一種大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法，包括以下步驟：步驟1：將大青葉粉碎后采用ASE萃取法萃取得到萃取液；步驟2：將萃取液稀釋、離心、過(guò)濾后，得到上清液；步驟3：將上清液采用液相色譜法進(jìn)行分析；其中，液相色譜法的分析條件為：a)儀器：液相色譜儀；b)色譜柱規(guī)格：碳18液相色譜柱4.6mm*250mm5μm；c)柱溫：35℃；d)流速：1mL/min；e)流動(dòng)相：甲醇和0.1wt％醋酸溶液的混合物，其中甲醇和0.1wt％醋酸溶液的體積比為60:40；f)檢測(cè)波長(zhǎng)：290nm。本發(fā)明提供了一種大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法，該方法操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)精度高。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
一種大青葉中1$玉紅的測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明涉及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)領(lǐng)域，特別是一種大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 2015年藥典記錄了大青葉中靛玉紅的提取和測(cè)定方法:取本品細(xì)粉0.25g，精密稱(chēng) 定，置索氏提取器中，加三氯甲烷，浸泡15小時(shí)，加熱回流提取至提取液無(wú)色?；厥杖軇┲?干，殘?jiān)蛹状际谷芙獠⑥D(zhuǎn)移至l〇〇ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。
[0003] 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇一水（75 : 25)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為 289nm。理論板數(shù)按靛玉紅峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。
[0004] 此外，在中國(guó)文獻(xiàn)《大青葉中靛玉紅的提取工藝研究》公開(kāi)了一種大青葉中靛玉紅 的提取方法，其采用超聲提取，得到了較好的提取效果。但是其操作時(shí)間長(zhǎng)，且用甲醇和氯 仿作為稀釋溶劑，氯仿作為控制藥品，需要嚴(yán)格控制其使用量。
[0005] 為了克服藥典和現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，需要尋找一種可靠的提取分析方法來(lái)對(duì)大青 葉中靛玉紅進(jìn)行提取和測(cè)定。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種中靛玉紅的測(cè)定方法，該方法操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)精度比藥 典要高。
[0007 ]本發(fā)明提供的技術(shù)方案為:一種大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法，包括以下步驟：
[0008] 步驟1:將大青葉粉碎后米用ASE萃取法萃取得到萃取液；
[0009] 步驟2:將萃取液稀釋、離心、過(guò)濾后，得到上清液；
[0010] 步驟3:將上清液采用液相色譜法進(jìn)行分析；
[0011] 其中，液相色譜法的分析條件為：
[0012] a)儀器:液相色譜儀
[0013] b)色譜柱規(guī)格:碳18液相色譜柱4 ? 6mm*250_5iim
[0014] (3)柱溫：35°〇
[0015] d)流速：lmL/min
[0016] e)流動(dòng)相：甲醇和0. lwt%醋酸溶液的混合物，其中甲醇和0. lwt%醋酸溶液的體 積比為60:40
[0017] f)檢測(cè)波長(zhǎng)：290nm。
[0018] 在上述的大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法中，所述的步驟1具體為：
[0019] S11:將大青葉粉碎后，過(guò)篩；
[0020] S12:稱(chēng)取SI 1中獲得的1重量份大青葉粉，與0.5重量份硅藻土混合均勻待用；
[0021] S13:將S12中的混合物移入預(yù)先放好過(guò)濾膜的萃取池中，加入適量的硅藻土至達(dá) 到萃取池的池口；蓋上萃取池的蓋子進(jìn)行靜態(tài)萃取;萃取結(jié)束后得到萃取液；
[0022] 萃取條件為：萃取溶劑為正己烷和乙酸乙酯的混合物，正己烷和乙酸乙酯的體積 比為1:1;萃取溫度80°C ;靜態(tài)萃取時(shí)間7min;沖洗體積60% ;靜態(tài)循環(huán)次數(shù)3次。
[0023]在上述的大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法中，所述的萃取池的體積為10ml。
[0024]在上述的大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法中，所述的靜態(tài)萃取的壓力為1500psi。
[0025]在上述的大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法中，所述的靜態(tài)萃取的吹掃時(shí)間為60s。
[0026] 在上述的大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法中，步驟2具體為:將萃取液用己烷和乙酸乙 酯的混合物稀釋后在1500r/min的條件下離心并過(guò)濾，保留濾液，其中，正己烷和乙酸乙酯 的體積比為1:1。
[0027] 在上述的大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法中，液相色譜分析所用的儀器為T(mén)hermoU-3000雙三元液相液相色譜儀。
[0028]在上述的大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法中，所述的ASE萃取法所采用的儀器為 ASE350快速溶劑萃取儀。
[0029] 本發(fā)明在采用上述技術(shù)方案后，其具有的有益效果為：
