專(zhuān)利名稱(chēng):確定抗凝治療因子的設(shè)備和方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及本發(fā)明涉及一種相對(duì)簡(jiǎn)單而準(zhǔn)確的方法及設(shè)備,其用于監(jiān)測(cè)口服抗凝劑治療,此治療考慮了由凝血激酶穩(wěn)定性不同而導(dǎo)致的凝血酶原時(shí)間變化。這些凝血激酶來(lái)源于兔腦、牛腦或所有用于口服抗凝治療的其它來(lái)源。
2.現(xiàn)有技術(shù)描述為了防止過(guò)度流血及產(chǎn)生有害的血凝塊,可讓患者在手術(shù)前、術(shù)中和術(shù)后接受口服抗凝劑治療。為了保證正確地給予口服抗凝劑治療,須進(jìn)行嚴(yán)格的監(jiān)測(cè)。這在各種醫(yī)學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)中有更充分的說(shuō)明,例如分別于1993年11月和1993年12月發(fā)表在“Clinical HemostasisReview”上的題為“PTs,PR,ISIs and INRs:A Primer on ProthrombinTime Reporting Parts Ⅰ andⅡ”的論文,本文將其引作參考。
這些技術(shù)文獻(xiàn)揭示的抗凝治療監(jiān)測(cè)考慮三個(gè)參數(shù),它們是國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比率(INR)、國(guó)際靈敏度指數(shù)(ISI)和凝血酶原時(shí)間(PT,報(bào)告時(shí)間單位為秒)。凝血酶原時(shí)間(PT)指示血漿樣品中凝血酶原的水平,并為衡量患者凝血反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)。需要INR和ISI參數(shù)以考慮檢測(cè)儀器、方法及抗凝治療中所用的凝血激酶(Tps)的靈敏度的各種差異。一般來(lái)說(shuō),在北美使用的凝血激酶(Tps)源于兔腦,早先在英國(guó)使用的源于人腦,而在歐洲使用的不是源于兔腦就是源于牛腦。INR和ISI考慮諸如凝血激酶(Tps)差異之類(lèi)的所有這些差異因子,用以提供一種監(jiān)測(cè)口服抗凝劑治療的標(biāo)準(zhǔn)化系統(tǒng),以減少與術(shù)前、術(shù)中和術(shù)后相關(guān)的嚴(yán)重問(wèn)題,例如過(guò)度流血或者形成血凝塊。
如上述發(fā)表在“Clinical Hemostasis Review”上的技術(shù)論文第一部(凝血激酶試劑校正和凝血酶原時(shí)間報(bào)告原理)報(bào)告,INR和ISI參數(shù)的測(cè)定非常繁雜,并且,如上述發(fā)表在“Clinical Hemostasis Review”上的技術(shù)論文第二部(INR報(bào)告的局限)報(bào)告,INR和ISI參數(shù)產(chǎn)生的誤差相當(dāng)?shù)馗?,例如可達(dá)13%。國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比率(INR)、國(guó)際靈敏度指數(shù)(ISI)和患者的凝血酶原時(shí)間(PT)之間相互關(guān)系的組成可以用下面的表達(dá)式(1)給出,式中,[患者的PT值/PT正常范圍的均值]的量一般稱(chēng)為凝血酶原比率(PR)INR=[患者的PT值/PT正常范圍的均值]ISI(1)使用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比率(INR)所涉及的可能誤差在E.A.Leoliger等發(fā)表于Thrombosis and Hemostasis 1985;53:148-154的題為“Reliabilityand Clinical Impact of the Normalization of the Prothrombin Times in OralAnticoagulant Control”的文章中也有論述,本文將其引作參考。由表達(dá)式(1)可見(jiàn),ISI是INR的指數(shù),它導(dǎo)致與INR相關(guān)的可能誤差達(dá)到約±13.5%,甚至還要多。在V.L.NG等發(fā)表在Am.J.Clin Pathol 1993;99:689-694上的題為“Failure of the International Normalized Ratio toGenerate Consistent Results within a Local Medical Community”的技術(shù)論文中說(shuō)明了與校準(zhǔn)ISI相關(guān)的一種過(guò)程,本文將其引作參考。
在L.Poller等發(fā)表在Am.J Clin Pathol 1998年2月,Vol.109,No2,196-204上的,題為“Minimum Lyophilized Plasma Requirementfor ISI Calibration”的技術(shù)論文中進(jìn)一步的討論了不利的INR偏差,本文將其引作參考。如此文所述,在檢測(cè)中異常樣品的數(shù)量減少到20以下時(shí),INR的偏差就變得明顯了,這導(dǎo)致要保持樣品數(shù)量在20人以上。L.Poller等的論文還討論了使用20份高度冷凍干燥的INR血漿和7份正常冷凍干燥血漿校正INR。另外在此文中,還討論了將與平均值偏差+/-10%作為INR偏差的允許限度。另外,此文還討論了分析技術(shù),其中考慮了凝血酶原(PR)和平均正常凝血酶原時(shí)間(MNPT),即正常血漿樣品的幾何均值。
在V.L.NG等發(fā)表在Am.J Clin.Pathol 1998,Vol.109,No.3,338-346上的題為“Highly Sensitive Thromboplastins Do Not ImproveINR Precision”的技術(shù)論文中進(jìn)一步的研究和說(shuō)明了與使用INR相關(guān)的離散性,本文將其引作參考。在此文中,分析了INR不一致性的臨床重要性,其結(jié)果列在該文的表4中,并且分析結(jié)論為,用不同的凝血激酶進(jìn)行試驗(yàn)時(shí),各個(gè)樣品的配對(duì)值的不一致水平不利地處于17%至29%的范圍。
希望提供一種方法用于監(jiān)測(cè)口服抗凝劑治療,它不存在以下缺點(diǎn),即需要確定INR和ISI參數(shù),并且不會(huì)由于在確定INR和ISI參數(shù)時(shí)使用其指數(shù)而時(shí)常發(fā)生相對(duì)較高的誤差(13%)。
因此本發(fā)明的首要任務(wù)是為此提供一種方法和裝置,以準(zhǔn)確而簡(jiǎn)單地監(jiān)測(cè)口服抗凝劑治療,同時(shí)沒(méi)有依賴INR和ISI參數(shù)的在先監(jiān)測(cè)技術(shù)的任何缺點(diǎn)和不足。
本發(fā)明與公開(kāi)于1975年9月16日的美國(guó)專(zhuān)利3,905,769(1769);1993年3月23日的美國(guó)專(zhuān)利5,179,017(1017)和1996年3月26日的美國(guó)專(zhuān)利5,502,651(1651)中的發(fā)明相關(guān),這些專(zhuān)利都授予Wallace E.Carroll和R.David Jackson,并且都在本文引作參考。另外本發(fā)明與前述的交互參考申請(qǐng)有關(guān)。本發(fā)明公開(kāi)一種監(jiān)測(cè)抗凝治療的方法和裝置,其中使用了全部顯示或描述于早期專(zhuān)利的某些裝置特征。
發(fā)明概要本發(fā)明涉及用于監(jiān)測(cè)抗凝治療的方法和裝置,其用以防止患者在術(shù)前、術(shù)中和術(shù)后過(guò)度出血及產(chǎn)生有害血凝塊。更具體而言,本發(fā)明提供了不依賴于凝血激酶(Tps)作用的方法和裝置,因此不必考慮源自兔腦或者牛腦的各種凝血激酶(Tps)的影響。特別地,本發(fā)明為此提供的方法和裝置利用抗凝治療因子取代國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)比率(INR)確定用于監(jiān)測(cè)口服抗凝劑治療。
本發(fā)明的方法和裝置用于確定本文命名的抗凝治療因子,這些抗凝因子取決于凝血酶原時(shí)間(PT)、凝血酶原比率(PR),纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FTR)和最高加速點(diǎn)(MAP),其中MAP具有最高加速的伴隨時(shí)間??鼓委熞蜃颖嚷屎幸粋€(gè)起于最高加速點(diǎn)前并且止于最高加速點(diǎn)后的預(yù)定范圍,而最高加速點(diǎn)與纖維蛋白原(FBG)向纖維轉(zhuǎn)化的最大加速相對(duì)應(yīng)。
附圖簡(jiǎn)述
圖1是電位光度測(cè)量式(后文有時(shí)稱(chēng)“POTENS+”)抗凝治療因子(ATF)測(cè)定裝置圖,其大體類(lèi)似于美國(guó)專(zhuān)利3,905,769、5,179,017和5,502,651的圖1所示,并且將模/數(shù)(A/D)轉(zhuǎn)換器的輸出施加到計(jì)算機(jī)上。
圖2是一個(gè)典型的血漿凝結(jié)過(guò)程中出現(xiàn)的纖維蛋白原濃度的各種時(shí)相的曲線圖。
圖3和4顯示比較實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,此實(shí)驗(yàn)在使用+/-0.5秒FTR范圍(圖3)和最高加速點(diǎn)(MAP)前1.0秒的FTR范圍(圖4)之間進(jìn)行。
圖5、6、7和8說(shuō)明國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比率(INR)和針對(duì)三個(gè)不同凝血激酶獨(dú)立計(jì)算出的校正的抗凝治療因子(CAFT)之間的相關(guān)性。
圖9、10、11和12說(shuō)明圖9向圖12的過(guò)渡,其中圖9為既沒(méi)有1的斜率也沒(méi)有0截距的曲線,圖12為既有1的斜率也有0的截距的曲線,這與本發(fā)明的實(shí)施一致。
圖13和14說(shuō)明國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比率(INR)和本發(fā)明的校正的抗凝治療因子(CAFT)之間的相關(guān)性。
