一種食用香精香料中萜烯醇酯類(lèi)化合物的檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及食品添加劑檢測(cè)領(lǐng)域，尤其涉及一種食用香精香料中萜烯醇酯類(lèi)化合 物的檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 現(xiàn)代食品工業(yè)為了追求利益最大化，需要添加相應(yīng)的香精來(lái)強(qiáng)化或改善其產(chǎn)品的 香味，誘導(dǎo)消費(fèi)，擴(kuò)大銷(xiāo)售。食用香精是指由食品用香料和（或）食品用熱加工香味料與食 品用香精輔料組成的用來(lái)起香味作用的濃縮調(diào)配混合物。食用香精可以起到調(diào)香作用，模 仿天然瓜果、食品的香和味，強(qiáng)化食品的香氣和味覺(jué)的仿真性，是食品添加劑的一種，廣泛 應(yīng)用在食品中。目前國(guó)家食品工業(yè)可以使用的食品香料、香精有上千種之多。盡管按照標(biāo) 準(zhǔn)規(guī)定的用量使用，食用香精一般不會(huì)危害人體健康，但近年發(fā)現(xiàn)，某些天然香料中含有的 黃樟素對(duì)健康有害。并且，目前食品行業(yè)對(duì)產(chǎn)品中所含添加劑進(jìn)行標(biāo)注時(shí)往往僅簡(jiǎn)單標(biāo)注 "食用香精"，而不標(biāo)注具體成分和含量，這不僅客觀不能約束生產(chǎn)企業(yè)不規(guī)范使用食用香 精，且給質(zhì)量檢測(cè)部門(mén)在對(duì)產(chǎn)品成分進(jìn)行檢測(cè)時(shí)造成了困擾。
[0003] 目前，我國(guó)食品領(lǐng)域，包括純?nèi)橹破贰⒋竺?、蜂蜜等在?nèi)的25類(lèi)商品明令禁止含有 香精。而是否添加了香精、添加了哪些種類(lèi)的香精、添加香精的量是影響食品品質(zhì)的重要因 素。但是，由于食用香精是種混合物，其中既有植物中提取的成分，也有很多化學(xué)合成成分， 成分越復(fù)雜檢測(cè)起來(lái)難度越大。
[0004] 萜烯類(lèi)化合物及其衍生物是香精香料的重要成分。例如：香葉醇和橙花醇是無(wú)環(huán) 單萜烯醇類(lèi)化合物，具有溫和而甜的玫瑰花香，留香較長(zhǎng)，是玫瑰系香精的主劑，廣泛應(yīng)用 于食用香精、日化香精、煙草、藥物等領(lǐng)域，入藥用于抗菌和驅(qū)蟲(chóng)；臨床表現(xiàn)為：有治療慢性 支氣管炎、改善肺通氣功能和降低氣道阻力等作用。香葉醇、橙花醇以及衍生物是非常有 價(jià)值的天然產(chǎn)物，因此其酯類(lèi)化合物是相關(guān)香料的重要成分，具有香檸檬、薰衣草樣持久香 氣，使人心曠神怡、清新舒暢，是制備高級(jí)香精不可缺少的香料，在日化、煙草、食品工業(yè) 中占有十分重要的地位。廣泛用于配制食品香精、香水香精、化妝品香精、皂用香精等，其用 途非常廣泛。隨著日用化妝品及其它香精產(chǎn)品需求量的日益遞增。其他常見(jiàn)的萜烯類(lèi)化合 物及其衍生物還有異丁酸橙花酯、異丁酸香葉酯、2-甲基丁酸橙花酯、異戊酸橙花酯、2-甲 基丁酸香葉酯、異戊酸香葉酯、反-2-己烯酸香葉酯、糠酸橙花酯、糠酸香葉酯、苯甲酸橙花 酯、苯甲酸香葉酯、肉桂酸橙花酯、肉桂酸香葉酯、肉豆蔻酸橙花酯、肉豆蔻酸香葉酯等。
[0005] 但是，由于食用香精香料中的成分比較復(fù)雜，目前國(guó)內(nèi)外有關(guān)萜烯醇酯尚無(wú)檢測(cè) 標(biāo)準(zhǔn)，也缺乏相關(guān)研宄及檢測(cè)方法。而由于市場(chǎng)對(duì)萜烯醇酯的需求正逐步增加，開(kāi)發(fā)萜烯醇 酯的檢測(cè)方法具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和社會(huì)效益。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題在于提供一種食用香精香料中萜烯醇酯類(lèi)化 合物的檢測(cè)方法。該方法檢測(cè)限低、準(zhǔn)確度高，重復(fù)性好。能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)香精香料中常見(jiàn)的萜 烯醇酯類(lèi)化合物的快速準(zhǔn)確檢測(cè)。
[0007] 本發(fā)明提供的食用香精香料中萜烯醇酯類(lèi)化合物的檢測(cè)方法，包括以下步驟：
[0008] 步驟1 :以二氯甲烷萃取含有內(nèi)標(biāo)的食用香精香料，制得樣品溶液；以二氯甲烷稀 釋萜烯醇酯類(lèi)化合物標(biāo)準(zhǔn)品后與內(nèi)標(biāo)混合，制得標(biāo)準(zhǔn)工作液；以二氯甲烷為空白溶液；
