一種快速檢測結核分枝桿菌的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)學檢測技術領域，尤其涉及一種快速檢測結核分枝桿菌的方法。
【背景技術】
[0002]目前結核分枝桿菌的檢測主要依據(jù)結核菌素進行檢測(pro檢測)，然而PPD檢測無法區(qū)分BCG接種產(chǎn)生的免疫應答反應與致病性結核分枝桿菌感染產(chǎn)生的應答反應，這讓核分枝桿菌的檢測有了難度，檢測敏感度和特異性較低。

【發(fā)明內容】

[0003]本發(fā)明的目的在于提供一種快速檢測結核分枝桿菌的方法，以解決上述技術問題。
[0004]本發(fā)明所要解決的技術問題采用以下技術方案來實現(xiàn):
[0005]—種快速檢測結核分枝桿菌的方法，其特征在于，步驟為:
[0006]向受檢血樣中加入結核分枝桿菌特有的T細胞抗原刺激，于37°C環(huán)境下培養(yǎng)16?24小時后檢測T細胞產(chǎn)生的γ干擾素的情況，如果T細胞由于結核分枝桿菌特異抗原的刺激而提高了 γ干擾素的產(chǎn)量，并到達一定的閥值，則認為受檢血樣感染了結核分枝桿菌。
[0007]結核分枝桿菌感染機體后，機體可產(chǎn)生具有抗原特異性的致敏T細胞，當機體再次受到結核分枝桿菌抗原刺激后，致敏T細胞可快速活化與增殖，釋放出γ -干擾素。
[0008]是以RDl編碼的結核特異性抗原為刺激原檢測機體內致敏T淋巴細胞釋放出干擾素。與pro試驗用的結核菌素不同，這些蛋白在所有結核分枝桿菌及致病性牛分枝桿菌中特異表達，而在卡介苗和大多數(shù)非結核分枝桿菌中不表達。因此，本發(fā)明檢測結核分枝桿菌具有較高的敏感度和特異性。
[0009]γ-干擾素(IFN-γ)體外釋放對于結核分枝桿菌感染，特別是區(qū)別自然感染和卡介苗接種等潛伏感染的檢測具有較強的特異性。γ -干擾素體外釋放通過特異性抗原刺激刺激血液淋巴細胞檢測細胞因子，檢測結核分枝桿菌的特異度和敏感度達到90%以上。
[0010]本發(fā)明的有益效果是:
[0011 ]第一，本發(fā)明所用刺激抗原為結核分枝桿菌特有抗原，而非結核分枝桿菌提取物，特異性高，不受BCG接種與非結核分枝桿菌的干擾，同時也不受導致類結核病癥狀的其他致病菌的影響。
[0012]第二，本發(fā)明檢測結核分枝桿菌的方法靈敏度好，可應用于體外檢測結核病，不僅對細菌學檢查陽性結核病患者檢出率較高，對菌陰及其他結核病患者也有90 %以上的檢出率，而菌陰及其他結核病患者恰恰是目前臨床診斷的難點。
[0013]第三，本發(fā)明為非人體試驗，結果判定客觀，且不會對機體免疫狀態(tài)產(chǎn)生影響。
[0014]本發(fā)明檢測IFN-γ濃度的高低與結核分枝桿菌的多少及活性相關。
【具體實施方式】
[0015]為了使本發(fā)明實現(xiàn)的技術手段、創(chuàng)作特征、達成目的與功效易于明白了解，下面結合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明，但下述實施例僅僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例，并非全部?；趯嵤┓绞街械膶嵤├?，本領域技術人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動的前提下所獲得其它實施例，都屬于本發(fā)明的保護范圍。
[0016]一種快速檢測結核分枝桿菌的方法，
[0017]向受檢血樣中加入結核分枝桿菌特有的T細胞抗原刺激，于37°C環(huán)境下培養(yǎng)16?24小時后檢測T細胞產(chǎn)生的γ干擾素的情況，如果T細胞由于結核分枝桿菌特異抗原的刺激而提高了 γ干擾素的產(chǎn)量，并到達一定的閥值，則認為受檢血樣感染了結核分枝桿菌。
[0018]以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點。本行業(yè)的技術人員應該了解，本發(fā)明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的僅為本發(fā)明的優(yōu)選例，并不用來限制本發(fā)明，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會有各種變化和改進，這些變化和改進都落入要求保護的本發(fā)明范圍內。本發(fā)明要求保護范圍由所附的權利要求書及其等效物界定。
【主權項】
1.一種快速檢測結核分枝桿菌的方法，其特征在于，步驟為: 向受檢血樣中加入結核分枝桿菌特有的T細胞抗原刺激，于37°C環(huán)境下培養(yǎng)16?24小時后檢測T細胞產(chǎn)生的γ干擾素的情況，如果T細胞由于結核分枝桿菌特異抗原的刺激而提高了 γ干擾素的產(chǎn)量，并到達一定的閥值，則認為受檢血樣感染了結核分枝桿菌。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種快速檢測結核分枝桿菌的方法，涉及醫(yī)學檢測技術領域，步驟為：向受檢血樣中加入結核分枝桿菌特有的T細胞抗原刺激，于37℃環(huán)境下培養(yǎng)16～24小時后檢測T細胞產(chǎn)生的γ干擾素的情況，如果T細胞由于結核分枝桿菌特異抗原的刺激而提高了γ干擾素的產(chǎn)量，并到達一定的閥值，則認為受檢血樣感染了結核分枝桿菌。本發(fā)明所用刺激抗原為結核分枝桿菌特有抗原，特異性高，不受BCG接種與非結核分枝桿菌的干擾；靈敏度好，非人體試驗，結果判定客觀，且不會對機體免疫狀態(tài)產(chǎn)生影響。
【IPC分類】G01N33/68, G01N33/569
【公開號】CN105548566
【申請?zhí)枴緾N201511028937
【發(fā)明人】蘇銳
【申請人】合肥安為康醫(yī)學檢驗有限公司
【公開日】2016年5月4日
【申請日】2015年12月25日