圖15、16、17和18說(shuō)明國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比率(INR)和關(guān)于本發(fā)明的改進(jìn)的抗凝治療因子(CAFT)之間的相關(guān)性。詳述在全部圖中,相同的標(biāo)記指示相同的事物。參照附圖,圖1中示有一個(gè)光源4,它可以是一種低功率的氣體激光器,產(chǎn)生一束穿過(guò)樣品管或者說(shuō)比色池8的光6,然后光6被一個(gè)檢測(cè)工具接收此檢測(cè)工具可以是一個(gè)硅或者硒光電池10(光電電池)。電池12起恒壓直流電源的作用。其負(fù)極端經(jīng)開(kāi)關(guān)14連接可變電阻16的一端,并且其正極端直接連接到可變電阻的另一端。電池12和可變電阻16聯(lián)合提供一個(gè)可變直流電壓源,可變電壓可以在電阻16上端的線18和滑動(dòng)片20之間變化。可變直流電壓源串連檢測(cè)裝置光電池10,檢測(cè)裝置光電池10的正輸出端連接到可變電阻16的滑動(dòng)片20,從而可變電壓直流源產(chǎn)生的電壓與檢測(cè)裝置光電池10產(chǎn)生的電壓相反。檢測(cè)裝置光電池10的負(fù)極輸出經(jīng)可變電阻22連接到線18。這樣,可變電阻22上所跨的電壓是可變電壓直流源產(chǎn)生的電壓與光電池10產(chǎn)生的電壓之間的差值。電網(wǎng)絡(luò)的輸出在線18和可變電阻22的滑動(dòng)片24之間取出。這樣可變電阻22起倍增器的作用其通過(guò)選擇性變化來(lái)倍增前述的電壓差值,而選擇性變化依賴于可變電阻22的調(diào)節(jié)。所述的電位光度計(jì)體現(xiàn)把電-模擬方案具體表達(dá)為比爾定律,并且其輸出直接表示受檢測(cè)物質(zhì)的濃度。
在本發(fā)明中,滑動(dòng)片24放置在一個(gè)位置上以給出一個(gè)適當(dāng)?shù)妮敵觯⑶移湓跈z測(cè)的過(guò)程中不加改變。線18和滑動(dòng)片24之間的輸出傳送到一個(gè)A/D轉(zhuǎn)換器26和數(shù)字記錄器28。如所公知,A/D轉(zhuǎn)換器26和數(shù)字記錄器28可以結(jié)合成為一個(gè)裝置,例如,可以是一個(gè)由National Instrument of Austin,Texas銷(xiāo)售的裝置,其型號(hào)為L(zhǎng)ab-PC+??缭娇勺冸娮?2上的信號(hào)是模擬信號(hào),因此,導(dǎo)線18與滑動(dòng)片24之間的信號(hào)部分(其施加在A/D轉(zhuǎn)換器26和數(shù)字記錄器28上)也是模擬的。計(jì)算機(jī)30連接到A/D轉(zhuǎn)換器26的輸出端。計(jì)算機(jī)30優(yōu)選的是IBM兼容機(jī),并且以后文所述的方式編程。
本發(fā)明說(shuō)明書(shū)提及的術(shù)語(yǔ)及其符號(hào)在此僅做一般描述,它們都將作進(jìn)一步的說(shuō)明,并且在表1中給出。表1
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中確定了一個(gè)抗凝治療因子(ATF),在另一個(gè)實(shí)施例中確定了一個(gè)校正的抗凝治療因子(CATF)。在監(jiān)測(cè)口服抗凝劑治療時(shí),兩者都可以被選作標(biāo)準(zhǔn),而完全不需要考慮國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)比率(INR)或者國(guó)際靈敏度指數(shù)(ISI)。這些國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)在分別發(fā)表于1993年11月期和1993年12月期“Clinical Hemostasis Review”的題為“PTs,PR,ISIs and INRs:A Primer on Prothrombin Time Reporting Parts Ⅰ andⅡ”的技術(shù)論文中進(jìn)行了討論,這些論文已經(jīng)在本文引作參考。本發(fā)明的實(shí)踐依賴于凝血酶原時(shí)間(pT)和纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FTR),即纖維蛋白原轉(zhuǎn)化成纖維蛋白以造成血漿凝結(jié)過(guò)程中的凝血酶活性。本發(fā)明的實(shí)踐還依賴于在血漿的凝血酶原時(shí)間(PT)內(nèi)發(fā)生的酶凝階段的具體理解,其中血漿中含有因子Ⅱ、Ⅱa、Ⅴ、Ⅶ、和Ⅹ等蛋白。
更具體地說(shuō),利用凝結(jié)階段來(lái)測(cè)定受測(cè)患者血漿樣品的凝結(jié)過(guò)程,在此凝結(jié)階段中,凝血激酶(Tp)激活因子Ⅶ,因子Ⅶ激活因子Ⅹ,因子Ⅹ轉(zhuǎn)而在因子Ⅴ的催化作用下激活因子Ⅱ(有時(shí)稱(chēng)為凝血酶原)以使因子Ⅱa(有時(shí)稱(chēng)作凝血酶)把纖維蛋白原(FBG)轉(zhuǎn)化成纖維蛋白。濁度活性作為結(jié)果,在進(jìn)行模擬的零級(jí)動(dòng)力學(xué)反應(yīng)時(shí)進(jìn)行測(cè)量,方法如后所述。
由以上所述應(yīng)當(dāng)注意到,凝血激酶(Tp)不參與因子ⅡA(凝血酶)把纖維蛋白原(FBG)轉(zhuǎn)化成纖維蛋白時(shí)的反應(yīng),而此反應(yīng)對(duì)于受測(cè)患者的血漿凝結(jié)是決定性的。凝血激酶(Tp)只激活因子Ⅶ以開(kāi)始整個(gè)連鎖過(guò)程。還要注意,不同的凝血激酶(Tp)對(duì)因子Ⅶ有不同的作用速率,從而直至Ⅱ-Ⅱa(PT)的酶因子反應(yīng)速率也不同。因此,凝血酶原時(shí)間(PT)也依不同的凝血激酶(Tp)而異,這可能是一個(gè)誤導(dǎo)因素,其誤導(dǎo)有關(guān)方面認(rèn)為,需要考慮國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)比率(INR)和國(guó)際靈敏度指數(shù)(ISI)以補(bǔ)償在監(jiān)測(cè)口服抗凝劑治療過(guò)程中不同種類(lèi)凝血激酶(Tp)的使用。另外應(yīng)注意,凝血激酶(Tp)對(duì)于因子ⅡA把纖維蛋白原(FBG)轉(zhuǎn)化成纖維蛋白毫無(wú)作用,因此當(dāng)纖維蛋白原轉(zhuǎn)化是主要因素時(shí),使用什么樣的凝血激酶(Tp)都沒(méi)有關(guān)系。本發(fā)明中對(duì)凝血激酶(Tp)的所有需要只是啟動(dòng)獲得因子ⅡA的反應(yīng)。一旦本發(fā)明得到因子ⅡA,纖維蛋白原(FBG)自行地轉(zhuǎn)化成纖維蛋白,而與使用的凝血激酶(Tp)無(wú)關(guān)。因此,在其抗凝治療因子(ATF)的實(shí)施中,本發(fā)明只需要考慮確定纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FTR)、凝血酶原時(shí)間(PT)和最高加速點(diǎn)(MAP),所有這些都可以通過(guò)使用纖維蛋白原溶液來(lái)確定。
本發(fā)明的實(shí)踐優(yōu)選地包括纖維蛋白原(FBG)標(biāo)準(zhǔn)溶液和對(duì)照溶液,其中,纖維蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液起固定參照的作用與本發(fā)明所分析的溶液進(jìn)行比較,對(duì)照溶液起試劑作用,用于對(duì)照與本發(fā)明相關(guān)的反應(yīng)。纖維蛋白原標(biāo)準(zhǔn)溶液包括高濃度溶液也包括低濃度溶液,而對(duì)照溶液實(shí)際上用于對(duì)照血液樣品的凝結(jié)時(shí)間和纖維蛋白原。
可以通過(guò)冷沉淀制備10克/升的纖維蛋白原(FBG)溶液。可以通過(guò)低溫冷凍血漿制備冷沉淀物使血漿在冰箱中解凍,然后,如領(lǐng)域內(nèi)公知,甩出血漿留下剩余的冷沉淀物。收集到的冷沉淀物應(yīng)當(dāng)既含有實(shí)際量的所需的纖維蛋白原(FBG),也含有實(shí)際量的所需因子Ⅷ(抗血友病球蛋白),還有其它與本發(fā)明不特別相關(guān)的物質(zhì)。進(jìn)一步處理后,10克/升的纖維蛋白原(FBG)溶液用作高濃度纖維蛋白原(FBG)標(biāo)準(zhǔn)液的來(lái)源。0.5克/升纖維蛋白原(FBG)溶液可以用一些收集的冷凍沉淀物1∶20稀釋液制備(10克/升/20=0.5克/升),對(duì)之可以加歐倫氏巴比妥鈉緩沖液(pH7.35)(領(lǐng)域內(nèi)所公知),或者生理鹽水,在進(jìn)一步處理后也可以是低濃度纖維蛋白原(FBG)標(biāo)準(zhǔn)液的來(lái)源。然后可以分別在1毫升的正常人血漿中加高和低濃度的纖維蛋白原標(biāo)準(zhǔn)源各1毫升(從而人血漿可以凝結(jié)),并且如此的添加可以分別產(chǎn)生6.38克/升和1.5克/升的高和低濃度的纖維蛋白原(FBG)標(biāo)準(zhǔn),其在本發(fā)明的實(shí)踐中用于分析受測(cè)枸櫞酸化血液樣品,特別是在抗凝治療中受監(jiān)測(cè)的血樣,其對(duì)本發(fā)明有首要意義。
如所公知,將凝血酶原C試劑作為凝結(jié)劑進(jìn)行添加,以使受測(cè)的枸櫞酸化血樣中發(fā)生凝結(jié),血樣可以容納在試管8中。在發(fā)生凝結(jié)時(shí),圖1的A/D轉(zhuǎn)換器26會(huì)計(jì)數(shù)并且在預(yù)定的周期,例如每0.05秒或者0.01秒,產(chǎn)生一個(gè)電壓數(shù)字值。如前文引作參考的美國(guó)專(zhuān)利5,197,017(′017)中所詳述,這些電壓值由記錄器存儲(chǔ)和打印成一個(gè)數(shù)字陣列,打印從左到右且從上到下逐行地進(jìn)行。象征地說(shuō),每秒有一百個(gè)數(shù)字分成5組(其代表電壓值),因此,每行在時(shí)間上代表五分之一秒(20×0.01秒)。同一列中的各個(gè)數(shù)字是二十個(gè)序列的分開(kāi)數(shù)字。因此在一列中兩個(gè)相鄰的數(shù)字之間的時(shí)間差是五分之一秒。在通覽了圖2所示的本發(fā)明的工作原理后可以更清楚地了解這些記錄值的意義,圖2的Y軸標(biāo)出纖維蛋白原濃度(光密度)而X軸標(biāo)出時(shí)間(秒)。
