降壓保健食品中硝苯地平快速檢測法及檢測卡研制方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種降壓類保健食品中硝苯地平快速檢測法及檢測卡研制方法。所述方法首先用提取劑A和提取液B浸泡待測樣品，振蕩后靜置提取硝苯地平；其次，取浸泡液用微孔濾膜進行過濾；第三，取濾液若干，加入等體積的樣品稀釋液C，得到待檢樣品處理液；第四，取70微升待檢樣品處理液滴加到硝苯地平檢測卡上，觀察試紙顏色的變化，若試紙呈現(xiàn)黃色或橙紅色，則初步證明待測樣品中含有硝苯地平，可與標(biāo)準(zhǔn)色階圖譜進行對比定性；最后，配合手持式金標(biāo)顯色儀可進行定量檢測。所述檢測卡研制方法包括以下步驟：制備試紙基材、制備顯色液、浸泡試紙基材、制備檢測試紙、制備檢測卡。所述方法適合現(xiàn)場快速檢測降壓類保健食品中化學(xué)成分硝苯地平。
【專利說明】
降壓保健食品中硝苯地平快速檢測法及檢測卡研制方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于食品安全檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種降壓類保健食品中硝苯地平快速檢測法及檢測卡研制方法。
【背景技術(shù)】
[0002]近年來，隨著百姓經(jīng)濟條件改善和健康意識提升，保健食品的市場前景一片大好。但是，不法商販為了追求所謂的療效，從而謀求巨額利潤，往往在宣傳為純中藥制劑的保健食品中違法添加化學(xué)成分。
[0003]目前，市場上常見的降壓類保健產(chǎn)品多數(shù)被宣傳為茶飲或純中藥制劑，但是不法商販為在短期內(nèi)達到降低血壓的目的，部分產(chǎn)品被人為地添加鈣拮抗劑硝苯地平。
[0004]硝苯地平，化學(xué)名為2,6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-1,4-二氫-3,5-吡啶二甲酸二甲酯，分子式為C17H18N2O6ο硝苯地平是一種鈣通道阻滯藥，為黃色結(jié)晶性粉末；由于它能阻滯細胞膜慢通道，阻止鈣離子跨膜流入細胞內(nèi)，并阻止鈣離子從細胞內(nèi)貯庫釋放，使細胞處于缺鈣狀態(tài)，故又稱為慢通道阻滯劑。硝苯地平用于治療各類高血壓及頑固性充血性心衰，也常用于預(yù)防或治療心絞痛。本藥主要損害心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)。目前已經(jīng)多次在保健食品中檢出硝苯地平，在保健食品中添加化學(xué)成分硝苯地平，消費者在不知情的情況下，長期服用含有硝苯地平的降壓類保健食品，針對患有冠心病、心絞痛或心肌梗塞的高血壓患者持續(xù)多次服用后，易引起心悸、竇性心動過速、舌根麻木、口干、發(fā)汗、頭痛、惡心、食欲不振等不良反應(yīng)。因此，及時檢測降壓類保健食品中是否還有化學(xué)成分硝苯地平及其含量，對于維護消費者身心健康、打擊不法商販、維護市場秩序具有重要意義。
[0005]目前檢測硝苯地平的方法主要包括高效液相色譜法、液-質(zhì)聯(lián)用法、薄層色譜法、質(zhì)譜法，這些方法存在的共同問題是檢測耗時長、操作復(fù)雜、對檢測人員專業(yè)素質(zhì)要求高，因而推廣應(yīng)用困難，應(yīng)用范圍受到局限。市面上針對降壓類保健食品中化學(xué)成分硝苯地平的快速檢測方法較少，只有二氫吡啶類快篩試劑盒可以進行硝苯地平的快速檢測，但該快篩試劑盒只能進行定性檢測，不能進行定量檢測。試紙法適用于保健食品的現(xiàn)場快速檢測化學(xué)成分硝苯地平。