[0030] 本發(fā)明的檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)單，精度比藥典方法的精度更高，重復(fù)性好。
【具體實(shí)施方式】
[0031] 下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，但不構(gòu)成對(duì) 本發(fā)明的任何限制。
[0032] 實(shí)施例1:
[0033]將大青葉樣品經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，過(guò)三號(hào)篩，約lg，精密稱(chēng)定，與0.5g硅藻土混合均勻， 待用，移入到預(yù)先放好過(guò)濾膜的ASE?10ml萃取池中再加入適量硅藻土，輕輕振搖使之與池 口在同一水平線上，擰緊萃取池上蓋。萃取結(jié)束后，把萃取液轉(zhuǎn)移于50ml容量瓶中，用正己 烷和乙酸乙酯(體積比1:1)的混合溶液稀釋至刻度，在15000r/min下離心5min，取上清液， 進(jìn)入LC測(cè)定。
[0034]萃取條件(見(jiàn)表1)為：
[0035]表 1
[0037] 分析方法為L(zhǎng)C液相色譜法，液相色譜分析條件：
[0038] a)儀器：Thermo 雙三元液相（U-3000)
[0039] b)色譜柱:0DS_C18，4.6mm*250mm5iim，即碳18色譜儀，直徑4.6mm，長(zhǎng)度250mm，粒徑 5微米
[0040]
[0041] d)流速：lmL/min
[0042] e)流動(dòng)相：甲醇和0. lwt %醋酸溶液的混合物，其中甲醇和0. lwt %醋酸溶液的體 積比為60:40;本發(fā)明中的體積比均為20°C情況下的各組分的體積比。
[0043] f)檢測(cè)波長(zhǎng)：290nm
[0044]實(shí)施例1的萃取方法的重現(xiàn)性驗(yàn)證：
[0045]取相同批號(hào)的樣品（批號(hào)：20140603)lg，共6份，精密稱(chēng)定，按ASE提取方法提取供 試品溶液，進(jìn)樣量為如1，以實(shí)施例1的色譜條件平行試驗(yàn)，測(cè)得樣品中靛玉紅的含量見(jiàn)表1， RSD為1.6%，試驗(yàn)表明ASE提取方法重復(fù)性良好，結(jié)果詳見(jiàn)表1。
[0046]表 1
[0048] 實(shí)施例1的萃取方法的精確度測(cè)試
[0049] 米用實(shí)施例1的ASE萃取方法和藥典的萃取方法對(duì)大青葉進(jìn)彳丁萃取，大青葉為4批， 批號(hào)分別為 20140603,20150204,20150809,157701;
[0050] 實(shí)施例1的ASE萃取方法對(duì)同一批次的大青葉采用相同型號(hào)規(guī)格但是不同的機(jī)器 進(jìn)行平行測(cè)試兩次，分別為ASE1和ASE2表示。
[0051]具體測(cè)試結(jié)果見(jiàn)下表2;
[0054]以上所述的僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡在本發(fā)明的精神和原則范圍內(nèi)所作的任 何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法，其特征在于，包括以下步驟： 步驟1:將大青葉粉碎后米用ASE萃取法萃取得到萃取液； 步驟2:將萃取液稀釋、離心、過(guò)濾后，得到上清液； 步驟3:將上清液采用液相色譜法進(jìn)行分析； 其中，液相色譜法的分析條件為： a) 儀器:液相色譜儀 b) 色譜柱規(guī)格:碳18液相色譜柱4.6mm*250mm5ym 幻柱溫:351€ d) 流速：lmL/min e) 流動(dòng)相：甲醇和O. Iwt %醋酸溶液的混合物，其中甲醇和O . Iwt %醋酸溶液的體積比 為60:40 f) 檢測(cè)波長(zhǎng)：290nm〇2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法，其特征在于，所述的步驟1具體 為： Sl 1:將大青葉粉碎后，過(guò)篩； S12:稱(chēng)取SI 1中獲得的1重量份大青葉粉，與0.5重量份硅藻土混合均勻待用； S13:將S12中的混合物移入預(yù)先放好過(guò)濾膜的萃取池中，加入適量的硅藻土至達(dá)到萃 取池的池口；蓋上萃取池的蓋子進(jìn)行靜態(tài)萃取;萃取結(jié)束后得到萃取液； 萃取條件為：萃取溶劑為正己烷和乙酸乙酯的混合物，正己烷和乙酸乙酯的體積比為 1:1;萃取溫度80°C ;靜態(tài)萃取時(shí)間7min;沖洗體積60% ;靜態(tài)循環(huán)次數(shù)3次。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法，其特征在于，所述的萃取池的體 積為l〇ml。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法，其特征在于，所述的靜態(tài)萃取的 壓力為1500psi。5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法，其特征在于，所述的靜態(tài)萃取的 吹掃時(shí)間為60s。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法，其特征在于，步驟2具體為:將萃 取液用己烷和乙酸乙酯的混合物稀釋后在1500r/min的條件下離心并過(guò)濾，保留濾液，其 中，正己烷和乙酸乙酯的體積比為1:1。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法，其特征在于，液相色譜分析所用 的儀器為T(mén)hermoU-3000雙三元液相液相色譜儀。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的大青葉中靛玉紅的測(cè)定方法，其特征在于，所述的ASE萃取法 所采用的儀器為ASE350快速溶劑萃取儀。
【文檔編號(hào)】G01N30/06GK105929058SQ201610254548
【公開(kāi)日】2016年9月7日
【申請(qǐng)日】2016年4月22日
【發(fā)明人】陳學(xué)松, 王麗麗, 韋濤, 梁美艷, 黃新惠
【申請(qǐng)人】廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗(yàn)所