專利名稱:菜籽(油)芥酸快速檢測(cè)技術(shù)的制作方法
發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域：
:(紙)色譜技術(shù)。
在低芥酸品種的繁殖和推廣中，由于分析和檢測(cè)要求在農(nóng)村基層進(jìn)行，因此對(duì)菜籽(油)芥酸含量測(cè)定法提出了新的要求;要求設(shè)備、試劑費(fèi)低廉，分析時(shí)間短，既便于處理零星，又可能較多量的處理分析樣品。過(guò)去曾用于育種階段的方法，或因設(shè)備費(fèi)高，或因全分析時(shí)間太長(zhǎng)，很難實(shí)用于農(nóng)村基層油糧、種子收購(gòu)等部門。
鑒于目前我國(guó)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)規(guī)模小而分散，基層儀器設(shè)備和技術(shù)力量都不足;因此一個(gè)不需要貴重設(shè)備，又能快速地檢測(cè)芥酸含量在5%以下(供食用油用)和2%以下(供留種用)的簡(jiǎn)易檢測(cè)技術(shù)是十分需要的。食品工業(yè)為了保證所生產(chǎn)食品中芥酸含量低，也需要一個(gè)快速簡(jiǎn)易的檢測(cè)技術(shù)。本方法即為針對(duì)以上生產(chǎn)上的實(shí)際需要而設(shè)計(jì)并取得實(shí)效的。
本項(xiàng)技術(shù)是對(duì)紙色譜法應(yīng)用在分離和鑒定菜籽(油)脂肪酸甲(乙)酯方面的改進(jìn)。
本項(xiàng)技術(shù)的主要改進(jìn)在于以下幾點(diǎn)1、在分離技術(shù)方面不要求分離菜籽油中的每一種脂肪酸甲(乙)酯，只要求分離或分辨出芥酸甲(乙)酯。在選用流動(dòng)相(甲醇-乙醇-水)比例合適時(shí)，即指甲醇-乙醇-水的流動(dòng)相相應(yīng)的組成體積百分比是在50-95∶0-60∶0-10的范圍中，可在10分鐘內(nèi)完成快速分離;與一般色譜每種不同的成份都有一個(gè)色譜點(diǎn)不同，本色譜圖上只有兩個(gè)色譜點(diǎn)(或一個(gè)色譜點(diǎn)帶一拖尾斑)。
2、在點(diǎn)樣方法和鑒別技術(shù)上在一般點(diǎn)樣量的情況下，含芥酸5%以上的樣品可分成兩個(gè)色譜點(diǎn);含量越高則芥酸點(diǎn)越清楚，含芥酸5%以下的樣品的芥酸色譜點(diǎn)則變成另一色斑的拖尾斑;由此則可區(qū)別出芥酸含量5%以上或以下的樣品。芥酸含量在5%以下的樣品，可供制備食用油之用。
在重點(diǎn)樣量(比一般點(diǎn)樣多2倍以上)的情況下，在芥酸含量在2%-5%樣品中，芥酸色譜點(diǎn)成為另一色譜點(diǎn)的輕微拖尾色斑;芥酸含量在2%以下的樣品則無(wú)可區(qū)辨的拖尾色斑。這種油菜籽可供留種之用。
3、在顯色技術(shù)上用1-5%碘乙醇(95%)溶液，在展開后的紙譜上，可作噴霧快速顯色劑。利用碘色在脂肪酸甲(乙)酯的位置上退色緩慢，在濾紙上退色較快的現(xiàn)象;當(dāng)濾紙碘色退后，即可顯出脂肪甲(乙)酯的色譜點(diǎn)。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比所具的優(yōu)點(diǎn)我們現(xiàn)在提出的方法與西德紙色譜法，(《赴西德學(xué)習(xí)油菜育種的報(bào)告》華中農(nóng)學(xué)院付廷棟，農(nóng)業(yè)部科技局，外事局印1982年1月，14-15頁(yè))以及中國(guó)農(nóng)科院油料研究所改進(jìn)的西德法，都是利用紙色譜法分離鑒定芥酸。但后兩種方法全分析時(shí)間要12小時(shí)以上，設(shè)備費(fèi)用每套要2.000元，難于實(shí)用于農(nóng)村基層。由于我們采用園紙色譜方式，并且只要求分離出芥酸，因此加快了分離速度。在采用特定的流動(dòng)相時(shí)，可于8分鐘完成分離，用我們提出的顯色劑2-3分鐘內(nèi)即可顯色。全分析時(shí)間在油菜收獲季節(jié)單樣需17分鐘，100份樣品集中分析時(shí)平均每個(gè)樣品需1.25分鐘。全部設(shè)備試劑費(fèi)每套在100元左右。每個(gè)樣品消耗材料及試劑費(fèi)為8分錢。這樣的速度和費(fèi)用完全有可能適用于農(nóng)村基層和基層食品工業(yè)部門。