[0009] 步驟2 :將所述樣品溶液、標(biāo)準(zhǔn)工作液、空白溶液經(jīng)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)，建立 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，獲得食用香精香料中萜烯醇酯類(lèi)化合物的種類(lèi)及含量；
[0010] 所述氣相色譜柱為Elite-35MS毛細(xì)管色譜柱。
[0011] 本發(fā)明提供的食用香精香料中萜烯醇酯類(lèi)化合物的檢測(cè)方法是通過(guò)氣相色譜法 進(jìn)行的。利用氣相色譜（GC)對(duì)小分子溶劑進(jìn)行定量檢測(cè)是目前常用的檢測(cè)方法，在面對(duì)需 要對(duì)食用香精香料中萜烯醇酯類(lèi)化合物進(jìn)行定量、定性分析時(shí)，采用氣相色譜是一種快速 有效的方式。但是，現(xiàn)有技術(shù)中，關(guān)于萜烯醇酯類(lèi)化合物的檢測(cè)方法研宄較少，尚未有方法 能夠同時(shí)對(duì)樣品中的多種萜烯醇酯類(lèi)化合物進(jìn)行鑒定。而通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，本發(fā)明提供的方 法目標(biāo)化合物及內(nèi)標(biāo)色譜峰都分離度較好，且均具有較好的線(xiàn)性相關(guān)性，檢出限在I. 95mg/ kg~4. 01mg/kg之間。并且，本發(fā)明方法的加標(biāo)回收率在83. 43%~113. 84%之間，相對(duì)標(biāo) 準(zhǔn)偏差（RSD)均小于5%，說(shuō)明本發(fā)明方法的回收率高，重復(fù)性好。
[0012] 色譜柱的填料、規(guī)格很大程度上的影響檢測(cè)的效果。增加柱長(zhǎng)可使理論塔板數(shù)增 大，但同時(shí)使峰寬加大，分析時(shí)間延長(zhǎng)。因此，填充柱的柱長(zhǎng)要選擇適當(dāng)。一般情況下，柱長(zhǎng) 選擇以使組分能完全分離，分離度達(dá)到所期望的值為準(zhǔn)。本發(fā)明本發(fā)明比較了 Elite-35MS、 Elite-17MS和HP-INN0WAX色譜柱，對(duì)香精香料中萜烯醇酯類(lèi)化合物的分離效果，結(jié)果表 明，Elite-35MS毛細(xì)管色譜柱的峰型和分離效果最好。且本發(fā)明實(shí)驗(yàn)表明，色譜柱的長(zhǎng)度 影響樣品的分離度，柱子越長(zhǎng)分離度越高。信噪比越高。
[0013] 本發(fā)明采用的氣相色譜柱為Elite_35MS毛細(xì)管色譜柱，固定相成分為35%苯基 /65 %甲基聚硅氧烷，為中等極性色譜柱，規(guī)格為60mXO. 25mmX0. 25 μ m。
[0014] 本發(fā)明所述標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的橫縱坐標(biāo)分別為：萜烯醇酯類(lèi)化合物色譜峰面積與內(nèi)標(biāo)色 譜峰面積的比值；萜烯醇酯類(lèi)化合物濃度與內(nèi)標(biāo)濃度的比值。
[0015] 在本發(fā)明的實(shí)施例中，萜烯醇酯類(lèi)化合物為異丁酸橙花酯、異丁酸香葉酯、2-甲基 丁酸橙花酯、異戊酸橙花酯、2-甲基丁酸香葉酯、異戊酸香葉酯、反-2-己烯酸香葉酯、糠酸 橙花酯、糠酸香葉酯、苯甲酸橙花酯、苯甲酸香葉酯、肉桂酸橙花酯、肉桂酸香葉酯、肉豆蔻 酸橙花酯或肉豆蔻酸香葉酯中任一種或兩者以上的組合。
[0016] 采用本發(fā)明提供的方法能夠同時(shí)鑒定出樣品中的15種萜烯醇酯類(lèi)化合物。其中 各化合物定量和定性選擇離子如表1所示：
[0017] 表1萜烯醇酯類(lèi)化合物定量和定性選擇離子表
[0018]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種食用香精香料中萜烯醇酯類(lèi)化合物的檢測(cè)方法，其特征在于，包括以下步驟： 步驟1:以二氯甲烷萃取含有內(nèi)標(biāo)的食用香精香料，制得樣品溶液；以二氯甲烷稀釋萜 烯醇酯類(lèi)化合物標(biāo)準(zhǔn)品后與內(nèi)標(biāo)混合，制得標(biāo)準(zhǔn)工作液；以二氯甲烷為空白溶液； 步驟2 :將所述樣品溶液、標(biāo)準(zhǔn)工作液、空白溶液經(jīng)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)，建立標(biāo)準(zhǔn) 曲線(xiàn)，獲得食用香精香料中萜烯醇酯類(lèi)化合物的種類(lèi)及含量； 所述氣相色譜柱為Elite-35MS毛細(xì)管色譜柱； 所述標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的橫縱坐標(biāo)分別為：萜烯醇酯類(lèi)化合物色譜峰面積與內(nèi)標(biāo)色譜峰面積的 比值；萜烯醇酯類(lèi)化合物濃度與內(nèi)標(biāo)濃度的比值。