[0006]而且目前在對硝苯地平實施檢測前，樣品前處理過程復(fù)雜繁瑣。基本過程是:取硝苯地平片2片，去糖衣研細，置50ml量瓶中，加流動相適量，超聲2min使其溶解，加流動相稀釋至刻度，搖勻，以0.22um濾膜過濾，精密量取續(xù)濾液3ml，置于1ml量瓶中，加流動相至刻度，作為樣品前處理液，其樣品去糖衣的過程相當(dāng)費時，一顆含糖衣的片劑去糖衣過程約需要30分鐘以上。
[0007]食品中危害因子及非法添加藥物智能化綜合檢測儀:簡稱為手持式檢測儀，利用反射光度法與顯色物跟檢測成分濃度呈正比的原理，通過內(nèi)部公式計算得到檢測成分的濃度數(shù)值的儀器。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]為了解決現(xiàn)有的針對降壓類保健食品是否含有化學(xué)成分硝苯地平的檢測方法存在的誤檢漏檢、只能定性檢測、檢測成本高、耗時長、對人員專業(yè)素質(zhì)要求高及樣品前處理復(fù)雜繁瑣等問題，本發(fā)明提供一種降壓類保健食品中硝苯地平快速檢測法及檢測卡研制方法。利用所述檢測卡，依據(jù)所述檢測方法，可現(xiàn)場快速檢測降壓類保健食品中硝苯地平的含量;大幅度降低了誤檢與漏檢率;硝苯地平檢測試紙對應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)色階圖譜可定性，配合手持金標(biāo)檢測儀可以進行定量分析；由于其便攜、操作簡單等特點，更適合現(xiàn)場快速對降壓類保健食品非法摻入的化學(xué)藥物硝苯地平進行鑒別檢測，并且對檢測人員的專業(yè)素質(zhì)要求不高，待檢樣品的前處理過程也得到大幅簡化。
[0009]為實現(xiàn)上述目標(biāo)，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
1、反應(yīng)原理
硝苯地平(富含吡啶環(huán)的六元環(huán)化合物)溶于丙酮后與氫氧化鈉反應(yīng)，生成橙紅色的絡(luò)合物，如圖1所示。硝苯地平含量濃度與顯色深度成正比，制備標(biāo)準(zhǔn)色階圖進行對照即可目測進行定性對比，又可配合手持式金標(biāo)顯色儀依據(jù)反射光度法原理可進行定量檢測。
[0010]2、檢測方法
一種降壓類保健食品中硝苯地平快速檢測方法，所述方法首先用提取劑A和提取液B浸泡待測樣品，振蕩后靜置提取硝苯地平;其次，取浸泡液用微孔濾膜進行過濾;第三，取濾液若干，加入等體積的樣品稀釋液C，得到待檢樣品處理液;第四，取70微升待檢樣品處理液滴加到硝苯地平檢測卡上，觀察試紙顏色的變化，若試紙呈現(xiàn)黃色或橙紅色，則初步證明待測樣品中含有硝苯地平，可與標(biāo)準(zhǔn)色階圖譜進行對比定性;最后，配合手持式金標(biāo)顯色儀可進行定量檢測。所述方法適合現(xiàn)場快速檢測降壓類保健食品中化學(xué)成分硝苯地平。
[0011]所述提取劑A為活性炭、聚酰胺粉、羥基磷灰石混合物，各組分的質(zhì)量比為8:1:1，提取液B是濃度為80?95%的丙酮，樣品稀釋液C是濃度為95%的乙醇。
[0012]所述方法包括以下步驟:
1)待測樣品前處理:針對兩類待測樣品分別進行前處理操作，制備待檢樣品處理液；
2)定性檢測:取70微升待檢樣品處理液滴到硝苯地平檢測卡上，若試紙呈現(xiàn)黃色或橙紅色，則初步證明待測樣品中含有硝苯地平，可與標(biāo)準(zhǔn)色階圖譜進行對比定性；
3)定量檢測:在15分鐘定性檢測后，將檢測卡放置于食品中危害因子及非法添加藥物智能化綜合檢測儀中檢測，利用反射光度法原理，讀取樣品中硝苯地平對應(yīng)的濃度。