圖2說(shuō)明本發(fā)明所涉及的凝結(jié)曲線的數(shù)據(jù)點(diǎn)位置。一般地說(shuō),圖2說(shuō)明了一種“凝結(jié)斜率”法,它可以用于本發(fā)明以確定抗凝治療因子(AFT),且在前面引為參考的美國(guó)專(zhuān)利5,502,651中更充分地討論,該專(zhuān)利測(cè)量血漿中對(duì)血漿的凝結(jié)起作用的纖維蛋白原(FBG)濃度,并且用圖1所示的電位光度計(jì)提供輸出電壓信號(hào),其直接指示容納在試管8的受測(cè)血漿樣品中的纖維蛋白原(FBG)濃度。沿圖2的Y軸給出的數(shù)量是可由數(shù)字記錄器28顯示的數(shù)值(+和-)。“凝結(jié)斜率”法含有檢測(cè)與從纖維蛋白原形成纖維蛋白相關(guān)聯(lián)的速率或者斜率。“凝結(jié)斜率”法考慮到凝血酶原時(shí)間(PT)(前文述及為確定抗凝治療的因子之一),它一般定義為向血漿內(nèi)注射凝血酶原和鈣離子之類(lèi)的試劑到開(kāi)始凝結(jié)時(shí)相應(yīng)一即刻之間的時(shí)間長(zhǎng)度。
如圖2所示,在時(shí)間t0,相應(yīng)于濃度c0,在血漿中引入凝血酶原/鈣離子試劑,引起血漿樣品成分?jǐn)_動(dòng),轉(zhuǎn)而引起血漿的光密度暫時(shí)增加。在注射試劑后(如下文所述,注射的時(shí)間可從計(jì)算機(jī)30知道),圖1的記錄器28的數(shù)字量快速地增加,然后以相對(duì)平穩(wěn)的方式達(dá)到平衡。然后如此繼續(xù),直至?xí)r間t1處濃度達(dá)到c1。從在t0時(shí)間注射凝血酶原到量c1的即刻時(shí)間t1之間的時(shí)間間隔就是凝血酶原時(shí)間(PT),其在圖2中由符號(hào)PT表示。凝血酶原時(shí)間(PT)有重要的意義,因?yàn)樗菦Q定本發(fā)明的抗凝治療因子(AFT)的三個(gè)參數(shù)(其它的是纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FTR)和與達(dá)到最高加速(TMA)的時(shí)間相關(guān)的最高加速點(diǎn)(MAP))之一。
量c1的光密度直接對(duì)應(yīng)于一個(gè)特定的最低纖維蛋白原(FBG)量,它須由一個(gè)測(cè)量系統(tǒng)如圖1的電路排列表示出,以檢測(cè)正在形成的凝結(jié)。另外,圖2所示的所有量都是與纖維蛋白原濃度直接相關(guān)的光密度。臨界量c1在各個(gè)凝結(jié)檢測(cè)系統(tǒng)中可以互不相同,但是對(duì)于圖1的電位光度計(jì)系統(tǒng),這個(gè)最低量由約0.05克/升的單位質(zhì)量所確定。
圖2示檢測(cè)到這個(gè)第一預(yù)定量c1發(fā)生在即刻時(shí)間t1,這時(shí)凝結(jié)過(guò)程開(kāi)始,該過(guò)程用本發(fā)明方法進(jìn)行監(jiān)測(cè)以確定抗凝治療因子(AFT)。時(shí)間t1是纖維蛋白原形成的起點(diǎn),就是說(shuō),是相應(yīng)于纖維蛋白原轉(zhuǎn)化加速開(kāi)始的點(diǎn),這個(gè)過(guò)程持續(xù)一個(gè)預(yù)定的時(shí)間,優(yōu)選地約1.5秒。時(shí)間點(diǎn)t1由檢測(cè)中積累的光密度數(shù)據(jù)的實(shí)時(shí)分析確定。至少1.5秒的時(shí)間持續(xù)使得有足夠量的延遲時(shí)間以消除任何誤響應(yīng),其歸因于起始把試劑混合進(jìn)樣品或者由受測(cè)樣品中的氣泡造成的噪音。這個(gè)1.5秒的時(shí)間幫助確定纖維蛋白原轉(zhuǎn)化的起始時(shí)間(t1),而不考慮可能短時(shí)間出現(xiàn)的任何氣泡或者人工因素。如果不得益于本發(fā)明,這些噪音源就可能被錯(cuò)誤地解釋為早期的凝結(jié)并且可能由測(cè)量的儀器導(dǎo)致相應(yīng)的誤響應(yīng)。
在此1.5秒時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生的纖維蛋白原轉(zhuǎn)化的加速,在圖2中示為第一時(shí)間段Ta(t1至t2)。此第一時(shí)間段Ta由第一量c1和發(fā)生在時(shí)間t2的第二量c2確定,其中c2至少等于c1的量。纖維蛋白原轉(zhuǎn)化的加速持續(xù)至?xí)r間t3,其相應(yīng)的量為c3。時(shí)間t3以及量c3對(duì)于本發(fā)明至關(guān)重要,因?yàn)樗抢w維蛋白原(FBG)向纖維蛋白轉(zhuǎn)化的最高加速點(diǎn),也是纖維蛋白原(FBG)向纖維蛋白轉(zhuǎn)化開(kāi)始減速的點(diǎn)。另外,從t1到t3這段時(shí)間是到達(dá)最高加速的時(shí)間(TMA),其示于圖2中。它起一個(gè)(TMA)/100的倍增器的作用,這下文將加以說(shuō)明。第三量(c3)和時(shí)間t3確定一個(gè)與本發(fā)明相關(guān)的最高加速點(diǎn)(MAP)并示于圖2中,它具有預(yù)定的范圍,在最高加速點(diǎn)(MAP)前開(kāi)始并且在最高加速點(diǎn)(MAP)之后結(jié)束,并且不同于纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FTR)的總范圍,后者也示于圖2中并且為一個(gè)+/-0.5秒典型區(qū)段。在MAP前的一個(gè)短滯后時(shí)相后,纖維蛋白的形成以線性方式發(fā)生一段時(shí)間。在這個(gè)滯后時(shí)相中,纖維蛋白原(FBG)是盈余的,并且直至MAP前纖維蛋白形成呈線性。在MAP的+/-(TMA/2)秒期間形成的FBG以總可凝結(jié)FBG的百分?jǐn)?shù)給出。這就是纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FTR)。纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FTR)對(duì)本發(fā)明至關(guān)重要,因?yàn)樗谴_定本發(fā)明的抗凝治療因子(ATF)的三個(gè)參數(shù)之一,其它的兩個(gè)是凝血酶原時(shí)間(PT)和最高加速點(diǎn)(MAP)。預(yù)定范圍可以在圖2所示的最高加速點(diǎn)(MAP)每一側(cè)從約0.1秒到約5.0秒,從而纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率可以覆蓋一個(gè)約0.2秒到10.0秒的總差值。
時(shí)間t3和t2確定第二時(shí)間期Tb,其典型值為1.5秒。纖維蛋白原(FBG)向纖維蛋白轉(zhuǎn)化的減速持續(xù)直至t4達(dá)到量c4。時(shí)間t4是纖維蛋白(FBG)向纖維蛋白轉(zhuǎn)化減速對(duì)應(yīng)于一個(gè)值時(shí)的時(shí)間點(diǎn),這個(gè)值低于起動(dòng)纖維蛋白原(FBG)向纖維蛋白轉(zhuǎn)化所要求的纖維蛋白原的量。這樣,因?yàn)椴辉俅嬖谒M睦w維蛋白原(FBG)向纖維蛋白的轉(zhuǎn)化,所以如本發(fā)明所定義,時(shí)間t4代表纖維蛋白原(FBG)向纖維蛋白轉(zhuǎn)化的終結(jié)點(diǎn)。纖維蛋白原(FBG)向纖維蛋白的轉(zhuǎn)化有一個(gè)起點(diǎn)t1和一個(gè)終點(diǎn)t4。由這兩個(gè)時(shí)間t1和t4確定一個(gè)第三時(shí)間期Tc。
點(diǎn)(t1和t4)的意義不在于它們發(fā)生的時(shí)間,而在于發(fā)生在時(shí)間t1和t4時(shí)的量c1和c4的光密度的差。此差值在本文定義為“凝結(jié)斜率法”的δ光密度,并且對(duì)于涉及確定抗凝治療因子(ATF)的本發(fā)明是重要的。“凝結(jié)斜率”法收集圖2所示典型數(shù)據(jù)。此法有四個(gè)關(guān)鍵參數(shù)。第一,正進(jìn)行分析的物質(zhì)的初始δ光密度應(yīng)當(dāng)大于約0.05克/升,以使圖1所示的電路排列能有效地工作。第二,加速(與Ta相關(guān)的纖維蛋白原(FBG)向纖維蛋白轉(zhuǎn)化)應(yīng)當(dāng)在最少約為1.5秒的時(shí)期內(nèi)不斷增加,以克服由氣泡產(chǎn)生的任何誤反應(yīng)。第三,總的δ光密度(由量c1和c4的差值定義)應(yīng)當(dāng)至少為儀器值的三倍,以進(jìn)行有效的檢測(cè),即,(3)*(0.05克/升)=0.15克/升。第四,纖維蛋白原(FBG)向纖維蛋白的轉(zhuǎn)化部分由點(diǎn)(t4)確定,在這點(diǎn)上,轉(zhuǎn)化的減速低于用于檢測(cè)凝結(jié)點(diǎn)(t1)的約0.05秒儀器值。如多數(shù)凝結(jié)檢測(cè)系統(tǒng),為檢測(cè)凝結(jié)形成,需要有特定量的纖維蛋白原。依照這四個(gè)給定的關(guān)鍵參數(shù)使本發(fā)明能夠確定特定量的纖維蛋白原。為了確定這個(gè)特定量的纖維蛋白原,必須首先測(cè)定凝結(jié)點(diǎn)(t1)。在測(cè)定了凝結(jié)點(diǎn)(t1)之后,合于邏輯的是,接著,當(dāng)纖維蛋白原轉(zhuǎn)化低于特定量時(shí)(對(duì)于圖1的電路排列是0.05克/升),纖維蛋白原轉(zhuǎn)化達(dá)到了終點(diǎn)(t4)。
圖2所示的數(shù)據(jù)收集、存儲(chǔ)和處理主要由圖1所示的計(jì)算機(jī)30完成,此計(jì)算機(jī)接收由光電池10檢測(cè)裝置的模擬電壓量經(jīng)A/D轉(zhuǎn)換器26轉(zhuǎn)換的數(shù)字電壓值。
