采用近紅外光譜法快速測(cè)定三七藥材中五種皂苷含量的方法及應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明涉及采用近紅外光譜法快速測(cè)定三七藥材中五種皂苷含量的方法及應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)收集三七不同批次的藥材組成樣本集，采集其近紅外光譜，通過(guò)異常樣本剔除，劃分校正集和驗(yàn)證集，選擇合適的光譜預(yù)處理方法和建模波段通過(guò)HPLC法測(cè)定三七藥材中五種藥效皂苷含量為參考值，應(yīng)用化學(xué)計(jì)量學(xué)技術(shù)，構(gòu)建三七藥材近紅外光譜與其五種藥效皂苷含量之間的定量校正模型，可用于未知含量的三七藥材及其相關(guān)制劑生產(chǎn)中五種藥效皂苷含量的測(cè)定。本發(fā)明所涉及的五種藥效皂苷是三七總皂苷類制劑的主要藥效成分，且與其質(zhì)控指標(biāo)一致，故可為三七藥材及其制劑質(zhì)量控制提供快速、高效的技術(shù)方法，減輕檢驗(yàn)工作量。
【專利說(shuō)明】
采用近紅外光譜法快速測(cè)定三七藥材中五種皂苷含量的方法 及應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種三七藥材中五種皂苷含量快速測(cè)定方法，具體地說(shuō)涉及一種采用 近紅外光譜法快速測(cè)定三七藥材中五種藥效皂苷含量的方法，屬于中醫(yī)藥研究技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 三七為五加科植物植物Panax notoginseng(Burk)F.H.Chen的干燥根和根莖，具 有散瘀止血，消腫定痛的功效，是一種重要的常見(jiàn)中藥，在中國(guó)已有上百年的使用歷史。其 中，三七的皂苷類成分被認(rèn)為是其中藥藥效物質(zhì)，以三七總皂苷為原料的中藥注射制劑，如 血塞通和血栓通等，年銷售額已近百億，是中藥注射劑界的"重鎊炸彈"。
[0003]三七單體阜苷成分大多為達(dá)瑪燒型(dammarane)四環(huán)三砲阜苷，可分為兩大類，分 別是20(S)_原人參二醇型[20(S)-protopanaxadiol]和20(S)-原人參三醇型[20(S)-protopanaxatriol]。其中三七皂苷Rl，人參皂苷Rgl，人參皂苷Re，人參皂苷Rbl和人參皂苷 Rd是三七中主要的皂苷類成分，被證明是三七及其制劑抗心肌缺血的主要藥效物質(zhì)，是三 七總皂苷類制劑質(zhì)量控制的指標(biāo)成分。
[0004] 藥材質(zhì)量分析是中藥制藥過(guò)程分析和質(zhì)量控制的源頭。同為三七藥材，不同產(chǎn)地、 不同采收時(shí)間等都會(huì)導(dǎo)致藥材質(zhì)量的變化?，F(xiàn)有的三七中皂苷類成分含量測(cè)定方法主要為 高效液相分析方法，該方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力，且需要對(duì)照品。因此，十分有必要建立三七藥材中主 要藥效物質(zhì)的含量測(cè)定方法，以滿足三七及其制劑質(zhì)量控制的需求。
[0005] 近紅外光譜(Near Infrared Spectroscopy，NIRS)能反映樣本中有機(jī)分子含氫基 團(tuán)（如C-H、N-H、〇-H等）的特征信息。近紅外光譜技術(shù)可用于中藥質(zhì)量分析，樣本無(wú)需或僅需 簡(jiǎn)單處理，不消耗化學(xué)試劑，操作簡(jiǎn)單、快速，在中藥質(zhì)量控制領(lǐng)域具有巨大的應(yīng)用潛力。將 近紅外光譜技術(shù)結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)技術(shù)，用于三七藥材中主要藥效物質(zhì)的快速檢測(cè)，對(duì)三七 藥材及三七總皂苷類制劑的質(zhì)量控制具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于提供一種采用近紅外光譜法快速測(cè)定三七藥材中五種藥效皂 苷含量的方法及應(yīng)用，為三七藥材及三七總皂苷類制劑質(zhì)量控制提供快速、高效的技術(shù)方 法，減輕檢驗(yàn)工作量。
[0007] 本發(fā)明的目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：