[0013]所述兩類待測樣品分別是指茶葉類降壓保健飲品和膠囊類降壓保健食品。
[0014]針對茶葉類降壓保健飲品的前處理方法是:準(zhǔn)確稱取0.5g樣品于5 ml試管中，加Λ0.1g提取劑A和1.5ml提取液B，震蕩搖勻2分鐘，靜置10分鐘，用0.45um微孔濾膜過濾后，取0.25 ml濾液加入樣品稀釋液C0.25ml，即為待檢樣品處理液；
針對膠囊類降壓保健食品的前處理方法是:取I粒膠囊內(nèi)容物于試管中，加入0.1g提取劑A和1.5 ml提取液B，震蕩搖勻2分鐘，靜置10分鐘，用0.45um微孔濾膜過濾后，取0.25 ml濾液加入樣品稀釋液C0.25 ml,即為待檢樣品處理液。
[0015]—種降壓類保健食品中硝苯地平快速檢測卡研制方法，包括以下步驟:
1)制備試紙基材:以中性濾紙作為硝苯地平檢測試紙的基材；
2)制備顯色液:分別制備試劑顯色液I和試劑顯色液2;
3)浸泡試紙基材:首先，將硝苯地平檢測試紙基材放入試劑顯色液I中浸泡10分鐘；其次，將硝苯地平檢測試紙基材放在溫度為37攝氏度的干燥器中，烘干20分鐘后晾涼;最后，將硝苯地平檢測試紙基材放入試劑顯色液2中浸泡5分鐘；
4)制備檢測試紙:將浸泡后的硝苯地平檢測試紙基材放在溫度為-55攝氏度低溫真空干燥箱中干燥3小時，得到硝苯地平檢測試紙；
5)制備檢測卡:將檢測試紙裁剪成條狀，制作檢測卡。
[0016]所述顯色液I的組分為:氫氧化鈉(I?10%)和烷基糖苷(APG0810)(5?20%)的混合溶液組成;各組分的體積比是10:1。
[0017]所述顯色液2的組分為:碳酸氫鈉(I?10%)和脂肪醇醚硫酸鹽(I?10%)的混合溶液組成;各組分的體積比是2:1。
[00?8] 所述硝苯地平檢測卡的檢出限為2.5mg/g，檢測范圍為1.6-7.5mg/g ；所述硝苯地平檢測卡與所述食品中危害因子及非法添加藥物智能化綜合檢測儀相配合可進行硝苯地平定量檢測。
[0019]本發(fā)明的優(yōu)點和有益效果為:
1)快速檢測:為了彌補高端儀器在檢測降壓類保健食品中化學(xué)成分硝苯地平時成本高、耗時較長、對檢測人員素質(zhì)要求高等缺點，本發(fā)明研制了硝苯地平快速檢測卡，可現(xiàn)場快速檢測降壓類保健食品中化學(xué)成分硝苯地平，檢測時間僅為15分鐘，填補了降壓類保健食品快速檢測方法的空白；
2)簡化了降壓類保健食品的樣品前處理過程:由于降壓類的保健食品樣品中分別富含茶多酚、葉綠素或是其他成分的配藥，有必要對樣品色素以及干擾成分進行相關(guān)的前處理，避免進行試紙檢測時影響其快檢試紙的檢測結(jié)果;本發(fā)明利用物理吸附以及萃取的原理將檢測干擾因子去除，其中物理吸附吸收相關(guān)干擾因子，溶液萃取將提取液中的待檢成分分離出來，其樣品前處理過程不超過30min，同時將硝苯地平成分用提取液萃取出來進行后期檢測；
3)定量檢測:硝苯地平檢測卡配合食品中危害因子及非法添加藥物智能化綜合檢測儀進行讀數(shù)，可進行定量檢測。
【附圖說明】
[0020]下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明作進一步說明。
[0021]圖1為硝苯地平溶于丙酮后與氫氧化鈉反應(yīng)，生成橙紅色絡(luò)合物的原理圖。
[0022]圖中，I為橙紅色絡(luò)合物。
[0023]圖2為本發(fā)明所述一種降壓類保健食品中硝苯地平快速檢測方法的流程圖。
[0024]圖3為本發(fā)明所述一種降壓類保健食品中硝苯地平快速檢測方法的操作示意圖。
[0025]圖中，I是手柄，2是硝苯地平檢測試紙，3是PVC板，4是滴加待檢樣品處理液。
[0026]圖4為本發(fā)明所述一種降壓類保健食品中硝苯地平快速檢測卡研制方法的流程圖。
【具體實施方式】
