一種基于石墨烯分散固相萃取-反萃取技術(shù)檢測涕滅威殘留的方法
【專利摘要】本發(fā)明公布了一種基于石墨烯分散固相萃取?反萃取技術(shù)檢測涕滅威殘留的方法，屬于分析化學(xué)檢測領(lǐng)域。方法包括如下操作：（1）提?。悍Q取試樣于離心管中，加入乙腈，均質(zhì)，再加入無水硫酸鈉、氯化鈉，振蕩、離心后收集上清液于梨形瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至近干。（2）分散固相萃?。簼饪s后的殘?jiān)贸兯芙猓尤胧┻M(jìn)行分散固相萃?。唬?）反萃?。簩⒎稚⒐滔噍腿『蟮娜芤哼^濾膜，棄去流出液；然后進(jìn)行反萃取。（4）檢測：將收集的反萃取液過濾膜，進(jìn)儀器進(jìn)行檢測。本發(fā)明的有益效果是，利用石墨烯分散固相萃取?反萃取技術(shù)，建立了簡便、快速的涕滅威檢測方法，方法操作簡單、成本低，能夠減少樣品基質(zhì)干擾，適用于蔬菜水果檢測。
【專利說明】
一種基于石墨烯分散固相萃取-反萃取技術(shù)檢測涕滅威殘留的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種基于石墨烯分散固相萃取-反萃取技術(shù)檢測涕滅威殘留的方法，尤其是一種石墨烯分散固相萃取-反萃取結(jié)合液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測果蔬中涕滅威殘留的方法，屬于分析化學(xué)檢測領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]涕滅威是一種高效、劇毒的氨基甲酸酯類殺蟲劑，被廣泛應(yīng)用于水果蔬菜種植領(lǐng)域，涕滅威在一定條件下容易被氧化成毒性更高的代謝物涕滅威砜、涕滅威亞砜。由于高效、經(jīng)濟(jì)而被廣泛應(yīng)用于水果蔬菜種植過程，因此而導(dǎo)致的涕滅威及其代謝物藥物殘留及中毒事件時有發(fā)生。目前已有的檢測前處理方法操作繁瑣、耗時長，因此需要建立高效、快速的凈化及檢測方法。
[0003]分散固相萃取技術(shù)因其具有快捷、高效、成本低廉等的特點(diǎn)而被廣泛使用，其技術(shù)核心是在樣品提取液中直接加入除水劑和雜質(zhì)吸附劑，提取液經(jīng)離心后直接進(jìn)行儀器分析。目前可以用于分散固相萃取的材料有C18、GCB、PSA、碳納米管等。
[0004]石墨烯比表面積大，理論值達(dá)2630m2/g，具有良好的耐酸堿性、耐熱性能和化學(xué)穩(wěn)定性、極強(qiáng)的疏水性、易于進(jìn)行功能化修飾等優(yōu)點(diǎn)，亦可與有機(jī)分子產(chǎn)生強(qiáng)的31-31相互作用。石墨烯是由天然石墨制備的，其具有制備成本低廉、原料易得且容易實(shí)現(xiàn)規(guī)?；苽涞葍?yōu)點(diǎn)，比碳納米管更具競爭優(yōu)勢。石墨烯分散固相萃取-反萃取技術(shù)用于果蔬中涕滅威的檢測尚未見報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明提供了一種基于石墨烯分散固相萃取-反萃取技術(shù)檢測涕滅威殘留的方法。
[0006]本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是:一種基于石墨烯分散固相萃取-反萃取技術(shù)檢測涕滅威殘留的方法，包括如下操作。
[0007](I)提取:稱取2-10g試樣，加入10-30ml乙腈，均質(zhì)l_3min，再加入無水硫酸鈉、氯化鈉，振蕩提取l_3min后，6000-9000r/min條件下離心5-8min，收集上清液于梨形瓶中，在40 V水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至近干。
[0008](2)分散固相萃取:濃縮后的殘?jiān)?mL超純水溶解，加入15mg石墨烯進(jìn)行分散固相萃取lmin。
[0009](3)反萃取:將分散固相萃取后的溶液通過5μπι以下濾膜，棄去流出液，此時吸附有目標(biāo)物的石墨烯全部留在了濾膜上;然后使用2mL乙腈進(jìn)行反萃取，收集反萃取液。
[0010](4)檢測:將收集的反萃取液過0.22μπι有機(jī)相濾膜，樣液進(jìn)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)進(jìn)行檢測。
