專利名稱：溶血劑的配置方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明與驗血常規(guī)用的溶血劑的配置方法有關(guān)，特別適用于電子血細胞計數(shù)及分類儀器。
美國西科雅·特納(SequoiaTurner)生產(chǎn)的溶血劑，只能與該公司生產(chǎn)的610型血球計數(shù)分類儀配套使用，功能才較齊全。但購貨手續(xù)繁雜，到達的時間又長，標明有效期為一年，實際有效時間更短，且要花費不少外匯，價格昂貴。問題還在于美國西科雅·特納溶血劑本身，它含有氰化物，損害操作人員的健康;含有醇和苯有機化合物，污染了環(huán)境;為強堿性物質(zhì)，PH值9.96，決定了使用有效不長。
本發(fā)明的目的向公眾提供一種，取代進口西科雅·特納(SequoiaTurner)的溶血劑，不含氰化物和苯、醇有機物的溶血劑。
本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的，它的配方中以磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉與蒸餾水構(gòu)成緩沖液，穩(wěn)定整個溶血劑，同時避免溶血紅細胞產(chǎn)生渾濁，使液體分布均勻;十六烷基三甲基溴化銨迅速溶解紅細胞，使紅細胞析出血紅蛋白，并與之結(jié)合成穩(wěn)定的棕色化合物便于測定血紅蛋白，冰乙酸使十六烷基三甲基溴化銨溶解度增大，而不受溫度影響;草酸銨有擴張白細胞和維護白細胞膜作用，便于白細胞分類;乙二胺四乙酸二鈉有抗凝作用，防止出現(xiàn)大的紅細胞的殘塊;能穩(wěn)定白細胞形態(tài)10分鐘。
本發(fā)明的優(yōu)點配方中不存在氰化物，對操作者的皮膚無損害;配方中無苯、醇有機物質(zhì)，對環(huán)境無污染;本發(fā)明PH值控制在5.5-5.8，呈弱酸性，有效期在二年至五年;價格便宜，本發(fā)明每1000毫升200元，而美國的溶血劑每1000毫升875元。為進一步說明問題，作如下幾個實驗。
取本發(fā)明每人每份溶血劑0.85毫升，與美國西科雅·特納的溶血劑在美國西科雅·特納610型血球計數(shù)分類儀上作對比實驗。
1.對比實驗
實驗結(jié)果表明美國溶血劑與本發(fā)明應用比較，WBC、LYM、HGB均無顯著差異P＞0.05。
白細胞分類圖譜見附圖。


圖1美國溶血劑圖譜。
圖2本發(fā)明圖譜。
本發(fā)明應用與美國溶血劑應用同樣顯示LYM、GRAN兩個波峰。
2.重復性試驗。
隨機取門診病人血一份(草酸鉀抗凝)按常規(guī)操作在CELL-DYN610儀器上，分別用美國溶血劑與本發(fā)明做10次重復試驗。
實驗結(jié)果，本發(fā)明應用其重復性的變異系數(shù)CV＜3%，優(yōu)于美國溶血劑。
3.穩(wěn)定性試驗隨機取門診病人血液標本一份在CELL-DYN610儀上用美國與本發(fā)明分別在溫度在攝氏25度和攝氏4度狀況下測試。每隔2分鐘測一次，共10次，測試時間共40分鐘。
實驗結(jié)果，美國溶血劑與本發(fā)明其穩(wěn)定性差異系數(shù)CV均小于3%，P＞0.05。
4.相關(guān)關(guān)系試驗隨機取門診血液標本一份，用稀釋液配成5份模擬貧血標本，應用本發(fā)明溶血劑檢測HGB、WBC。
實驗結(jié)果已知貧血及WBC減少標本經(jīng)應用本發(fā)明檢測結(jié)果與其變化程度呈正相關(guān)關(guān)系，HGB及WBC計數(shù)，r值分別為0.90、0.89。
