抗β2糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種抗β2糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒及其制備方法，抗β2糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒包括：β2糖蛋白I抗原包被的羧基化的磁微粒和抗人IgG二抗標記的化學(xué)發(fā)光標記物。這種抗β2糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒能夠以全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀為檢測工具，完成抗β2糖蛋白I抗體IgG的檢測這種抗β2糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，經(jīng)過實驗，其檢測靈敏度達到2AU/mL，相對于傳統(tǒng)的抗β2糖蛋白I抗體IgG的檢測方法靈敏度至少提高了10倍，這種抗β2糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的檢測精度較高。
【專利說明】
抗的糖蛋白I抗體I gG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及體外檢測領(lǐng)域，尤其設(shè)及一種抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測 試劑盒及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 的糖蛋白1(的-GPI)，又稱為人載脂蛋白H，在1961年首次確認它是一種50kD的血 漿蛋白。并在1984年確定其分子生物學(xué)特性，其功能是作為抗屯、憐脂抗體核屯、憐脂結(jié)合的 輔助因子。
[0003] 抗憐脂綜合征(APS)是W病人體內(nèi)出現(xiàn)高滴度抗憐脂抗體(APL)為主要特征的一 種非器官特異性自身免疫性疾病，可單獨發(fā)病，也可與其他自身免疫病伴發(fā)，尤其是系統(tǒng)性 紅斑狼瘡（SLE)。它的主要臨床特點是反復(fù)動、靜脈血栓形成，多器官缺血及習慣性流產(chǎn)。 2005年悉尼舉行的國際血栓止血學(xué)會（ISTH)會議首次增補抗的-GPI抗體陽性作為APS實驗 室診斷指標之一。
[0004] 臨床檢測抗的糖蛋白I抗體IgG的主要方法為酶聯(lián)免疫吸附法，但該方法也存在著 下述的不足之處：
[0005] (1)使用12X8型、6X8型、8X12型或整板型96孔專用微孔板作為抗原包被用具和 反應(yīng)容器，在使用時只能分成12批次、6批次、8批次或整板一次使用，無法進行獨立的、單人 份的檢測；
[0006] (2)定量測定所用的試劑種類較多，每一種檢測試劑都要用試劑瓶來盛裝，并且每 使用一種試劑時都需要更換吸液嘴來分別加注到微孔板的微孔中，不但試劑瓶種類多，加 注試劑的操作也極為繁瑣；
[0007] (3)缺少對檢測信息的相應(yīng)標注，只能通過查看試劑盒外包裝盒的標識才能了解 或知悉檢測試劑的生產(chǎn)批號及有效期信息，而且所知悉的信息在檢測過程中不受控，具有 很大的隨意性；
[000引（4)檢測試劑在檢測過程中處于開放的空間，容易引起各種試劑之間的交叉污染 而影響檢測結(jié)果的準確性；
[0009] (5)檢測過程多采用手工操作，試劑或樣本的加量不很精確，操作過程極為繁瑣和 復(fù)雜，容易發(fā)生操作差錯，檢測結(jié)果的準確度和精密度較差；
[0010] (6)在檢測項目成套試劑的數(shù)量配置及使用上均為項目數(shù)X48/96人份，如果需要 檢測10個項目，則試劑的配置及使用數(shù)須為10X48/96人份，如果只有一份樣本需要檢測10 個不同的項目，也需要配置10 X 48/96人份的試劑，存在著不夠經(jīng)濟合理的缺點。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0011] 基于此，有必要提供一種檢測靈敏度較高的抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢 測試劑盒及其制備方法。
[001 ^ -種抗02糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢現(xiàn)聯(lián)劑盒，包括:的糖蛋白I抗原包被的 簇基化的磁微粒和抗人IgG二抗標記的化學(xué)發(fā)光標記物。
[0013] 所述的糖蛋白I抗原包被的簇基化的磁微粒中，所述的糖蛋白I抗原與所述簇基化 的磁微粒的比例為1:25~35。
[0014] 所述抗人IgG二抗標記的化學(xué)發(fā)光標記物中，所述抗人IgG二抗與所述化學(xué)發(fā)光標 記物的比例為50:1~10。
[001引所述簇基化的磁微粒的粒徑為0. 05曲1~1皿。
[0016] 所述化學(xué)發(fā)光標記物為魯米諾、異魯米諾、=聯(lián)化晚釘或叮晚醋。
[0017] 所述的抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，還包括化學(xué)發(fā)光底物液， 所述化學(xué)發(fā)光底物液包括激發(fā)液與預(yù)激發(fā)液。
[001引所述預(yù)激發(fā)液為出化溶液，所述激發(fā)液為NaO田容液。
