一種藻類營養(yǎng)鹽中鐵離子濃度的測定方法
【技術(shù)領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種鐵離子的測定方法,特別涉及一種藻類營養(yǎng)鹽中鐵離子濃度的測 定方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 如今,藻類科研及生產(chǎn)規(guī)模日益壯大,工業(yè)生產(chǎn)及實驗室培養(yǎng)中,鐵元素一直是藻 類營養(yǎng)鹽中的關(guān)鍵營養(yǎng)成分。不同藻類對鐵元素的價位要求不同,有些藻類需要H價鐵,而 另一些需要亞鐵。常用的鐵元素營養(yǎng)鹽主要是巧樣酸與鐵的絡合物,即巧樣酸鐵或巧樣酸 亞鐵。巧樣酸鐵在配制及存放過程中部分被還原為巧樣酸亞鐵,巧樣酸亞鐵在配制及存放 過程中極易被氧化為巧樣酸鐵,兩者的膽存液都會形成巧樣酸鐵與巧樣酸亞鐵的混合物, 不同化學價位及不同濃度的鐵離子則影響了藻類的正常生長,如何正確的測量出藻類營養(yǎng) 鹽中的巧樣酸鐵及巧樣酸亞鐵的含量對藻類的培養(yǎng)至關(guān)重要。
[0003] 但是,人工養(yǎng)殖或?qū)嶒炇已芯恐?,藻類營養(yǎng)鹽中巧樣酸鐵與巧樣酸亞鐵的含量由 于配制試劑、配制方法及膽藏條件等因素產(chǎn)生了明顯差異。目前只有定量檢測鐵元素的方 法,但對于巧樣酸鐵與巧樣酸亞鐵的混合物,尚無定量檢測的方法,也沒有確定巧樣酸鐵與 巧樣酸亞鐵的比例的方法,給生產(chǎn)及科學研究造成了諸多不便。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種藻類營養(yǎng)鹽中鐵離子濃度的測定方法,該方法通過紫外 分光光度法實時、定量檢測巧樣酸鐵的含量,同時也能算出巧樣酸亞鐵的含量,簡單、快速、 準確率高、檢測范圍寬、檢測成本低。
[0005] 為了實現(xiàn)W上技術(shù)效果,本發(fā)明是通過如下步驟實現(xiàn):
[0006] -種藻類營養(yǎng)鹽中鐵離子濃度的測定方法,其步驟包括:
[0007] (1)配制;價鐵離子濃度為6X l〇-3mol/L的巧樣酸鐵標準液,冷卻至18-25C ;選 擇該H價鐵離子濃度偏離標準小,誤差小。
[000引 似將步驟(1)中的巧樣酸鐵標準液稀釋至不同濃度的稀釋液,利用光吸收酶標 儀測得巧樣酸鐵稀釋液在450nm處的吸光度平均值,W A450平均值為縱坐標,對應該吸光 度值的鐵離子濃度為橫坐標,繪制標準工作曲線;選擇在450nm處測吸光度值,繪制標準曲 線,否則標準曲線非線性。
[0009] (3)測定藻類營養(yǎng)鹽樣品在450nm處的吸光度值,根據(jù)步驟(1)中繪制的標準工 作曲線,計算樣品中的H價鐵離子濃度;選擇在450皿處測吸光度值,巧樣酸鐵的吸光值 在0. 1-0. 5之間,而巧樣酸亞鐵吸光值為0,能很好地區(qū)分巧樣酸鐵和巧樣酸亞鐵該兩種物 質(zhì)。
[0010] (4)藻類營養(yǎng)鹽膽存液樣品中的H價鐵離子的初始濃度減去步驟(2)中的實測H 價鐵離子濃度,為藻類營養(yǎng)鹽樣品中的二價鐵離子濃度。
[0011] 所述步驟(2)中,巧樣酸鐵稀釋液中的H價鐵離子濃度為0、0.6Xl(T3m〇i/L、 1. 2X l〇-3mol/L、2. 4X l〇-3mol/L、4. 8X l〇-3mol/L 及 6X l〇-3mol/L。
[0012] 所述藻類營養(yǎng)鹽樣品的成分為巧樣酸鐵和巧樣酸亞鐵的混合液。
[0013] 所述步驟(1)中,配好后的巧樣酸鐵標準液在空氣中暴露時間不超過3分鐘。避 免了巧樣酸鐵被還原。
[0014] 所述步驟(2)中,標準液稀釋時,采用的稀釋液為無氧蒸觸水。
[0015] 所述步驟(2)中,在稀釋標準液時混勻即可,不能產(chǎn)生氣泡,且環(huán)境操作溫度低于 25 C。避免了巧樣酸鐵被還原。
[001引所述步驟(3)中,藻類營養(yǎng)鹽樣品測定前,將樣品在4C下密封保存且不能混有氣 泡,樣品在空氣中暴露時間不超過3分鐘。
[0017] 所述藻類營養(yǎng)鹽樣品的成分為巧樣酸鐵。
[0018] 發(fā)明的有益效果是;1、本發(fā)明提供的藻類營養(yǎng)鹽中鐵離子濃度的測定方法可實時 定量檢測藻類營養(yǎng)鹽膽存液中巧樣酸鐵基巧樣酸亞鐵的含量,簡單、快速,準確率高、檢測 范圍寬。2、本測定方法由于中間過程少,無需添加其它試劑,樣品無需預處理,因而比國標 法更加接近實際值,測試成本低、時間短。3、本檢測方法可直接測定巧樣酸鐵,在微藻領域 使用,針對性強、靈敏度高,
[0019] 計算誤差時,由于國標法不能直接測定巧樣酸鐵含量,因而用國標法測定巧樣酸 亞鐵推算巧樣酸鐵含量,并與本方法直接測定的巧樣酸鐵做比較。
【附圖說明】
[0020] 圖1是實施例1中新制巧樣酸鐵與巧樣酸亞鐵光譜對比曲線。
[0021] 圖2是實施例1中巧樣酸鐵標準曲線圖。
[0022] 圖3是實施例3中,采用國標法檢測時的巧樣酸鐵標準曲線圖。
【具體實施方式】
[0023] 下面結(jié)合實施例,對本發(fā)明作進一步說明:
[0024] 實驗所用到的設備;紫外分析儀UV-1800。
[00巧]實驗所用到的試劑;一水巧樣酸(QftO, ?&0)、構(gòu)稼酸鐵饋(CeHwFeNOs)、硫酸亞鐵 (FeS化? 7&0)、無氧蒸觸水;
[0026] 國標法試劑;鹽酸輕胺(冊一畑2 ?肥1)、鄰二氮菲咕2&馬? &0)、Imol/L己酸軸 (C&COONa)、金屬鐵、鹽酸、蒸觸水。
[0027] 1、標準液的配制
[0028] 取巧樣酸0. 3g,構(gòu)稼酸鐵饋0. 3g,用煮沸的蒸觸水將巧樣酸和構(gòu)稼酸鐵饋溶解, 混合后定容至lOOmU冷卻至18-25°C,H價鐵離子終濃度為6Xl(r3m〇l/L的巧樣酸鐵標準 液。該巧樣酸鐵現(xiàn)配現(xiàn)用,配好后在空氣中暴露時間不超過3分鐘。
[0029] 取巧樣酸0. 3g,硫酸亞鐵(FeS〇4 ? 7&0) 0. 17g,用煮沸的蒸觸水先將巧樣酸 溶解,再將硫酸亞鐵溶解,混勻后定容至lOOmU冷卻至18-25°C,二價鐵離子終濃度為 6X l(T3mol/L的巧樣酸亞鐵標準液。
[0030] 2、標準工作曲線的繪制
[0031] 分別取3mL上述步驟配制的巧樣酸鐵標準液與巧樣酸亞鐵標準液,用紫外分光光 度計測定吸收光譜(190nm-750nm),發(fā)現(xiàn)在450nm處,巧樣酸鐵的吸光值在0. 1-0. 5之間,而 巧樣酸亞鐵吸光值為0,具體如圖1所示,所W選取A450為測定值。
[0032] 取6支1. 5mL的離也管,按照下表的加入比例,配制不同濃度的巧樣酸鐵溶液(單 位;y L)
[0033]
【主權(quán)項】
