一種漿果和其它小型水果中708種農(nóng)藥殘留gc-q-tof/ms偵測技術(shù)的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及農(nóng)殘檢測領(lǐng)域，特別設(shè)及一種應(yīng)用GC-Q-T0F/MS篩查漿果和其他小型 水果中708種農(nóng)殘的偵測方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 早在1976年世界衛(wèi)生組織(WHO)、糧農(nóng)組織(FA0)和聯(lián)合國環(huán)境規(guī)劃署(UNEP)共同 建立了全球環(huán)境檢測系統(tǒng)/食品項(xiàng)目（Global Environment Monitoring System,GEMS/ 化od)，旨在掌握會員國食品污染狀況，了解食品污染物攝入量，保護(hù)人體健康，促進(jìn)貿(mào)易發(fā) 展?，F(xiàn)在，世界各國都把食品安全提升到國家安全的戰(zhàn)略地位。農(nóng)藥殘留限量是食品安全標(biāo) 準(zhǔn)之一，也是國際貿(mào)易準(zhǔn)入口檻。同時，對農(nóng)藥殘留的要求呈現(xiàn)出品種越來越多，限量越來 越嚴(yán)格的發(fā)展趨勢，也就是國際貿(mào)易設(shè)立的農(nóng)藥殘留限量口檻越來越高?，F(xiàn)在歐盟已制定 了839種農(nóng)藥的162248項(xiàng)Μ化標(biāo)準(zhǔn)，美國制定了351種農(nóng)藥的39147項(xiàng)Μ化標(biāo)準(zhǔn)，日本制定了 579種農(nóng)藥的51600多項(xiàng)MRL標(biāo)準(zhǔn)，我國2014年發(fā)布了381種農(nóng)藥的3650項(xiàng)MRL標(biāo)準(zhǔn)。目前，國 際上普遍采用的一律標(biāo)準(zhǔn)限量為l〇yg/kg。因此，食品安全和國際貿(mào)易都呼喚高通量快速農(nóng) 藥殘留檢測技術(shù)，運(yùn)無疑也給廣大農(nóng)藥殘留分析工作者提供了機(jī)遇和挑戰(zhàn)。在目前的眾多 農(nóng)藥殘留分析技術(shù)中，色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)是實(shí)現(xiàn)高通量多殘留快速檢測的最佳分析手段。
[0003] 漿果(Berry)是由子房或聯(lián)合其他花器發(fā)育而成柔軟多汁的肉質(zhì)果，芳香味美，極 富營養(yǎng)價值和藥用價值。據(jù)中國統(tǒng)計年鑒數(shù)據(jù)顯示，2011年我國水果總量為22768.18萬t， 其中漿果類約占水果總量的19.3%。隨著人們生活水平的提高，對優(yōu)質(zhì)、健康的漿果和其他 小型水果的需求逐漸旺盛，漿果類食品逐漸展現(xiàn)出
[0004] 目前，農(nóng)藥殘留分析多W氣相色譜、液相色譜、氣相色譜-質(zhì)譜和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián) 用技術(shù)為主。運(yùn)些檢測技術(shù)都首先需要農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品對照進(jìn)行定性。例如，對100種農(nóng)藥的檢 測就需要準(zhǔn)備相應(yīng)的100種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品對照，而運(yùn)100種之外的農(nóng)藥都會被漏檢。在農(nóng)獸藥 殘留實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際工作中，絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都不會儲備數(shù)百種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，其原因是農(nóng)藥 標(biāo)準(zhǔn)品不僅價格昂貴，而且有效期只有2-3年，需要重復(fù)投資。一般實(shí)驗(yàn)室常備農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品 只有幾十種，其日常監(jiān)測的農(nóng)藥品種也就只限于運(yùn)幾十種，由此造成食品安全監(jiān)測漏桐。

