酶標二抗、顯色液、反應終止液；所述的重組抗原蛋白為帶有his標簽的重組hnrnpa3抗原蛋白。

2.根據(jù)權利要求1所述一種檢測血清自身抗體的試劑盒，其特征在于，所述標準品為含有hnrnpa3自身抗體的血清。

3.根據(jù)權利要求1所述一種檢測血清自身抗體的試劑盒，其特征在于，所述重組hnrnpa3抗原蛋白的包被濃度為0.5-1μg/ml。

4.根據(jù)權利要求3所述一種檢測血清自身抗體的試劑盒，其特征在于，所述重組hnrnpa3抗原蛋白最佳包被濃度為0.5μg/ml。

5.根據(jù)權利要求1所述一種檢測血清自身抗體的試劑盒，其特征在于，所述酶標二抗為辣根過氧化物酶標記的兔抗人igg抗體。

6.根據(jù)權利要求1所述一種檢測血清自身抗體的試劑盒，其特征在于，所述顯色液為tmb顯色液；所述反應終止液為硫酸。

7.根據(jù)權利要求1至6任一項所述一種檢測血清自身抗體的試劑盒在制備乳腺癌前期病變篩查以及診斷產(chǎn)品中的應用。

8.根據(jù)權利要求7所述一種檢測血清自身抗體的試劑盒在制備乳腺癌前期病變篩查以及診斷產(chǎn)品中的應用，其特征在于，所述試劑盒用于檢測血清樣本中hnrnpa3自身抗體含量。

技術總結
本發(fā)明屬于生物檢測領域，具體涉及一種檢測血清自身抗體的試劑盒及其應用。所述試劑盒包括標準品、包被重組抗原蛋白的酶標板、酶標二抗、顯色液、反應終止液；所述的重組抗原蛋白為帶有His標簽的重組HNRNPA3抗原蛋白。本發(fā)明提供的用于檢測乳腺癌的試劑盒特異性強，可特異性檢測HNRNPA3自身抗體含量，作為高表達HNRNPA3自身抗體乳腺癌輔助診斷手段，對癌癥早期的篩查和診斷至關重要。

技術研發(fā)人員：楊琴,楊成杰
受保護的技術使用者：廣州醫(yī)太通生物科技有限公司
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/12/19