[0008] 采用近紅外光譜法快速測(cè)定三七藥材中五種皂苷含量的方法，包括以下步驟：
[0009] 1)收集不同批次的三七藥材或三七藥材提取物或三七制劑，得到校正集樣本；
[0010] 2)采集所述校正集樣本的近紅外光譜數(shù)據(jù)，采用一階導(dǎo)濾波法進(jìn)行預(yù)處理，獲取 特征近紅外光譜數(shù)據(jù)；
[0011] 3)用HPLC法測(cè)定所述校正集樣本中三七皂苷R1、人參皂苷Rgl、人參皂苷Re、人參 皂苷Rbl和人參皂苷Rd的含量；
[0012] 4)采用偏最小二乘法建立步驟2)中所述校正集樣本的特征近紅外光譜數(shù)據(jù)與步 驟3)中所述五種皂苷含量之間的定量校正模型；
[0013] 5)按照步驟2)相同的方法采集待測(cè)樣品的近紅外光譜數(shù)據(jù)，導(dǎo)入所述定量校正模 型，得到待測(cè)樣品的五種皂苷含量。
[0014] 為便于描述，本發(fā)明中將三七皂苷R1、人參皂苷Rgl、人參皂苷Re、人參皂苷Rbl和 人參皂苷Rd簡(jiǎn)稱為五種皂苷。
[0015] 本發(fā)明中，樣本收集是通過(guò)收集不同批次的三七藥材或三七藥材提取物或三七制 劑樣本，以增加樣本集的代表性。本發(fā)明所稱的"批次"是本領(lǐng)域常用的一個(gè)技術(shù)術(shù)語(yǔ)，具體 到本發(fā)明，不同"批次"的藥材之間的區(qū)別體現(xiàn)在:產(chǎn)地(即生長(zhǎng)環(huán)境）、部位、主根規(guī)格、采收 時(shí)間、貯存時(shí)間、到貨入庫(kù)時(shí)間、規(guī)格等。
[0016] 為了更好地建立定量校正模型，本發(fā)明所述產(chǎn)地包括文山州、紅河州、昆明市、玉 溪市等產(chǎn)地;所述部位包括三七剪口、主根、筋條、須根等部位;所述主根規(guī)格包括至少10 頭。
[0017] 本發(fā)明中，優(yōu)選地，在進(jìn)行近紅外光譜采集前對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理:將三七藥材樣品 真空干燥，粉碎后過(guò)280μπι篩，得到三七藥材粉末。
[0018] 本發(fā)明中，優(yōu)選地，光譜采集方式為:積分球漫反射采樣;優(yōu)選地采集條件:波數(shù)范 圍4，000-10，OOOcnf1，掃描次數(shù)64次，分辨率4cnf 1，參比光譜為空氣。
[0019]本發(fā)明中，優(yōu)選地，采用一階導(dǎo)濾波對(duì)光譜進(jìn)行預(yù)處理。
[0020] 本發(fā)明中，優(yōu)選地，在對(duì)所采集的近紅外光譜數(shù)據(jù)(包括校正集樣本，驗(yàn)證集樣本 和待測(cè)樣本)進(jìn)行預(yù)處理前還包括剔除光譜異常樣本;進(jìn)一步優(yōu)選地，采用Chauvenet檢驗(yàn) 剔除光譜異常樣本。
[0021] 本發(fā)明中，優(yōu)選地，采用偏最小二乘回歸法(PLSR)建立所述定量校正模型。
[0022] 本發(fā)明中，優(yōu)選地，所述五種皂苷成分的均以4，000-10，OOOcnf1全波段建模。
[0023]本發(fā)明在分別對(duì)光譜數(shù)據(jù)預(yù)處理和建模波段進(jìn)行優(yōu)選后，以交叉驗(yàn)證均方根誤差 RMSECV為指標(biāo)確定最佳主成分?jǐn)?shù)。優(yōu)選地，三七皂苷R1，人參皂苷Rgl，人參皂苷Re，人參皂 苷Rbl、人參皂苷Rd的主成分?jǐn)?shù)分別為7個(gè)、7個(gè)、7個(gè)、7個(gè)、8個(gè)。
[0024] 優(yōu)選地，本發(fā)明所述步驟4)中，還包括對(duì)所建立的所述定量校正模型的預(yù)測(cè)性能 進(jìn)行評(píng)價(jià)的步驟;所述評(píng)價(jià)指標(biāo)包括相關(guān)系數(shù)R、預(yù)測(cè)均方根誤差RMSEP;進(jìn)一步地，若R值接 近于1，RMSEP值越小，則所述定量校準(zhǔn)模型適用于所述待測(cè)樣品的檢測(cè);反之，則不適用。
[0025] 具體地，所述對(duì)所建立的所述定量校正模型的預(yù)測(cè)性能進(jìn)行評(píng)價(jià)的步驟包括:取 上述五種皂苷含量已知的驗(yàn)證集樣本，按照步驟2)相同的方法采集待測(cè)樣品的近紅外光譜 數(shù)據(jù)，導(dǎo)入所述定量校正模型，得到驗(yàn)證集樣本的五種皂苷含量;與驗(yàn)證集樣本的五種皂苷 含量真測(cè)值的相比較，評(píng)價(jià)預(yù)測(cè)性能。