【發(fā)明內(nèi)容】

[000引為了克服上述缺陷，本發(fā)明人團(tuán)隊(duì)經(jīng)過多年潛屯、研究，研發(fā)了 708種農(nóng)藥的精確質(zhì) 量數(shù)據(jù)庫W及一種果蔬中708種農(nóng)藥殘留的GC-Q-T0F/MS偵測技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了不需標(biāo)準(zhǔn)品對 照、即可對漿果和其他小型水果中708種農(nóng)藥殘留進(jìn)行快速偵測檢測，滿足了當(dāng)前農(nóng)產(chǎn)品中 農(nóng)藥殘留高通量快速檢測的急需。
[0006] 一方面，本發(fā)明提供了一種GC-Q-T0F/MS檢測漿果和其他小型水果中708種農(nóng)藥殘 留的偵測方法，其特征在于:建立708種農(nóng)藥T0F/MS數(shù)據(jù)庫，同時對漿果和其他小型水果中 708種農(nóng)藥進(jìn)行定性偵測與確證;該方法包括W下步驟：
[0007] (1)將農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品分別配制成l-5mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，設(shè)定條件下經(jīng)GC-QTOF/MS-級 模式全譜數(shù)據(jù)測定每種標(biāo)準(zhǔn)溶液的全譜數(shù)據(jù)，分別得到每種農(nóng)藥的化學(xué)分子式、保留時間、 碎片離子精確質(zhì)量數(shù)、離子豐度比；
[0008] (2)將步驟(1)中獲得的一級模式全譜數(shù)據(jù)，經(jīng)核實(shí)后的碎片離子全掃描質(zhì)譜圖導(dǎo) 入PO)L軟件中，并與對應(yīng)的農(nóng)藥信息相關(guān)聯(lián)，建成T0F/MS精確質(zhì)量數(shù)據(jù)庫，用于數(shù)據(jù)檢索分 析；
[0009] (3)與步驟（1)相同的設(shè)定條件下漿果和其他小型水果的測定待測樣品中農(nóng)藥的 全譜數(shù)據(jù)，得到其含有的農(nóng)藥的化學(xué)分子式、保留時間、碎片離子精確質(zhì)量數(shù)、離子豐度比；
[0010] (4)對樣品測定結(jié)果經(jīng)精確質(zhì)量數(shù)據(jù)庫檢索，對符合鑒定依據(jù)的檢出農(nóng)藥進(jìn)行準(zhǔn) 確鑒定，從而獲得漿果和其他小型水果中的農(nóng)殘種類。
[0011] 優(yōu)選的，通過對漿果和其他小型水果進(jìn)行前處理W獲得漿果和其他小型水果的測 定待測樣品，所述前處理方法包括W下程序：
[0012] 樣品制備:漿果和其他小型水果樣品經(jīng)0.5-5體積％醋酸乙臘勻漿提取，經(jīng)脫水和 離屯、、濃縮后，再經(jīng)Carbon/N此柱凈化，乙臘+甲苯洗脫殘留農(nóng)藥，經(jīng)再濃縮、過濾后制成待 測樣液曰。
[0013] 本發(fā)明所具有的有益效果：
[0014] 1、本發(fā)明W高分辨碎片離子精確質(zhì)量數(shù)、保留時間、離子豐度比等化合物信息為 識別標(biāo)準(zhǔn)，建立的708種農(nóng)藥偵測和確證技術(shù)方法，徹底改變了原有W化合物標(biāo)準(zhǔn)物為參比 的定性模式，是一種不需要標(biāo)準(zhǔn)物對照，快速、高通量、準(zhǔn)確可靠的農(nóng)藥殘留檢測新技術(shù)。
[0015] 2、本發(fā)明在不需標(biāo)準(zhǔn)物對照的前提下，實(shí)現(xiàn)了 708種農(nóng)藥殘留的定性偵測和確證， 可W大大節(jié)省購買標(biāo)準(zhǔn)物的成本，也更加環(huán)保、安全。