[0027]實施例1:茶類降壓保健飲品中硝苯地平快速檢測方法參見圖2、圖3，檢測過程如下: 1)待測樣品前處理:準(zhǔn)確稱取0.5g樣品于5 ml試管中，加入0.1g提取劑A和1.5ml提取液B，震蕩搖勻2分鐘，靜置10分鐘，用0.45um微孔濾膜過濾后，取0.25 ml濾液加入樣品稀釋液C0.25ml，即為待檢樣品處理液；
2)定性檢測:將70ul稀釋液滴加到硝苯地平試紙卡上，若試紙呈現(xiàn)橙紅色，則初步證明待測樣品中含有硝苯地平，可與標(biāo)準(zhǔn)色階圖譜進行對比定性；
3)定量檢測:在15分鐘定性檢測后，將檢測卡放置于食品中危害因子及非法添加藥物智能化綜合檢測儀中檢測，利用反射光度法原理，讀取樣品中硝苯地平對應(yīng)的濃度。
[0028]實施例2:膠囊類降壓保健食品中硝苯地平快速檢測方法參見圖2、圖3，檢測過程如下:
I)待測樣品前處理:取I粒膠囊內(nèi)容物于試管中，加入0.1g提取劑A和1.5 ml提取液B，震蕩搖勻2分鐘，靜置10分鐘，用0.45um微孔濾膜過濾后，取0.25 ml濾液加入樣品稀釋液C
0.25 ml，即為待檢樣品處理液。
[0029]2)定性檢測:將70ul稀釋液滴加到硝苯地平試紙卡上，若試紙呈現(xiàn)橙紅色，則初步證明待測樣品中含有硝苯地平，可與標(biāo)準(zhǔn)色階圖譜進行對比定性；
3)定量檢測:在15分鐘定性檢測后，將檢測卡放置于食品中危害因子及非法添加藥物智能化綜合檢測儀中檢測，利用反射光度法原理，讀取樣品中硝苯地平對應(yīng)的濃度。
[0030]實施例3:硝苯地平快速檢測卡制備方法參見圖4，制備過程如下:
I)制備試紙基材:以中性濾紙作為硝苯地平檢測試紙的基材；
2 )制備顯色液:取氫氧化鈉(I?10%)溶液20ml和烷基糖苷(APG0810 ) (5?20%)溶液2ml;將各組分放入反應(yīng)器中混合制得顯色液I;取碳酸氫鈉(I?10%)溶液1ml和脂肪醇醚硫酸鹽(I?10%)溶液5ml;將各組分放入反應(yīng)器中混合制得顯色液2
3)浸泡試紙基材:首先，將硝苯地平檢測試紙基材放入試劑顯色液I中浸泡10分鐘；其次，將硝苯地平檢測試紙基材放在溫度為37攝氏度的干燥器中，烘干20分鐘后晾涼;最后，將硝苯地平檢測試紙基材放入試劑顯色液2中浸泡5分鐘；
4)制備檢測試紙:將浸泡后的硝苯地平檢測試紙基材放在溫度為-55攝氏度低溫真空干燥箱中干燥3小時，得到硝苯地平檢測試紙；
5)制備檢測卡:將檢測試紙裁剪成條狀，制作檢測卡。
[0031]最后應(yīng)說明的是:顯然，上述實施例僅僅是為清楚地說明本發(fā)明所作的舉例，而并非對實施方式的限定。對于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在上述說明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動。這里無需也無法對所有的實施方式予以窮舉。而由此所引伸出的顯而易見的變化或變動仍處于本發(fā)明的保護范圍之中。
【主權(quán)項】
1.一種降壓類保健食品中硝苯地平快速檢測方法，其特征在于:所述方法首先用提取劑A和提取液B浸泡待測樣品，振蕩后靜置提取硝苯地平;其次，取浸泡液用微孔濾膜進行過濾;第三，取濾液若干，加入等體積的樣品稀釋液C，得到待檢樣品處理液;第四，取70微升待檢樣品處理液滴加到硝苯地平檢測卡上，觀察試紙顏色的變化，若試紙呈現(xiàn)黃色或橙紅色，則初步證明待測樣品中含有硝苯地平，可與標(biāo)準(zhǔn)色階圖譜進行對比定性;最后，配合手持式金標(biāo)顯色儀可進行定量檢測;所述方法適合現(xiàn)場快速檢測降壓類保健食品中化學(xué)成分硝苯地平。2.