快速檢測(cè)中毒病人血液中的毒鼠強(qiáng)的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種快速檢測(cè)中毒病人血液中的毒鼠強(qiáng)的方法，旨在提供一種靈敏度好，檢測(cè)效率高的毒鼠強(qiáng)的檢測(cè)方法；其技術(shù)方案為：1)標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備；2)供試樣品的制備取血液5ml置15ml離心管中，加入5ml乙腈，漩渦震蕩2min；3200r/min離心5min，取上清液上氣質(zhì)聯(lián)用儀測(cè)定；屬于化學(xué)檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
【專利說(shuō)明】
快速檢測(cè)中毒病人血液中的毒鼠強(qiáng)的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明公開(kāi)了一種毒鼠強(qiáng)的檢測(cè)方法，具體地說(shuō)，是一種快速檢測(cè)中毒病人血液 中的毒鼠強(qiáng)的方法，屬于化學(xué)檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 毒鼠強(qiáng)(tetramine)，化學(xué)名為四亞甲基二砜四胺，為劇毒速效的滅鼠藥，無(wú)色、無(wú) 味。它對(duì)所有溫血?jiǎng)游锒加袆《?，中?guó)農(nóng)業(yè)部、衛(wèi)生部曾于1982年聯(lián)合發(fā)文嚴(yán)禁使用這些化 合物作為滅鼠藥，但仍有人使用而造成中毒事件。為給中毒病人的診斷治療提供及時(shí)可靠 的依據(jù)，有必要建立一種操作簡(jiǎn)易快速、定性準(zhǔn)確、靈敏度高的檢測(cè)方法。毒鼠強(qiáng)氣質(zhì)聯(lián)用 法作為唯一確證方法，沒(méi)有統(tǒng)一國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，傳統(tǒng)前處理過(guò)程復(fù)雜繁瑣，耗時(shí)過(guò)長(zhǎng)，通常需要 幾個(gè)小時(shí)，難以適應(yīng)突發(fā)公共衛(wèi)生事件的快速毒檢要求。而且往往會(huì)在分析復(fù)雜基質(zhì)如:人 的血液等時(shí)，由于凈化不夠，雜質(zhì)帶入系統(tǒng)，使儀器耗損嚴(yán)重，甚至引起結(jié)論判斷錯(cuò)誤。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于提供一種中毒病人血液中的毒鼠強(qiáng)的方法，該 方法靈敏度好，檢測(cè)效率高。
[0004] 為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是這樣的：
[0005] -種快速檢測(cè)中毒病人血液中的毒鼠強(qiáng)的方法，依次包括下述步驟：
[0006] 1)標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
[0007] 準(zhǔn)確稱取毒鼠強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)品5 . Omg，置于100ml容量瓶中，用乙腈溶解并定容，配成50y g/ml對(duì)照溶液；
[0008] 2)供試樣品的制備
[0009] 取血液5ml置15ml離心管中，加入5ml乙腈，漩禍震蕩2min;3200r/min離心5min，取 上清液上氣質(zhì)聯(lián)用儀測(cè)定；
[0010]所述的色譜條件如下：
[0011 ] 色譜柱:HP-5MS，20m X 0.18mm，膜厚0.18WI1;載氣為高純氦氣；進(jìn)樣量:30yl;在PTV 進(jìn)樣期間，分流排空閥控制在80ml/min的流量，進(jìn)樣完成后，分流排空閥關(guān)閉1. Omin;
[0012]所述的質(zhì)譜條件如下：
[0013] 電子轟擊離子源，電子能量70eV;掃描特征離子:m/z92、m/z 132、m/z 212、m/z 240; GC/MS接口溫度:280 °C ;離子源溫度:230 °C ;四級(jí)桿溫度：150 °C。
[0014] 所述的PTV溫度程序如下：40°C維持l.Omin，以230°C/min速率升至230°C維持 2min，以230°C/min速率升至300 °C維持7min;柱流速：以恒流模式0.5ml/min;柱溫箱:90°C 21^11，以100°(：/111111速率升至150°(：，以50°(：/111111速率升至280°(：維持4111111。
[0015] 進(jìn)一步，上述的快速檢測(cè)中毒病人血液中的毒鼠強(qiáng)的方法，所述的氣質(zhì)聯(lián)用儀采 用安捷倫7890A-5975C氣質(zhì)聯(lián)用儀。
[0016] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本申請(qǐng)?zhí)峁┑募夹g(shù)方案結(jié)合大體積進(jìn)樣、PTV進(jìn)樣，通過(guò)sim模式 進(jìn)行毒鼠強(qiáng)檢測(cè)確證。從樣品前處理到確證完成全過(guò)程耗時(shí)約20min。該方法具操作簡(jiǎn)易快 速、定性準(zhǔn)確、靈敏度高等特點(diǎn)，能應(yīng)用于應(yīng)急檢驗(yàn)，為病人搶救工作節(jié)省了寶貴的時(shí)間，降 低了成本。
【附圖說(shuō)明】
[0017]圖1是S頂模式采集毒鼠強(qiáng)的質(zhì)譜圖；
[0018]圖2是液液萃取法結(jié)合大口徑色譜柱的毒鼠強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)溶液圖譜；
[0019] 圖3是液液萃取法結(jié)合大口徑色譜柱的血液提取液圖譜；
【具體實(shí)施方式】
[0020] 下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的權(quán)利要求做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，但不構(gòu)成對(duì) 本發(fā)明的任何限制，任何人在本發(fā)明權(quán)利要求保護(hù)范圍內(nèi)所做的有限次的修改，仍在本發(fā) 明的權(quán)利要求保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0021] 本發(fā)明所涉及到的百分濃度，沒(méi)有特別說(shuō)明的，液體均為體積濃度，溶質(zhì)為固體的 指質(zhì)量濃度。
