一種左卡尼汀及其鹽類產(chǎn)品中右卡尼汀含量的高效液相檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥物分析領(lǐng)域中的一種左卡尼汀及其鹽類產(chǎn)品中右卡尼汀含量的高 效液相檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 左卡尼汀（Levocarnitine)，又名左旋肉堿，其化學(xué)名為（R)-3-羧基-2-羥基-N， N，N-三甲基-1-丙胺氫氧化物，內(nèi)鹽，是一種國際公認(rèn)安全無害的營養(yǎng)劑。其鹽類常用的有 左卡尼汀鹽酸鹽、左卡尼汀酒石酸鹽等。左卡尼汀是哺乳動(dòng)物能量代謝中必需的體內(nèi)天然 物質(zhì)，其主要功能是促進(jìn)脂類代謝。它既能將長(zhǎng)鏈脂肪酸帶進(jìn)線粒體基質(zhì)，并促進(jìn)其氧化分 解，為細(xì)胞提供能量，又能將線粒體內(nèi)產(chǎn)生的短鏈脂?；敵觥１酒返难a(bǔ)充可緩解因其體內(nèi) 缺乏引起的脂肪代謝紊亂、骨骼肌和心肌等組織的功能障礙。卡尼汀有一個(gè)手性中心，有兩 種光學(xué)異構(gòu)體，即左旋體和右旋體，具有生物活性為左旋體，即左卡尼汀，右旋體為右卡尼 汀。為保證本品的質(zhì)量及其安全性，需建立檢測(cè)方法對(duì)右卡尼汀的含量進(jìn)行控制。目前，關(guān) 于左卡尼汀及其鹽類中右卡尼汀的含量的高效液相檢測(cè)方法，為將本品衍生后，用C18柱 進(jìn)行色譜分離，檢測(cè)器為熒光檢測(cè)器，方法比較復(fù)雜且耗時(shí)長(zhǎng)。因此，研制開發(fā)一種簡(jiǎn)單、省 時(shí)、適于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)左卡尼汀及其鹽類產(chǎn)品中右卡尼汀含量的高效液相檢測(cè)方法一直是亟待 解決的新課題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于提供一種左卡尼汀及其鹽類產(chǎn)品中右卡尼汀含量的高效液相 檢測(cè)方法，該方法采用環(huán)糊精及其衍生物鍵合硅膠手性固定相作為色譜柱的填充劑分離左 卡尼汀、右卡尼汀及左卡尼汀雜質(zhì)A，用紫外檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。通過該方法檢測(cè)左卡尼汀及 其鹽類產(chǎn)品中右卡尼汀含量，右卡尼汀與左卡尼汀之間、左卡尼汀與左卡尼汀雜質(zhì)A之間 均能達(dá)良好分離，方法重復(fù)性、靈敏度、耐用性等均能符合要求，且操作簡(jiǎn)單、省時(shí)快速，適 用于左卡尼汀及其鹽類產(chǎn)品中右卡尼汀的含量控制。
[0004] 本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的：一種左卡尼汀及其鹽類產(chǎn)品中右卡尼汀含量的高效 液相檢測(cè)方法，該檢測(cè)方法包括如下步驟： (1) 色譜條件： 色譜柱：環(huán)糊精及其衍生物為填充劑的手性色譜柱； 檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器； 流動(dòng)相：由三乙胺-醋酸水溶液和乙腈配制的混合溶液； (2) 系統(tǒng)適用性溶液的制備： 精密稱取左卡尼汀對(duì)照品、右卡尼汀對(duì)照品、左卡尼汀雜質(zhì)A對(duì)照品各適量，加水溶解 并稀釋； (3) 供試品溶液及對(duì)照溶液的制備： 精密稱取樣品適量，加水溶解并稀釋，作為供試品溶液；精密量取供試品溶液適量，用 水稀釋，作為對(duì)照溶液； (4)測(cè)定方法： 取系統(tǒng)適用性溶液注入液相色譜儀，記錄圖譜，色譜峰按右卡尼汀、左卡尼汀、左卡尼 汀雜質(zhì)A次序依次流出，上述三種成分色譜峰之間分離度均應(yīng)大于1. 5 ;精密量取供試品溶 液與對(duì)照溶液，注入液相色譜儀，記錄圖譜，分別計(jì)算供試品液中右卡尼汀的峰面積和對(duì)照 溶液中左卡尼汀的峰面積， 右卡尼汀1
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種左卡尼汀及其鹽類產(chǎn)品中右卡尼汀含量的高效液相檢測(cè)方法，其特征在于：該 檢測(cè)方法包括如下步驟： (1) 色譜條件： 色譜柱：環(huán)糊精及其衍生物為填充劑的手性色譜柱； 檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器； 流動(dòng)相：由三乙胺-醋酸水溶液和乙腈配制的混合溶液； (2) 系統(tǒng)適用性溶液的制備： 精密稱取左卡尼汀對(duì)照品、右卡尼汀對(duì)照品、左卡尼汀雜質(zhì)A對(duì)照品各適量，加水溶解 并稀釋； (3) 供試品溶液及對(duì)照溶液的制備： 精密稱取樣品適量，加水溶解并稀釋，作為供試品溶液；精密量取供試品溶液適量，用 水稀釋，作為對(duì)照溶液； (4) 測(cè)定方法： 取系統(tǒng)適用性溶液注入液相色譜儀，記錄圖譜，色譜峰按右卡尼汀、左卡尼汀、左卡尼 汀雜質(zhì)A次序依次流出，上述三種成分色譜峰之間分離度均應(yīng)大于1. 5 ;精密量取供試品溶 液與對(duì)照溶液，注入液相色譜儀，記錄圖譜，分別計(jì)算供試品液中右卡尼汀的峰面積和對(duì)照 溶液中左卡尼汀的峰面積， 右卡尼打