圖1的優(yōu)選IBM兼容計(jì)算機(jī)30存儲(chǔ)并且處理與圖2的相關(guān)數(shù)據(jù)相對(duì)應(yīng)的這些數(shù)字值,并且此計(jì)算機(jī)優(yōu)選如下進(jìn)行編程a)對(duì)于用枸櫞酸處理的血,如上述在試管8中的血,在注射凝血激酶前,計(jì)算機(jī)30以及記錄器28相繼地記錄電壓值幾秒鐘。如前所討論,凝血激酶是人體內(nèi)引起血液凝結(jié)的因子之一。凝血酶原是另一因子之一。纖維蛋白原也是因子之一。在注射凝血激酶之前,A/D轉(zhuǎn)換器26的輸出是相對(duì)恒定的。當(dāng)向試管中的血中注入凝血激酶時(shí),在計(jì)算機(jī)30和記錄器28兩者記錄的電壓值都發(fā)生重要而突然的改變。這個(gè)突然的改變由記錄器28辨識(shí),并且更重要地是,它由計(jì)算機(jī)30辨識(shí),后者利用這個(gè)辨識(shí)來(lái)確定已參照?qǐng)D2討論過(guò)的t0??梢杂?jì)算機(jī)編程,使A/D轉(zhuǎn)換器26的數(shù)字量與檢測(cè)裝置光電池10的模擬輸出相關(guān),檢測(cè)裝置光電池10的模擬輸出又與參照?qǐng)D2討論的血樣的纖維蛋白原(FBG)濃度克/升直接相關(guān);b)在記錄代表凝血激酶已經(jīng)注入這一事實(shí)的數(shù)字量(見(jiàn)圖2的t0)之后,可以計(jì)算機(jī)編程以尋找代表前面討論的臨界量c1的數(shù)字量,并且當(dāng)找出此量時(shí)記錄其瞬時(shí)時(shí)間t1。在t0到t1之間的間隔是對(duì)本發(fā)明特別重要的凝血酶原時(shí)間(PT),正常持續(xù)時(shí)間約為12秒,但是可以長(zhǎng)于30秒;c)檢測(cè)臨界量c1之后,可以對(duì)計(jì)算機(jī)30編程以檢測(cè)在指定時(shí)間段段Ta之內(nèi)纖維蛋白原(FBG)向纖維蛋白轉(zhuǎn)化的加速度,持續(xù)的典型值是1.5秒。這個(gè)時(shí)間點(diǎn)Ta的參數(shù)是,其起點(diǎn)由第一預(yù)定量c1的出現(xiàn)(t1)確定,其終點(diǎn)由在時(shí)間t2第二預(yù)定量c2的出現(xiàn)確定。所述的第一預(yù)定時(shí)間段Ta的典型范圍當(dāng)由t0測(cè)量時(shí)約為12至30秒。還對(duì)計(jì)算機(jī)編程以檢測(cè)最高加速量c3及其出現(xiàn)時(shí)間t3(典型值是t2后約1.5秒)。由t2和t3這兩個(gè)時(shí)間確定時(shí)間段Tb。而且,計(jì)算機(jī)檢測(cè)出現(xiàn)在t4的量c4以確定時(shí)間段Tc。時(shí)間段Ta可超出但不可低于典型的1.5秒長(zhǎng)度。在量c1出現(xiàn)的時(shí)間(t1)和量c2出現(xiàn)的時(shí)間(t2)之間的時(shí)間長(zhǎng)度不是固定的。重要的只是纖維形成速率在時(shí)間點(diǎn)(t1)之后的至少1.5秒內(nèi)增加;d)在確定最高加速量c3和時(shí)間t3之后兩者都可確定最高加速點(diǎn)(MAP),對(duì)計(jì)算機(jī)30編程以確定預(yù)定范圍內(nèi)的纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FTR),此范圍起自最高加速點(diǎn)(MAP)之前而終于最高加速點(diǎn)(MAP)之后。從t1到t3所經(jīng)歷的時(shí)間是圖2所示的達(dá)到最高加速的時(shí)間(TMA),并且是一個(gè)倍增因素(TMA/100)。在最高加速點(diǎn)(MAP)之前纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FTR)有一個(gè)上升的(增量的)斜率,并且在最高加速點(diǎn)(MAP)之后有一個(gè)下降的(減量的)斜率。對(duì)計(jì)算機(jī)30編程以使之能夠在一個(gè)預(yù)定的范圍內(nèi)確定纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FPT),這個(gè)范圍可以是最高加速點(diǎn)(MAP)兩側(cè)各約0.1秒至5.0秒,纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FPT)可以覆蓋約0.2秒至10.0秒的差距;e)在檢測(cè)纖維蛋白原轉(zhuǎn)化的加速之后,對(duì)計(jì)算機(jī)30編程以檢測(cè)纖維蛋白原轉(zhuǎn)化的減速。其中,纖維蛋白原的濃度從其第三預(yù)定量c3減少到第四預(yù)定量c4,其約等于但低于第一量c1。由檢測(cè)到第一量c1的瞬時(shí)時(shí)間至檢測(cè)到第四量c4的瞬時(shí)時(shí)間確定第三時(shí)間段Tc;f)計(jì)算機(jī)30處理上面a);b);c);d)和e)收集的數(shù)據(jù),以確定凝血酶原時(shí)間,它基于的原理是,如果要求的纖維蛋白原濃度c1的量(例如,0.05克/升)是確定凝結(jié)時(shí)間點(diǎn)(t1)的第一必要條件,那么當(dāng)出現(xiàn)在時(shí)間(t4)的纖維蛋白原濃度(c4)開(kāi)始低于所需要的量c1時(shí),就已經(jīng)達(dá)到了纖維蛋白原終止點(diǎn)。更具體地說(shuō),所需要的纖維蛋白濃度c1是凝結(jié)過(guò)程的纖維蛋白轉(zhuǎn)化的起點(diǎn),而低于所需的纖維蛋白濃度的c4是凝血過(guò)程的纖維蛋白原轉(zhuǎn)化的終點(diǎn)。這樣本發(fā)明凝血過(guò)程中纖維蛋白原轉(zhuǎn)化的持續(xù)時(shí)間由t1和t4之間的時(shí)間段確定并在圖2中一般指示為T(mén)c;g)計(jì)算機(jī)30現(xiàn)在具有了確定本發(fā)明的抗凝治療因子(AFT)所需要的信息。更具體地說(shuō),計(jì)算機(jī)30知道了纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FTR)、凝血酶原時(shí)間(PT)和在計(jì)算機(jī)30中運(yùn)行的簡(jiǎn)單除法規(guī)則,其結(jié)果當(dāng)與達(dá)到最高加速的時(shí)間(TMA)的相乘得出本發(fā)明的抗凝治療因子(AFT),其關(guān)系由下式(2)表達(dá)AET=PT/FRT*(TMA/100)(2)現(xiàn)在可以了解,本發(fā)明提供了一個(gè)用于得到抗凝治療因子(AFT)的相對(duì)簡(jiǎn)易而且自動(dòng)的方法,其不必面對(duì)在先技術(shù)中國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)比率(INR)和國(guó)際靈敏度指數(shù)(ISI)的繁復(fù)性,后者具有下面的表達(dá)式(3)所定義的關(guān)系以及數(shù)量[患者的PT/PT正常范圍均值](指的是凝血酶原比率(PR)),這都在“技術(shù)背景”一節(jié)中進(jìn)行了討論INR=[患者的PT/PT正常范圍均值]ISI(3)抗凝治療因子(ATF)是國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)比率(INR)的替代;而現(xiàn)在的醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)、儀器和方法學(xué)都與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)比率(INR)緊密相關(guān),因而本發(fā)明的實(shí)踐通過(guò)比較性實(shí)驗(yàn)使量ATF與INR彼此相關(guān),即使了解INR的確定可能會(huì)有約13%的誤差,在解釋下文所討論的不一致性時(shí)要考慮這個(gè)誤差。ATF和INR量的比較性實(shí)驗(yàn)比較性檢驗(yàn)利用三個(gè)不同的凝血激酶(Tp)進(jìn)行,第一個(gè)是ISI為2.06的Dade公司凝血激酶·C;第二個(gè)是帶有約ISI為1.0的Dade公司Innovin;而第三個(gè)是ISI為2.48的帶有鈣離子的Sigma診斷用凝血激酶。這三個(gè)具有鈣離子的凝血激酶(Tp)的使用提供了相對(duì)較大的ISI參數(shù)范圍。在血漿從患者抽取一個(gè)小時(shí)后得到枸櫞酸處理的患者血漿,并測(cè)定其凝血原酶時(shí)間(PT)。多數(shù)患者用抗凝劑下丙酮香豆素鈉,相當(dāng)少數(shù)既用下丙酮香豆素鈉也用肝素。在測(cè)定凝血酶原時(shí)間后,以前述的方式測(cè)定FTR和INR。至少進(jìn)行四輪比較性實(shí)驗(yàn)(后文將說(shuō)明盤(pán)Ⅰ、盤(pán)Ⅱ、盤(pán)Ⅲ和盤(pán)Ⅳ,特別將對(duì)圖3-8加以說(shuō)明)。在第一輪(盤(pán)Ⅰ)中利用凝血激酶·C并且在最后一輪(盤(pán)Ⅳ)中重復(fù)其使用。將凝血激酶(Tp)Innovin用于第二樣品(盤(pán)Ⅱ)。將凝血激酶改變成西格瑪(Tp)(盤(pán)Ⅲ),并且再次進(jìn)行檢驗(yàn)。最后,將凝血激酶·C用于第盤(pán)Ⅳ。用約40分鐘改變各種凝血激酶并且運(yùn)行樣品(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ)。Thromboplastin*凝血激酶在第一個(gè)(盤(pán)Ⅰ)和最后一個(gè)(盤(pán)Ⅳ)運(yùn)行,以表明沒(méi)有出現(xiàn)明顯的凝結(jié)因子退變。比較性實(shí)驗(yàn)的結(jié)果示于圖3-8,各圖的X軸都指示國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)比率(INR),Y軸都指示抗凝治療因子(AFT)的值,而其間的相關(guān)性是其相關(guān)因子r。
圖3和4說(shuō)明比較性實(shí)驗(yàn),以X軸表示所有盤(pán)(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ)的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)比率(INR),Y軸表示所有盤(pán)(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ)的抗凝治療因子(ATF)。圖3示在相對(duì)于最高加速點(diǎn)(MAP)+和-0.5秒范圍內(nèi)的纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FRT),而圖4示在最高加速點(diǎn)(MAP)前1秒范圍的纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FRT)。使用圖3的+/-0.5秒范圍的纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FRT)得到的相關(guān)性是0.9334,它優(yōu)于使用-1秒范圍的纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FRT)得到的相關(guān)性0.9235。
圖5、6、7和8顯示獨(dú)立計(jì)算盤(pán)Ⅰ(圖5)、盤(pán)Ⅱ(圖6)、盤(pán)Ⅲ(圖7)和盤(pán)Ⅳ(圖8)的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)比率(INR)的結(jié)果。圖5、6、7和8分別示相關(guān)性為0.948、0.9632、0.966和0.9653。
盡管當(dāng)采樣的患者多數(shù)使用一種特定的治療如抗凝劑下丙酮香豆素鈉(前文討論)時(shí),上述的抗凝治療因子(ATF)與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)比率(INR)相關(guān)性很好,但當(dāng)對(duì)各個(gè)的患者比較ATF和INR量時(shí)卻存在偏離。當(dāng)用下面的表達(dá)式(4)統(tǒng)計(jì)地校正抗凝治療因子時(shí),解決了這些偏離,這在后文稱(chēng)為校正的抗凝治療因子(CATF)CATF=PT*PR/FTR*(TMA/100)(4)這里所用的凝血酶原比率PR=PT/MNPT,這里用的平均正常凝血酶原時(shí)間(MNPT)是從至少20名正?;颊叩玫降哪冈瓡r(shí)間的幾何平均。在表達(dá)式(4)中凝血酶原比率PR的使用均勻地展開(kāi)了凝血酶原時(shí)間PT的值,從而得到比表達(dá)式(2)ATF量的靈敏度更加靈敏的表達(dá)式(4)的CATF量。
一般希望把表達(dá)式(2)的ATF“校正”為表達(dá)式(4)的值,以使校正了的抗凝治療因子(CATF)盡可能在數(shù)字上與INR相對(duì)應(yīng)。為了在視覺(jué)上顯示這種相關(guān)性,把INR對(duì)ATF的圖表(圖9-12,如后說(shuō)明)進(jìn)行數(shù)學(xué)處理,使圖9-12的曲線的斜率是1,并且使這些曲線的直線表達(dá)線經(jīng)過(guò)原點(diǎn),就是說(shuō),產(chǎn)生一條0相交線。這些處理改進(jìn)了表達(dá)式(2)的ATF值,從而使表達(dá)式(4)的CATF量幾乎等于INR。一般來(lái)說(shuō),為了將改進(jìn)的ATF(MATF)值與INR值相比較,我們對(duì)使用凝血激酶的所有樣品計(jì)算其MEAN(X)、MEAN(Y)和SLOPE(X、Y),然后參照?qǐng)D13-18說(shuō)明的方式進(jìn)行幾何改進(jìn),并且,其中量MATF可以由下面給出的表達(dá)式(5)一般地表達(dá)為MAFT=((CATF-MEAN)/SLOPE(XY))+MEAN(X)(5)CATF和INR之間的相關(guān)性示于圖13-14,其有待于進(jìn)一步的說(shuō)明,其中的量X(INR)是沿X軸所示的量,而量Y(CATF)是沿Y軸所示的量。為把表達(dá)式(2)的量轉(zhuǎn)換成表達(dá)式(4)的量,進(jìn)行以下由相應(yīng)表達(dá)式(6)-(10)所代表的五個(gè)處理,并且以其X量代表圖9-12的INR,其Y量代表圖13-14的CATF量X的平均值(x)從x得到,這里也稱(chēng)為平均(x);(6)Y的平均值(y)從y得到,這里也稱(chēng)為平均(y);(7)然后把X設(shè)為=X-xY設(shè)為=Y-y再把Y設(shè)為(y-y)/斜率(x,y);(8)表達(dá)式(6)、(7)和(8)使圖9-14的曲線斜率等于1而不改變關(guān)于INR的表達(dá)式(2)的相關(guān)性;(9)還需要把回歸線放置得交于0點(diǎn),為x加在X和Y上。
(10)CAFT和INR量之間的相關(guān)性,特別是為提供斜率為1并且交于0點(diǎn)的曲線而進(jìn)行的校正數(shù)據(jù)的處理,可以參照?qǐng)D9-12以圖表的方式說(shuō)明。
圖9示一條由92個(gè)樣品得到的各種校正數(shù)據(jù)(一般地用X符號(hào)指示)的曲線32,其中與X和Y軸關(guān)聯(lián)的數(shù)據(jù)的相關(guān)因子r為0.0759。圖9的曲線32的斜率為2.8388并且截距是-1.6852。如前所述,本發(fā)明的實(shí)踐希望保持曲線32所確定的量,但把斜率改變成1且把截距改變成0。
圖10說(shuō)明曲線32截距為0,這是通過(guò)設(shè)X=x-平均(x)和Y=y-平均(y)達(dá)到的,其中的量x和y是圖9中的數(shù)據(jù)。比較圖9和圖10的X軸和Y軸,揭示Y軸的值從圖9中的0至20改變成圖10中的-5至15,類(lèi)似地,X軸的值從圖9中的0至7改變成圖10中的-2至5。然而,曲線32的分布和校正因子r保持不變。
圖11顯示曲線32的斜率為1,這是通過(guò)設(shè)X=圖10中的x量并且設(shè)Y=圖10中的y量且隨后以圖9的x、y量設(shè)Y=Y/斜率(x,y)達(dá)到的。比較圖10和圖11的X軸和Y軸揭示Y軸的值從圖10的-5至15改變到圖11的-2至6,相反,圖10和圖11的X軸的值都保持不變,即從-2至5。
圖12顯示曲線32截距是0,這是通過(guò)設(shè)X和Y為圖11的量且隨后設(shè)X=Y+平均(x)和Y=Y+平均(x)達(dá)到的,這里x和y為圖9中的量。比較圖11和圖12的X軸和Y軸,其揭示,Y軸的值從圖11中的-2至6改變成圖12中的0至8,類(lèi)似地,X軸的值從圖11中的-2至5改變成圖12中的0至8。更重要的是,確定X和Y軸的值是相同的;即0至8。
圖12的曲線32斜率是1且截距是0,其提供的數(shù)據(jù)用于表達(dá)式(4)中彼此一致的INR量和CATF量,這些數(shù)據(jù)由x點(diǎn)和y點(diǎn)組成,其值由本發(fā)明的實(shí)踐所定義。
計(jì)算機(jī)30可用于利用公知的編程工作和技術(shù)來(lái)處理和取得表達(dá)式(4)的量??梢允褂糜捎?jì)算機(jī)30收集的用于處理和取得表達(dá)式(2)的抗凝治療因子(ATF)的數(shù)據(jù),并且使其成為用于處理和取得表達(dá)式(4)的校正的抗凝治療因子(CATF)的同一數(shù)據(jù)。類(lèi)似地,使用公知的數(shù)學(xué)技術(shù),本領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)人員可以導(dǎo)出表達(dá)式(4)的凝血酶原比率(PR)和平均正常凝血酶原時(shí)間(MNPT),它們轉(zhuǎn)而用于確定表達(dá)式(4)的校正抗凝治療因子(CATF)。這些量的準(zhǔn)確性部分取決于所用樣品的數(shù)量,即穩(wěn)定的患者的數(shù)量;這里,為了本發(fā)明的實(shí)踐,優(yōu)選至少用20名穩(wěn)定的患者進(jìn)行校準(zhǔn)工作,其有待本文進(jìn)一步討論,而且此校準(zhǔn)工作也與領(lǐng)域內(nèi)用于建立人群采樣標(biāo)準(zhǔn)的方法相符,例如前文引作參考的L.Poller的技術(shù)論文所述。
對(duì)多于20的樣品各自進(jìn)行獨(dú)立的處理以得到獨(dú)立的校正抗凝治療因子(CATF),但大多數(shù)樣品用于導(dǎo)出平均正常凝血酶原時(shí)間(MNPT),其被用于各個(gè)獨(dú)立的抗凝血治療因子(CATF)量的推導(dǎo)過(guò)程中。CATF和INR量的比較性實(shí)驗(yàn)在本發(fā)明的實(shí)踐中,由20名正常患者測(cè)定INR、AIF和校正的ATF(表達(dá)式(4)中的CATF)。實(shí)踐中所用的ATF和INR的量已經(jīng)是可以得到的,例如象參照?qǐng)D2-8討論的那樣。進(jìn)一步,通過(guò)使用Dade公司的凝血激酶C+來(lái)測(cè)定附加的INR,其中的凝血激酶用本領(lǐng)域內(nèi)公知的Coag-A-Mate凝血分析器分析。將用Coag-A-Mate凝血分析器測(cè)定的INR與校正的AFT進(jìn)行比較。校正的ATF和收集的INR之間的比較可以參照前述的圖13進(jìn)行進(jìn)一步的討論。
圖13和14類(lèi)似于圖3-4具有一個(gè)由INR指示的X軸,但是這里有一個(gè)由CATF指示的Y軸。圖13顯示一條校正ATF(CATF)對(duì)INR的組合曲線,其來(lái)自使用四種獨(dú)立的凝血激酶的510份穩(wěn)定患者的樣品,上述的凝血激酶都是領(lǐng)域內(nèi)公知的,它們是凝血激酶C+(TPC)、Innovin(INN)、Sigma(SIG)和Pacific Hemostasis-D(PHT)。圖13的校正因子是r=0.6860。用前面討論的方式,從圖13中應(yīng)當(dāng)注意到其曲線代表一條截距是0且斜率是1的直線,此兩點(diǎn)都在前面進(jìn)行過(guò)說(shuō)明。本發(fā)明的校正的ATF(CATF)和INR之間的比較可以參照?qǐng)D14進(jìn)行進(jìn)一步的說(shuō)明。
圖14顯示校正的ATF(CATF)對(duì)INR曲線,其來(lái)自從20名穩(wěn)定的患者中取得的380份樣品,且得出0.9126的校正因子r。圖14與圖13不同處在于圖13中的INN凝血激酶被從圖14中排除了。
如本領(lǐng)域內(nèi)公知,INN凝血激酶由重組技術(shù)制備并且ISI為1.02,而其它的三種凝活素(TPC、SIG和PHT)由兔腦制備并且ISI值分別是2.12、2.51和1.99。對(duì)于在其他方面拖延的樣品(即時(shí)間長(zhǎng)于15秒),使用INN凝血激酶肯定會(huì)導(dǎo)致較長(zhǎng)的凝血酶原時(shí)間,并且INN凝血激酶也具有較慢的反應(yīng)時(shí)間,如時(shí)間對(duì)從使用圖1的裝置中得到的光密度的凝結(jié)曲線中可見(jiàn)的那樣。這個(gè)較慢的反應(yīng)時(shí)間導(dǎo)致個(gè)體檢測(cè)在獲得實(shí)際的最終總纖維蛋白原(FBG)值之前結(jié)束。
由于得到少量的FBG,從而FTR有所增加,并且AFT也因此增加。(對(duì)于Sigma凝血激酶,這個(gè)終點(diǎn)檢測(cè)的問(wèn)題也在較小的程度上存在)??梢酝ㄟ^(guò)把測(cè)量時(shí)間延長(zhǎng)到得出“檢測(cè)結(jié)束”或者延長(zhǎng)到120秒(不論兩者哪個(gè)先達(dá)到)來(lái)解決這個(gè)問(wèn)題。與運(yùn)行截止時(shí)間為60秒的檢測(cè)相比較,在120秒處的誤差是無(wú)關(guān)緊要的。60秒的時(shí)間長(zhǎng)度對(duì)于凝血酶原時(shí)間是足夠的,但是對(duì)于用INN測(cè)定的FBG卻是明顯不足的,而對(duì)于SIG凝血激酶的情況下則更不足。改進(jìn)的ATF(MATF)與INR之間的比較可以參照?qǐng)D15-18進(jìn)一步說(shuō)明。
圖15、16、17和18所示曲線表示改進(jìn)抗凝治療因子(MATF)和INR之間的相關(guān)性,其分別用92份由TPC凝血激酶得到的樣品,得到0.9759的相關(guān)因子r;用93份由SIG得到的樣品得到0.9442的相關(guān)因子r;用101份由PHT凝血激酶得到的樣品得到0.9268的相關(guān)因子r;和用96份由INN凝血激酶得到的樣品得到0.8927的相關(guān)因子r。
回顧以上圖13-14所示結(jié)果,其顯示了一種可接受的校正ATF(CATF)對(duì)INR的相關(guān)因子(r),并且總結(jié)以上的圖15-18所示的結(jié)果,其顯示了一種可接受的改進(jìn)ATF(MATF)對(duì)INR的相關(guān)因子(r)。當(dāng)排除了INN凝血激酶(包括在圖13和15中)之后,這兩個(gè)結(jié)果進(jìn)一步地得到改善,但是臨床用藥時(shí)要求注意患者的個(gè)體情況,因此仍需考慮使用INN凝血激酶。在圖13-18的這部分研究中,我們把校正ATF(CATF)和改進(jìn)ATF(MATF)與INF進(jìn)行比較,其中INF用圖1的“POTENS+”裝置測(cè)定和/或在臨床實(shí)驗(yàn)室中用領(lǐng)域內(nèi)公知的Coag-A-Mate凝結(jié)分析器測(cè)定。這些臨床實(shí)驗(yàn)室INR結(jié)果是那些按前述方式用于實(shí)際治療患者的結(jié)果。導(dǎo)出圖15-18曲線的原始數(shù)據(jù)在下面表2和3中給出。
表2
表2(續(xù))
表2(續(xù))
表2(續(xù))
表2(續(xù))
表3
表3(續(xù))
表3(續(xù))
表2有四列,分成TPC凝血激酶、INN凝血激酶、SIG凝血激酶和PHT凝血激酶,各列再分為INR和MATF兩列。表3有兩列,分別標(biāo)示為臨床實(shí)驗(yàn)室INR和改進(jìn)的ATF(MATF)。在表2和3的每個(gè)列中,如果具體的MATF偏離相應(yīng)的平均INR值在+/-10%以上,其量就認(rèn)為是不合要求的。另外,在表2和3的每個(gè)列中,如果具體的MATF對(duì)于給定的INR范圍(例如在2-3.0之間的國(guó)際靈敏度指數(shù)(ISI)),在相應(yīng)的INR+/-10%以內(nèi)、但是對(duì)于不同的INR范圍,例如3.4-4.5之間的ISI,偏離相應(yīng)INR在+/-10%以上,其量就認(rèn)為是不合要求的。
表2顯示四列數(shù)據(jù)對(duì),代表MATF值對(duì)INR,這里MATF是由圖1的“POTENS+”裝置得到的。各列中的MATF與其自身的配對(duì)INR相關(guān),并且四個(gè)成對(duì)的列中的每列都是相互獨(dú)立的。當(dāng)把得到的INR與樣品或作為參照的標(biāo)準(zhǔn)INR比較時(shí),其間有0.5單位的差被認(rèn)為是可以接受的。另外,當(dāng)INR在相應(yīng)的平均樣品INR值的+/-10%之內(nèi)時(shí),也認(rèn)為其是可以接受的。把相同的規(guī)則用于ATF和INR時(shí),0.5單位或者以下也認(rèn)為是可以接受的差,其方式類(lèi)似于Judy R.Bodwell,MT(ASCP)SC,Boehringer Mannheim Corporation在Technical Bulletin(技術(shù)公報(bào))中所述,該文在此引作參考,或者當(dāng)ATF在INR參照的+/-10%之內(nèi)時(shí),其被認(rèn)為是可以接受的,其方式類(lèi)似于Poller等在American Journal of clinical Pathology 1998;109;196-204上的前述參考文獻(xiàn)中所述。用于治療靜脈栓塞、肺阻塞和預(yù)防全身性栓塞時(shí)的INR治療范圍是2.0-3.0單位,而用于機(jī)械性人工瓣膜時(shí)的范圍是2.5-3.5單位。用于各種治療時(shí)的INR范圍更全面地公開(kāi)于J.Hirsh等發(fā)表在Oral Anticoagulants;Chest,102,4,October,1991增刊上的“Mechanismof Action,Clinical Effctiveness,and Optimal Therapeutic Range”中。
回顧表2,其揭示使用TPC凝血激酶時(shí),92名患者中的2名表現(xiàn)差值大于0.5。
進(jìn)一步回顧表2,其揭示使用INN凝血激酶時(shí),96名患者中的10名表現(xiàn)MATF-INR差大于0.5??梢栽贗NN凝血激酶劑量中作一些調(diào)節(jié)以使患者的值回到范圍內(nèi)。使用SIG凝血激酶時(shí),93名患者中的12名表現(xiàn)MATF-INR差大于0.5,而且這些患者中有一些可以不必改變用藥。使用PHT凝血激酶時(shí),101名患者中的5名顯示差大于0.5,而這些患者中有一些可以不必改變用藥。
對(duì)于表2的全面回顧揭示對(duì)于個(gè)體患者,四種凝血激酶都有良好的結(jié)果,尤其是用TPC和PHT凝血激酶,并且,INN和SIG凝血激酶較得自TPC和PHT凝血激酶得到的結(jié)果稍差。
回顧表3,其中用“改進(jìn)的ATF”對(duì)由臨床實(shí)驗(yàn)室(例如57名患者)測(cè)定的INR,其揭示只有一名患者顯示大于0.5單位的差。與表2相比較,TPC既用于凝結(jié)儀,如圖1的“POTENS+”裝置,也用于臨床實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的裝置,即Coag-A-Mate系統(tǒng)。
可以重新整理表2和3中給出的信息,分別如下面的表4A和4B所示,然后與前面引為參考的V.L.NG等的技術(shù)論文的信息和分析進(jìn)行比較,更具體地說(shuō),其中表4是表4A
表4B
表4A和表4B的排列方式類(lèi)似于V.L.NG等的技術(shù)論文中的方式(表4),其中最左的一列指示使用的凝血激酶,其中間列指示治療劑量范圍,而最右的列指示總的不匹配數(shù)。更具體地說(shuō),舉表4A的范圍<2.0的TPC凝血激酶為例,且總數(shù)為4個(gè)中間列指示在那個(gè)特定的范圍中較低和較高的(0.4)INR讀數(shù),而在那個(gè)特定的范圍樣品總數(shù)為60個(gè)。另外同樣對(duì)于此例,最右列指示以總樣品(87)中測(cè)到的較高和較低INR讀數(shù)總和(9),從而得出百分比(9/87=10%)。
通過(guò)回顧表4A和4B認(rèn)識(shí)到由本發(fā)明的實(shí)踐得到6-25%不一致性,其遠(yuǎn)優(yōu)于V.L.NG等的技術(shù)論文中所述的17-29%不一致性。ATF的校準(zhǔn)在本發(fā)明的實(shí)踐中,當(dāng)使用一組新的凝血激酶時(shí),優(yōu)選重建平均正常凝血酶原時(shí)間MNPT,以對(duì)各個(gè)患者計(jì)算INR值。為了進(jìn)行這種重建,優(yōu)選重新校準(zhǔn)圖1的電路排列。為了進(jìn)行此校準(zhǔn),把用于得出MNPT的樣品組合,以按前述方式建立新組的低ATF值。優(yōu)選一批已經(jīng)至少使用了6周口服凝血?jiǎng)┑幕颊哂糜诮⒏逜TF值,其INR的理想值為3.0或者3.0以上。由高和低ATF組中的各至少20個(gè)樣品組成一輪實(shí)驗(yàn),以確立儀器的精確性以及MEAN(X)、MEAN(Y)和SLOPE(X,Y),其方式如前文所述。這些高和低ATF值用于產(chǎn)生改進(jìn)的ATF(MATF)值,并且它們對(duì)各種凝血激酶是特定的。當(dāng)本發(fā)明實(shí)踐對(duì)這新組凝血激酶進(jìn)行分析以得到前文所論的ATF和CATF時(shí),上述這些低和高ATF值作為參照用于比較。
在本發(fā)明的實(shí)踐中,上述的校準(zhǔn)過(guò)程使用Date公司的凝血激酶C+,并且盡管斜率和截距并不正好分別是1和0,但仍得到了滿意的結(jié)果。
現(xiàn)在應(yīng)當(dāng)了解到,本發(fā)明的實(shí)踐提供了方法和設(shè)備,其導(dǎo)出抗凝治療因子(ATF)、校正的抗凝治療因子(CATF)和改進(jìn)的抗凝治療因子(MATF),它們與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)比率(INR)的相關(guān)性都很好,也不存在源自兔腦或牛腦的凝血激酶造成的不精確性。
盡管參照特定實(shí)施例說(shuō)明了本發(fā)明,但是這些說(shuō)明是講解性的,其不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明范圍的限制。本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以在不偏離所附權(quán)利要求書(shū)中確定的本發(fā)明的精神和范圍情況下作出各種改進(jìn)和變更。
權(quán)利要求
1.一種確定抗凝治療因子(ATF)的方法,包括下列步驟a)得到一系列的模擬電壓信號(hào),其電壓振幅與含纖維蛋白原的液體樣品的光密度成比例;b)把得到的模擬電壓信號(hào)轉(zhuǎn)換成一系列數(shù)字電壓值信號(hào);c)在液體樣品中注入凝血?jiǎng)?,從而在液體樣品的光密度中產(chǎn)生突然的改變,所述的突然的改變?cè)陔娔M信號(hào)振幅中產(chǎn)生突然的改變,后者又在所述的數(shù)字電壓信號(hào)的值中產(chǎn)生突然的改變,所述數(shù)字電壓信號(hào)的值直接指示液體樣品中的纖維蛋白原濃度;d)記錄所述數(shù)字電壓信號(hào)的所述值的所述突然改變的即刻時(shí)間t0;e)監(jiān)測(cè)所述電壓數(shù)字信號(hào)值的第一預(yù)定纖維蛋白原濃度量c1;f)記錄即刻時(shí)間t1以及所述第一預(yù)定纖維蛋白原濃度量c1的電壓數(shù)字信號(hào)的值;g)記錄t0和t1之間經(jīng)歷的時(shí)間,定義為凝血酶原時(shí)間(PT);h)監(jiān)測(cè)電壓數(shù)字信號(hào)值的差分改變,電壓數(shù)字信號(hào)值包括一個(gè)第二預(yù)定纖維蛋白原濃度c2和一個(gè)第三預(yù)定纖維蛋白原濃度c3;所述第二預(yù)定纖維蛋白原濃度c2至少等于所述的第一預(yù)定纖維蛋白原濃度c1,所述第一c1和第二c2預(yù)定纖維蛋白原濃度量出現(xiàn)在第一預(yù)定時(shí)間段Ta內(nèi),所述第二c2和第三c3預(yù)定纖維蛋白原濃度量出現(xiàn)在第二預(yù)定時(shí)間段Tb內(nèi);及i)對(duì)相應(yīng)于時(shí)間t2和t3的每個(gè)所述的第二c2和第三c3預(yù)定纖維蛋白原濃度量,記錄即刻時(shí)間和電壓數(shù)字信號(hào)值,所述第一預(yù)定時(shí)間段Ta由所述第一c1和第二c2預(yù)定纖維蛋白原濃度的即刻時(shí)間之間的差定義,所述第二預(yù)定時(shí)間段Tb由所述第二c2和第三c3預(yù)定纖維蛋白原濃度的即刻時(shí)間t2和t3之間的差定義,所述第三纖維蛋白原濃度量c3和所述的時(shí)間t3分別定義為一個(gè)最高加速點(diǎn)(MAP)和到達(dá)最高加速點(diǎn)的時(shí)間(TMA),而到達(dá)最高加速點(diǎn)(MAP)的時(shí)間(TMA)測(cè)量為從時(shí)間t1至t3經(jīng)歷的時(shí)間,它用作倍增數(shù)(TMA)/100,而且,第三量c3和所述的時(shí)間t3各有一個(gè)預(yù)定的范圍起自所述的最高加速點(diǎn)(MAP)之前,終于所述最高加速點(diǎn)(MAP)之后,其差由一個(gè)確定纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FRT)的總的范圍覆蓋;其中抗凝治療因子(ATF)由以下關(guān)系式表達(dá)ATF=(PT/FTR)*(TMA/100)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法,其中所述液體樣品是血漿。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的方法,其中注入樣品的凝血?jiǎng)┦菐в锈}離子的凝血激酶。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法,其中通過(guò)經(jīng)血漿樣品傳輸一光束,然后檢測(cè)穿過(guò)該血漿樣品的光的改變以得到產(chǎn)生的電信號(hào)的相應(yīng)改變,獲得模擬電壓信號(hào)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法,其中所述總范圍具有一個(gè)從約0.2秒到約10.0秒的值,使得所述預(yù)定的范圍是在最高加速點(diǎn)(MAP)的前和后具有從約0.1秒至約5.0秒的值。
6.一種確定抗凝治療因子(ATF)的設(shè)備,包括a)具有一個(gè)光源、一個(gè)試管、一個(gè)光電池、一個(gè)電池和一個(gè)可變電阻的裝置,全部用于得到振幅與含有纖維蛋白原的液體樣品光密度成比例的模擬電壓信號(hào);b)具有一個(gè)A/D轉(zhuǎn)換器和一個(gè)計(jì)算機(jī)的裝置,兩者協(xié)同用于把得到的模擬信號(hào)轉(zhuǎn)換成一系列數(shù)字電壓信號(hào)值并且加以記錄;c)用于把凝血?jiǎng)┳⑸溥M(jìn)液體樣品,從而在液體樣品的光密度中產(chǎn)生一個(gè)突然的改變的裝置,所述的突然的改變?cè)陔娔M信號(hào)的振幅中產(chǎn)生一個(gè)突然的改變,后者,又在所述的數(shù)字電壓信號(hào)的值中產(chǎn)生一個(gè)突然的改變,所述的數(shù)字電壓信號(hào)的值直接指示液體樣品中的纖維蛋白原濃度;d)用于記錄所述的數(shù)字電壓信號(hào)的所述值的突然改變的即刻時(shí)間t0的裝置;e)用于對(duì)第一預(yù)定纖維蛋白原濃度c1監(jiān)測(cè)所述電壓數(shù)字信號(hào)值的裝置;f)用于記錄即刻時(shí)間t1和所述的第一預(yù)定纖維蛋白原濃度c1的電壓數(shù)字信號(hào)值的裝置;g)用于記錄定義為凝血酶原時(shí)間(PT)的,t0和t1之間經(jīng)歷的時(shí)間的裝置;h)包括所述計(jì)算機(jī)的裝置,用于監(jiān)測(cè)所述電壓數(shù)字信號(hào)值以確定電壓數(shù)字信號(hào)值的差分改變,所述電壓數(shù)字信號(hào)值包括一個(gè)第二預(yù)定纖維蛋白原濃度c2,一個(gè)第三預(yù)定纖維蛋白原濃度c3,和一個(gè)第四預(yù)定纖維蛋白原濃度c4;所述第二預(yù)定纖維蛋白原濃度c2至少等于所述的第一預(yù)定纖維蛋白原濃度c1,所述第一c1和第二c2預(yù)定纖維蛋白原濃度量出現(xiàn)在第一預(yù)定時(shí)間段Ta內(nèi),所述第二c2和第三c3預(yù)定纖維蛋白原濃度量出現(xiàn)在第二預(yù)定時(shí)間段Tb內(nèi),所述第一c1和第四c4預(yù)定纖維蛋白原濃度出現(xiàn)在第三預(yù)定時(shí)間段Tc內(nèi);i)用于分別記錄相應(yīng)于時(shí)間t2、t3和t4的每個(gè)所述的第二c2,第三c3和第四c4預(yù)定纖維蛋白原濃度量的即刻時(shí)間和電壓數(shù)字信號(hào)值的裝置,所述第一預(yù)定時(shí)間段Ta由所述第一c1和第二c2預(yù)定纖維蛋白原濃度的即刻時(shí)間之間的差定義,所述第二預(yù)定時(shí)間段Tb由所述第二c2和第三c3預(yù)定纖維蛋白原濃度的即刻時(shí)間之間的差定義,所述第三預(yù)定纖維蛋白原濃度量c3和所述的時(shí)間t3分別定義為一個(gè)最高加速點(diǎn)(MAP)和到達(dá)最高加速點(diǎn)的時(shí)間(TMA),而到達(dá)最高加速點(diǎn)(MAP)的時(shí)間(TMA)測(cè)量為從時(shí)間t1至t3經(jīng)歷的時(shí)間,它用作倍增數(shù)(TMA)/100,而且第三量c3和所述的時(shí)間t3各有一個(gè)預(yù)定的范圍起自所述的最高加速點(diǎn)(MAP)之前,終于所述最高加速點(diǎn)(MAP)之后,其差由一個(gè)確定纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FRT)的總的范圍覆蓋,并且所述的預(yù)定時(shí)間段Tc由所述第一c1和第四c4預(yù)定纖維蛋白原濃度量的即刻時(shí)間之間的差定義;以及j)包括所述計(jì)算機(jī)的裝置,用于由纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FTR)去除凝血酶原時(shí)間(PT),把所得的商乘以到達(dá)最高加速的時(shí)間(TMA)/100,以其積是抗凝治療因子(ATF),由以下關(guān)系式表達(dá)ATF=(PT/FTR)*(TMA/100)。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的設(shè)備,其中所述液體樣品是血漿。
8.根據(jù)權(quán)利要求6的設(shè)備,其中注入樣品的凝血?jiǎng)┦菐в锈}離子的凝血激酶。
9.根據(jù)權(quán)利要求6的設(shè)備,其中通過(guò)經(jīng)血漿樣品傳輸一光束,然后檢測(cè)穿過(guò)血漿樣品的光的改變以得到產(chǎn)生的電信號(hào)的相應(yīng)改變,獲得模擬電壓信號(hào)。
10.根據(jù)權(quán)利要求6的設(shè)備,其中所述總范圍具有一個(gè)從約0.2秒到約10.0秒的值,使得所述預(yù)定的范圍具有在最高加速點(diǎn)(MAP)的前和后約從0.1秒至5.0秒的值。
11.一種確定校正的抗凝治療因子(CATF)的方法,包括步驟a)得到一系列的模擬電壓信號(hào),其電壓振幅與多個(gè)含纖維蛋白原的液體樣品的光密度成比例;b)把得到的模擬電壓信號(hào)轉(zhuǎn)換成一系列數(shù)字電壓值信號(hào);c)在所述多個(gè)液體樣品的每一個(gè)中注入凝血?jiǎng)?,從而在每個(gè)液體樣品的光密度中都產(chǎn)生一個(gè)相應(yīng)的突然的改變,所述的各個(gè)突然的改變?cè)谙鄳?yīng)的電模擬信號(hào)振幅中產(chǎn)生突然的改變,后者又在所述的各個(gè)相應(yīng)數(shù)字電壓信號(hào)的值中產(chǎn)生突然的改變,所述數(shù)字電壓信號(hào)的值直接指示所述多個(gè)液體樣品中的纖維蛋白原濃度;d)記錄所述數(shù)字電壓信號(hào)的各個(gè)所述值的相應(yīng)的突然改變的即刻時(shí)間t0;e)監(jiān)測(cè)各個(gè)第一預(yù)定纖維蛋白原濃度量c1的每個(gè)所述相應(yīng)的電壓數(shù)字信號(hào)值;f)記錄即刻時(shí)間t1以及每個(gè)所述相應(yīng)的第一預(yù)定纖維蛋白原濃度量c1的電壓數(shù)字信號(hào)的值;g)記錄t0和t1之間經(jīng)歷的時(shí)間,其定義為對(duì)于每個(gè)所述相應(yīng)的數(shù)字電壓信號(hào)的凝血酶原時(shí)間(PT);h)監(jiān)測(cè)每個(gè)所述相應(yīng)電壓數(shù)字信號(hào)值的差分改變,所述電壓數(shù)字信號(hào)值包括對(duì)每個(gè)所述相應(yīng)電壓數(shù)字信號(hào)值的一個(gè)第二預(yù)定纖維蛋白原濃度c2和一個(gè)第三預(yù)定纖維蛋白原濃度c3;第二預(yù)定纖維蛋白原濃度c2至少等于所述的第一預(yù)定纖維蛋白原濃度c1,每個(gè)所述第一c1和第二c2預(yù)定纖維蛋白原濃度量出現(xiàn)在第一預(yù)定時(shí)間段Ta內(nèi),所述第二c2和第三c3預(yù)定纖維蛋白原濃度量出現(xiàn)在第二預(yù)定時(shí)間段Tb內(nèi);及i)記錄相應(yīng)于每個(gè)所述相應(yīng)電壓數(shù)字信號(hào)值的時(shí)間t2和t3的第二c2和第三c3預(yù)定纖維蛋白原濃度量的即刻時(shí)間和電壓數(shù)字信號(hào)值,每個(gè)相應(yīng)的量的所述第一預(yù)定時(shí)間段Ta由每個(gè)所述相應(yīng)的第一c1和第二c2預(yù)定纖維蛋白原濃度的即刻時(shí)間之間的差定義,每個(gè)相應(yīng)的量的所述第二預(yù)定時(shí)間段Tb由各個(gè)所述相應(yīng)的第二c2和第三c3預(yù)定纖維蛋白原濃度的即刻時(shí)間t2和t3之間的時(shí)間差定義,每個(gè)相應(yīng)的量的所述第三c3預(yù)定纖維蛋白原濃度量和所述的時(shí)間t3分別定義為一個(gè)相應(yīng)的量的最高加速點(diǎn)(MAP)和到達(dá)最高加速點(diǎn)(MAP)的時(shí)間(TMA),而每個(gè)相應(yīng)的量到達(dá)最高加速點(diǎn)(MAP)的時(shí)間(TMA)測(cè)量為各個(gè)相應(yīng)的量從時(shí)間t1至t3經(jīng)歷的時(shí)間,它用作倍增數(shù)(TMA)/100,而且,每個(gè)相應(yīng)的量的各個(gè)第三量c3和所述的時(shí)間t3各有一個(gè)預(yù)定的范圍起自所述的最高加速點(diǎn)(MAP)之前,終于所述最高加速點(diǎn)(MAP)之后,其差確定各個(gè)相應(yīng)的量的纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FRT)的總的范圍覆蓋;其中對(duì)于所述多個(gè)液體樣品中的每個(gè)校正的抗凝治療因子(CATF)由以下關(guān)系式表達(dá)CATF=((PT)*(PR)/FTR)*(TMA/100)其中PR=PT/MNPT,而PR是各個(gè)液體樣品的凝血酶原比率,MNPT是由至少20名正常人得到的多個(gè)液體樣品的平均PT值。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的方法,其中所述多個(gè)為至少20。
13.根據(jù)權(quán)利要求11的方法,其中所述液體樣品是血漿。
14.根據(jù)權(quán)利要求11的方法,其中注入多個(gè)樣品的每個(gè)中的凝血?jiǎng)┦菐в锈}離子的凝血激酶。
15.根據(jù)權(quán)利要求11的方法,其中通過(guò)經(jīng)相應(yīng)的血漿樣品傳輸一光束,然后檢測(cè)穿過(guò)血漿樣品的光的改變以得到產(chǎn)生的電信號(hào)的相應(yīng)改變,獲得模擬電壓信號(hào)。
16.根據(jù)權(quán)利要求11的方法,其中所述總范圍是一個(gè)從約0.2秒到約10.0秒的值,從而所述預(yù)定的范圍是在最高加速點(diǎn)的前和后約從0.1秒至5.0秒的值。
17.一種確定校正的抗凝治療因子(CATF)的設(shè)備,包括a)具有一個(gè)光源、一個(gè)試管、一個(gè)光電池、一個(gè)電池和一個(gè)可變電阻的裝置,全部用于得到振幅與各含有纖維蛋白原的多個(gè)液體樣品的光密度成比例的模擬電壓信號(hào);b)具有一個(gè)A/D轉(zhuǎn)換器和一個(gè)計(jì)算機(jī)的裝置,兩者協(xié)同用于將得到的模擬信號(hào)轉(zhuǎn)換成一系列數(shù)字電壓信號(hào)值并且加以記錄;c)用于把凝血?jiǎng)┳⑸溥M(jìn)所述多個(gè)液體樣品的每個(gè)中,從而在每個(gè)液體樣品的光密度中各產(chǎn)生一個(gè)相應(yīng)的突然的改變的裝置,所述的相應(yīng)的突然的改變?cè)谙鄳?yīng)的電模擬信號(hào)的振幅中產(chǎn)生突然的改變,后者又在各個(gè)所述的相應(yīng)數(shù)字電壓信號(hào)的值中產(chǎn)生突然的改變,所述的數(shù)字電壓信號(hào)的值直接指示每個(gè)所述多個(gè)液體樣品中的纖維蛋白原濃度;d)用于記錄所述的數(shù)字電壓信號(hào)的所述值的每個(gè)所述相應(yīng)的突然改變的即刻時(shí)間t0的裝置;e)用于對(duì)第一預(yù)定纖維蛋白原濃度c1監(jiān)測(cè)每個(gè)所述相應(yīng)的電壓數(shù)字信號(hào)值的裝置;f)用于記錄即刻時(shí)間t1和每個(gè)所述的第一預(yù)定纖維蛋白原濃度c1的所述電壓數(shù)字信號(hào)值的裝置;g)用于記錄對(duì)每個(gè)所述相應(yīng)的數(shù)字電壓信號(hào)定義為一個(gè)凝血酶原時(shí)間(PT)的t0和t1之間經(jīng)歷的時(shí)間的裝置;h)包括所述計(jì)算機(jī)的裝置,用于監(jiān)測(cè)所述電壓數(shù)字信號(hào)以測(cè)定每個(gè)所述相應(yīng)的電壓數(shù)字信號(hào)值的差分改變,所述電壓數(shù)字信號(hào)值包括對(duì)于每個(gè)所述的相應(yīng)電壓數(shù)字信號(hào)值的一個(gè)第二預(yù)定纖維蛋白原濃度c2,一個(gè)第三預(yù)定纖維蛋白原濃度c3,和一個(gè)第四預(yù)定纖維蛋白原濃度c4;所述第二預(yù)定纖維蛋白原濃度c2至少等于所述相應(yīng)的第一預(yù)定纖維蛋白原濃度c1,各個(gè)所述的量的所述第一c1和第二c2預(yù)定纖維蛋白原濃度量出現(xiàn)在第一預(yù)定時(shí)間段Ta內(nèi),各個(gè)所述的量的所述第二c2和第三c3預(yù)定纖維蛋白原濃度量出現(xiàn)在第二預(yù)定時(shí)間段Tb內(nèi),而各個(gè)所述的量的所述第一c1和第四c4預(yù)定纖維蛋白原濃度量出現(xiàn)在第三預(yù)定時(shí)間段Tc內(nèi);i)用于分別記錄相應(yīng)于時(shí)間t2、t3和t4的每個(gè)所述的相應(yīng)的量的第二c2,第三c3和第四c4預(yù)定纖維蛋白原濃度量的即刻時(shí)間和電壓數(shù)字信號(hào)值的裝置,所述第一預(yù)定時(shí)間段Ta由每個(gè)所述的相應(yīng)的預(yù)定的纖維蛋白原濃度量的所述第一c1和第二c2的即刻時(shí)間之間的差定義,每個(gè)所述的相應(yīng)的量的所述第二預(yù)定時(shí)間段Tb由每個(gè)所述的相應(yīng)的預(yù)定的纖維蛋白原濃度量的所述第二c2和第三c3的即刻時(shí)間t2和t3之間的差定義,每個(gè)所述的相應(yīng)的量的所述第三預(yù)定纖維蛋白原濃度量c3和所述的時(shí)間t3定義為每個(gè)所述的相應(yīng)的量的一個(gè)最高加速點(diǎn)(MAP)和達(dá)到最高加速點(diǎn)的時(shí)間(TMA),而到達(dá)每個(gè)所述的相應(yīng)的量的最高加速點(diǎn)(MAP)的時(shí)間用(TMA)測(cè)量為從時(shí)間t1至t3經(jīng)歷的時(shí)間,它用作倍增數(shù)(TMA)/100,而且,每個(gè)所述的相應(yīng)的量的各個(gè)第三量c3和所述的時(shí)間t3各有一個(gè)預(yù)定的范圍起自所述的最高加速點(diǎn)(MAP)之前,終于所述最高加速點(diǎn)(MAP)之后,其差由一個(gè)確定纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率(FRT)的總的范圍覆蓋,并且所述的預(yù)定時(shí)間段Tc由每個(gè)所述的相應(yīng)的纖維蛋白原量的所述第一c1和第四c4預(yù)定纖維蛋白原濃度量的即刻時(shí)間之間的差定義;以及j)包括所述計(jì)算機(jī)的裝置,用于確定多個(gè)所述液體樣品的每個(gè)的PR=PT/MNPT,這里PR是多個(gè)所述液體樣品的每個(gè)凝血酶原比率,而MNPT是從多個(gè)所述液體樣品得到的平均PT值,并且用于確定多個(gè)所述液體樣品的每個(gè)的量(PT*PR/FTR)因此,對(duì)于多個(gè)液體樣品的每一個(gè),校正的抗凝治療因子(CATF)由以下關(guān)系式表達(dá)CATF=((PT)*(PR)/FTR)*(TMA/100)。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的設(shè)備,其中所述多個(gè)是至少20。
19.根據(jù)權(quán)利要求17的設(shè)備,其中所述液體樣品是血漿。
20.根據(jù)權(quán)利要求17的設(shè)備,其中注入多個(gè)樣品的每個(gè)中的凝血?jiǎng)┦菐в锈}離子的凝血激酶。
21.根據(jù)權(quán)利要求17的設(shè)備,其中通過(guò)經(jīng)所述多個(gè)樣品的每個(gè)的血漿樣品傳輸一光束,然后檢測(cè)經(jīng)血漿樣品穿過(guò)的光的改變以得到產(chǎn)生的電信號(hào)的相應(yīng)改變,獲得模擬電壓信號(hào)。
22.根據(jù)權(quán)利要求17的設(shè)備,其中所述總范圍是一個(gè)從約0.2秒到約10.0秒的值,從而所述預(yù)定的范圍是在最高加速點(diǎn)(MAP)的前和后約從0.1秒至5.0秒的值。
23.一種校準(zhǔn)抗凝治療的凝血激酶樣品并且確定各個(gè)所述的凝血激酶樣品的校正的抗凝治療因子(CATF)的方法,該方法包括步驟a)通過(guò)進(jìn)行權(quán)利要求1的步驟(a)-(i)確定所述的凝血激酶樣品的至少20個(gè)樣品的抗凝治療因子(AFT),然后選擇具有最低值的ATF;b)通過(guò)進(jìn)行權(quán)利要求1的步驟(a)-(i)從一組至少接受過(guò)六周口服抗凝血?jiǎng)┑幕颊咧写_定至少20個(gè)樣品的抗凝治療因子(AFT),然后選擇具有最高值的ATF;c)通過(guò)進(jìn)行權(quán)利要求11的步驟(a)-(i)確定每個(gè)所述的凝血激酶樣品的校正的抗凝治療因子(CAFT);和d)把權(quán)利要求23的步驟(c)與權(quán)利要求23的步驟(a)和(b)的最低值的ATF和最高值的ATF進(jìn)行比較。
全文摘要
公開(kāi)了一種確定抗凝治療因子(AFT)、校正的抗凝治療因子和改進(jìn)的抗凝治療因子的方法和裝置,它們都選擇性的用于監(jiān)測(cè)口服抗凝劑治療以有利于防止會(huì)在術(shù)中、術(shù)前或者術(shù)后出現(xiàn)的過(guò)度出血及有害的血液凝結(jié)??鼓委熞蜃?AFT)、校正的抗凝治療因子和改進(jìn)的抗凝治療因子是基于所揭示的測(cè)定纖維蛋白原轉(zhuǎn)化率的方法測(cè)定的,后者又取決于纖維蛋白轉(zhuǎn)化的最高加速點(diǎn)。
文檔編號(hào)G01N33/49GK1309770SQ98814178
公開(kāi)日2001年8月22日 申請(qǐng)日期1998年7月31日 優(yōu)先權(quán)日1998年7月31日
發(fā)明者華萊士·E·卡羅爾, R·戴維·杰克遜 申請(qǐng)人:華萊士·E·卡羅爾, R·戴維·杰克遜