本發(fā)明與美國Sequoia-Turner溶血劑應用對照試驗，主要項目WBC、LYM、HGB檢測結(jié)果，P＞0.05無顯著差異。重復性試驗變異系數(shù)均小于3%，白細胞分類及血紅蛋白優(yōu)于美國溶血劑。穩(wěn)定性本發(fā)明與美國溶血劑無顯著差異，P＞0.05。對貧血標本W(wǎng)BC減少的檢測，結(jié)果呈正相關(guān);HGB的改變在本發(fā)明的作用下，其檢測結(jié)果也隨之改變，結(jié)果呈正相關(guān)關(guān)系，即r＝0.90。在本發(fā)明的作用下，細胞分類圖譜打印清晰。經(jīng)過三年臨床檢驗實踐應用，本發(fā)明完全代替了美國Sequoia-TurnerCorporation制造的溶血劑。
實施例制取本發(fā)明溶血劑1000毫升。
一、本發(fā)明的配方是磷酸二氫鉀(KH2PO4)0.276克，本品由廣州化學試劑廠生產(chǎn)磷酸氫二鈉(Na2HPO4)9.25克，汕頭市化學試劑廠生產(chǎn)乙二胺四乙酸二鈉(GOH14N2O8Na2·2H2O)20克，汕頭市西隴化工廠生產(chǎn)。
十六烷基三甲基溴化銨〔CH3·(CH2)13〕(CH3)3NBr17.5克，上海市計劃生育科學研究所供應。
草酸銨(NH4)，C2O4·H2O20克，汕頭市新寧化工廠生產(chǎn)冰乙酸CH3CooH25毫升上海試劑一廠生產(chǎn)蒸餾水H2O 1000毫升。
二、本發(fā)明的生產(chǎn)步驟先配成緩沖液，在一量筒中，稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4)4.6克加蒸餾水至500毫升，酸堿度PH控制在5.5，取出30毫升備用，這30毫升含有0.276克的KH2PO4;在另一量筒中，稱取磷酸氫二鈉Na2HPO49.5克，加蒸餾水至1000毫升，溶解后，取出30毫升不用，酸堿度PH值控制在8.5(有時要用氫氧化鈉調(diào)控)。將兩量筒溶液混合，PH值控制在8.5，即成緩沖液。稱取十六烷基三甲基溴化銨7.5克，乙二胺四乙酸二鈉20克，草酸銨20克，用上述緩沖液1000毫升加熱至攝氏80度溶解，溶解后加冰乙酸25毫升，用4號的玻沙漏斗過濾，或用過濾紙過濾，將過濾液酸堿度調(diào)在5.5至5.8之間，即成溶血劑。
權(quán)利要求
1.溶血劑的配置方法，其特征在于A、先配成緩沖液在一量筒中，稱取磷酸二氫鉀4.6克，加蒸餾水至500毫升，酸堿度PH控制在5.5，取出30毫升備用，在另一量筒中，稱取磷酸氫二鈉9.5克，加蒸餾水至1000毫升，溶解后，取出30毫升不用，酸堿度控制在8.5，將兩個量筒溶液混合，酸堿度控制在8.5，B、稱取十六烷基三甲基溴化銨7.5克，乙二胺四乙酸二鈉20克、草酸銨20克，將上述緩沖液加至1000毫升，加熱攝氏80度溶解再加冰乙酸25毫升，用4號玻沙漏斗或過濾紙過濾，過濾后的液體酸堿度控制在5.5至5.8之間。
全文摘要
溶血劑配置方法，先配緩沖液，在一量筒中，稱磷酸二氫鉀4.6克，加蒸餾水500毫升，pH值5.5，取30毫升備用。在另一量筒中，稱磷酸氫二鈉9.5克，加蒸餾水1000毫升，溶解后，取出30毫升不用，pH值控制在8.5，將兩個量筒溶液混合，pH值8.5，稱十六烷基三甲基溴化銨7.5克、乙二胺四乙酸二鈉20克、草酸銨20克將上述緩沖液加至1000毫升，加熱溶解后再加冰乙酸25毫升，用過濾紙過濾，濾液pH值5.5至5.8之間。本發(fā)明能取代進口溶血劑，保存時間長，對環(huán)境無污染。
文檔編號G01N33/49GK1069576SQ9210446
公開日1993年3月3日 申請日期1992年6月4日 優(yōu)先權(quán)日1992年6月4日
發(fā)明者謝建輝 申請人:謝建輝