[0016] 3、本發(fā)明可在1小時內(nèi)完成708種農(nóng)藥偵測、定性與確證，與傳統(tǒng)檢ii方法相比較， 可W提高工作效率數(shù)百倍。
[0017] 4、本發(fā)明能夠做到對漿果和其他小型水果樣品中708種農(nóng)藥殘留一次性提取凈 化，一次進(jìn)樣檢測，與傳統(tǒng)檢測方法相比較，可W節(jié)省檢測成本、提高工作效率數(shù)百倍。
[0018] 5、本發(fā)明可W測試的漿果和其他小型水果樣品中農(nóng)藥包括W下物質(zhì)中的一類或 幾類:有機(jī)憐類農(nóng)藥，氨基甲酸醋類農(nóng)藥，苯并咪挫類農(nóng)藥，橫酷脈類農(nóng)藥，煙堿類農(nóng)藥，除 蟲菊醋類農(nóng)藥及其他類型的農(nóng)藥及代謝物。
[0019] 6、本發(fā)明建立的GC-QT0F/MS偵現(xiàn)版術(shù)指標(biāo)巧描范圍50-600m/z;現(xiàn)憶的精確質(zhì)量 可達(dá)O.OOOlm/z;質(zhì)量精度可控制在20ppmW內(nèi)；掃描速度在50-600m/z范圍為每秒5次。
[0020] 7、本發(fā)明提供的一種應(yīng)用氣相色譜四級桿飛行時間質(zhì)譜(GC-Q-T0F/MS)快速篩查 漿果和其他小型水果中708種農(nóng)藥殘留的高分辨質(zhì)譜偵測技術(shù)在7個農(nóng)藥殘留分析實(shí)驗(yàn)室 得到了推廣和應(yīng)用，經(jīng)過對30多個省市多個市售漿果和其他小型水果樣品的偵測驗(yàn)證，取 得了重要的殘留偵測數(shù)據(jù)。
[0021] 8、同時偵測的708種農(nóng)藥中，偵測靈敏度一律低于標(biāo)準(zhǔn)10微克/千克，滿足各國農(nóng) 藥殘留ML水平篩查的要求。
[0022] 本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點(diǎn)將在隨后的【具體實(shí)施方式】部分予W詳細(xì)說明。
【附圖說明】
[0023] 附圖是用來提供對本發(fā)明的進(jìn)一步理解，并且構(gòu)成說明書的一部分，與下面的具 體實(shí)施方式一起用于解釋本發(fā)明，但并不構(gòu)成對本發(fā)明的限制。在附圖中：
[0024] 圖1是沈陽地區(qū)雜猴桃樣品GC-Q-T0F/MS技術(shù)檢出頻次最高農(nóng)藥(威殺靈）結(jié)果示 例。
[0025] 圖2是沈陽地區(qū)雜猴桃樣品GC-Q-T0F/MS技術(shù)檢出的頻次最高農(nóng)藥(威殺靈）的質(zhì) 譜信息與數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對的結(jié)果。
[0026] 圖3是北京地區(qū)市售葡萄樣品GC-Q-T0F/MS技術(shù)檢出頻次最高農(nóng)藥(戊挫醇）結(jié)果 示例。
[0027] 圖4是北京地區(qū)市售葡萄樣品GC-Q-T0F/MS技術(shù)檢出的頻次最高農(nóng)藥(戊挫醇）的 質(zhì)譜信息與數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對的結(jié)果。
[0028] 圖5是天津地區(qū)市售雜猴桃樣品GC-Q-T0F/MS技術(shù)檢出頻次最高農(nóng)藥(威殺靈）結(jié) 果不例。
[0029] 圖6是天津地區(qū)市售雜猴桃樣品GC-Q-T0F/MS技術(shù)檢出的頻次最高農(nóng)藥(威殺靈） 的質(zhì)譜信息與數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對的結(jié)果。
[0030] 圖7是重慶地區(qū)市售草替樣品GC-Q-T0F/MS技術(shù)檢出頻次最高農(nóng)藥（甲氯菊醋）結(jié) 果不例。
[0031] 圖8是重慶地區(qū)市售草替樣品GC-Q-T0F/MS技術(shù)檢出的頻次最高農(nóng)藥（甲氯菊醋） 的質(zhì)譜信息與數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對的結(jié)果。
【具體實(shí)施