[0026]所述驗(yàn)證集樣本五種皂苷含量的檢測(cè)可采用現(xiàn)有技術(shù)方法，也可采用上述HPLC 法。
[0027] 優(yōu)選地，本發(fā)明所述HPLC法色譜條件:Agilent Zorbax SB-C18色譜柱;流動(dòng)相:流 動(dòng)相A為水，流動(dòng)相為B乙腈;梯度洗脫:0~22min，17%~19%B;22~30min，19%~27%B; 30 ~35min，27%B;35 ~47min，27% ~46%B;47 ~70min，46% ~90%B。
[0028] 具體地，本發(fā)明所述HPLC法色譜條件：Agilent Zorbax SB-C18色譜柱（4.6X 50mm，1.8μπι);流動(dòng)相:流動(dòng)相A為水，流動(dòng)相為B乙腈;梯度洗脫:0~22min，17%~19%B;22 ~30min，19% ~27%B;30 ~35min，27%B;35~47min，27%~46%B;47~70min，46%~ 90 % B;檢測(cè)波長(zhǎng)203nm;進(jìn)樣體積3yL;流速0.8mL · min-1;柱溫35 °C。
[0029] 進(jìn)一步優(yōu)選地，所述HPLC法供試品溶液制備包括：三七藥材切碎，粉碎，過(guò)280μπι 篩;精密稱定三七粉末0.5g，用70%甲醇水(v/v)40mL，超聲(工作頻率53kHz)提取1小時(shí);過(guò) 濾，用70%甲醇充分洗滌殘?jiān)?，使完全轉(zhuǎn)移;60°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干；用70%甲醇轉(zhuǎn)移至5. OmL容 量瓶中，相同溶劑定容;過(guò)〇. 22μπι尼龍濾膜，即得。
[0030] 本發(fā)明還包括上述采用近紅外光譜法快速測(cè)定三七藥材中五種皂苷含量的方法 在三七藥材、三七制劑質(zhì)量檢測(cè)及控制領(lǐng)域中的應(yīng)用。
[0031] 本發(fā)明所述三七制劑包括血塞通膠囊、血塞通注射劑、血栓通膠囊、血栓通注射劑 等。
[0032] 本發(fā)明將近紅外光譜分析技術(shù)引入到三七及其制劑的五種主要皂苷類藥效物質(zhì) 的檢測(cè)中，實(shí)現(xiàn)了對(duì)這五種主要藥效物質(zhì)的快速測(cè)定，與傳統(tǒng)的檢測(cè)方法相比，大大縮短了 測(cè)試時(shí)間，節(jié)省了大量的人力物力。本發(fā)明有利于提高三七藥材及其制劑質(zhì)量控制水平，可 在三七藥材檢測(cè)及三七總皂苷類制劑的生產(chǎn)過(guò)程中推廣使用。
[0033] 本發(fā)明通過(guò)選擇三七樣本的近紅外光譜中的五種皂苷的光譜波段，提取有效的特 征光譜波段，該特征光譜波段與按照現(xiàn)有常規(guī)方法測(cè)定的五種皂苷具有良好的相關(guān)性，可 有效的監(jiān)控三七及其制劑五種皂苷含量。本發(fā)明通過(guò)采用Chauvenet檢驗(yàn)剔除光譜異常樣 本，采用一階導(dǎo)濾波對(duì)光譜進(jìn)行預(yù)處理，以篩選信息，減少噪音，提高該方法檢測(cè)的準(zhǔn)確性 和精確度。本發(fā)明所涉及的五種藥效皂苷是三七總皂苷類制劑的主要藥效成分，且為三七 總皂苷類制劑的質(zhì)控指標(biāo)故可為三七藥材及其制劑質(zhì)量控制提供快速、高效的技術(shù)方法， 減輕檢驗(yàn)工作量。
【附圖說(shuō)明】
[0034]圖1為實(shí)驗(yàn)例1中三七藥材粉末的近紅外漫反射光譜圖；
[0035]圖2實(shí)驗(yàn)例1中人參皂苷Rd定量模型的主成分?jǐn)?shù)和RMSECV關(guān)系圖；
[0036] 圖3為實(shí)驗(yàn)例1中五種皂苷模型預(yù)測(cè)值與參考值相關(guān)圖。
【具體實(shí)施方式】
[0037] 以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體 技術(shù)或條件者，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的技術(shù)或條件，或者按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。所用 試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可通過(guò)正規(guī)渠道商購(gòu)買得到的常規(guī)產(chǎn)品。