[0022] 實(shí)施例1
[0023] 1.材料與方法
[0024] 1.1儀器與試劑
[0025] 安捷倫7890A-5975C氣質(zhì)聯(lián)用儀，配有CTC多功能進(jìn)樣器、PTV進(jìn)樣口；超純水器 (ELGAPURELAB ClassicUVF);超聲波清洗器;高速離心機(jī);C18固相萃取小柱(天津博納艾杰 爾科技有限公司）
[0026]乙腈(HPLC級(jí)，美國(guó)Fisher公司），其它試劑均為分析純（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公 司）。實(shí)驗(yàn)用水為經(jīng)ELGAPURELAB ClassicUVF凈化系統(tǒng)過(guò)濾的去離子水;毒鼠強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)自 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心。
[0027] 1.2色譜條件
[0028] 色譜柱:HP-5MS(20m X 0.18_膜厚0.18WH);載氣為高純氦氣;進(jìn)樣量:30yl;在PTV 進(jìn)樣期間（〇 . 8min)，分流排空閥控制在80ml/min的流量，進(jìn)樣完成后，分流排空閥關(guān)閉 (1.0min);PTV溫度程序如下：40°C維持l.Omin，以230°C/min速率升至230°C維持2min，以 230°C/min速率升至300°C維持7min。柱流速：以恒流模式0.5ml/min。柱溫箱:90°C(2min)， 以100 °C/min速率升至150 °C，以50 °C/min速率升至280 °C維持4min。
[0029] 采用PTV進(jìn)樣口的溶劑吹掃功能與HP-5MS(20m X 0.18mm膜厚0.18wn)，可在保證靈 敏度的基礎(chǔ)上，加快出峰時(shí)間，從而減少分析時(shí)間。
[0030] 相對(duì)于普通進(jìn)樣器與普通的氣相分流不分流進(jìn)樣口，一般有效進(jìn)樣量為liil;但本 申請(qǐng)采用了大體積進(jìn)樣(50u 1)與PTV進(jìn)樣模式，為達(dá)到提取后不需對(duì)提取液進(jìn)行濃縮，即可 上樣，并在進(jìn)樣口端實(shí)現(xiàn)溶劑吹掃，使目標(biāo)物聚焦后進(jìn)入色譜柱，大大節(jié)省了前處理的時(shí) 間。
[0031] 2.3質(zhì)譜條件
[0032] 電子轟擊(EI)離子源，電子能量70eV;掃描特征離子:m/z92、m/z 132、m/z 212、m/ z 240(質(zhì)譜圖見(jiàn)圖1);GC/MS接口溫度:280°C ;離子源溫度:230°C ;四級(jí)桿溫度：150°C。
[0033] 2.4標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
[0034]準(zhǔn)確稱取毒鼠強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)品5.Omg，置于100ml容量瓶中，用乙腈溶解并定容，配成50y g/ml對(duì)照溶液。
[0035] 2.5供試樣品的制備
[0036] 取血液5ml置15ml離心管中，加入5ml乙腈，漩禍震蕩2min;3200r/min離心5min，取 上清液上氣質(zhì)聯(lián)用儀測(cè)定。
[0037] 3 結(jié)果
[0038]將毒鼠強(qiáng)加入空白血液樣品中，采用"2.5"節(jié)方法進(jìn)行處理，測(cè)定毒鼠強(qiáng)在血液中 的回收率，每種添加量水平測(cè)定3次，取平均值作為實(shí)際檢出，結(jié)果見(jiàn)表1。
[0039] 結(jié)果表明血液回收率為80%~93%，方法準(zhǔn)確率高。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種快速檢測(cè)中毒病人血液中的毒鼠強(qiáng)的方法，其特征在于，依次包括下述步驟： 1) 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 準(zhǔn)確稱取毒鼠強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)品5.Omg，置于100mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容，配成50μg/ml 對(duì)照溶液； 2) 供試樣品的制備 取血液5ml置15ml離心管中，加入5ml乙腈，漩禍震蕩2min;3200r/min離心5min，取上清 液上氣質(zhì)聯(lián)用儀測(cè)定； 所述的色譜條件如下： 色譜柱:HP-5MS，20m X 0.18mm，膜厚0.18μπι;載氣為高純氦氣;進(jìn)樣量:30μ1;在PTV進(jìn)樣 期間，分流排空閥控制在80ml/min的流量，進(jìn)樣完成后，分流排空閥關(guān)閉1.0 min; 所述的質(zhì)譜條件如下： 電子轟擊離子源，電子能量70eV;掃描特征離子:m/z92、m/z 132、m/z 212、m/z 240; GC/MS接口溫度:280°C ;離子源溫度:230°C ;四級(jí)桿溫度：150°C。 所述的PTV溫度程序如下：40°C維持l.Omin，以230°C/min速率升至230°C維持2min，以 230°C/min速率升至300 °C維持7min;柱流速：以恒流模式0.5ml/min;柱溫箱:90°C 2min，以 100°C/min速率升至150°C，以50°C/min速率升至280°C維持4min。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)中毒病人血液中的毒鼠強(qiáng)的方法，其特征在于，所述 的氣質(zhì)聯(lián)用儀采用安捷倫7890A-5975C氣質(zhì)聯(lián)用儀。
【文檔編號(hào)】G01N30/06GK105929042SQ201610235342
【公開(kāi)日】2016年9月7日
【申請(qǐng)日】2016年4月15日
【發(fā)明人】陳學(xué)松, 羅達(dá)龍, 劉慧妍
【申請(qǐng)人】廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗(yàn)所