雞蛋質(zhì)譜檢測特征序列組及檢測試劑盒的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明提供一種雞蛋的檢測方法，屬于食品檢測領(lǐng)域，具體地講，涉及用質(zhì)譜方法 來檢測雞蛋中特征序列組的技術(shù)。
【背景技術(shù)】
[0002] 食物過敏癥是越來越被重視的健康問題，雞蛋屬于八大食物過敏原之一。雞蛋誘 導(dǎo)的過敏性反應(yīng)有所不同，有的是輕微的局部反應(yīng)如口腔過敏綜合征，有的是嚴重的全身 過敏性反應(yīng)，有些甚至是致命和近乎致命的過敏反應(yīng)。由于美國和歐洲雞蛋消費量的不同， 導(dǎo)致對過敏原的感受度不同。在歐洲，雞蛋過敏十分普遍。歐盟在2007/68/EC中要求的14 種必須標注的過敏原中包含雞蛋，同樣加拿大的CODEX STAN118-1979中同樣對過敏原的標 注做出了明確的要求。為了滿足監(jiān)管的要求及過敏人群的需求，需要開發(fā)相應(yīng)的檢測方法。 目前雞蛋的檢測方法有酶聯(lián)免疫法，但是雞蛋過敏原和禪樹前纖維蛋白有交叉反應(yīng)的過敏 原，因此容易導(dǎo)致假陽性結(jié)果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題是提供用于質(zhì)譜檢測的雞蛋特征序列。
[0004] 本發(fā)明是通過W下技術(shù)方案實現(xiàn)的： 1. 雞蛋過敏原Ova化umin氨基酸序列 2. 特征序列的篩選；通過Pinpoint軟件針對雞蛋過敏原Ova化umin找到適合的氨基 酸序列作為檢測標簽。
[0005] 雞蛋過敏原Ova化umin氨基酸序列Uniprot:P01012。
[0006] 經(jīng)過篩選確認適合的雞蛋質(zhì)譜檢測標簽組為： 1. YPILPEYLQCVK 2. HIATNAVLFFGR 表1雞蛋過敏蛋白特征性膚段及SRM離子對
【主權(quán)項】
1. 一種雞蛋質(zhì)譜檢測特征序列組，其特征在于，其為用于通過質(zhì)譜法檢測雞蛋過敏原 的檢測標簽組，含有以下特征序列 ： 特征序列 I :YPILPEYLQCVK 特征序列 2 :HIATNAVLFFGR。
2. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的雞蛋質(zhì)譜檢測特征序列組，所述試樣可以是面包、蛋糕、冰激 淋、餅干含有雞蛋的加工產(chǎn)品。
3. 權(quán)利要求1至2中所述的質(zhì)譜檢測特征序列組需要用雞蛋成分檢測試劑盒處理試 樣，其特征在于包括： (1) 提取緩沖液 〇· 2M Tris-HCl pH8. 1 ?8. 3 ;和 (2) 胰酶IOng/μ 1，溶劑為50mM碳酸氫氨；和 (3) 質(zhì)譜檢測特征序列組的標肽。
4. 權(quán)利要求1至3中一種雞蛋的檢測方法，其中步驟包括：以試劑盒中的提取緩沖液 提取試樣中的蛋白質(zhì)，進行酶解，溶于溶解緩沖液，通過分離器分離肽段，在質(zhì)譜儀上進行 離子化及檢測，以峰面積及標簽濃度進行線性回歸處理，計算樣品中的雞蛋過敏原的有無 及濃度。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的雞蛋質(zhì)譜檢測特征序列組的檢測方法，其在所述步驟中，用 到的分離器可以是碳18柱，也可以是離子交換柱和碳18柱的串接或者離子交換柱和碳18 柱的二維一體柱。
6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的雞蛋質(zhì)譜檢測特征序列組的檢測器可以是三重四級桿，或復(fù) 合型電場軌道阱回旋共振質(zhì)譜，或串聯(lián)質(zhì)譜。
7. -種檢測結(jié)果的判斷方法，其特征在于，如果同時出現(xiàn)雞蛋質(zhì)譜檢測特征序列組的 陽性結(jié)果則試樣中含有雞蛋，如果出現(xiàn)雞蛋質(zhì)譜檢測特征序列組陰性結(jié)果則試樣中不含雞 蛋成分。
8. -種檢測結(jié)果的判斷方法，其特征在于，通過線性回歸的方法可以對試樣中的雞蛋 含量進行定量檢測。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種雞蛋質(zhì)譜特征序列組和檢測試劑盒，屬于食品檢驗領(lǐng)域。本發(fā)明為一種雞蛋質(zhì)譜檢測特征組，以及一種雞蛋過敏原檢測用試劑及雞蛋過敏原檢測方法。本發(fā)明靈敏度高、精確度好，適合于面包、雪糕等含有雞蛋的加工產(chǎn)品中雞蛋的檢測，以及雞蛋的真?zhèn)舞b別，便于在各檢測機構(gòu)推廣應(yīng)用。
【IPC分類】G01N27-62, G01N30-02
【公開號】CN104569124
【申請?zhí)枴緾N201410235231
【發(fā)明人】賀艷, 鄭文杰, 張裕君, 趙璟源, 張霞, 陳其勇, 趙衛(wèi)東, 許泓
【申請人】天津出入境檢驗檢疫局動植物與食品檢測中心
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2014年5月29日