Ase-hplc測(cè)定羅漢果茶中山奈素含量的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種ASE?HPLC測(cè)定羅漢果茶中山奈素含量的方法，旨在提供一種分析效率高，檢測(cè)結(jié)果重現(xiàn)好的ASE?HPLC測(cè)定羅漢果茶中山奈素含量的方法；其技術(shù)方案：取本品，精密稱定，研細(xì)，取1g置于10mL萃取池中，用70％乙醇對(duì)樣品進(jìn)行提取，再以甲醇為提取溶劑提?。惶崛∫簻p壓蒸干，殘?jiān)蛹状?4ml使溶解，加10％磷酸溶液5ml，置水浴加熱回流30分鐘，放冷，定量轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，吸取1.5mL于裝有300mgPSA的2mL離心管中，漩渦2min，15000r/min離心3min，取上清液進(jìn)行高效液相分析；屬于化學(xué)檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
【專利說明】
ASE-HPLC測(cè)定羅漢果茶中山奈素含量的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明提供一種測(cè)定山奈素含量的方法，具體地說，是一種ASE-HPLC測(cè)定羅漢果茶中山奈素含量的方法;屬于化學(xué)檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]羅漢果茶是由羅漢果提取、加工制成的茶劑。經(jīng)大量的臨床試驗(yàn)證明，羅漢果茶對(duì)于治療急性支氣管炎痰熱壅肺所致咳嗽、痰多、口干等癥有良好效果，根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，羅漢果中除含葫蘆烷類化合物外，還得到了2種黃酮苷；由于黃酮類化合物具有消炎、強(qiáng)心、降壓、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、降低膽固醇、利尿、止咳祛痰、保肝等作用，故通過測(cè)定羅漢果茶中黃酮類化合物的含量，達(dá)到控制產(chǎn)品質(zhì)量的目的，前人已對(duì)羅漢果鮮果中槲皮素含量進(jìn)行了研究。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]針對(duì)上述不足，本發(fā)明的目的是提供一種分析效率高，檢測(cè)結(jié)果重現(xiàn)好的ASE-HPLC測(cè)定羅漢果茶中山奈素含量的方法。
[0004]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案如下:
[0005]—種ASE-HPLC測(cè)定羅漢果茶中山奈素含量的方法，依次包括下述步驟:
[0006]I)取本品，精密稱定，研細(xì)，取Ig置于1mL萃取池中，用70%乙醇對(duì)樣品進(jìn)行提取，所述的提取溫度為60°C，靜態(tài)提取時(shí)間為5min，提取次數(shù)為I次，沖洗體積65%，再以甲醇為提取溶劑，提取溫度為70°C，靜態(tài)提取時(shí)間為3min，提取次數(shù)為2次;減壓蒸干，殘?jiān)蛹状?4ml使溶解，加10 %磷酸溶液5ml，置水浴加熱回流30分鐘，放冷，定量轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，吸取1.5mL于裝有300mg PSA的2mL離心管中，漩渦2min，15000r/min離心3min，取上清液進(jìn)行高效液相分析；
[0007]2)高效液相色譜法進(jìn)行分析時(shí)參數(shù)設(shè)置如下:
[0008]流動(dòng)相:70%乙醇-水-乙腈，用甲酸調(diào)解pH值為4.0;流速:lml/min;柱溫:35°C ;
[0009]色譜柱:PhenomenexC18柱；
[0010]檢測(cè)波長(zhǎng)27 Inm;
[0011 ] 所述的流動(dòng)相中70 %乙醇-水-乙腈的體積比為10:10:80?25:25:50;所述的流動(dòng)相在O分鐘至4分鐘時(shí)間段內(nèi)70 %乙醇-水-乙腈的體積比為30:30:40升至35:35:30;然后在4分鐘至9分鐘時(shí)間段內(nèi)70%乙醇-水-乙腈的體積比恒定在40:40:20，再在9-12分鐘內(nèi)70%乙醇-水-乙腈的體積比恒定在20:20:60。
[0012]進(jìn)一步的，上述的一種ASE-HPLC測(cè)定羅漢果茶中山奈素含量的方法，所述的色譜柱的規(guī)格為 5μηι，4.6mm X 250mm。
[0013]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的技術(shù)方案用HPLC法測(cè)定山奈素含量，來(lái)反映黃酮類化合物的含量，并對(duì)含量計(jì)算方法進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)探討研究。通過ASE快速提取，梯度洗脫檢測(cè)，該操作方法簡(jiǎn)單快速，結(jié)果顯示本法準(zhǔn)確，可靠，無(wú)干擾，重現(xiàn)性好，可用于羅漢果茶的質(zhì)量控制。
【具體實(shí)施方式】
