一種密蒙花中柳穿魚葉苷的測定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種密蒙花中柳穿魚葉苷的測定方法，包括以下步驟：步驟1：將密蒙花粉碎后過篩，稱取0.5重量份密蒙花粉，與0.5重量份硅藻土混合均勻，在預(yù)先放好過濾膜的萃取池中，加入適量的硅藻土至達(dá)到萃取池的池口；蓋上萃取池的蓋子，對萃取池內(nèi)的混合物萃取，萃取分為去酯步驟和提取步驟；步驟2：將萃取液用甲醇稀釋后離心分離，得到上清液；步驟3：將上清液采用液相色譜法進(jìn)行分析。本發(fā)明提供了一種密蒙花中柳穿魚葉苷的測定方法，該方法操作簡單，檢測精度高。
【專利說明】
-種密蒙花中柳穿魚葉昔的測定方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及實(shí)驗室檢測領(lǐng)域，特別是一種密蒙花中柳穿魚葉巧的測定方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 2015年藥典記錄了提取密蒙花中蒙花巧的方法:取本品粗粉約0.5g，精密稱定，置 索氏提取器中，加石油酸(60~90°C)100ml，加熱回流2小時，棄去石油酸，藥渣揮干，再加甲 醇100mL繼續(xù)加熱回流4小時，提取液置蒸發(fā)皿中，濃縮至適量，轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，殘渣及 容器用少量甲醇洗涂，洗液并入同一量瓶中.加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。在 1 SOOOr/min下離屯、3min，取上清液，進(jìn)入LC測定。
[0003] 其液相色譜的參數(shù)為：W十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；W甲醇-0.1 %冰醋酸 (48:52)為流動相;檢測波長為326nm。
[0004] 湖南中醫(yī)雜志2013年6月第29卷第6期記載了《HPLC法測定大劑配方顆粒中蒙花巧 和柳穿魚葉巧的含量》，其采用超聲溶解大劑配方顆粒中的蒙花巧和柳穿魚葉巧，并采用高 效液相色譜法提取其中的蒙花巧和柳穿魚葉巧。
[0005] 藥典和《冊LC法測定大劑配方顆粒中蒙花巧和柳穿魚葉巧的含量》記載的方法操 作過程復(fù)雜，對操作人員的操作技能要求高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種密蒙花中柳穿魚葉巧的測定方法，該方法操作簡單，檢 測精度高。
[0007] 本發(fā)明提供的技術(shù)方案為一種密蒙花中柳穿魚葉巧的測定方法，包括W下步驟： [000引步驟1:將密蒙花粉碎后過篩，稱取0.5重量份密蒙花粉，與0.5重量份娃藻±混合 均勻，在預(yù)先放好過濾膜的萃取池中，加入適量的娃藻±至達(dá)到萃取池的池口；蓋上萃取池 的蓋子，對萃取池內(nèi)的混合物萃取，得到萃取液，萃取分為去醋步驟和提取步驟；
[0009] 去醋步驟的條件為：萃取溶劑為乙酸乙醋；萃取溫度70°C;靜態(tài)萃取時間5min;沖 洗體積100% ;靜態(tài)循環(huán)次數(shù)1次；
[0010] 提取步驟的條件為:萃取溶劑為質(zhì)量比為82:18的甲醇和乙醇混合溶液;萃取溫度 l〇〇°C ;靜態(tài)萃取時間5min;沖洗體積60% ;靜態(tài)循環(huán)次數(shù)3次；
[0011] 步驟2:將萃取液用甲醇稀釋后離屯、分離，得到上清液；
[0012] 步驟3:將上清液采用液相色譜法進(jìn)行分析；
[0013] 其中，液相色譜法的分析條件為：
[0014] a)儀器:高效液相色譜儀
[0015] b)色譜柱規(guī)格:碳18色譜柱，3*100mm 3皿
[0016] 。）柱溫：30。[
[0017] d)流速:0.5mL/min
[001引 e)流動相：甲醇-0.1 wt %醋酸，體積比80:20
[0019] f)檢測波長：332nm。
[0020] 在上述的密蒙花中柳穿魚葉巧的測定方法中，所述的萃取池的體積為10ml，所述 的去醋步驟和提取步驟的靜態(tài)萃取的壓力均為ISOOpsi，所述的去醋步驟的吹掃時間為 200s，提取步驟的吹掃時間為60s。
[0021] 在上述的密蒙花中柳穿魚葉巧的測定方法中，步驟2具體為:將萃取液用甲醇稀釋 后在1500化/min的條件下離屯、3min，取上清液。
[0022] 在上述的密蒙花中柳穿魚葉巧的測定方法中，所述的儀器為化ermo U3000UHPLC 液相色譜儀，所述的色譜柱為化ermo Syncronis C18。
[0023] 在上述的密蒙花中柳穿魚葉巧的測定方法中，所述的ASE萃取法所采用的儀器為 ASE350快速溶劑萃取儀。
[0024] 本發(fā)明在采用上述技術(shù)方案后，其具有的有益效果為：
[0025] 本發(fā)明的檢測方法操作簡單，萃取精度高，檢測準(zhǔn)確。
【具體實(shí)施方式】