[0019] 所述的抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，還包括抗的糖蛋白I抗體 IgG定標品。
[0020] 所述抗的糖蛋白I抗體IgG定標品為濃度分別為OAU/mL、1 OAU/mL、20AU/mL、50AU/ mL、IOOAU/mL和200AU/mL的抗的糖蛋白I抗體IgG的溶液。
[0021] -種上述的抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的制備方法，包括如下 步驟：
[0022] 取簇基化的磁微粒的懸浮液，磁分離去上清后用MES緩沖液重懸，接著加入抓C水 溶液，活化簇基化的磁微粒的表面簇基，接著加入的糖蛋白I抗原，室溫下混懸化~IOh，磁 分離去除上清后用Tris緩沖液重懸，得到的糖蛋白I抗原包被的簇基化的磁微粒;W及
[0023] 取抗人IgG二抗，加入碳酸鹽緩沖液后混勻，然后加入化學(xué)發(fā)光標記物后混勻，室 溫下避光反應(yīng)化~化后除雜，得到抗人IgG二抗標記的化學(xué)發(fā)光標記物。
[0024] 運種抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒能夠W全自動化學(xué)發(fā)光免疫 分析儀為檢測工具，完成抗的糖蛋白I抗體IgG的檢測運種抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免 疫檢測試劑盒，經(jīng)過實驗，其檢測靈敏度達到2AU/mL，相對于傳統(tǒng)的抗的糖蛋白I抗體IgG的 檢測方法靈敏度至少提高了 10倍，運種抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的檢 測精度較高。
【附圖說明】
[0025] 圖1為一實施方式的抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的制備方法的 流程圖；
[0026] 其中，四邊形實框為關(guān)鍵工序，六邊形框為質(zhì)量控制點。
[0027] 圖2為實施例3得到的抗的糖蛋白I抗體IgG標準曲線圖。
【具體實施方式】
[0028] 為使本發(fā)明的上述目的、特征和優(yōu)點能夠更加明顯易懂，下面結(jié)合附圖和具體實 施例對本發(fā)明的【具體實施方式】做詳細的說明。在下面的描述中闡述了很多具體細節(jié)W便于 充分理解本發(fā)明。但是本發(fā)明能夠W很多不同于在此描述的其它方式來實施，本領(lǐng)域技術(shù) 人員可W在不違背本發(fā)明內(nèi)涵的情況下做類似改進，因此本發(fā)明不受下面公開的具體實施 的限制。
[0029] -實施方式的抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，包括:抗人IgG二抗 包被的簇基化的磁微粒和抗人IgG二抗標記的化學(xué)發(fā)光標記物。
[0030] 優(yōu)選的，的糖蛋白I抗原包被的簇基化的磁微粒中，的糖蛋白I抗原與簇基化的磁 微粒的比例為1:25~35。
[0031] 優(yōu)選的，抗人IgG二抗標記的化學(xué)發(fā)光標記物中，抗人IgG二抗與化學(xué)發(fā)光標記物 的比例為50:1~10。
[0032] 優(yōu)選的，簇基化的磁微粒的粒徑為0.05皿~1皿。
[0033] 化學(xué)發(fā)光標記物可W為魯米諾、異魯米諾、=聯(lián)化晚釘或叮晚醋。其中，化學(xué)發(fā)光 標記物優(yōu)選為叮晚醋。
[0034] 在其他的實施例中，上述抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒還包括化 學(xué)發(fā)光底物液。
[0035] 化學(xué)發(fā)光底物液包括預(yù)激發(fā)液和激發(fā)液。預(yù)激發(fā)液可W為出化溶液，激發(fā)液可W為 NaOH溶液。
[0036] 本實施例中，預(yù)激發(fā)液為濃度為0.1mol/L的此化溶液，激發(fā)液為濃度為0.25mol/L 的NaO田容液。
[0037] 在其他的實施例中，上述抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒還包括抗 的糖蛋白I抗體IgG定標品。
[003引抗的糖蛋白I抗體IgG定標品為濃度分別為0AU/mL、10AU/mL、20AU/mL、50AU/mL、 1 OOAU/mL和200AU/mL的抗的糖蛋白I抗體IgG的溶液。
[0039] 具體的，抗的糖蛋白I抗體IgG定標品可W采用標準品緩沖液將抗的糖蛋白I抗體 IgG 配制成濃度分別為 0411/1111^、1041]/1111^、2041]/血、5041]/1111^、10041]/血和20041]/1111的抗的糖 蛋白I抗體IgG的溶液。
[0040] 運種抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒用于抗的糖蛋白I抗體IgG檢 測時，利用全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀對抗的糖蛋白I抗體IgG定標品進行檢測，繪制標準 曲線，內(nèi)置于電腦軟件;接著測試實際樣本，根據(jù)樣本發(fā)光值計算樣本濃度;最后對抗的糖 蛋白I抗體IgG全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)進行性能(靈敏度、線性、精密度、干擾性)的評 價。
[0041] 運種抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒能夠W全自動化學(xué)發(fā)光免疫 分析儀為檢測工具，完成抗的糖蛋白I抗體IgG的檢測運種抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免 疫檢測試劑盒，經(jīng)過實驗，其檢測靈敏度達到0. 〇69AU/mL，相對于傳統(tǒng)的抗的糖蛋白I抗體 IgG的檢測方法靈敏度至少提高了 10倍，運種抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑 盒的檢測精度較高。
[0042] 此外，運種抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒還具有W下優(yōu)點：
[0043] 1、選擇叮晚醋作為標記材料，并應(yīng)用于化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)，該發(fā)光體系為直 接化學(xué)發(fā)光，與傳統(tǒng)的酶促化學(xué)發(fā)光相比，該反應(yīng)不需要酶的參與，更加節(jié)約成本；
[0044] 2、選用日丫晚醋的化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)線性范圍寬，能達到5AU/mL~190AU/mL， 而傳統(tǒng)的抗的糖蛋白I抗體IgG的檢測方法的檢線性范圍為OAU/mL~lOOAU/mL
[0045] 3、叮晚醋化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)重復(fù)性高，批內(nèi)及批間差均在5% W內(nèi)，運是其它 化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)難W達到的；
[0046] 4、化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)已實現(xiàn)樣本的定量，通過內(nèi)置標準曲線到測試軟件，只 需測試樣本就可直接得到樣本的濃度值；
[0047] 5、化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)可W實現(xiàn)全自動化，試劑及樣本的添加全有儀器完成， 操作更加簡便，減少了人為的誤差。
[0048] 如圖1所示的上述抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的制備方法，包 括如下步驟：
[0049] 取簇基化的磁微粒的懸浮液，磁分離去上清后用MES緩沖液重懸，接著加入EDC水 溶液，活化簇基化的磁微粒的表面簇基，接著加入的糖蛋白I抗原，室溫下混懸化~IOh，磁 分離去除上清后用Tris緩沖液重懸，得到的糖蛋白I抗原包被的簇基化的磁微粒。
[0050] MES(2-(N-嗎啡嘟）乙橫酸)緩沖液的濃度為0.02M，抑為5.5。
[0051 ] PBS緩沖液的濃度為0.1 M并且含有2%BSA，抑為8.0。
[0052] 邸C(l-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亞胺)水溶液的濃度為lOmg/mL~20mg/ mL，邸C與簇基化的磁微粒的比例為0.05:0.1~1。
[0053] 優(yōu)選的，的糖蛋白I抗原包被的簇基化的磁微粒中，的糖蛋白I抗原與簇基化的磁 微粒的比例為1:25~35。
[0054] 優(yōu)選的，簇基化的磁微粒的粒徑為0.05皿~1皿。
[0055] 取抗人IgG二抗，加入碳酸鹽緩沖液后混勻，然后加入化學(xué)發(fā)光標記物后混勻，室 溫下避光反應(yīng)化~化后除雜，得到抗人IgG二抗標記的化學(xué)發(fā)光標記物。
[0化6] 碳酸鹽緩沖液濃度為0.1 M，pH為9.0~9.5，
[0057] 除雜的操作為離屯、脫鹽柱脫鹽，具體操作為:先分別用純凈水及TBS緩沖液(40mM Tris-HCl，0.5 %BSA，1 %化Cl, pH 8.0)處理離屯、脫鹽柱，最后加入得到的的糖蛋白I抗原包 被的簇基化的磁微粒的溶液，最后收集離屯、管中的液體。
[0058] 優(yōu)選的，抗人IgG二抗標記的化學(xué)發(fā)光標記物中，抗人IgG二抗與化學(xué)發(fā)光標記物 的比例為50:1~10。
[0059] 化學(xué)發(fā)光標記物可W為魯米諾、異魯米諾、=聯(lián)化晚釘或叮晚醋。其中，化學(xué)發(fā)光 標記物優(yōu)選為叮晚醋。
[0060] 得到的的糖蛋白I抗原包被的簇基化的磁微粒和抗人IgG二抗標記的化學(xué)發(fā)光標 記物組合即可得到上述抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒。
[0061] 運種抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒在使用時，還需要化學(xué)發(fā)光底 物液和抗的糖蛋白I抗體IgG定標品。
[0062] 化學(xué)發(fā)光底物液和抗的糖蛋白I抗體IgG定標品可W自行配制得到。
[0063] 化學(xué)發(fā)光底物液包括預(yù)激發(fā)液和激發(fā)液。預(yù)激發(fā)液可W為出化溶液，激發(fā)液可W為 NaOH溶液。
[0064] 本實施例中，預(yù)激發(fā)液為濃度為0.1mol/L的此化溶液，激發(fā)液為濃度為0.25mol/L 的NaO田容液。
[0065] 具體的，抗的糖蛋白I抗體IgG定標品可W采用標準品緩沖液將抗的糖蛋白I抗體 IgG 配制成濃度分別為 0411/1111^、1041]/1111^、2041]/血、5041]/1111^、10041]/血和20041]/1111的抗的糖 蛋白I抗體IgG的溶液。
[0066] 運種抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的制備方法簡單方便，制得的 抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的檢測靈敏度較高，具有良好的應(yīng)用前景。
[0067] W下為具體實施例。
[0068] 實施例1:抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的制備
[0069] (1)的糖蛋白I抗原包被的簇基化的磁微粒的制備：
[0070] 取含有50mg粒徑為0.05皿~1皿的簇基化的磁微粒(Ma即aBind?，貨號21353)懸浮 液，磁分離去上清，用0.02M，抑為5.5MES緩沖液重懸，加入ImL新配置的lOmg/mL的抓C水溶 液，活化磁珠表面簇基，加入4mg抗02糖蛋白I抗原(Meridian,貨號A3C083H)，室溫下混懸 6h，磁分離，去除上清，用含2%BSA的0.1M，pH為8.0的IYis緩沖液重懸到Img/血，得到的糖 蛋白I抗原包被的簇基化的磁微粒，每瓶5mL分裝保存于4°C備用。
[0071] (2)抗人I gG二抗標記的叮晚醋的制備：
[0072] 取50化濃度為25mg/mL的抗人IgG二抗，加入150化濃度為0.1M、抑為9.0~9.5的碳 酸鹽緩沖液，混勻，然后加入1.化L濃度為5mg/血的日丫晚醋溶液混勻，室溫下避光反應(yīng)，1.5h 后取出，用2mL的zeba離屯、脫鹽柱脫鹽處理，脫鹽過程中首先分別用純凈水及TBS緩沖液進 行處理，最后加入得到的抗人IgG二抗標記的叮晚醋溶液，收集離屯、管中的液體至保存管得 至晰人IgG二抗標記的日丫晚醋，每瓶5mL分裝保存于4°C備用。
[0073] (3)抗的糖蛋白I抗體IgG定標品的制備：
[0074] 用標準品緩沖液(40mMTris-肥l，0.5%BSA，l%化Cl，pH8.0)將抗的糖蛋白I抗 體IgG配置成濃度為OAU/mL、10AU/mL、20AU/血、50AU/mL、lOOAU/m巧日200AU/mL，每瓶0.5mL 分裝，-20°C保存?zhèn)溆谩?br>[0075] 實施例2:抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測方法
[0076] W全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(Y化0,貨號iFlash3000)為檢測工具，方法學(xué)模式 為雙抗體夾屯、法，即儀器依次加入扣L的樣品、5化L的的糖蛋白I抗原包被的簇基化的磁微 粒W及95化的抗的糖蛋白I抗體IgG處理液，反應(yīng)10min后，再加10化L的抗的糖蛋白I抗體 IgG包被的叮晚醋，反應(yīng)10min后，進行磁分離，儀器將反應(yīng)混合物送入暗室，依次加入發(fā)光 底物預(yù)激發(fā)液化地2)及激發(fā)液(NaOH)進行發(fā)光反應(yīng)，最后記錄發(fā)光值。
[0077] 實施例3:抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒性能評價
[0078] 采用實施例2中的方法對抗的糖蛋白I抗體IgG定標品進行檢測，得到繪制標準曲 線如圖2所示。
[0079] 接著對接著測試實際樣本，根據(jù)樣本發(fā)光值計算樣本濃度。
[0080] 靈敏度的檢測：
[0081] 參照化SI EP17-A文件推薦實驗方案，計算抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢 測試劑盒的靈敏度，求得的靈敏度為0. 〇69AU/mL。
[0082] 線性的檢測：
[0083] 對濃度為 5411/1吐、4241]/1111^、7941]/1止、11641]/1止、15341]/1吐、19041]/血標準品做線性 分析，計算線性相關(guān)系數(shù)，r = 0.9991，另外，該試劑盒對抗的糖蛋白I抗體IgG樣品檢測的線 性范圍為5AU/mL~190AU/mL。
[0084] 精密度測定：
[0085] 取濃度為30AU/mL及80AU/mL兩個抗的糖蛋白I抗體IgG樣品，每個樣本每個濃度各 做3個平行，用=批試劑盒進行檢測，計算試劑盒批內(nèi)及批間差，結(jié)果表明該試劑盒批內(nèi)及 批間差均小于10%。
[00化]干擾性實驗：
[0087] 取混合血清分別添加干擾物包括:結(jié)合膽紅素、游離膽紅素、血紅蛋白、抗壞血酸、 甘油醋，添加比例按照1:20進行，分別測定混合血清及添加了各種干擾物后混合血清的測 值，計算二者之間的偏差，W±l〇%為可接受范圍。結(jié)果表明，干擾性均達到NCXLS的文件標 準，可用于臨床實驗室抗的糖蛋白I抗體IgG狀況的準確評估。
[0088] 實施例4、抗的糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的對比實驗
