糖尿病腎病早期篩查試劑盒、生物標(biāo)志物檢測(cè)方法及應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物檢測(cè)領(lǐng)域，尤其是涉及一種糖尿病腎病早期篩查試劑盒、生物標(biāo) 志物檢測(cè)方法及應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 糖尿病腎病是糖尿病最嚴(yán)重的慢性微血管并發(fā)癥之一，并最終引起終末腎衰竭， 是糖尿病患者死亡的主要原因。據(jù)世界衛(wèi)生組織2013年統(tǒng)計(jì)，全世界約有3. 47億人患有 糖尿病，其中超過80%的糖尿病死亡病例發(fā)生在發(fā)展中國家。同時(shí)，世界衛(wèi)生組織預(yù)測(cè)到 2030年，全球因糖尿病死亡的人數(shù)將翻一番，其中30%~40%的2型糖尿病人將發(fā)展為糖 尿病腎病，20%~40%的1型糖尿病患者在15~30年后也將發(fā)展為糖尿病腎病，造成了巨 大且沉重的社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。
[0003] 然而，糖尿病腎病早期很難發(fā)現(xiàn)，且臨床糖尿病腎病診斷黃金標(biāo)準(zhǔn)肌酐和蛋白尿 也只能間接反映腎臟實(shí)質(zhì)性病變（腎小球系膜細(xì)胞擴(kuò)增、基底膜加厚、足細(xì)胞損傷、腎小管 上皮細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞損傷等），無法診斷早期糖尿病腎?。ㄕ５鞍啄蚱?，見下表1)。
[0004] 表1 :糖尿病腎病臨床分期（基于Mogensen分期法）
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種糖尿病腎病早期篩查試劑盒，其特征在于，包括檢測(cè)試劑和捕獲試劑； 所述檢測(cè)試劑包括第一檢測(cè)試劑、第二檢測(cè)試劑、第三檢測(cè)試劑和第四檢測(cè)試劑，所述 第一檢測(cè)試劑的溶質(zhì)為第一足糖萼蛋白抗體，所述第二檢測(cè)試劑的溶質(zhì)為第一IV型膠原蛋 白抗體，所述第三檢測(cè)試劑的溶質(zhì)為第一肝型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體，所述第四檢測(cè)試劑的 溶質(zhì)為第一中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白抗體； 所述捕獲試劑的溶質(zhì)包括結(jié)合了第一可檢測(cè)標(biāo)記成分的第二足糖萼蛋白抗體、結(jié)合了 第二可檢測(cè)標(biāo)記成分的第二IV型膠原蛋白抗體、結(jié)合了第三可檢測(cè)標(biāo)記成分的第二肝型脂 肪酸結(jié)合蛋白抗體和結(jié)合了第四可檢測(cè)標(biāo)記成分的第二中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載 蛋白抗體。
2. 如權(quán)利要求1所述的糖尿病腎病早期篩查試劑盒，其特征在于，所述糖尿病腎病早 期篩查試劑盒還包括足糖萼蛋白標(biāo)準(zhǔn)品、IV型膠原蛋白標(biāo)準(zhǔn)品、肝型脂肪酸結(jié)合蛋白標(biāo)準(zhǔn) 品和中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白標(biāo)準(zhǔn)品。
3. 如權(quán)利要求1所述的糖尿病腎病早期篩查試劑盒，其特征在于，所述第一足糖萼蛋 白抗體為單克隆抗體，所述第二足糖萼蛋白抗體為多單克隆抗體； 所述第一IV型膠原蛋白抗體為單克隆抗體，所述第二IV型膠原蛋白抗體為多克隆抗 體； 所述第一肝型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體為單克隆抗體，所述第二肝型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 為多克隆抗體； 所述第一中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白抗體為單克隆抗體，所述第二中性粒細(xì) 胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白抗體為多克隆抗體。
4. 如權(quán)利要求1所述的糖尿病腎病早期篩查試劑盒，其特征在于，所述第一可檢測(cè)標(biāo) 記成分為酶、輔基、熒光物質(zhì)、發(fā)光物質(zhì)、生物發(fā)光物質(zhì)或放射活性物質(zhì)； 所述第二可檢測(cè)標(biāo)記成分為酶、輔基、熒光物質(zhì)、發(fā)光物質(zhì)、生物發(fā)光物質(zhì)或放射活性 物質(zhì)； 所述第三可檢測(cè)標(biāo)記成分為酶、輔基、熒光物質(zhì)、發(fā)光物質(zhì)、生物發(fā)光物質(zhì)或放射活性 物質(zhì)； 所述第四可檢測(cè)標(biāo)記成分為酶、輔基、熒光物質(zhì)、發(fā)光物質(zhì)、生物發(fā)光物質(zhì)或放射活性 物質(zhì)。