如權(quán)利要求1所述的一種降壓類保健食品中硝苯地平快速檢測方法，其特征在于:所述提取劑A為活性炭、聚酰胺粉、羥基磷灰石混合物，各組分的質(zhì)量比為8:1:1;提取液B是濃度為80?95%的丙酮，樣品稀釋液C是濃度為95%的乙醇。3.如權(quán)利要求1所述的一種降壓類保健食品中硝苯地平快速檢測方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟: 1)待測樣品前處理:針對兩類待測樣品分別進行前處理操作，制備待檢樣品處理液； 2)定性檢測:取70微升待檢樣品處理液滴到硝苯地平檢測卡上，若試紙呈現(xiàn)黃色或橙紅色，則初步證明待測樣品中含有硝苯地平，可與標(biāo)準(zhǔn)色階圖譜進行對比定性； 3)定量檢測:在15分鐘定性檢測后，將檢測卡放置于食品中危害因子及非法添加藥物智能化綜合檢測儀中檢測，利用反射光度法原理，讀取樣品中硝苯地平對應(yīng)的濃度。4.如權(quán)利要求1或3所述的一種降壓類保健食品中硝苯地平快速檢測方法，其特征在于:所述兩類待測樣品分別是指茶葉類降壓保健飲品和膠囊類降壓保健食品。5.如權(quán)利要求1或3或4所述的一種降壓類保健食品中硝苯地平快速檢測方法，其特征在于: 1)針對茶葉類降壓保健飲品的前處理方法是:準(zhǔn)確稱取0.5g樣品于5ml試管中，加入0.1g提取劑A和1.5ml提取液B，震蕩搖勻2分鐘，靜置10分鐘，用0.45um微孔濾膜過濾后，取0.25 ml濾液加入樣品稀釋液C0.25ml，即為待檢樣品處理液； 2)針對膠囊類降壓保健食品的前處理方法是:取I粒膠囊內(nèi)容物于試管中，加入0.1g提取劑A和1.5 ml提取液B，震蕩搖勻2分鐘，靜置10分鐘，用0.45um微孔濾膜過濾后，取0.25ml濾液加入樣品稀釋液C0.25 ml,即為待檢樣品處理液。6.一種降壓類保健食品中硝苯地平快速檢測卡研制方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟: 1)制備試紙基材:以中性濾紙作為硝苯地平檢測試紙的基材； 2)制備顯色液:分別制備試劑顯色液I和試劑顯色液2; 3)浸泡試紙基材:首先，將硝苯地平檢測試紙基材放入試劑顯色液I中浸泡10分鐘；其次，將硝苯地平檢測試紙基材放在溫度為37攝氏度的干燥器中，烘干20分鐘后晾涼;最后，將硝苯地平檢測試紙基材放入試劑顯色液2中浸泡5分鐘； 4)制備檢測試紙:將浸泡后的硝苯地平檢測試紙基材放在溫度為-55攝氏度低溫真空干燥箱中干燥3小時，得到硝苯地平檢測試紙； 5)制備檢測卡:將檢測試紙裁剪成條狀，制作檢測卡。7.如權(quán)利要求6所述的一種降壓類保健食品中硝苯地平快速檢測卡研制方法，其特征在于，所述顯色液分為顯色液I和顯色液2，所述顯色液I的組分為:濃度為I?10%的氫氧化鈉和濃度為5?20%的烷基糖苷APG0810的混合溶液組成;各組分的體積比是10:1;所述顯色液2的組分為:濃度為I?10%的碳酸氫鈉和濃度為I?10%的脂肪醇醚硫酸鹽的混合溶液組成;各組分的體積比是2:1。8.如權(quán)利要求6所述的一種降壓類保健食品中硝苯地平快速檢測卡研制方法，其特征在于:所述硝苯地平檢測卡的檢出限為2.5mg/g，檢測范圍為1.6-7.5mg/g ；所述硝苯地平檢測卡與所述食品中危害因子及非法添加藥物智能化綜合檢測儀相配合可進行硝苯地平定量檢測。
【文檔編號】G01N21/17GK105866111SQ201610186016
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年3月29日
【發(fā)明人】姚世平, 劉光中, 姚洪濤, 李心樂, 周軼
【申請人】北京倍肯恒業(yè)科技發(fā)展股份有限公司