1. 一種藻類營養(yǎng)鹽中鐵離子濃度的測定方法,其步驟包括: (1) 配制三價鐵離子濃度為6Xl(T3m〇l/L的檸檬酸鐵標準液,冷卻至18-25°C ; (2) 將步驟(1)中的檸檬酸鐵標準液稀釋至不同濃度的稀釋液,利用光吸收酶標儀測 得檸檬酸鐵稀釋液在450nm處的吸光度平均值,以A450平均值為縱坐標,對應該吸光度值 的鐵離子濃度為橫坐標,繪制標準工作曲線; (3) 測定藻類營養(yǎng)鹽樣品在450nm處的吸光度值,根據(jù)步驟(1)中繪制的標準工作曲 線,計算樣品中的三價鐵離子濃度; (4) 藻類營養(yǎng)鹽貯存液樣品中的三價鐵離子的初始濃度減去步驟(2)中的實測三價鐵 離子濃度,為藻類營養(yǎng)鹽樣品中的二價鐵離子濃度。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藻類營養(yǎng)鹽中鐵離子濃度的測定方法,其特征在于:所述 步驟(2)中,檸檬酸鐵稀釋液中的三價鐵離子濃度為0、0.6XKT 3m〇l/L、1.2Xl(T3m〇l/L、 2. 4X l(T3mol/L、4. 8X l(T3mol/L 及 6X l(T3mol/L。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藻類營養(yǎng)鹽中鐵離子濃度的測定方法,其特征在于:所述藻 類營養(yǎng)鹽樣品的成分為檸檬酸鐵和檸檬酸亞鐵的混合液。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藻類營養(yǎng)鹽中鐵離子濃度的測定方法,其特征在于:所述步 驟(1)中,配好后的檸檬酸鐵標準液在空氣中暴露時間不超過3分鐘。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藻類營養(yǎng)鹽中鐵離子濃度的測定方法,其特征在于:所述步 驟(2)中,標準液稀釋時,采用的稀釋液為無氧蒸餾水。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藻類營養(yǎng)鹽中鐵離子濃度的測定方法,其特征在于:所述步 驟(2)中,在稀釋標準液時混勻即可,不能產(chǎn)生氣泡,且環(huán)境操作溫度低于25°C。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藻類營養(yǎng)鹽中鐵離子濃度的測定方法,其特征在于,所述步 驟(3)中,藻類營養(yǎng)鹽樣品測定前,將樣品在4°C下密封保存且不能混有氣泡,樣品在空氣 中暴露時間不超過3分鐘。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種鐵離子的測定方法,特別涉及一種藻類營養(yǎng)鹽中鐵離子濃度的測定方法,配制三價鐵離子濃度為6×10-3mol/L的檸檬酸鐵標準液;將標準液稀釋至不同濃度的稀釋液,利用紫外分光光度計測得稀釋液在450nm處的吸光度平均值,繪制標準曲線;測定樣品在450nm處的吸光度值,根據(jù)標準曲線,計算樣品中的三價鐵離子濃度;樣品中的三價鐵離子的初始濃度減去實測三價鐵離子濃度,為樣品中的二價鐵離子濃度。本測定方法可實時定量檢測藻類營養(yǎng)鹽貯存液中檸檬酸鐵及檸檬酸亞鐵的含量,簡單、快速,準確率高、檢測范圍寬,中間過程少,無需添加其它試劑,樣品無需預處理,因而測試成本低、時間短。
【IPC分類】G01N21-33, G01N21-31
【公開號】CN104596965
【申請?zhí)枴緾N201510056756
【發(fā)明人】孫溢華, 何培民, 施定基, 劉媛媛, 徐文婷, 賈睿, 賈曉惠
【申請人】上海海洋大學
【公開日】2015年5月6日
【申請日】2015年2月3日