[0038] 如無(wú)特殊說(shuō)明，以下實(shí)驗(yàn)例及實(shí)施例所用儀器及試劑：
[0039] Antaris近紅外光譜儀(Thermo公司，美國(guó)），配備積分球漫反射采樣裝置和RESULT 3.0光譜采集軟件，用于采集樣本中的近紅外光譜。
[0040] 安捷倫1100系列HPLC系統(tǒng)(Agilent公司，美國(guó)），配有四元溶劑栗、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱 溫箱、可變波長(zhǎng)紫外光檢測(cè)器。三七皂苷R1、人參皂苷Rgl、人參皂苷Re、人參皂苷Rbl和人參 皂苷Rd五種皂苷標(biāo)準(zhǔn)品（上海融禾醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司，純度2 98%)。
[0041] 液相用水為超純水(Millipore)，色譜乙腈(Merck，Germany)，其它試劑為分析純。
[0042] 實(shí)驗(yàn)例1
[0043] 1樣本采集:取173組三七不同部位(包括三七剪口、主根、筋條、須根等部位）、不同 產(chǎn)地(包括文山州、紅河州、昆明市、玉溪市等產(chǎn)地）、不同大小規(guī)格的三七樣品，真空干燥， 粉碎后過(guò)280μηι篩。
[0044] 2 方法
[0045] 2.1用HPLC法測(cè)定樣本中五種藥效皂苷含量
[0046] 2.1.1供試品溶液制備：精密稱定三七粉末0.5g，用70 %甲醇水(v/v)40mL，超聲 (工作頻率53kHz)提取1小時(shí)。過(guò)濾，用70 %甲醇充分洗滌殘?jiān)?，使完全轉(zhuǎn)移。60°C下旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)至干。用70%甲醇轉(zhuǎn)移至5.OmL容量瓶中，相同溶劑定容。過(guò)0.22μπι尼龍濾膜，即得。
[0047] 2 · 1 · 2色譜條件：Agilent Zorbax SB-C18色譜柱（4· 6 X 50mm，1 · 8μηι);流動(dòng)相水 (Α)-乙腈（Β)，梯度洗脫（0~22min，17%~19%Β;22~30min，19%~27%Β;30~35min， 27%B; 35~47min，27% ~46%B;47~70min，46% ~90%B);檢測(cè)波長(zhǎng)203nm;進(jìn)樣體積3yL; 流速〇.8mL · mirT1;柱溫35°C。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算三七樣本中五種藥效阜苷含量。
[0048] 2.2樣本及近紅外光譜采集
[0049]光譜采集條件:波數(shù)范圍4，000-10，OOOcnf1，掃描次數(shù)64次，分辨率4CHT1，參比光 譜為空氣。三七藥材粉末的近紅外漫反射光譜圖如圖1所示。
[0050] 3結(jié)果與討論
[0051] 3.1近紅外光譜數(shù)據(jù)預(yù)處理方法
[0052]根據(jù)Chauvenet檢驗(yàn)剔除光譜異常樣本，然后隨機(jī)劃分校正集152例和驗(yàn)證集16 例。采用全波段PLSR建模，用一階導(dǎo)濾波對(duì)光譜進(jìn)行預(yù)處理，各皂苷皆為全波段建模。三七 皂苷R1，人參皂苷Rgl，人參皂苷Re，人參皂苷Rbl和人參皂苷Rd的主成分?jǐn)?shù)分別為7個(gè)、7個(gè)、 7個(gè)、7個(gè)和8個(gè)。
[0053] 3.2定量校正模型的建立方法
[0054]為了除去近紅外光譜中的噪音和干擾。采用全波段PLSR建模，分別比較了未經(jīng)光 譜預(yù)處理、一階導(dǎo)數(shù)、二階導(dǎo)數(shù)、多元散射校正(MSC)和標(biāo)準(zhǔn)正則變換(SNV)這五種光譜預(yù)處 理方法。結(jié)果如表卜表5所不，結(jié)果顯不一階導(dǎo)濾波對(duì)五種阜苷定量結(jié)果較好。其中RMSEC表 示校正集均方根誤差;RMSEP表示預(yù)測(cè)集均方根誤差。
[0055] 表1 R1光譜預(yù)處理結(jié)果比較 [0056]
[0057] 表2 Rgl光譜預(yù)處理結(jié)果比較
[0058]
[0059] 表3 Re光譜預(yù)處理結(jié)果比較
[0060]
[0061 ] 表4 Rbl光譜預(yù)處理結(jié)果比較
[0062]
[0063] 表5 Rd光譜預(yù)處理結(jié)果比較
[0064]
[0065] 3.3光譜波段的選擇
[0066]雖然PLSR方法可以一定程度消除光譜的共線性，仍然有必要對(duì)建模波段進(jìn)行優(yōu) 化。通過(guò)比較了不同波段的建模效果，結(jié)果見(jiàn)表6-表10。五種皂苷皆為全波段建模較優(yōu)。 [0067]表6 R1波段建模效果比較
[0068]
[0069] 表7 Rgl波段建模效果比較
[0070]
[0071]表8 Re波段建模效果比較 [0072]
[0073]表9 Rbl波段建模效果比較
[0074]
[0075]表10 Rd波段建模效果比較
[0076]
[0077] 3.4最佳主成分?jǐn)?shù)的確定
[0078]根據(jù)交叉驗(yàn)證均方根誤差RMSECV判斷PLSR的主成分?jǐn)?shù)，圖2為人參皂苷Rd定量模 型的主成分?jǐn)?shù)和交叉驗(yàn)證均方根殘差（RMSECV)關(guān)系圖，當(dāng)主成分?jǐn)?shù)為8時(shí)，RMSECV趨于穩(wěn) 定。同理，其他皂苷成分的主成分?jǐn)?shù)分別為:R1，7個(gè);Rgl，7個(gè);Re，7個(gè);Rb 1，7個(gè)。
[0079] 3.5模型預(yù)測(cè)結(jié)果
[0080]采用PLSR方法建立定量校正模型，以預(yù)測(cè)相關(guān)系數(shù)R和預(yù)測(cè)均方根誤差RMSEP為指 標(biāo)評(píng)價(jià)模型預(yù)測(cè)性能。
[0081 ] 運(yùn)用偏最小二乘回歸法(PLSR)將152例校正集樣品的NIR光譜與HPLC法測(cè)得的五 種皂苷含量進(jìn)行回歸關(guān)聯(lián)，建立五種皂苷的最優(yōu)近紅外定量校正模型。將其余16例驗(yàn)證集 樣品的近紅外光譜輸入定量校正模型，計(jì)算五種皂苷的含量，并與HPLC法測(cè)定值進(jìn)行比較， 以預(yù)測(cè)均方根誤差RMSEP為指標(biāo)評(píng)價(jià)模型預(yù)測(cè)性能，三七皂苷R1、人參皂苷Rgl、Re、Rbl和Rd 的RMSEP分別為2.50，3.73，1.41，3.10和1.00。各個(gè)回歸模型的預(yù)測(cè)值和參考值之間的相關(guān) 圖如圖3所示。圖3中，1?1、1^1、1^、肋1、1?(1分別表示三七皂苷1?1、人參皂苷1^1、人參皂苷1^、 人參阜苷Rbl和人參阜苷Rd; Calibration為校正集，Validation為驗(yàn)證集。
[0082]三七皂苷R1、人參皂苷1^1、1^、1^1和1?(1在校正模型中的預(yù)測(cè)相關(guān)系數(shù)(1〇分別為 0·9463，0·9718，0·9347，0·9596和0·9892。
[0083] 3.6定量分析模型的應(yīng)用
[0084]在選定的光譜預(yù)處理和波段條件下，對(duì)三七藥材中五種藥效皂苷含量進(jìn)行預(yù)測(cè)。 本三七藥材漫反射近紅外定量模型，具有較高的預(yù)測(cè)精度，五種皂苷成分(三七皂苷R1、人 參皂苷Rgl、Re、Rbl和Rd)的預(yù)測(cè)相關(guān)系數(shù)均大于0.93。而且檢測(cè)指標(biāo)與三七總皂苷類制劑 的質(zhì)控指標(biāo)一致，增加了方法的實(shí)用性。該方法適合在三七總皂苷類制劑生產(chǎn)線旁快速準(zhǔn) 確的投料藥材的含量信息，為制劑的生產(chǎn)提供參考。同時(shí)，該方法也可以用于三七藥材采購(gòu) 階段的質(zhì)量檢測(cè)。