X0.5% 其中：=供試品溶液中右卡尼汀的峰面積； A左卡尼汀=對(duì)照溶液中左卡尼汀的峰面積。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種左卡尼汀及其鹽類產(chǎn)品中右卡尼汀含量的高效液相檢 測(cè)方法，其特征在于：所述色譜柱的填充劑選自環(huán)糊精鍵合硅膠、環(huán)糊精衍生物鍵 合硅膠，所述環(huán)糊精衍生物鍵合硅膠選自乙?；沫h(huán)糊精鍵合硅膠、二甲基化的 3 -環(huán)糊精鍵合硅膠、3, 5-二甲基苯基氨基甲酸酯衍生化的的0 -環(huán)糊精鍵合硅膠、2,6-二 硝基-4-三氟甲基苯甲醚衍生化的的環(huán)糊精鍵合硅膠、（S)-羥丙基醚衍生化的的 3 -環(huán)糊精鍵合硅膠、（R，S)-羥丙基醚衍生化的的0 -環(huán)糊精鍵合硅膠、高效（R，S)-羥丙 基醚衍生化的的環(huán)糊精鍵合硅膠。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種左卡尼汀及其鹽類產(chǎn)品中右卡尼汀含量的高效液相檢 測(cè)方法，其特征在于：所述填充劑的粒徑為3. 5-10ym。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種左卡尼汀及其鹽類產(chǎn)品中右卡尼汀含量的高效液相檢 測(cè)方法，其特征在于：所述三乙胺-醋酸水溶液中三乙胺的體積濃度為〇. 05-0.6%，pH為 4. 0-6. 5 ;所述三乙胺-醋酸水溶液的配制方法為量取三乙胺試劑，加水稀釋制成體積濃度 為0. 05-0.6%的溶液，用醋酸水溶液調(diào)節(jié)pH為4. 0-6. 5。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種左卡尼汀及其鹽類產(chǎn)品中右卡尼汀含量的高效液相檢 測(cè)方法，其特征在于：所述流動(dòng)相中三乙胺-醋酸水溶液與乙腈的體積比為15-35: 85-65。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種左卡尼汀及其鹽類產(chǎn)品中右卡尼汀含量的高效液相檢 測(cè)方法，其特征在于：所述流動(dòng)相的流速為〇.8-1.2ml/分鐘，所述系統(tǒng)適用性溶液、供試品 溶液、對(duì)照溶液的進(jìn)樣量為10-100y1，所述紫外檢測(cè)器的檢測(cè)波長(zhǎng)為205nm，所述色譜柱 的柱溫為10-30°C。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種左卡尼汀及其鹽類產(chǎn)品中右卡尼汀含量的高效液相檢 測(cè)方法，其特征在于：所述鹽類選自鹽酸鹽、酒石酸鹽、富馬酸鹽，所述左卡尼汀及其鹽類 產(chǎn)品選自左卡尼汀及其鹽類原料藥、左卡尼汀及其鹽類藥物組合物，所述藥物組合物選自 口服劑型、注射劑型，所述口服劑型選自片劑、膠囊劑、口服溶液劑，所述注射劑型選自注射 液、注射用無菌粉末。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種左卡尼汀及其鹽類產(chǎn)品中右卡尼汀含量的高效液相 檢測(cè)方法，其特征在于：所述系統(tǒng)適用性溶液詳細(xì)制備方法為精密稱取左卡尼汀對(duì)照品約 200mg，右卡尼汀對(duì)照品約2mg，置同一10ml容量瓶中；另取左卡尼汀雜質(zhì)A對(duì)照品約2mg， 精密稱定，置200ml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，作為左卡尼汀雜質(zhì)A對(duì)照品溶液；精 密量取左卡尼汀雜質(zhì)A對(duì)照品溶液1.0ml置上述10ml容量瓶中，加水超聲溶解并稀釋至刻 度。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種左卡尼汀及其鹽類產(chǎn)品中右卡尼汀含量 的高效液相檢測(cè)方法，其特征在于：所述左卡尼汀雜質(zhì)A的英文化學(xué)名稱為 (E)-or(Z)-4-(trimethylammonio)but-2-enoate〇
【專利摘要】一種應(yīng)用于藥物檢測(cè)領(lǐng)域中的一種左卡尼汀及其鹽類產(chǎn)品中右卡尼汀含量的高效液相檢測(cè)方法，該方法采用手性固定相高效液相色譜法,手性固定相選用環(huán)糊精及其衍生物鍵合硅膠填料，使得左卡尼汀、右卡尼汀、左卡尼汀雜質(zhì)A三種成分的分離效果好、方法重復(fù)性及耐用性好；流動(dòng)相選用三乙胺-醋酸水溶液與乙腈體系,該流動(dòng)相對(duì)手性色譜柱基本無損傷，色譜峰保留時(shí)間重復(fù)性好，峰型對(duì)稱。
【IPC分類】G01N30-02
【公開號(hào)】CN104698101
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510111998
【發(fā)明人】王虹, 王潔, 黃文姝, 劉心, 董愛軍, 岳靜, 劉佳
【申請(qǐng)人】東北制藥集團(tuán)股份有限公司
【公開日】2015年6月10日
【申請(qǐng)日】2015年3月16日