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述萜烯醇酯類(lèi)化合物為異丁酸橙花 酯、異丁酸香葉酯、2-甲基丁酸橙花酯、異戊酸橙花酯、2-甲基丁酸香葉酯、異戊酸香葉酯、 反-2-己烯酸香葉酯、糠酸橙花酯、糠酸香葉酯、苯甲酸橙花酯、苯甲酸香葉酯、肉桂酸橙花 酯、肉桂酸香葉酯、肉豆蔻酸橙花酯或肉豆蔻酸香葉酯中任一種或兩者以上的組合。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用，色譜的升溫程 序?yàn)椋撼跏紲囟?0°C，以5°C/min升溫至260°C，保持lOmin。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的進(jìn)樣口溫度為 280°C;不分流進(jìn)樣；流速1.OmL/min。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用，質(zhì)譜采用選擇 離子掃描模式分段掃描。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用，質(zhì)譜輸線(xiàn)溫度 260°C;離子源溫度200°C;溶劑延遲8min。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述內(nèi)標(biāo)為3-苯丙酸乙酯。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述萃取的條件為25°C超聲萃取30min。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述標(biāo)準(zhǔn)工作液中內(nèi)標(biāo)的濃度為50yg/ mL;貓稀醇醋類(lèi)化合物的濃度為 2yg/mL、4yg/mL、10yg/mL、20yg/mL或 40yg/mL。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1~9任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述食用香精香料中萜烯醇 酯類(lèi)化合物的含量計(jì)算公式為：
式中： X為食用香精香料中萜烯醇酯類(lèi)化合物的含量； C為由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)得到的食用香精香料中萜烯醇酯濃度； Q為由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)得到的空白溶液中萜烯醇酯濃度； V為二氯甲烷的體積； M為試樣的質(zhì)量。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及食品添加劑檢測(cè)領(lǐng)域，尤其涉及一種食用香精香料中萜烯醇酯類(lèi)化合物的檢測(cè)方法。本發(fā)明提供的食用香精香料中萜烯醇酯類(lèi)化合物的檢測(cè)方法是通過(guò)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的方法法進(jìn)行的。通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，本發(fā)明提供的方法對(duì)目標(biāo)化合物及內(nèi)標(biāo)色譜峰都分離度較好，且均具有較好的線(xiàn)性相關(guān)性。本發(fā)明提供的方法能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)15種萜烯醇酯類(lèi)化合物的同時(shí)定量、定性檢測(cè)。檢出限在1.95mg/kg～4.01mg/kg之間。并且，本發(fā)明方法的加標(biāo)回收率在83.43％～113.84％之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均小于5％，說(shuō)明本發(fā)明方法的回收率高，重復(fù)性好。
【IPC分類(lèi)】G01N30-88
【公開(kāi)號(hào)】CN104807941
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510242687
【發(fā)明人】李寶志, 黃飛, 佟亞楠, 劉金霞, 王超, 臧婉辰, 李河霖
【申請(qǐng)人】吉林煙草工業(yè)有限責(zé)任公司
【公開(kāi)日】2015年7月29日
【申請(qǐng)日】2015年5月13日