[0014]下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的權(quán)利要求做進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限制，任何在本發(fā)明權(quán)利要求保護(hù)范圍所做的有限次的修改，仍在本發(fā)明的權(quán)利要求保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0015]本發(fā)明所涉及的到百分含量濃度，除特殊說明外，溶質(zhì)為液體的均為體積濃度，溶質(zhì)為固體的均為質(zhì)量濃度。
[0016]實(shí)施例1
[0017]—種ASE-HPLC測(cè)定羅漢果茶中山奈素含量的方法，依次包括下述步驟:
[0018]取本品，精密稱定，研細(xì)，取Ig置于1mL萃取池中，用70%乙醇對(duì)樣品進(jìn)行提取，所述的提取溫度為60°C，靜態(tài)提取時(shí)間為5min，提取次數(shù)為I次，沖洗體積65%，再以甲醇為提取溶劑，提取溫度為70°C，靜態(tài)提取時(shí)間為3min，提取次數(shù)為2次；減壓蒸干，殘?jiān)蛹状?4ml使溶解，加10 %磷酸溶液5ml，置水浴加熱回流30分鐘，放冷，定量轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，吸取1.5mL于裝有300mg PSA的2mL離心管中，漩渦2min，15000r/min離心3min，取上清液進(jìn)行高效液相分析；
[0019]2)高效液相色譜法進(jìn)行分析時(shí)參數(shù)設(shè)置如下:
[0020]流動(dòng)相:70%乙醇-水-乙腈，用甲酸調(diào)解pH值為4.0;流速:lml/min;柱溫:35°C ;
[0021]色譜柱:PhenomenexC18柱(5ym，4.6mmX250mm);
[0022]檢測(cè)波長(zhǎng)271nm;
[0023]所述的流動(dòng)相中70 %乙醇-水-乙腈的體積比為10:10:80?25:25:50;所述的流動(dòng)相在O分鐘至4分鐘時(shí)間段內(nèi)70 %乙醇-水-乙腈的體積比為30:30:40升至35:35:30;然后在4分鐘至9分鐘時(shí)間段內(nèi)70%乙醇-水-乙腈的體積比恒定在40:40:20，再在9-12分鐘內(nèi)70%乙醇-水-乙腈的體積比恒定在20:20:60。
[0024]取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥過夜的山奈素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含I Oyg的溶液，即得對(duì)照品溶液。
[0025]分別吸取對(duì)照品溶液10μ1、供試品溶液及陰性樣品溶液各20μ1，注入高效液相色譜儀，按上述色譜條件記錄色譜圖，山奈素峰的測(cè)定無(wú)干擾，山奈素的保留時(shí)間為12分鐘左右，山奈素峰與相鄰近的蜂分離度良好。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種ASE-HPLC測(cè)定羅漢果茶中山奈素含量的方法，其特征在于，依次包括下述步驟: 1)取本品，精密稱定，研細(xì)，取Ig置于1mL萃取池中，用70%乙醇對(duì)樣品進(jìn)行提取，所述的提取溫度為60°C，靜態(tài)提取時(shí)間為5min，提取次數(shù)為I次，沖洗體積65%，再以甲醇為提取溶劑，提取溫度為70°C，靜態(tài)提取時(shí)間為3min，提取次數(shù)為2次;減壓蒸干，殘?jiān)蛹状?4ml使溶解，加10 %磷酸溶液5ml，置水浴加熱回流30分鐘，放冷，定量轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，吸取1.5mL于裝有300mg PSA的2mL離心管中，漩禍2min，15000r/min離心3min，取上清液進(jìn)行高效液相分析； 2)高效液相色譜法進(jìn)行分析時(shí)參數(shù)設(shè)置如下: 流動(dòng)相:70 %乙醇-水-乙腈，用甲酸調(diào)解pH值為4.0;流速:lml/min;柱溫:35°C ; 色譜柱:Phenomenex C18柱； 檢測(cè)波長(zhǎng)27 Inm; 所述的流動(dòng)相中70%乙醇-水-乙腈的體積比為10:10:80?25:25:50;所述的流動(dòng)相在O分鐘至4分鐘時(shí)間段內(nèi)70%乙醇-水-乙腈的體積比為30: 30:40升至35:35:30；然后在4分鐘至9分鐘時(shí)間段內(nèi)70%乙醇-水-乙腈的體積比恒定在40:40: 20，再在9-12分鐘內(nèi)70%乙醇-水-乙腈的體積比恒定在20:20:60。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種ASE-HPLC測(cè)定羅漢果茶中山奈素含量的方法，其特征在于，所述的色譜柱的規(guī)格為5ym，4.6_X250mm。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK105954390SQ201610259369
【公開日】2016年9月21日
【申請(qǐng)日】2016年4月25日
【發(fā)明人】陳學(xué)松, 陳江濤, 梁慧敏, 李亞, 李澄
【申請(qǐng)人】廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗(yàn)所