[0089] 分別用化學(xué)發(fā)光檢測方法和傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附法對濃度為OAU/mL、15.3AU/mL、 的抗的糖蛋白I抗體IgG樣品做檢測，兩種方法檢測靈敏度相比，數(shù)據(jù)如下表所示：
[0090]
[0091] 由上表可W看出，化學(xué)發(fā)光檢測方法的靈敏度較酶聯(lián)免疫吸附法提高了約30倍。
[0092] W上所述實施例僅表達了本發(fā)明的幾種實施方式，其描述較為具體和詳細，但并 不能因此而理解為對本發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當指出的是，對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員 來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可W做出若干變形和改進，運些都屬于本發(fā)明的保 護范圍。因此，本發(fā)明專利的保護范圍應(yīng)W所附權(quán)利要求為準。
【主權(quán)項】
1. 一種抗β2糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，其特征在于，包括:β2糖蛋白I 抗原包被的羧基化的磁微粒和抗人IgG二抗標記的化學(xué)發(fā)光標記物。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗β2糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，其特征在于， 所述β2糖蛋白I抗原包被的羧基化的磁微粒中，所述β2糖蛋白I抗原與所述羧基化的磁微粒 的比例為1:25~35。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗β2糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，其特征在于， 所述抗人IgG二抗標記的化學(xué)發(fā)光標記物中，所述抗人IgG二抗與所述化學(xué)發(fā)光標記物的比 例為50:1~10。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗β2糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，其特征在于， 所述羧基化的磁微粒的粒徑為〇. 〇5μηι~Ιμπι。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗β2糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，其特征在于， 所述化學(xué)發(fā)光標記物為魯米諾、異魯米諾、三聯(lián)吡啶釕或吖啶酯。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗β2糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，其特征在于， 還包括化學(xué)發(fā)光底物液，所述化學(xué)發(fā)光底物液包括預(yù)激發(fā)液和激發(fā)液。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的抗β2糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，其特征在于， 所述預(yù)激發(fā)液為H2O 2溶液，所述激發(fā)液為NaOH溶液。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗β2糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，其特征在于， 還包括抗似糖蛋白I抗體IgG定標品。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的抗β2糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，其特征在于， 所述抗β2糖蛋白I抗體I gG定標品為濃度分別為OAU/mL、I OAU/mL、20AU/mL、50AU/mL、IOOAU/ mL和200AU/mL的抗β2糖蛋白I抗體IgG的溶液。10. -種根據(jù)權(quán)利要求1~9中任一項所述的抗β2糖蛋白I抗體IgG化學(xué)發(fā)光免疫檢測試 劑盒的制備方法，其特征在于，包括如下步驟： 取羧基化的磁微粒的懸浮液，磁分離去上清后用MES緩沖液重懸，接著加入EDC水溶液， 活化羧基化的磁微粒的表面羧基，接著加入β2糖蛋白I抗原，室溫下混懸2h~IOh，磁分離去 除上清后用Tris緩沖液重懸，得到β2糖蛋白I抗原包被的羧基化的磁微粒；以及 取抗人IgG二抗，加入碳酸鹽緩沖液后混勻，然后加入化學(xué)發(fā)光標記物后混勻，室溫下 避光反應(yīng)Ih~2h后除雜，得到抗人IgG二抗標記的化學(xué)發(fā)光標記物。
【文檔編號】G01N33/543GK105954510SQ201610510237
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年6月30日
【發(fā)明人】郝建華, 付琳, 夏福臻, 錢純亙, 何雨禧
【申請人】深圳市亞輝龍生物科技股份有限公司