5. -種生物標(biāo)志物檢測(cè)方法，采用如權(quán)利要求1~4中任一項(xiàng)所述的糖尿病腎病早期 篩查試劑盒，其特征在于，包括如下步驟： 提供設(shè)有檢測(cè)位點(diǎn)的基板，將檢測(cè)試劑滴加在檢測(cè)位點(diǎn)上，充分反應(yīng)后將所述檢測(cè)位 點(diǎn)洗絳干凈； 將洗滌干凈后的所述檢測(cè)位點(diǎn)封閉，封閉完成后將所述檢測(cè)位點(diǎn)洗滌干凈； 將待檢測(cè)樣本滴加在封閉完成并洗滌干凈的所述檢測(cè)位點(diǎn)上，充分反應(yīng)后將所述檢測(cè) 位點(diǎn)洗絳干凈； 將捕獲試劑滴加在所述檢測(cè)位點(diǎn)上，充分反應(yīng)后將所述檢測(cè)位點(diǎn)洗滌干凈；以及 檢測(cè)所述檢測(cè)位點(diǎn)是否含有所述第一可檢測(cè)標(biāo)記成分、所述第二可檢測(cè)標(biāo)記成分、所 述第三可檢測(cè)標(biāo)記成分和所述第四可檢測(cè)標(biāo)記成分，并且根據(jù)檢測(cè)結(jié)果得到所述待檢測(cè)樣 本中足糖萼蛋白、IV型膠原蛋白、肝型脂肪酸結(jié)合蛋白和中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載 蛋白的含量。
6. 如權(quán)利要求5所述的生物標(biāo)志物檢測(cè)方法，其特征在于，還包括如下步驟：將得到的 所述待檢測(cè)樣本中的足糖萼蛋白、IV型膠原蛋白、肝型脂肪酸結(jié)合蛋白和中性粒細(xì)胞明膠 酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白的含量與截?cái)嘀颠M(jìn)行對(duì)比，當(dāng)所述待檢測(cè)樣本中的足糖萼蛋白、IV型 膠原蛋白、肝型脂肪酸結(jié)合蛋白和中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白的含量均在截?cái)嘀?以上時(shí)判定為陽性，此外則判定為陰性。
7. 如權(quán)利要求5所述的生物標(biāo)志物檢測(cè)方法，其特征在于，還包括如下步驟：將得到的 所述待檢測(cè)樣本中的足糖萼蛋白、IV型膠原蛋白、肝型脂肪酸結(jié)合蛋白和中性粒細(xì)胞明膠 酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白的含量與截?cái)嘀颠M(jìn)行對(duì)比，當(dāng)所述待檢測(cè)樣本中的足糖萼蛋白、IV型 膠原蛋白、肝型脂肪酸結(jié)合蛋白和中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白的含量至少有一個(gè) 在截?cái)嘀狄陨蠒r(shí)判定為陽性，此外則判定為陰性。
8. 如權(quán)利要求5所述的生物標(biāo)志物檢測(cè)方法，其特征在于，所述待檢測(cè)樣本包括治療 前樣本和治療后樣本； 將得到的治療前樣本中足糖萼蛋白、IV型膠原蛋白、肝型脂肪酸結(jié)合蛋白和中性粒細(xì) 胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白的含量與治療后樣本中的足糖萼蛋白抗體、IV型膠原蛋白、肝 型脂肪酸結(jié)合蛋白和中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白的含量進(jìn)行對(duì)比，根據(jù)比對(duì)結(jié)果 評(píng)估治療方法的有效性。
9. 如權(quán)利要求5所述的生物標(biāo)志物檢測(cè)方法，其特征在于，所述待檢測(cè)樣本為尿液樣 本。
10. 足糖萼蛋白、IV型膠原蛋白、肝型脂肪酸結(jié)合蛋白和中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn) 載蛋白作為生物標(biāo)志物在制備腎損傷診斷試劑或腎損傷診斷裝置中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種糖尿病腎病早期篩查試劑盒，包括檢測(cè)試劑；所述檢測(cè)試劑包括第一檢測(cè)試劑、第二檢測(cè)試劑、第三檢測(cè)試劑和第四檢測(cè)試劑；所述第一檢測(cè)試劑的溶質(zhì)為第一足糖萼蛋白抗體，所述第二檢測(cè)試劑的溶質(zhì)為第一Ⅳ型膠原蛋白抗體，所述第三檢測(cè)試劑的溶質(zhì)為第一肝型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體，所述第四檢測(cè)試劑的溶質(zhì)為第一中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白抗體。這種糖尿病腎病早期篩查試劑盒通過足糖萼蛋白、Ⅳ型膠原蛋白、肝型脂肪酸結(jié)合蛋白和中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白作為生物標(biāo)志物，可以根據(jù)實(shí)際檢測(cè)結(jié)果，為腎損傷提供輔助判斷，從而為區(qū)分早期糖尿病腎病提供輔助。
【IPC分類】G01N33-68
【公開號(hào)】CN104764885
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510130214
【發(fā)明人】張貫京, 張俊然, 谷東風(fēng), 克里斯基捏·普拉紐克, 艾琳娜·古列莎, 波達(dá)別特·伊萬, 劉遙峰, 盧卡·穆桑特, 楊軼, 石江波, 朱孔林
【申請(qǐng)人】深圳市貝沃德克生物技術(shù)研究院有限公司, 深圳市易特科信息技術(shù)有限公司, 深圳市前海安測(cè)信息技術(shù)有限公司
【公開日】2015年7月8日
【申請(qǐng)日】2015年3月24日