[0011]步驟(4)儀器檢測所使用的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜配有電噴霧離子源(ESI)。
[0012]檢測時的色譜條件為:
色譜柱:Poroshell 120 EC-C18，3.0X 10mm,2.1m.,柱溫:30°C；進(jìn)樣體積:lyL；流動相:A為甲醇、B為水；洗脫程序:0-4min，5%-70%A ； 4_5min，70%A ； 3_7min，20%A ； 5-7.lmin，70%-5%A； 1min, 5%A；流速:0.3mL/min。
[0013]檢測時的質(zhì)譜條件為:
掃描模式:正離子模式;檢測方式:多反應(yīng)監(jiān)測;干燥氣溫度:3250C ；干燥氣流速:1L/min ；霧化氣壓力:45psi ；鞘氣溫度:350°C ;鞘氣流速:llL/min；毛細(xì)管電壓:4000V；碰撞氣:高純氮;各離子對駐留時間均為70ms。
[0014]涕滅威的定性離子對213/89.3、213/98.3，對應(yīng)的碎裂電壓均為120￥，對應(yīng)的碰撞能量分別為16 eV、ll eV;定量離子對213/89.3。
[0015]本發(fā)明的有益效果是，利用石墨烯分散固相萃取-反萃取技術(shù)，建立了簡便、快速的涕滅威檢測方法，方法具有良好的線性關(guān)系和精密度，回收率高，檢出限和定量限均能滿足檢測需要，適用于蔬菜水果中涕滅威殘留的檢測。
【具體實(shí)施方式】
[0016]以蘋果檢測為例來說明本發(fā)明。
[0017]儀器設(shè)備:
美國Agilent公司1290-6460液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，配有噴射流離子聚焦電噴霧離子源(AJS-ESI);德國IKA公司GM200型高速均質(zhì)機(jī)；日本東京理化MMV-1000W型振蕩器；日本Hitachi公司CR22GIII型高速冷凍離心機(jī);瑞士 Buchi公司R215型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀;德國IKA公司MS3型渦旋混勻器。
[0018]材料與試劑:
石墨烯由濟(jì)寧利特納米技術(shù)有限責(zé)任公司提供;3mL空柱管、篩板(孔徑< 20μπι)購于天津博納艾杰爾公司；甲醇、乙腈、丙酮、乙酸乙酯甲酸均為色譜純；無水硫酸鈉(650°C灼燒4h，冷卻后貯存于干燥器中，備用)、氯化鈉、氨水為分析純;實(shí)驗(yàn)用水為超純水。
[0019]標(biāo)準(zhǔn)品:涕滅威濃度為100mg/L，lmL，購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所。
[°02°] (I)提取:稱取5試樣，加入20ml乙腈，均質(zhì)Imin，再加入4g無水硫酸鈉、Ig氯化鈉，振蕩提取3min后，9000r/min條件下離心5min，收集上清液于梨形瓶中，在40°C水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至近干。
[0021](2)分散固相萃取:濃縮后的殘?jiān)?mL超純水溶解，加入15mg石墨烯進(jìn)行分散固相萃取lmin。
[0022](3)反萃取:將分散固相萃取后的溶液通過0.22μπι濾膜，棄去流出液;然后使用2mL乙腈進(jìn)行反萃取，收集反萃取液。
[0023](4)檢測:將收集的反萃取液過0.22μπι有機(jī)相濾膜，樣液進(jìn)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)進(jìn)行檢測。
[0024]液相色譜條件。
[0025]色譜柱:Poroshell120 EC_C18，3.0X 100mm，2.7ymo
[0026]柱溫:30Γ。
[0027]進(jìn)樣體積:lyL。
[0028]流動相:A為甲醇、B為水。
[0029]流動相梯度洗脫程序:0-4min，5%-70%A； 4_5min，70%A ； 3_7min，20%A ； 5-7.lmin，70%-5%A;10min，5%A。
[0030]流速:0.3mL/min。
[0031]質(zhì)譜條件。
[0032]離子源:噴射流離子聚焦電噴霧離子源。
[0033]掃描模式:正離子模式。