我們提出的方法，經(jīng)中國(guó)情報(bào)所重慶分所國(guó)際聯(lián)機(jī)檢索世界專利索引(1963-1980，1981-現(xiàn)在的專利文獻(xiàn))，檢索貯存號(hào)“TBO14”，前人尚未有類似專利申請(qǐng)。
實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的最好方式是將已處理好的反相園濾紙?jiān)谥行奶幱玫镀瑒澮粭l約0.7厘米長(zhǎng)的細(xì)縫，在距該縫0.7厘米處，對(duì)稱用進(jìn)樣毛細(xì)管點(diǎn)酯化好的樣品溶液，每張紙可點(diǎn)四個(gè)點(diǎn)，每點(diǎn)為一個(gè)樣，各點(diǎn)點(diǎn)樣量5次(約100微升)每點(diǎn)一次后，再加點(diǎn)二次，使其成直徑約0.4厘米的園點(diǎn)。點(diǎn)完樣后，讓石油醚自由揮發(fā)掉。
在培養(yǎng)皿里注入流動(dòng)相溶液。剪一小濾紙條，使紙條與園紙平面垂直，濾紙條上端略露出，使皿蓋和紙面離開少許距離，下端位置適宜，使紙條能放置于培養(yǎng)皿的溶液中。讓園紙剛好放在培養(yǎng)皿上，然后將培養(yǎng)皿蓋蓋上。流動(dòng)相甲醇∶乙醇∶水在50-95∶0-60∶0-10的范圍大約8分鐘后，流動(dòng)相距園紙邊緣1厘米時(shí)，取出園濾紙，風(fēng)干。
用玻璃噴瓶將顯色劑1-5%的碘乙醇液噴在風(fēng)干了的園濾紙上，待底色退去后，立即根據(jù)色譜斑點(diǎn)進(jìn)行判斷，并記下結(jié)果。如果濾紙的顏色全退完還沒(méi)能記下實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可再向園濾紙噴一次顯色劑，重新判斷一次。
權(quán)利要求
1.一項(xiàng)改進(jìn)的分離菜籽(油)脂肪酸甲。(乙)酯的園紙色譜法，其特征是使用甲醇--乙醇--水配制流動(dòng)相，快速地把樣點(diǎn)展開成芥酸甲(乙)酯和其余脂肪酸甲(乙)酯的兩個(gè)色譜點(diǎn)。
2.要求專利(1)項(xiàng)中的甲醇-乙醇-水的流動(dòng)相相應(yīng)的組成體積百分比是在50-95∶0-60∶0-10的范圍中。
3.要求專利(1)項(xiàng)中的兩個(gè)色譜點(diǎn)，在兩種不同點(diǎn)樣法中形狀不同，用一般點(diǎn)樣法時(shí)，可分離成兩個(gè)色譜點(diǎn)，用來(lái)鑒別出芥酸含量5%以上或以下的樣品，在重點(diǎn)樣法時(shí)(為一般點(diǎn)樣法的二倍以上)，則芥酸甲(乙)酯成為另一色譜點(diǎn)的拖尾斑，可用來(lái)鑒別出芥酸含量在2%以上和以下的樣品。
4.一項(xiàng)快速的菜籽(油)脂肪酸甲(乙)酯的紙色譜顯色方法，其特征是用碘乙醇溶液作顯色劑，利用碘色在脂肪酸甲(乙)酯上和在濾紙上退色的速度差別，形成可辨別的色譜斑點(diǎn)。
5.要求專利(4)項(xiàng)中使用的碘乙醇配方是100毫升95%的乙醇中含有1-5克碘的溶液。
專利摘要
本發(fā)明提供了一種菜籽(油)芥酸快速檢測(cè)技術(shù)。該技術(shù)采用圓紙層析法進(jìn)行檢測(cè)，用特定的展開劑和顯色劑快速地(單樣17分鐘，100份樣品集中分析時(shí)平均每個(gè)樣品1.25分鐘)鑒定出菜籽(油)中芥酸含量為5％以下和2％以下的樣品。
文檔編號(hào)G01N30/00GK85103044SQ85103044
公開日1987年5月6日 申請(qǐng)日期1985年10月29日
發(fā)明者廖恒, 周淑平, 彭若平 申請(qǐng)人:貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院中心實(shí)驗(yàn)室導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan