專利名稱：反流抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及使用GABAB受體激動(dòng)劑抑制一過(guò)性食管下括約肌松弛；治療胃食管反流疾?。缓?或治療嬰兒反胃。
背景技術(shù)：
反流在一些人中，食管下括約肌(LES)較其他人更經(jīng)常易于松弛。結(jié)果，在此時(shí)由于機(jī)械屏障暫時(shí)喪失，胃內(nèi)液體能夠進(jìn)入食管，這一情況下文稱為“反流”。
胃食管反流疾病(GERD)是最普遍的上消化道疾病。目前治療目的在于減少胃酸分泌，或通過(guò)增強(qiáng)食管清除力、食管下括約肌張力和胃排空，減少食管的酸接觸。反流的主要機(jī)理已被認(rèn)為取決于低張力的食管下括約肌。然而，最近的研究(如Holloway和Dent(1990)Gastroenterol.Clin.N.Amer.19,517-535)已顯示絕大部分反流情況發(fā)生于一過(guò)性的食管下括約肌松弛(TLESR)時(shí)，即并非由吞咽觸發(fā)的松弛。也已顯示在患有GERD的病人中胃酸分泌通常是正常的。
因此，需要能減少TLESR的發(fā)生并且從而防止反流的化合物。理想地，該化合物應(yīng)具有約12小時(shí)的作用時(shí)間，因?yàn)榻^大部分反流發(fā)生在白天和飯后。
WO87/04077和US5,036,057公開了包含局部麻醉的、適合抑制食管下括約肌松弛的藥用組合物。
GABAB受體激動(dòng)劑GABA(4-氨基丁酸)是在中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中的一種內(nèi)源性神經(jīng)遞質(zhì)。GABA受體傳統(tǒng)上被分為GABAA和GABAB受體亞型。GABAB受體(參見(jiàn)kerr,D.I.B.和Ong,J.(1995)Pharmac.Ther.67卷，187-246頁(yè))屬于G-蛋白偶聯(lián)受體的超家族。GABAB受體激動(dòng)劑被描述為用于CNS疾病，如在脊柱強(qiáng)直中的肌肉松弛，心血管疾病，哮喘，腸運(yùn)動(dòng)功能紊亂如過(guò)敏性腸綜合征的治療，以及為prokinetic和止咳劑。GABAB受體激動(dòng)劑也被公開用于嘔吐的治療(WO96/11680)。
GABAB受體激動(dòng)劑巴氯芬(baclofen)(4-氨基-3-(4-氯代苯基)丁酸)(瑞士專利CH449.046號(hào))是最多被研究的GABA類物。

GABA

巴氯芬其它GABAB受體激動(dòng)劑或部分的激動(dòng)劑被公開在EP0356128、EP0181833、EP0399949、EP0463969和FR2,722,192中。GABAB調(diào)節(jié)劑的化學(xué)方面的綜述參見(jiàn)Froestl,W.和Mickel,S.J.在GABAReceptors,271-296頁(yè)(Eds,S.J.Enna和N.G.Bowery,Humana PressInc.,Totowa,NJ,U.S.A.1997)。
在本領(lǐng)域中已知通過(guò)使用被克隆的受體基因轉(zhuǎn)染的細(xì)胞能夠改善藥物篩選。較傳統(tǒng)的篩選，此類被轉(zhuǎn)染的細(xì)胞可以提供幾個(gè)好處，最重要的大概就是選擇性。轉(zhuǎn)染細(xì)胞的其它好處是它們?cè)试S評(píng)估藥物對(duì)克隆的人類受體的活性。GABAB受體最近已被克隆的事實(shí)(Kaupmann等，Nature 386(6622),239-246,20 March 1997)為開發(fā)作用于GABAB受體的更特效的藥物提供了機(jī)會(huì)。所述論文公開了得自大鼠的稱作GABABR1a和GABABR1b的兩種受體亞型，但是很顯然幾種其它的亞型能被分離到。
本發(fā)明的發(fā)現(xiàn)令人驚奇地發(fā)現(xiàn)GABAB受體激動(dòng)劑能被用于抑制一過(guò)性食管下括約肌松弛，并且因此能用于治療胃食管反流性疾病。
因此，本發(fā)明提供使用GABAB受體激動(dòng)劑來(lái)制造一種抑制一過(guò)性食管下括約肌松弛(TLESR)，或者更確切的說(shuō)，治療胃食管反流性疾病的藥劑。對(duì)于這一發(fā)明的目的，術(shù)語(yǔ)“激動(dòng)劑”應(yīng)被理解為包括完全激動(dòng)劑和部分激動(dòng)劑兩者，由此“部分激動(dòng)劑”應(yīng)被理解為能夠部分地，而不是全部地，激活GABAB受體的化合物。
所述TLESR的抑制也暗示著所述化合物能被用于嬰兒反胃的治療。嬰兒反胃的有效治療將是治療由反流的胃內(nèi)容物的吸入引起的肺部疾病，以及治療由攝入營(yíng)養(yǎng)的過(guò)度丟失引起的生長(zhǎng)不良的一種重要方法。
在本發(fā)明的優(yōu)選形式中，所述GABAB受體激動(dòng)劑是一個(gè)被取代的氨基丙酸衍生物，其酸性端(acidic head)為羧基、膦酸基(phosphinic group)、亞酸膦基(phosphonous group)或亞磺酸基(sulfinic group)。
對(duì)GABAB受體具有激動(dòng)的或部分激動(dòng)的親和力并且按照本發(fā)明能被使用的化合物的實(shí)例是4-氨基丁酸(GABA)，4-氨基-3-(4-氯代苯基)丁酸(巴氯芬)，4-氨基-3-苯丁酸，4-氨基-3-羥基丁酸，
4-氨基-3-(4-氯代苯基)-3-羥基苯基丁酸，4-氨基-3-(噻吩-2-基)丁酸，4-氨基-3-(5-氯代噻吩-2-基)丁酸，4-氨基-3-(5-溴代噻吩-2-基)丁酸，4-氨基-3-(5-甲基噻吩-2-基)丁酸，4-氨基-3-(2-咪唑基)丁酸，4-胍基-3-(4-氯代苯基)丁酸，3-氨基-2-(4-氯代苯基)-1-硝基丙烷，(3-氨基丙基)亞膦酸，(4-氨基丁-2-基)亞膦酸，(3-氨基-2-甲基丙基)亞膦酸，(3-氨基丁基)亞膦酸，(3-氨基-2-(4-氯代苯基)丙基)亞膦酸，(3-氨基-2-(4-氯代苯基)-2-羥基丙基)亞膦酸，(3-氨基-2-(4-氟代苯基)丙基)亞膦酸，(3-氨基-2-苯基丙基)亞膦酸，(3-氨基-2-羥基丙基)亞膦酸，(E)-(3-氨基丙烯-1-基)亞膦酸，(3-氨基-2-環(huán)己基丙基)亞膦酸，(3-氨基-2-芐基丙基)亞膦酸，[3-氨基-2-(4-甲基苯基)丙基]亞膦酸，[3-氨基-2-(4-三氟甲基苯基)丙基]亞膦酸，[3-氨基-2-(4-甲氧基苯基)丙基]亞膦酸，[3-氨基-2-(4-氯代苯基)-2-羥基丙基]亞膦酸，(3-氨基丙基)甲基膦酸，(3-氨基-2-羥基丙基)甲基膦酸，(3-氨基丙基)(二氟甲基)膦酸，(4-氨基丁-2-基)甲基膦酸，
(3-氨基-1-羥丙基)甲基膦酸，(3-氨基-2-羥丙基)(二氟甲基)膦酸，(E)-(3-氨基丙烯-1-基)甲基膦酸，(3-氨基-2-氧代丙基)甲基膦酸，(3-氨基丙基)羥甲基膦酸，(5-氨基戊-3-基)甲基膦酸，(4-氨基-1,1,1-三氟丁-2-基)甲基膦酸，(3-氨基-2-(4-氯代苯基)丙基)亞磺酸，3-氨基丙基亞磺酸。
優(yōu)選地，對(duì)GABAB受體具有激動(dòng)的或部分激動(dòng)的親和力的所述化合物是下例化合物中的任何一個(gè)4-氨基-3-(4-氯代苯基)丁酸(巴氯芬)，(3-氨基丙基)甲基膦酸，(3-氨基-2-羥基丙基)甲基膦酸，4-氨基丁酸(GABA)，(3-氨基-2-(4-氯代苯基)丙基)亞磺酸，(3-氨基丙基)(二氟甲基)膦酸，(3-氨基-2-氧代丙基)甲基膦酸，4-氨基-3-(5-氯代噻吩-2-基)丁酸，(3-氨基丙基)亞膦酸，對(duì)所述目的的GABAB配位體的藥學(xué)上可接受的鹽的使用也包括在本發(fā)明中。絕大部分已知的GABAB配位體，例如巴氯吩、(3-氨基丙基)甲基膦酸和(3-氨基-2-(S)-羥基丙基)甲基膦酸，是兩性的并且可以以內(nèi)鹽的形式出現(xiàn)。它們也能夠形成酸加成鹽和與堿形成的鹽。這種鹽是特別的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽，和藥學(xué)上可接受的用堿形成的鹽。用于形成這種鹽的合適的酸包括，例如，無(wú)機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸或磷酸，或有機(jī)酸如有機(jī)磺酸和有機(jī)羧酸。GABAB配位體和堿的鹽是，例如，堿金屬鹽，如鈉鹽或鉀鹽，或堿土金屬鹽，如鈣鹽或鎂鹽，以及銨鹽，如那些含有氨或有機(jī)胺的鹽。
對(duì)所述目的的GABAB配位體的旋光異構(gòu)體的使用也包括在本發(fā)明中。許多已知的GABAB配位體，例如巴氯吩和(3-氨基-2-(S)-羥丙基)甲基膦酸，是因不對(duì)稱碳原子的存在而產(chǎn)生的手性化合物。根據(jù)不對(duì)稱的原子的存在，GABAB配位體可以是異構(gòu)體混合物的形式，特別是外消旋物，或是純異構(gòu)體的形式，特別是對(duì)映體。
在另一方面，本發(fā)明提供了抑制一過(guò)性食管下括約肌松弛的方法，其包含給予需要這種治療的哺乳動(dòng)物(包括人類)有效劑量的如上述定義的GABAB受體激動(dòng)劑。
本發(fā)明也提供用于抑制一過(guò)性食管下括約肌松弛的藥用組合物。更確切地說(shuō)，所述藥用組合物對(duì)胃食管反流疾病的治療和/或嬰兒反胃的治療是有用的。在所述藥用組合物中的活性成分可以是如上述定義的GABAB受體激動(dòng)劑中的任何一種。
日劑量作為一種TLESR抑制劑和一種反流抑制劑的使用，GABAB受體激動(dòng)劑可以以適合于已知GABAB受體激動(dòng)劑對(duì)其是有用的其它疾病的劑量使用。所述活性物質(zhì)通常的日劑量在一個(gè)較寬的范圍內(nèi)變化并且依據(jù)多種因素而定，例如每個(gè)病人的個(gè)體需要和給藥途徑。一般來(lái)說(shuō)，藥物劑量是在每天每公斤體重1μg至100mg的范圍內(nèi)，優(yōu)選每天每公斤體重10μg至10mg。
藥用制劑為了臨床使用，本發(fā)明的化合物被配制成口服、直腸、胃腸外或其它給藥方式的藥用制劑。該藥用制劑含有與一種或多種藥學(xué)上可接受的成分結(jié)合的本發(fā)明的化合物。載體可以是固體、半固體或液體稀釋劑，或膠囊。這些藥物制劑是本發(fā)明的進(jìn)一步的目的。通常活性化合物的量是制劑重量的0.1-95％之間，優(yōu)選在胃腸外使用的制劑中占0.2-20％(重量)和優(yōu)選在口服給予的制劑中占1-50％(重量)。
在以劑量單位形式口服給予的含有本發(fā)明的化合物藥用制劑的制備中，所選擇的化合物可以與固體、粉末成分，如乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、支鏈淀粉、纖維素衍生物、明膠或其它合適的成分，以及與崩解劑和潤(rùn)滑劑如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酰富馬酸鈉和聚乙二醇蠟混合。然后將混合物制作成顆粒或壓成藥片。
軟明膠膠囊可以用裝有活性化合物或本發(fā)明的化合物、植物油、脂肪或其它合適的用于軟明膠膠囊的溶媒的混合物的膠囊來(lái)制備。硬明膠膠囊可以裝有活性化合物的顆粒。硬明膠膠囊也可以裝有與固體粉末成分如乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、馬鈴薯淀粉、谷物淀粉、支鏈淀粉、纖維素衍生物或明膠組合的活性化合物。
直腸給藥的劑量單位可以被制備成(Ⅰ)含有與中性脂肪堿混合的活性物質(zhì)的栓劑形式；(Ⅱ)含有與植物油、石蠟油或其它用于明膠直腸膠囊的合適的媒介混合的活性物質(zhì)的明膠直腸膠囊形式；(Ⅲ)預(yù)制的微量灌腸劑(ready-made micro enema)的形式；或(Ⅳ)干燥的微量灌腸劑的劑型，在臨給藥前置于合適的溶劑中復(fù)制。
口服給予的液體制劑可以以糖漿或混懸劑的形式制備，如含有0.2％-20％(重量)的活性成分的溶液或混懸液，其余成分由糖或糖醇和乙醇、水、甘油、丙二醇及聚乙二醇的混合物組成。需要時(shí)，這種液體制劑還可以含有著色劑、調(diào)味劑、甜味劑和羧甲基纖維素或其它增稠劑?？诜o予的液體制劑可以以干粉的形式制備，在臨使用前用合適的溶劑復(fù)制而成。
胃腸外給藥的溶液可以被制備成本發(fā)明的化合物在藥學(xué)上可接受的溶劑中的溶液的形式，優(yōu)選占重量0.1％-10％的濃度。這些溶液也可以含有穩(wěn)定劑成分和/或緩沖劑成分并且以安瓿或小瓶的形式分配成單位劑量。胃腸外給藥的溶液也可以被制成干燥制劑，臨用前用合適的溶劑復(fù)制而成。
化合物對(duì)TLESR活性的篩選本發(fā)明進(jìn)一步包括細(xì)胞的使用，該細(xì)胞由編碼GABAB受體的核苷酸序列轉(zhuǎn)染，用于篩選目的，以鑒定一過(guò)性食管下括約肌松弛的抑制劑。所述GABAB受體可以是GABAB受體亞型基因的任何一種，如GABABR1a和GABABR1b或迄今尚未克隆出的GABAB受體亞型。所述核苷酸序列可由任何物種得到，但優(yōu)選從哺乳動(dòng)物和最優(yōu)選從人類獲得。
因此，本發(fā)明進(jìn)一步提供一種方法，用于一過(guò)性食管下括約肌松弛抑制劑的化合物的篩選，包括編碼GABAB受體的核苷酸序列的使用。這一方法優(yōu)選的形式包括步驟(a)用編碼GABAB受體的核苷酸序列轉(zhuǎn)染培養(yǎng)的細(xì)胞，以便GABAB受體在細(xì)胞的表面表達(dá)；(b)使受試化合物與所述細(xì)胞接觸；和(c)測(cè)定該受試化合物是否結(jié)合到GABAB受體上，和/或激活GABAB受體。所述GABAB受體可以是，如GABABR1a或GABABR1b。
實(shí)施例材料和方法選用兩種性別(5只雄性，3只雌性)重量在20-30kg的成年Labrador retriever狗。施行頸段食管造口術(shù)以便插管。在恢復(fù)期以后，狗被用于對(duì)照實(shí)驗(yàn)直到獲得一個(gè)穩(wěn)定的和可靠的對(duì)照反應(yīng)。在對(duì)它們給予GABAB受體激動(dòng)劑以前，狗被用于其它實(shí)驗(yàn)，但它們總是被允許一個(gè)至少2天的洗出(wash-out)期，在這段時(shí)間內(nèi)不給予藥物。每只狗的每個(gè)第四次實(shí)驗(yàn)均是一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，以確保結(jié)果的穩(wěn)定性和可重復(fù)性。
實(shí)驗(yàn)大約在上午8時(shí)開始，此時(shí)動(dòng)物已禁食約17小時(shí)。狗被放置在以前已習(xí)慣的巴甫洛夫臺(tái)(Pavlov stand)中。一根細(xì)的末端開口的硅膠管通過(guò)食管造口被逆行引導(dǎo)進(jìn)入咽部以記錄吞咽。該導(dǎo)管用約每分鐘2ml的空氣灌注。一個(gè)多腔的裝置被放在適當(dāng)?shù)奈恢靡员阌涗浗宋?、LES和遠(yuǎn)端食管的四個(gè)位置中的壓力。該裝置配備有6cm長(zhǎng)的套管以可靠地測(cè)量LES壓力。胃和LES腔道用每分鐘0.45ml的除氣蒸餾水灌注，而食管腔道以每分鐘0.1ml(灌注)。使用一個(gè)低順應(yīng)性的氣水壓泵(low-compliancepneumohydraulic pump)以取得最理想的灌注條件。管腔內(nèi)的壓力用外部的壓力傳感器測(cè)量。使用Lab Windows/CVI軟件(3.1版)放大并獲得信號(hào)。壓力刻度定在0和100mmHg，同時(shí)多腔裝置放在稍低于壓力傳感器的水平。狗被放在適當(dāng)?shù)奈恢靡允蛊骄竷?nèi)壓力約為0mmHg。一個(gè)銻pH-電極口向放置3cm到LES的上緣，并且如上所述獲得該信號(hào)。使用Lab Windows軟件分析獲得的信號(hào)。
基線測(cè)量至少進(jìn)行10分鐘，然后用2分鐘靜脈給予溶媒(0.9％NaCl；0.5ml/kg)或GABAB受體激動(dòng)劑。在給藥完成后10分鐘，以每分鐘100ml(30ml/kg)的速率經(jīng)多腔裝置注入營(yíng)養(yǎng)素。在營(yíng)養(yǎng)素給予前10分鐘開始持續(xù)靜脈輸注給予GABA；在某些例子中在給營(yíng)養(yǎng)素前30分鐘胃內(nèi)給予R.S-巴氯芬。營(yíng)養(yǎng)素含有10％蛋白胨(w/v)、5％內(nèi)脂(Intralipid)(v/v)和5％D-葡萄糖(w/v)并且用HCl酸化至pH3.0。灌注以后立即以每分鐘40ml吹入空氣以構(gòu)成從營(yíng)養(yǎng)素灌注起始開始的總共90分鐘的時(shí)間。然后對(duì)狗拔除插管同時(shí)進(jìn)行基線測(cè)量以確保沒(méi)有漂移發(fā)生。
TLESR由下列標(biāo)準(zhǔn)確定；LES和胃內(nèi)壓力差小于2mmHg、延續(xù)時(shí)間大于0.5秒和松弛不是由原發(fā)的蠕動(dòng)(即由咽的信號(hào))觸發(fā)。壓力下降的速率大于每秒鐘10mmHg。絕大部分(但不是全部)TLESR也能通過(guò)在食管造口特異的響聲(即噯氣)被聽(tīng)覺(jué)覺(jué)察出。計(jì)算前45分鐘時(shí)間和整個(gè)實(shí)驗(yàn)(90分鐘)的TLESR的總數(shù)。與個(gè)體的對(duì)照數(shù)據(jù)相關(guān)的GABAB受體激動(dòng)劑的作用被表示(n≥5)。每種激動(dòng)劑至少在兩只不同的狗中測(cè)試。
結(jié)果和討論TLESR實(shí)際上在禁食狀態(tài)下從未發(fā)生，但總是發(fā)生于營(yíng)養(yǎng)素灌注和空氣吹入以后。TLESR的發(fā)生率在狗之間變化顯著，但在個(gè)體內(nèi)的變化則不大。
GABAB受體激動(dòng)劑劑量依賴地減少TLESR的發(fā)生率。在45分鐘的抑制大于整個(gè)實(shí)驗(yàn)期(90分鐘)計(jì)算的抑制。由于胃的擴(kuò)張是TLESR的主要刺激，當(dāng)抑制化合物被給予時(shí)，45分鐘值顯然是最恰當(dāng)?shù)臏y(cè)量TLESR的減少導(dǎo)致氣體引起的胃擴(kuò)張?jiān)鰪?qiáng)，并因此導(dǎo)致一個(gè)新的域值。這一混淆作用在實(shí)驗(yàn)的開始幾乎不明顯(見(jiàn)下面)。
GABAB受體激動(dòng)劑對(duì)TLESR的抑制作用除了高劑量的R,S-巴氯芬引起一些鎮(zhèn)靜作用(在給藥后大約一小時(shí)消失)以外，尚未記錄到有行為的副作用。在對(duì)照實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)營(yíng)養(yǎng)素灌注/空氣吹入時(shí)胃內(nèi)壓力從0增加到約4mmHg。給予幾乎完全抑制TLESR的劑量的GABAB受體激動(dòng)劑伴有較大的胃內(nèi)壓力增加(10-13mmHg)。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)這種高胃內(nèi)壓力偶爾產(chǎn)生嘔吐。它們是因?yàn)楫?dāng)TLESR被消除時(shí)，狗不能從胃內(nèi)排出氣體而發(fā)生。
結(jié)果(表1)顯示在液體飲食后接著吹入空氣，GABAB受體激動(dòng)劑抑制TLESR的發(fā)生。該作用不是繼發(fā)于鎮(zhèn)靜或催眠作用。結(jié)論是在胃食管反流疾病的治療中，對(duì)GABAB受體具有親和力的化合物可能是有用的治療劑。
表1在狗中各種GABAB受體激動(dòng)劑對(duì)TLESR的作用(均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤)。除非另外說(shuō)明否則所有化合物均是靜脈給予。

1靜脈輸注給予超過(guò)100分鐘，即營(yíng)養(yǎng)素和空氣刺激以前10分鐘和刺激期間。
權(quán)利要求
1．GABAB受體激動(dòng)劑，或所述GABAB受體激動(dòng)劑的藥學(xué)上可接受的鹽或旋光異構(gòu)體在生產(chǎn)抑制一過(guò)性食管下括約肌松弛的藥物中的用途。
2．權(quán)利要求1的用途，以治療胃食管反流疾病。
3．權(quán)利要求1的用途，以治療嬰兒反胃。
4．權(quán)利要求1到3中任何一項(xiàng)的用途，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是一個(gè)被取代的氨基丙酸衍生物，其酸性端(acidic head)為羧基、膦酸基(phosphinic group)、亞膦酸基(phosphonous group)或亞磺酸基(sulfinic group)。
5．根據(jù)權(quán)利要求1到4中任何一項(xiàng)的用途，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是4-氨基-3-(4-氯代苯基)丁酸(巴氯芬)。
6．根據(jù)權(quán)利要求1到4中任何一項(xiàng)的用途，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是(3-氨基丙基)甲基膦酸。
7．根據(jù)權(quán)利要求1到4中任何一項(xiàng)的用途，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是(3-氨基-2-羥基丙基)甲基膦酸。
8．根據(jù)權(quán)利要求1到4中任何一項(xiàng)的用途，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是4-氨基丁酸(GABA)。
9．根據(jù)權(quán)利要求1到4中任何一項(xiàng)的用途，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是(3-氨基-2-(4-氯代苯基)丙基)亞磺酸。
10．根據(jù)權(quán)利要求1到4中任何一項(xiàng)的用途，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是(3-氨基丙基)(二氟甲基)膦酸。
11．根據(jù)權(quán)利要求1到4中任何一項(xiàng)的用途，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是(3-氨基-2-氧代丙基)甲基膦酸。
12．根據(jù)權(quán)利要求1到4中任何一項(xiàng)的用途，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是4-氨基-3-(5-氯代噻吩-2-基)丁酸。
13．根據(jù)權(quán)利要求1到4中任何一項(xiàng)的用途，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是(3-氨基丙基)亞膦酸。
14．抑制一過(guò)性食管下括約肌松弛的方法，其包含給予需要這種治療的哺乳動(dòng)物，包括人類，有效量的GABAB受體激動(dòng)劑，或所述GABAB受體激動(dòng)劑的藥學(xué)上可接受的鹽或旋光異構(gòu)體。
15．權(quán)利要求10的方法用于治療胃食管反流疾病。
16．權(quán)利要求10的方法用于治療嬰兒反胃。
17．權(quán)利要求14到16中任何一項(xiàng)的方法，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是被取代的氨基丙酸衍生物，其酸性端為羧基、膦酸基、亞膦酸基或亞磺酸基。
18．根據(jù)權(quán)利要求14到17中任何一項(xiàng)的方法，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是4-氨基-3-(4-氯代苯基)丁酸(巴氯芬)。
19．根據(jù)權(quán)利要求14到17中任何一項(xiàng)的方法，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是(3-氨基丙基)甲基膦酸。
20．根據(jù)權(quán)利要求14到17中任何一項(xiàng)的方法，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是(3-氨基-2-羥基丙基)甲基膦酸。
21．根據(jù)權(quán)利要求14到17中任何一項(xiàng)的方法，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是4-氨基丁酸(GABA)。
22．根據(jù)權(quán)利要求14到17中任何一項(xiàng)的方法，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是(3-氨基-2-(4-氯代苯基)丙基)亞磺酸。
23．根據(jù)權(quán)利要求14到17中任何一項(xiàng)的方法，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是(3-氨基丙基)(二氟甲基)膦酸。
24．根據(jù)權(quán)利要求14到17中任何一項(xiàng)的方法，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是(3-氨基-2-氧代丙基)甲基膦酸。
25．根據(jù)權(quán)利要求14到17中任何一項(xiàng)的方法，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是4-氨基-3-(5-氯代噻吩-2-基)丁酸。
26．根據(jù)權(quán)利要求14到17中任何一項(xiàng)的方法，其中所述GABAB受體激動(dòng)劑是(3-氨基丙基)亞膦酸。
27．篩選為一過(guò)性食管下括約肌松弛的抑制劑的化合物的方法，包括編碼GABAB受體的核苷酸序列的使用。
28．根據(jù)權(quán)利要求27的方法，其包括步驟(a)用編碼GABAB受體的核苷酸序列轉(zhuǎn)染培養(yǎng)的細(xì)胞，以便GABAB受體在細(xì)胞的表面表達(dá)；(b)使所述細(xì)胞與受試化合物接觸；和(c)測(cè)定該受試化合物是否結(jié)合到GABAB受體上，和/或激活GABAB受體。
29．根據(jù)權(quán)利要求27或28的方法，其中所述GABAB受體是GABABR1a或GABABR1b。
全文摘要
本發(fā)明涉及使用GABA
文檔編號(hào)G01N33/00GK1237105SQ97199600
公開日1999年12月1日 申請(qǐng)日期1997年9月15日 優(yōu)先權(quán)日1996年9月18日
發(fā)明者P·L·R·安德魯斯, A·勒曼 申請(qǐng)人:阿斯特拉公司