無甲醛組織標本固定液的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種無甲醛組織標本固定液，其由混合溶液和添加組分組成，其中，混合溶液包含以下體積份數(shù)的組分：無水乙醇45～50份、無水甲醇20～25份，聚乙二醇?400 15份，純化水10～20份以及表面活性劑0.03～0.05份，所述添加組分包含以下組分，各組分在所述固定液中的終濃度為：無水碳酸鈉3～5g/L和三氯乙酸6～8g/L。本發(fā)明所述的無甲醛組織標本固定液采用無毒無害的化學試劑制成，固定效果好，組織細胞的形態(tài)保存完整。
【專利說明】
無甲醛組織標本固定液
技術領域
[0001]本發(fā)明屬于病理學實驗技術領域，涉及體外診斷試劑，尤其涉及一種無甲醛組織標本固定液。
【背景技術】
[0002]組織病理學的誕生已有150多年的歷史，在所有的醫(yī)院，手術切除的病理樣本及各種活體檢查組織，均由醫(yī)院病理科對手術組織樣本作出組織病理學診斷。
[0003]常規(guī)石蠟包埋HE染色制片是當前用以處理組織樣本的最基本技術，它是病理診斷方法學的基礎，也是許多新方法、新技術優(yōu)劣的評定參照標準。傳統(tǒng)的方法是將組織樣本放置處理液的缸中，依次倒入或調入不同處理液，樣本依次在每個試劑中按規(guī)定浸泡不同時間完成處理切片、染色、封片等，全程需要30多個步驟。整個過程大量使用甲醛、二甲苯、氧化汞、氨水有毒害化學試劑，病理技術人員長期置身于有毒環(huán)境，且試劑排放嚴重污染環(huán)境。并且所用的試劑寬容度差，操作復雜，試劑消耗量大，病理制片優(yōu)質片低(全國統(tǒng)計在40?70%)，嚴重影響病理診斷。同時絕大數(shù)醫(yī)院自行配試劑，缺乏統(tǒng)一標準。因此病理行業(yè)組織標本處理液用品的標準化生產(chǎn)、無毒化、社會化供求，是行業(yè)發(fā)展的必然趨勢。
[0004]例如申請?zhí)枮?00810136961.X的專利申請公開了一種生物組織樣本常規(guī)石蠟制片HE染色無二甲苯全程處理液。然而這種基于傳統(tǒng)組織固定的處理液仍舊采用了嚴重污染環(huán)境的毒害試劑甲醛。使用不同濃度的甲醛-福爾馬林，固定人體及動植物組織標本，進行人體病理學和動植物病理學的研究已有160年以上的歷史。甲醛是當今世界公認的有毒有害化學品具有潛在的致癌性，其是一種單純固定液，其固定機理是通過在蛋白質亞單位氨基酸分子間的鉸鏈反應，形成亞甲基橋完成固定作用。然而交聯(lián)反應會出現(xiàn)收縮硬化等現(xiàn)象，對組織細胞的抗原分子結構、酶類、核酸分子保存不佳。因此，研發(fā)甲醛的替代品，替代甲醛用于病理學實驗具有重要的意義。

【發(fā)明內容】

[0005]本發(fā)明設計開發(fā)了一種無毒害、固定效果好的無甲醛組織標本固定液。
[0006]本發(fā)明提供的技術方案為:
[0007]—種無甲醛組織標本固定液，其由混合溶液和添加組分組成，其中，混合溶液包含以下體積份數(shù)的組分:無水乙醇45?50份、無水甲醇20?25份，聚乙二醇-400 15份，純化水10?20份以及表面活性劑0.03?0.05份，所述添加組分包含以下組分，各組分在所述固定液中的終濃度為:無水碳酸鈉3?5g/L和三氯乙酸6?8g/L。
[0008]優(yōu)選的是，所述的無甲醛組織標本固定液中，其由混合溶液和添加組分組成，其中，混合溶液包含以下體積份數(shù)的組分:無水乙醇45份、無水甲醇25份，聚乙二醇-400 15份，純化水15份以及表面活性劑0.03?0.05份，所述添加組分包含以下組分，各組分在所述固定液中的終濃度為:無水碳酸鈉3g/L和三氯乙酸7.5g/L。
[0009]優(yōu)選的是，所述的無甲醛組織標本固定液中，所述表面活性劑為氟類表面活性劑。
[0010]優(yōu)選的是，所述的無甲醛組織標本固定液中，所述混合溶液還包含聚乙二醇-2005份、聚乙二醇600 5份以及聚丙二醇-425 3份。
[0011]本發(fā)明所述的無甲醛組織標本固定液采用無毒無害的化學試劑制成，固定效果好，組織細胞的形態(tài)保存完整。本發(fā)明的無甲醛組織標本固定液可滿足常規(guī)病理診斷、免疫組織化學診斷技術、分子生物學診斷技術要求，處理的組織效果優(yōu)于傳統(tǒng)技術，以完全替代甲醛應用于相關的病理學實驗。
【具體實施方式】
[0012]下面對本發(fā)明做進一步的詳細說明，以令本領域技術人員參照說明書文字能夠據(jù)以實施。
[0013]本發(fā)明提供一種無甲醛組織標本固定液，其由混合溶液和添加組分組成，其中，混合溶液包含以下體積份數(shù)的組分:無水乙醇45?50份、無水甲醇20?25份，聚乙二醇-40015份，純化水10?20份以及表面活性劑0.03?0.05份，所述添加組分包含以下組分，各組分在所述固定液中的終濃度為:無水碳酸鈉3?5g/L和三氯乙酸6?8g/L。
[0014]本發(fā)明不使用甲醛，既避免了甲醛的毒害作用，又消除了甲醛對抗原物質的遮蓋，能夠很好的保存抗原。而且本發(fā)明使用聚乙二醇-400來促進分子的滲透作用，以促進細胞蛋白質沉淀作用完成固定過程，此過程抑制了交聯(lián)反應的收縮硬化等現(xiàn)象，有利于組織細胞形態(tài)的保存。
[0015]本發(fā)明提供的無甲醛組織標本固定液采用復合成分配方，其全部組分為無毒無害的化學試劑;經(jīng)細胞形態(tài)學實驗、免疫組織化學實驗、分子病理學實驗及核酸提取實驗證明，無醛固定液具有較為全面的固定效果，完全可以替代甲醛應用于相關的病理學實驗，以完成對組織標本的固定作用。
[0016]本發(fā)明提供的無甲醛組織標本固定液的配制，是將各組分在常溫下按所述比例混勻即可。
[0017]在一個優(yōu)選的實施例中，所述的無甲醛組織標本固定液中，其由混合溶液和添加組分組成，其中，混合溶液包含以下體積份數(shù)的組分:無水乙醇45份、無水甲醇25份，聚乙二醇-400 15份，純化水15份以及表面活性劑0.03?0.05份，所述添加組分包含以下組分，各組分在所述固定液中的終濃度為:無水碳酸鈉3g/L和三氯乙酸7.5g/L。
[0018]在一個優(yōu)選的實施例中，所述的無甲醛組織標本固定液中，所述表面活性劑為氟類表面活性劑。
[0019]在一個優(yōu)選的實施例中，所述的無甲醛組織標本固定液中，所述混合溶液還包含聚乙二醇-200 5份、聚乙二醇600 5份以及聚丙二醇-425 3份。
[0020]經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，不同分子量的聚乙二醇之間相互作用，更有助于促使分子的滲透作用，從而促進細胞蛋白質沉淀。另外，少量的聚丙二醇-425可進一步抑制交聯(lián)反應的收縮硬化，保證細胞不收縮變形，最大程度保存組織細胞的形態(tài)。通過精確調節(jié)聚乙二醇-200、聚乙二醇-400、聚乙二醇-600的用量，還可以增強組織的穩(wěn)定性，使組織在脫水、包埋、切片以及染色過程不被損壞，并改善組織成分對染料的親和力，使染色效果好。
[0021]為了進一步說明本發(fā)明的技術方案，以下提供三個實施例。
[0022]實施例一
[0023]本實施例中無甲醛組織標本固定液由混合溶液和添加組分組成，其中，混合溶液包含以下體積份數(shù)的組分:無水乙醇45mL，無水甲醇20mL，聚乙二醇-400 15mL，純化水1mL以及氟類表面活性劑0.03mL，所述添加組分包含以下組分，各組分在所述固定液中的終濃度為:無水碳酸鈉3g/L和三氯乙酸6g/L。
[0024]應用本實施例的固定液，組織細胞的固定效果好，細胞無變形，細胞形態(tài)保存完整。
[0025]實施例二
[0026]本實施例中無甲醛組織標本固定液由混合溶液和添加組分組成，其中，混合溶液包含以下體積份數(shù)的組分:無水乙醇50mL，無水甲醇25mL，聚乙二醇-400 15mL，純化水20mL以及氟類表面活性劑0.05mL，所述添加組分包含以下組分，各組分在所述固定液中的終濃度為:無水碳酸鈉5g/L和三氯乙酸8g/L。
[0027]應用本實施例的固定液，組織細胞的固定效果好，細胞無變形，細胞形態(tài)保存完整。
[0028]實施例三
[0029]本實施例中無甲醛組織標本固定液由混合溶液和添加組分組成，其中，混合溶液包含以下體積份數(shù)的組分:無水乙醇45mL，無水甲醇25mL，聚乙二醇-400 15mL，聚乙二醇-200 5mL，聚乙二醇600 5mL，聚丙二醇-425 3mL，純化水15mL以及氟類表面活性劑0.03mL，所述添加組分包含以下組分，各組分在所述固定液中的終濃度為:無水碳酸鈉3g/L和三氯乙酸 7.5g/L。
[0030]應用本實施例的固定液，組織細胞的固定效果好，細胞無變形，細胞形態(tài)保存完整。
[0031]盡管本發(fā)明的實施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實施方式中所列運用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領域，對于熟悉本領域的人員而言，可容易地實現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細節(jié)。
【主權項】
1.一種無甲醛組織標本固定液，其特征在于，其由混合溶液和添加組分組成，其中，混合溶液包含以下體積份數(shù)的組分:無水乙醇45?50份、無水甲醇20?25份，聚乙二醇-40015份，純化水10?20份以及表面活性劑0.03?0.05份，所述添加組分包含以下組分，各組分在所述固定液中的終濃度為:無水碳酸鈉3?5g/L和三氯乙酸6?8g/L。2.如權利要求1所述的無甲醛組織標本固定液，其特征在于，其由混合溶液和添加組分組成，其中，混合溶液包含以下體積份數(shù)的組分:無水乙醇45份、無水甲醇25份，聚乙二醇-400 15份，純化水15份以及表面活性劑0.03?0.05份，所述添加組分包含以下組分，各組分在所述固定液中的終濃度為:無水碳酸鈉3g/L和三氯乙酸7.5g/L。3.如權利要求1所述的無甲醛組織標本固定液，其特征在于，所述表面活性劑為氟類表面活性劑。4.如權利要求2或3所述的無甲醛組織標本固定液，其特征在于，所述混合溶液還包含聚乙二醇-200 5份、聚乙二醇600 5份以及聚丙二醇-425 3份。
【文檔編號】G01N1/28GK105842033SQ201610319527
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年5月13日
【發(fā)明人】李明, 王德田
【申請人】北京九州柏林生物科技有限公司