[0085]雖然，上文中已經(jīng)用一般性說(shuō)明及具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在 本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的。因 此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 采用近紅外光譜法快速測(cè)定三七藥材中五種皂苷含量的方法，其特征在于，包括以 下步驟： 1) 收集不同批次的三七藥材或三七藥材提取物或三七制劑，得到校正集樣本； 2) 采集所述校正集樣本的近紅外光譜數(shù)據(jù)，采用一階導(dǎo)濾波法進(jìn)行預(yù)處理，獲取特征 近紅外光譜數(shù)據(jù)； 3) 用HPLC法測(cè)定所述校正集樣本中三七皂苷R1、人參皂苷Rgl、人參皂苷Re、人參皂苷 Rbl和人參皂苷Rd的含量； 4) 采用偏最小二乘法建立步驟2)中所述校正集樣本的特征近紅外光譜數(shù)據(jù)與步驟3) 中所述五種皂苷含量之間的定量校正模型； 5) 按照步驟2)相同的方法采集待測(cè)樣品的近紅外光譜數(shù)據(jù)，導(dǎo)入所述定量校正模型， 得到待測(cè)樣品的五種皂苷含量。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述五種皂苷成分的均以4，000-10，000cm 4全波段建模。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，光譜采集方式為：積分球漫反射采樣； 采集條件:波數(shù)范圍4，000-10，OOOcnf 1，掃描次數(shù)64次，分辨率4cnf1，參比光譜為空氣。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，在對(duì)所采集的近紅外光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù) 處理前還包括剔除光譜異常樣本的步驟;優(yōu)選地，采用Chauvenet檢驗(yàn)剔除光譜異常樣本。5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，以交叉驗(yàn)證均方根誤差RMSECV為指標(biāo) 確定最佳主成分?jǐn)?shù);優(yōu)選地，三七皂苷R1，人參皂苷Rgl，人參皂苷Re，人參皂苷Rbl、人參皂 苷Rd的主成分?jǐn)?shù)分別為7個(gè)、7個(gè)、7個(gè)、7個(gè)、8個(gè)。6. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步驟4)中，還包括對(duì)所建立的定量 校正模型的預(yù)測(cè)性能進(jìn)行評(píng)價(jià)的步驟；所述評(píng)價(jià)指標(biāo)包括相關(guān)系數(shù)R、預(yù)測(cè)均方根誤差 RMSEP;進(jìn)一步地，若R值接近于1，RMSEP值越小，則所述定量校準(zhǔn)模型適用于所述待測(cè)樣品 的檢測(cè);反之，則不適用。7. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述批次中產(chǎn)地包括文山州、紅河州、 昆明市、玉溪市;所述批次中部位包括三七剪口、主根、筋條、須根;所述批次中主根規(guī)格包 括至少10頭。8. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，在進(jìn)行近紅外光譜采集前對(duì)樣品進(jìn)行 預(yù)處理:將三七藥材樣品真空干燥，粉碎后過(guò)280μπι篩，得到三七藥材粉末。9. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述HPLC法色譜條件:Agilent Zorbax SB-C18色譜柱;流動(dòng)相:流動(dòng)相A為水，流動(dòng)相為B乙腈;梯度洗脫:0~22min，17 %~19 %B; 22 ~30min，19% ~27%B;30 ~35min，27%B;35~47min，27%~46%B;47~70min，46%~ 90%B〇10. 權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所述的方法在三七藥材及三七總皂苷類制劑的質(zhì)量檢測(cè)及控 制領(lǐng)域中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】G01N21/359GK105866064SQ201610284900
【公開(kāi)日】2016年8月17日
【申請(qǐng)日】2016年5月3日
【發(fā)明人】方同華, 程翼宇, 瞿海斌, 楊振中, 許照芹, 席桂才, 張永年, 王春生, 孫海峰, 孫淑娜, 季慶亮, 徐秀杰, 周廣紅, 賈文娟, 王維龍
【申請(qǐng)人】哈爾濱珍寶制藥有限公司