[0034]檢測方式:多反應(yīng)監(jiān)測。
[0035]干燥氣溫度:325 Γ。
[0036]干燥氣流速:10L/min。
[0037]霧化氣壓力:45psi。
[0038]鞘氣溫度:350 Γ。
[0039]鞘氣流速:llL/min。
[0040]毛細(xì)管電壓:4000V。
[0041 ] 碰撞氣:高純氮。
[0042]各離子對駐留時間均為70ms。
[0043]涕滅威的定性離子對213/89.3、213/98.3，對應(yīng)的碎裂電壓均為120￥，對應(yīng)的碰撞能量分別為16 eV、ll eV;定量離子對213/89.3。
[0044]方法評價(jià)。
[0045]分別配制濃度為5、10、20、50、100、200、500yg/L的涕滅威標(biāo)準(zhǔn)溶液，按優(yōu)化后的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行前處理，然后利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行分析，得到涕滅威標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，相關(guān)系數(shù)良好，均大于0.998;通過在陰性樣品中添加不同濃度梯度的涕滅威標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行回收率和精密度試驗(yàn)，驗(yàn)證方法的可靠性，回收率在85%-110%之間，精密度均小于13%。
[0046]所述實(shí)施例僅僅是本發(fā)明的一個優(yōu)選的實(shí)施例，并不是對本發(fā)明的范圍進(jìn)行限定?；诒景l(fā)明實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動的前提下，對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行的各種改進(jìn)、優(yōu)化，進(jìn)而獲得的所有其他實(shí)施例，均屬于本發(fā)明權(quán)利要求書所聲明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種基于石墨烯分散固相萃取-反萃取技術(shù)檢測涕滅威殘留的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟: (O分散固相萃取:稱取2-10g樣品，加入10_30mL乙臆，均質(zhì)提取l-3min，尚心后將上清液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至近干;殘?jiān)贸兯芙?，加入石墨烯進(jìn)行分散固相萃??； (2)反萃取:將分散固相萃取后的溶液通過5μπι以下濾膜，棄去流出液;然后使用反萃取試劑進(jìn)行反萃取，收集反萃取液，過濾膜，進(jìn)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)進(jìn)行檢測。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于石墨烯分散固相萃取-反萃取技術(shù)檢測涕滅威殘留的方法，其特征是:步驟(I)所述石墨稀的用量為15mg。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于石墨烯分散固相萃取-反萃取技術(shù)檢測涕滅威殘留的方法，其特征是:步驟(I)中分散固相萃取時間為Imin。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于石墨烯分散固相萃取-反萃取技術(shù)檢測涕滅威殘留的方法，其特征是:步驟(2)所述反萃取試劑為乙腈。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于石墨烯分散固相萃取-反萃取技術(shù)檢測涕滅威殘留的方法，其特征是:步驟(2)所使用的反萃取試劑體積為2mL。
【文檔編號】G01N30/06GK105842360SQ201610187743
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年3月29日
【發(fā)明人】倪永付
【申請人】中華人民共和國濟(jì)寧出入境檢驗(yàn)檢疫局