[0026] 下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但不構(gòu)成對 本發(fā)明的任何限制。
[0027] 實(shí)施例1:
[0028] 將密蒙花經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，過=號篩，約0.5g，精密稱定，與0.5g娃藻±混合均勻，待 用，移入到預(yù)先放好過濾膜的ASE'" IOml萃取池中再加入適量娃藻±，輕輕振搖使之與池口 在同一水平線上，梓緊萃取池上蓋。萃取結(jié)束后，把萃取液轉(zhuǎn)移于50ml容量瓶中，用甲醇稀 釋至刻度，在1500化/min下離屯、5min，取上清液，進(jìn)入LC測定。
[0029] 萃取條件(見表1)為：
[0030] 表 1 [0。。"
[0
[0033] 分析方法為LC液相色譜法，液相色譜分析條件：
[0034] a)儀器:Thermo雙S元液相化-3000);
[OO%] b)色譜柱：The;rmo Syncronis C18 3*100mm 3um，即碳 18色譜柱，直徑3mm，長度 100mm，粒徑3微米；
[0036] C)柱溫：30。。
[0037] d)流速:0.5mL/min;
[003引e)流動相：甲醇-0 . Iwt %醋酸溶液（20°C甲醇和0.1 Wt %醋酸溶液體積比為80 : 20);
[0039] f)檢測波長：332nm;
[0040] 實(shí)施例1的萃取方法的精確度測試
[0041] 采用實(shí)施例1的萃取和測定方法對4批次密蒙花進(jìn)行平行測試兩次，批號分別為 1508090,151118'20150701,141201;
[0042] 柳穿魚葉巧的含量如下：〇. 231 % ,0.232% ( 1508090) ,0.215%，0.215% (151118) ,0.275% ,0.277% (20150701 ),0.199% ,0.195% (141201)。
[0043] W上所述的僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡在本發(fā)明的精神和原則范圍內(nèi)所作的任 何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1. 一種密蒙花中柳穿魚葉苷的測定方法，其特征在于，包括以下步驟： 步驟1:將密蒙花粉碎后過篩，稱取0.5重量份密蒙花粉，與0.5重量份硅藻土混合均勻， 在預(yù)先放好過濾膜的萃取池中，加入適量的硅藻土至達(dá)到萃取池的池口；蓋上萃取池的蓋 子，對萃取池內(nèi)的混合物萃取，得到萃取液，萃取分為去酯步驟和提取步驟； 去酯步驟的條件為：萃取溶劑為乙酸乙酯；萃取溫度70°C;靜態(tài)萃取時間5min;沖洗體 積100%;靜態(tài)循環(huán)次數(shù)1次； 提取步驟的條件為：萃取溶劑為質(zhì)量比為82:18的甲醇和乙醇混合溶液;萃取溫度100 °C ;靜態(tài)萃取時間5min;沖洗體積60% ;靜態(tài)循環(huán)次數(shù)3次； 步驟2:將萃取液用甲醇稀釋后離心分離，得到上清液； 步驟3:將上清液采用液相色譜法進(jìn)行分析； 其中，液相色譜法的分析條件為： a) 儀器:高效液相色譜儀 b) 色譜柱規(guī)格:碳18色譜柱，3*100mm 3um (：)柱溫:30°〇 d) 流速:0 · 5mL/min e) 流動相：甲醇-0.1wt %醋酸，體積比80:20 f) 檢測波長:332nm〇2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的密蒙花中柳穿魚葉苷的測定方法，其特征在于，所述的萃取池 的體積為IOml，所述的去酯步驟和提取步驟的靜態(tài)萃取的壓力均為1500psi，所述的去酯步 驟的吹掃時間為200s，提取步驟的吹掃時間為60s。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的密蒙花中柳穿魚葉苷的測定方法，其特征在于，步驟2具體為： 將萃取液用甲醇稀釋后在15000r/min的條件下離心3min，取上清液。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的密蒙花中柳穿魚葉苷的測定方法，其特征在于，所述的儀器為 Thermo U3000UHPLC液相色譜儀，所述的色譜柱為Thermo Syncronis C18〇5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的密蒙花中柳穿魚葉苷的測定方法，其特征在于，所述的ASE萃 取法所采用的儀器為ASE350快速溶劑萃取儀。
【文檔編號】G01N30/02GK105954405SQ201610268591
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年4月27日
【發(fā)明人】陳學(xué)松, 王麗麗, 韋濤, 梁美艷, 黃新惠
【申請人】廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗所